石 偉，鄭 華，蒙小云，夏代剛，李 青，池騰江

（深圳市農(nóng)牧實(shí)業(yè)有限公司，廣東 深圳 518023）

克隆豬在集約化豬場育成情況跟蹤觀察

石 偉，鄭 華*，蒙小云，夏代剛，李 青，池騰江

（深圳市農(nóng)牧實(shí)業(yè)有限公司，廣東 深圳 518023）

通過跟蹤觀察9窩45頭克隆豬從出生到育肥的死淘情況，探討克隆豬的存活力。結(jié)果表明，克隆豬死淘率太高，哺乳階段死淘率為48.89%（22/45），保育階段死淘率為43.48%（10/23），生長階段死淘率為30.77%（4/13），育肥階段死淘率為66.67%（6/9），全期死淘率高達(dá)93.33%（42/45）。臨床癥狀和病理剖解結(jié)果顯示，克隆豬死淘原因主要是抗病力差、普遍存在呼吸系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)障礙，與克隆豬心肺功能異常有關(guān)。

克隆豬；育成；集約化豬場

盡管體細(xì)胞克隆在許多動(dòng)物上都獲得了成功，但同時(shí)也出現(xiàn)了一些問題。人們發(fā)現(xiàn)在獲得體細(xì)胞克隆動(dòng)物的同時(shí)，克隆動(dòng)物的出生率比正常受精動(dòng)物的出生率低很多，而且在出生的克隆動(dòng)物中，會(huì)發(fā)現(xiàn)一些異常的生理表型，其中包括出生時(shí)體質(zhì)量過重、胎盤過大、圍產(chǎn)期高死亡率、心肺功能不全、早衰等，因而克隆動(dòng)物的健康安全性逐漸受到人們的普遍關(guān)注。陳會(huì)蘭（2012）[1]曾對克隆的巴馬小型豬和楓涇豬部分組織病理學(xué)和生理生化指標(biāo)進(jìn)行分析。張德福等（2013）[2]對克隆的巴馬小型豬主要性能指標(biāo)進(jìn)行了測定。目前，對杜洛克、長白和大白等外來品種的克隆豬的跟蹤觀察鮮有報(bào)道，本研究主要是觀察杜洛克克隆豬后代在集約化豬場育成情況，為克隆豬產(chǎn)業(yè)化提供參考。

1??材料與方法

1．1 試驗(yàn)材料

選用深圳市農(nóng)牧實(shí)業(yè)有限公司遺傳指數(shù)高、生產(chǎn)性能好的杜洛克公豬作為供體，采用手工克隆技術(shù)建系和生產(chǎn)克隆胚胎。用手術(shù)法移植26頭受體母豬，結(jié)果分娩8窩、產(chǎn)41頭活仔豬；利用內(nèi)窺鏡法移植20頭受體母豬，結(jié)果分娩1窩、產(chǎn)4頭活仔豬。以這45頭克隆仔豬為試驗(yàn)對象。

表1 克隆豬死淘情況跟蹤表

1．2 飼養(yǎng)管理

按深圳市農(nóng)牧實(shí)業(yè)有限公司飼養(yǎng)管理規(guī)程飼養(yǎng)，并考慮克隆仔豬相對普通仔豬而言體弱的特點(diǎn)，整個(gè)飼養(yǎng)管理規(guī)程更加精細(xì)，哺乳仔豬和保育豬溫濕度滿足生長發(fā)育要求，飼喂公司自己生產(chǎn)的全價(jià)配合料，自由采食，自由飲水。免疫和保健程序、衛(wèi)生和消毒程序等均嚴(yán)格按公司已有的程序執(zhí)行。

1．3 試驗(yàn)方法

記錄豬只的死亡和淘汰情況，對部分死淘豬只進(jìn)行解剖，分析其死因。

2??結(jié)果與分析

2．1 死淘結(jié)果

45頭克隆豬從出生到出欄的死淘情況跟蹤結(jié)果見表1。全期死淘42頭，僅育成3頭，全期育成率6.67%。分階段來看，哺乳階段死淘22頭，產(chǎn)房死淘率為48.89%（22/45）；保育階段死淘10頭，保育死淘率為43.48%（10/23）；生長階段死淘4頭，生長死淘率為30.77%（4/13）；育肥階段死淘6頭，育肥死淘率為66.67%（6/9）。

同期豬場的產(chǎn)房死淘率為5.60%，保育死淘率4.90%，生長死淘率1.5%，育肥死淘率1.2%，全期育成率為87.37%?？梢钥闯?，無論是哺乳階段、保育階段、生長階段，還是育肥階段，克隆豬的死淘率均明顯高于非克隆豬。

