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(南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科，湖南 衡陽 421001)

一種新型的陰道分泌物檢測方法和常規(guī)鏡檢的比較

程俊*，張靜

(南華大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科，湖南 衡陽 421001)

目的探討陰道炎五聯(lián)檢在臨床運用中的價值，為臨床找到一種新型的快速檢測陰道分泌物的方法。

方法收集門診病人1457例，分別用常規(guī)鏡檢和陰道炎五聯(lián)檢兩種方法進行檢測陰道分泌物，并對結(jié)果進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié)果常規(guī)鏡檢法和陰道五聯(lián)檢在白色念珠菌和滴蟲感染、清潔度以及乳酸桿菌的檢出率上差異無顯著性(P>0.05)，但陰道五聯(lián)檢在微生物特異性識別方面有所缺陷；兩種方法在細菌性陰道炎檢出率上差異有顯著性(P<0.05)。結(jié)論陰道炎五聯(lián)檢作為一種新型的陰道分泌物檢測方法，與常規(guī)鏡檢聯(lián)合使用，可提高檢出率。

陰道分泌物； 常規(guī)鏡檢； 陰道炎五聯(lián)檢

陰道分泌物檢查又稱白帶檢查，是女性泌尿生殖道健康檢查的基本項目，其主要目的是檢測女性泌尿生殖道是否感染和陰道內(nèi)環(huán)境的變化。臨床上普遍運用的白帶檢測方法是顯微鏡濕片法，該方法有操作方便、結(jié)果快速的優(yōu)點，能較快地判斷真菌、滴蟲、細菌引起的感染，并能對炎癥的程度進行分級，指導(dǎo)臨床醫(yī)生的用藥。但是，鏡檢也受到一些制約，如：只能在形態(tài)上對其識別、結(jié)果受涂片的均勻度以及檢驗者本身經(jīng)驗高低的影響明顯，在質(zhì)量控制方面受到很大的限制[1]。因此，為了減少不同人員之間產(chǎn)生的誤差，滿足實驗室檢測的質(zhì)控要求，近年來，陰道炎五聯(lián)檢測試劑盒逐漸在臨床開始應(yīng)用[2]，試劑盒主要由陰道炎五聯(lián)卡組成，陰道炎五聯(lián)卡上有五個小孔，分別用于檢測β-氨基半乳糖苷酶(N-acetyl-β-galactosaminase,NAG)、唾液酸苷酶(Sialidase,SNA)、白細胞酯酶(Leukocyte esterase，LE)、H2O2濃度、pH值,檢測過程由珠海麗拓發(fā)展有限公司生產(chǎn)的LTS-400陰道炎檢測儀完成。其中，NAG是由念珠菌、陰道毛滴蟲、支原體等產(chǎn)生的β-氨基半乳糖苷酶；SNA是由細菌性陰道炎致病菌加德納菌等分泌的特異性酶；LE是指白細胞酯酶，在發(fā)生陰道炎癥時，白細胞聚集后大量釋放；H2O2是陰道正常菌群乳酸桿菌的產(chǎn)物；pH值是陰道內(nèi)環(huán)境的酸堿度。本研究旨在探討五聯(lián)檢與常規(guī)鏡檢結(jié)果之間的比較，為臨床醫(yī)生對婦科疾病的診斷提供幫助。

1 資料與方法

1.1分泌物標本的采集2015年7月至2015年9月在我院婦科門診就診進行陰道分泌物檢查的患者共1 457例,年齡分布在17～73歲之間。剔除就診前48 h內(nèi)有性生活、使用陰道灌洗及局部上藥、經(jīng)期帶血等標本。每位患者用兩根無菌棉拭子采集陰道后穹窿處分泌物，分別放入兩個無菌試管中立即送檢。

1.2檢測方法取其中一管棉拭子標本，加入0.9%生理鹽水數(shù)滴，然后將棉拭子均勻涂抹在玻片上，顯微鏡鏡檢，嚴格按照《臨床檢驗基礎(chǔ)》第4版操作。另一管棉拭子標本采用陰道炎五聯(lián)試劑盒(珠海市麗拓發(fā)展公司)檢測，先從2～8 ℃的冰箱將試劑盒取出，平衡到室溫。打開儀器，儀器開始初始化，放入廢液卡，顯色液載入，待液體注入廢液卡結(jié)束，取走廢液卡片。然后，在裝有取樣棉拭子的試管中，加入約300 uL的樣品提取液，反復(fù)擠壓棉拭子，使標本溢出，將棉拭子丟棄廢液桶。將檢測試劑卡，吸嘴，和樣品上機，按照標本的順序編號，并在儀器輸入編號。儀器自動加樣，陰道炎五聯(lián)卡上小孔依次檢測NAG、SNA、LE、H2O2以及pH值，約37 ℃恒溫中溫育15分鐘后，儀器自動判讀結(jié)果，并將結(jié)果上傳電腦。

1.3結(jié)果判斷鏡檢陰道分泌物的結(jié)果判斷按照《臨床檢驗基礎(chǔ)》第4版要求，記錄高倍鏡下觀察到的滴蟲、白色念珠菌、清潔度、線索細胞。五聯(lián)檢的結(jié)果由檢驗人員嚴格按照說明書進行操作，儀器自動進行結(jié)果判讀。

1.4統(tǒng)計分析所有數(shù)據(jù)采用SPSS20.0軟件進行統(tǒng)計分析處理，計數(shù)資料采用配對四格表經(jīng)χ2檢驗，P<0.05為差異有顯著性。

2 結(jié) 果

2.1滴蟲、白色念珠菌檢測率兩種方法檢測滴蟲、白色念珠菌的結(jié)果見表1。滴蟲和念珠菌都可產(chǎn)生β-氨基半乳糖苷酶，因此，兩者之中任何一種感染,陰道炎檢測儀均判定為陽性結(jié)果；鏡檢中也把滴蟲和白色念珠菌兩者檢測只要有一項是陽性，均歸為鏡檢陽性結(jié)果。兩種方法的結(jié)果符合率為94.78%,經(jīng)配對資料的卡方檢驗，差異無顯著性(P>0.05)。

表1兩種方法檢測滴蟲、白色念珠菌(例)

常規(guī)鏡檢五聯(lián)檢陽性陰性合計陽性22532257陰性4411561200合計26911881457

2.2對細菌性陰道炎的檢測差異兩種方法對細菌性陰道炎的檢測結(jié)果見表2。鏡檢判斷細菌性陰道炎按照Amsel標準方法，有四項檢測指標：①陰道分泌物稀??；②胺試驗陽性；③陰道pH>4.5；④高倍鏡下可見線索細胞。滿足第④加上前面三項里面任意兩項就可以鏡檢判斷細菌性陰道炎為陽性結(jié)果。兩種檢測方法結(jié)果如下,經(jīng)配對資料的卡方檢驗,差異有顯著性(P<0.05)。

表2兩種方法檢測細菌性陰道炎(例)

常規(guī)鏡檢五聯(lián)檢陽性陰性合計陽性34213355陰性3710651102合計37910781457

2.3白帶清潔度檢測兩種方法檢測白帶清潔度的結(jié)果見表3。在白帶常規(guī)鏡檢中，清潔度Ⅲ、Ⅳ度均表示陰道有炎癥，只是炎癥的程度不同，在鏡檢中判斷陽性結(jié)果，清潔度Ⅰ、Ⅱ度則判斷為陰性結(jié)果，兩種檢測方法在清潔度結(jié)果符合率為96.23%，經(jīng)配對資料的卡方檢驗,差異無顯著性(P>0.05)。

表3兩種方法檢測白帶清潔度(例)

常規(guī)鏡檢五聯(lián)檢陽性陰性合計陽性1145211166陰性34257291合計11792781457

2.4乳酸桿菌檢測兩種方法檢測乳酸桿菌的結(jié)果見表4。兩種檢測方法在檢測乳酸桿菌結(jié)果符合率為92.66%,經(jīng)配對資料的卡方檢驗,差異無顯著性(P>0.05)。

表4兩種方法檢測乳酸桿菌(例)

常規(guī)鏡檢五聯(lián)檢陽性陰性合計陽性49348541陰性59857916合計5529051457

3 討 論

陰道炎五聯(lián)檢法是通過酶學(xué)方法進行檢測，通過NAG來判斷白色念珠菌和滴蟲的感染，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，陰道炎五聯(lián)檢和白帶鏡檢的結(jié)果兩者差異無顯著性，兩種方法的結(jié)果符合率為94.78%，有較高的一致性。但是有32例標本在鏡檢中為陽性結(jié)果，而在五聯(lián)檢中檢測為陰性結(jié)果，有可能是有些種類念珠菌不具有酶活性[2]，利用特異性酶檢測念珠菌，存在部分種類念珠菌漏檢現(xiàn)象[3]。同時，還發(fā)現(xiàn)有44例標本在五聯(lián)檢中為陽性結(jié)果，在鏡檢中為陰性結(jié)果，原因可能是滴蟲易受到標本取樣后保存時間和溫度的影響，檢出率下降；另外支原體等其他微生物感染也可以引起NAG陽性。