2．2 臨床癥狀及病理剖解

哺乳階段有3頭仔豬被母豬壓死，有8頭出現(xiàn)了黃白痢，發(fā)病豬多表現(xiàn)為眼瞼水腫、充血、毛糙、皮膚蒼白、消瘦等癥狀。病理剖解可見心臟肥大、腸腔充氣、腸系膜淋巴腫大、出血等病理變化。

保育階段發(fā)病死亡主要發(fā)生在調(diào)入保育舍后2～4周的時(shí)間段里，主要表現(xiàn)為消瘦、皮膚蒼白、喘氣、后肢關(guān)節(jié)腫大、有的出現(xiàn)腹瀉等癥狀，治療效果差。病理剖解可見下頜淋巴、腹股溝淋巴、肺門淋巴及腸系膜淋巴腫大、出血，肺臟粘連，有纖維性滲出物覆蓋，間質(zhì)性肺炎。

生長階段的4頭病死豬表現(xiàn)為生長不良、呼吸困難、淋巴結(jié)腫大。病理解剖可見肺臟腫脹，間質(zhì)增寬，全身淋巴結(jié)，特別是腹股溝、肺門和腸系膜淋巴結(jié)顯著腫大，切面為灰黃色，或有出血，脾臟腫脹，心臟冠狀溝有黃色膠凍樣物。

育肥階段有3頭豬為急性死亡，口鼻流出泡沫血性分泌物，懷疑死于傳染性胸膜肺炎；3頭豬為慢性消瘦性病癥導(dǎo)致死亡，表現(xiàn)為呼吸困難，常呆立或呈犬坐式，張口伸舌，咳喘，并腹式呼吸。病理剖解可見喉頭充滿血樣液體，雙側(cè)性肺炎，在心葉、尖葉和膈葉出現(xiàn)病灶，病灶區(qū)呈紫紅色，堅(jiān)實(shí)，輪廓清晰，肺間質(zhì)積留血色膠樣液體。

3??討論

1）對飼養(yǎng)克隆豬的豬場的血清學(xué)調(diào)查和病原調(diào)查表明，該場為藍(lán)耳病病毒（以高致病性豬藍(lán)耳病病毒為主）和圓環(huán)病毒陽性場，但豬瘟、偽狂犬病均為陰性?？寺∝i相對于同期飼養(yǎng)的非克隆豬而言，更易受到疫病影響造成死亡和淘汰，其抗病力不強(qiáng)。

2）死淘的克隆豬普遍存在呼吸系統(tǒng)和循環(huán)系統(tǒng)障礙，病理剖解結(jié)果表明，克隆豬的高死淘率與其心肺功能異常有關(guān)，而研究人員經(jīng)常在克隆動(dòng)物身上發(fā)現(xiàn)肺臟的異常。Hill 等（1999）[3]報(bào)道生產(chǎn)的13頭克隆牛，4頭牛胎在出生前流產(chǎn)，3頭在出生時(shí)或出生后死亡，大部分死亡克隆牛發(fā)現(xiàn)肺臟畸形。李世杰（2004）[4]在9頭新生死亡克隆牛的研究中也發(fā)現(xiàn)，有7頭克隆牛表現(xiàn)出肺臟的發(fā)育異常。

3）克隆豬要真正實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化，不僅僅要能克隆出來，還要能存活，且生長發(fā)育要正常，繁殖性能也要正常。本試驗(yàn)中克隆豬死淘率較高，也有可能是在克隆過程中某些技術(shù)環(huán)節(jié)出現(xiàn)了問題，還需要更加深入研究來解決。

[1] 陳會(huì)蘭. 克隆豬部分組織病理學(xué)及生理生化指標(biāo)分析[D]. 上海：上海海洋大學(xué)，2012.

[2] 張德福，陳會(huì)蘭，顧曉龍，等. 體細(xì)胞克隆小型豬主要性能指標(biāo)的測定[J].中國獸醫(yī)學(xué)報(bào)， 2013，33（3）：462-465

[3] Hill J R， Roussel A J， Cibelli J B， et al. Clinical and pathologic features of cloned transgenic calves and fetusess(13 case studies)[J]. Theriogenology， 1999(51)：1451-1465.

[4] 李世杰.發(fā)育相關(guān)基因在新生死亡體細(xì)胞克隆牛中的表達(dá)[D]. 北京：中國農(nóng)業(yè)大學(xué)， 2004.

2014-11-13）

深圳市科技計(jì)劃項(xiàng)目（編號：JSA200904011807A）。

*通訊作者：鄭華（1973—），男，高級畜牧師，主要從事豬的育種、生產(chǎn)和經(jīng)營管理。E-mail: sznmzhenghua@126.com