細菌性陰道病(BV)是陰道正常菌群乳酸桿菌減少，需氧菌中的加德納菌、厭氧菌等增多，陰道內(nèi)環(huán)境失衡引起的疾病[4]，其主要表現(xiàn)為白帶增多、線索細胞陽性、陰道pH值升高、胺試驗陽性[5,6]等。據(jù)報道，約有50%BV患者因無明顯臨床癥狀而被貽誤診斷和治療[7]。SNA是加德納菌和動彎桿菌等BV致病菌分泌的特異性酶,Culhane[8]等還研究發(fā)現(xiàn)，在BV感染的婦女中，動彎桿菌陽性的婦女比動彎桿菌陰性的婦女有更多的唾液酸苷酶的釋放和聚集，而正常婦女陰道中不含此酶，SNA結(jié)合pH值，能有效的指示BV的感染。在本研究中，采用陰道炎五聯(lián)檢測試劑盒與常規(guī)鏡檢方法比較，檢出率差異有顯著性，陰道炎五聯(lián)卡對BV的檢出率為26.01%，高于鏡檢對BV的檢出率24.36%，這與唐子平[9]報道的27.2%的BV感染率較為相近。在臨床上，常規(guī)鏡檢主要通過尋找線索細胞來診斷,容易受主觀因素及生理鹽水過量稀釋等影響，易造成漏檢，而五聯(lián)檢主要依靠對致病菌特異性代謝酶類的生化檢測，pH值進行分析，其結(jié)果直觀準確、快速、穩(wěn)定性好。在此次研究中我們排除了帶血的標本，但是在臨床中偶爾會遇到血性標本，脯氨酸氨基肽酶會把血性物質(zhì)分解后產(chǎn)生胺類物質(zhì)，五聯(lián)卡檢測結(jié)果會出現(xiàn)假陽性[10]，因此，值得注意的是血性標本一定要結(jié)合鏡檢檢測。

采用白細胞酯酶檢測白細胞，LE是反映陰道宿主細胞的主要標志酶，主要存在于粒細胞的胞漿中，直接反映陰道內(nèi)炎癥侵入、感染和陰道黏膜損傷的程度[11]，避免了因各種因素導(dǎo)致的分泌物中白細胞破碎濕片鏡檢漏檢的問題[12]。但是酶學(xué)檢驗的一大弊端是，不能很好的為炎癥的嚴重程度分級，這需要鏡檢輔助來完成，有助于臨床醫(yī)生的診斷和治療。

乳酸桿菌是陰道內(nèi)正常的優(yōu)勢菌群,在陰道微生態(tài)的平衡中起重要的調(diào)節(jié)作用，常見有卷曲乳酸桿菌、詹氏乳酸桿菌等,絕大部分的乳酸桿菌能產(chǎn)生H2O2,有文獻報道，陰道中高水平的乳酸桿菌還可以保護妊娠婦女，有效地防止羊膜和子宮腔的上行性感染[13]。因此,可以通過檢測H2O2來表示陰道分泌物中乳酸桿菌的多少，借此了解陰道環(huán)境處于病理或亞健康狀態(tài)，但也存在由于部分乳酸桿菌不產(chǎn)生H2O2出現(xiàn)漏檢的情況。所以，聯(lián)合鏡檢，可以有助于判斷陰道內(nèi)環(huán)境的狀態(tài)。

正常婦女的陰道pH值為3.7～4.5，陰道的這種弱酸性環(huán)境能保持陰道的自潔功能，但當陰道在感染因素的作用下pH值改變后，可引起條件致病菌的大量繁殖，引發(fā)陰道炎癥。有文獻報道，霉菌性陰道炎的患者陰道分泌物一般pH值≤4.5，滴蟲性陰道炎患者分泌物pH值一般﹥4.5，因此，了解陰道pH值可做為一種輔助資料對我們診治陰道炎也起到了一定的作用。

綜上所述，陰道炎五聯(lián)卡檢測是一種陰道炎新型的檢測方法，具有能大批量上機、檢測快捷準確、對項目能夠特異性檢測、靈敏度高、便于臨床實驗室質(zhì)量控制等一系列優(yōu)點，但是同時也要預(yù)防標本之間的交叉污染，在滴蟲、念珠菌的特異性識別方面，還需要借助顯微鏡加以辨別。因此，五聯(lián)檢聯(lián)合常規(guī)鏡檢，能彌補雙方的不足，可提高檢出率，有效的避免標本中出現(xiàn)的假陽性和假陰性，增加結(jié)果的可靠性和穩(wěn)定性，更好的為臨床服務(wù)。

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ANewDetectingMethodUsinginVaginalSecretionsComparewithMicroscopicExamination

CHENG Jun,ZHANG Jing

(DepartmentofGynecologyandObstetrics,theFirstAffiliatedHospital,UniversityofSouthChina,Hengyang,Hunan421001,China)

ObjectiveTo evaluate the value of vaginitis five joint examination in clinical application，and find a new way to quickly test vaginal secretion.MethodsTwo methods of Microscopic examination and vaginitis five joint examination were used to exam the samples of vaginal secretion collected form 1457 cases in our hospital,respectively.The data of results were analyzed by statistics.ResultsThe two methods had no statistically significant difference in detecting mycete and trichomonad,cleanliness,lactobacilli (P>0.05),however,the method of vaginitis five joint examination was not better in specific identification of microorganism,the detection rate of two methods had a significant difference in bacterial vaginal diseases (P<0.05).ConclusionThe combination of aginitis five joint and microscopic examination help clinician get the accurate result in diagnosis of bacterial vaginal diseases.

vaginal secretion; microscopic examination; vaginitis five joint examination

10.15972/j.cnki.43-1509/r.2015.06.023

2015-09-10；

2015-11-13

*通訊作者，E-mail：11410510@qq.com.

R711.31

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(此文編輯：秦旭平)