COX-2、nm23和C-erbB-2在乳腺癌組織中的表達及其臨床意義

陳鵬1，韓瑩瑩2，鄧軍吉1，殷愛云1，李博1

(1.濰坊市中醫(yī)院放療中心，山東 濰坊 261041；

2.濰坊市中醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東 濰坊 261041)

[摘要]目的探討COX-2、nm23和C-erbB-2在乳腺癌組織中的表達及其臨床意義。方法采用免疫組化法及熒光免疫雜交法檢測正常乳腺、乳腺良性疾病和乳腺癌組織中COX-2、nm23及C-erbB-2的表達情況。結果乳腺癌組織中COX-2和C-erbB-2的表達明顯高于正常乳腺組織及乳腺良性疾病組織，nm23的表達低于正常乳腺組織及乳腺良性疾病組織(P<0.05)。COX-2和C-erbB-2的表達與乳腺癌患者TNM分期、淋巴結轉移有關(P<0.05)；nm23表達與乳腺癌患者TNM分期、組織學分級及淋巴結轉移有關(P<0.05)。乳腺癌組織中，COX-2與C-erbB-2表達呈顯著正相關(r=0.78，P<0.05)，nm23與COX-2、C-erbB-2表達呈顯著負相關(r=-0.87、-0.93，P<0.05)。結論乳腺癌組織中COX-2和C-erbB-2的高表達、nm23的低表達與乳腺癌的疾病進展關系密切，三者聯(lián)合檢測有利于乳腺癌的生物學行為和預后判斷。

[關鍵詞]乳腺癌；COX-2；nm23；C-erbB-2；免疫組化

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2015.02.003

[中圖分類號]R737.9；R730.23

作者簡介：陳鵬(1982-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事腫瘤的放化療工作。E-mail： chenpeg0414@126.com

收稿日期：(2014-09-21)

Expressions of COX-2,Nm23 and C-erbB-2 in the Breast Cancer Tissues

Chen Peng1,Han Yingying2,Deng Junji1,Yin Aiyun1,Li Bo1

(1.DepartmentofRadiotherapy,WeifangHospitalofTraditionalChineseMedicine,

Weifang261041,China;2.DepartmentofObstetricsandGynaecology,

WeifangHospitalofTraditionalChineseMedicine,Weifang261041,China)

Abstract[]ObjectiveTo explore the expressions of COX-2,nm23 and C-erbB-2 in the breast cancer tissues and their clinical significance.MethodsImmunohistochemical method and fluorescence hybridization assay were used to detect the expressions of COX-2,nm23 and C-erbB-2 in the normal breast tissues,breast benign disease tissues and breast cancer tissues.ResultsThe expressions of COX-2 and C-erbB-2 in the breast cancer tissues were significantly higher than those in the normal breast tissues and the benign breast disease tissues (P<0.05); while the expression of nm23 in the breast cancer tissues was lower than those in the normal breast tissues and the benign

breast disease tissues (P<0.05).The expressions of COX-2 and C-erbB-2 in the breast cancer were positively correlated with TNM stage and lymphnode metastasis (P<0.05); while the expression of nm23 in the breast cancer was negatively correlated with TNM stage,histological grade and lymphnode metastasis (P<0.05).There was significantly positive correlation between the expressions of COX-2 and C-erbB-2 in the breast cancer tissues (r=0.78,P<0.05);while the expression of nm23 was negativly correlated with the expressions of COX-2 and C-erbB-2 (r=-0.87,-0.93;P<0.05).ConclusionThe high expressions of COX-2 and C-erbB-2 and the low expression of nm23 in the breast cancer tissues are closely related with the progression of breast cancer,the combined detection of these three markers couldindicate the biological behaviour and prognosis of breast cancer.

[Key words]breast cancer; COX-2; nm23; C-erbB-2; immunohistochemistry

乳腺癌是危害婦女健康的常見惡性腫瘤之一，在女性惡性腫瘤的發(fā)病率中已經(jīng)超過宮頸癌上升到第1位[1]。在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程中有諸多因素可影響到腫瘤細胞的生物學行為，包括多種癌基因的異常表達，作者就COX-2、nm23和C-erbB-2在乳腺癌組織中的表達情況進行了研究，并以正常乳腺組織和乳腺良性疾病組織作為對照。

1材料與方法

1.1一般材料收集濰坊市中醫(yī)院2009年1月至2013年12月存檔的乳腺切除標本，隨機抽取石蠟包埋的標本90例，其中取自距離腫瘤5 cm以上的乳腺組織標本10例，取術后經(jīng)組織病理學診斷證實的乳腺良性疾病標本35例，取乳腺癌組織標本45例,均為女性患者，全部標本均經(jīng)組織病理學診斷證實，術前所有患者均未行放、化療等特殊治療，且患者病史資料保存完整。

1.2方法所有標本均進行常規(guī)HE染色，光鏡觀察，明確病理診斷。用免疫組化法檢測COX-2、nm23和C-erbB-2的表達情況，分析其相互關系，對于C-erbB-2表達(++)的患者行熒光免疫雜交檢測，并分析兩者之間的符合率。

1.3結果判斷COX-2染色以細胞質或細胞質和細胞核同時出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，nm23染色以細胞質出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，C-erbB-2染色以細胞膜呈棕色染色為陽性。對于C-erbB-2(++)的標本行熒光免疫雜交檢測。

1.4統(tǒng)計學處理采用SPSS 13.0進行數(shù)據(jù)處理，計數(shù)資料的比較采用χ2檢驗，數(shù)據(jù)間的相關性分析采用Spearman相關分析，檢驗水準α=0.05。

2結果

2.1COX-2、nm23、C-erbB-2在不同乳腺組織中的表達見表1。

表1　COX-2、nm23、C-erbB-2在不同乳腺組織中的表達

2.2COX-2、nm23和C-erbB-2的表達與乳腺癌患者臨床病理特征的關系見表2。

2.3乳腺癌組織中COX-2、nm23和C-erbB-2之間表達的相關關系nm23在COX-2陽性組中的陽性率為41.67%(10/24)，在COX-2陰性組為80.95%(17/21)，兩者呈顯著負相關關系(r=-0.87，P<0.05)；C-erbB-2在COX-2陽性組中的陽性率為58.44%(14/24)，在COX-2陰性組為33.33%(7/21)，兩者呈顯著正相關(r=0.78，P<0.05)；C-erbB-2在nm23陽性組中的陽性為22.22%(6/27)，在nm23陰性組為83.33%(15/18)，兩者呈顯著負相關(r=-0.93，P<0.05)。

表2　乳腺癌組織中COX-2、nm23、C-erbB-2的表達與患者臨床病理特征的關系

3討論

乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展過程中受到諸多因素的影響，本研究的COX-2、nm23和C-erbB-2等3個因素也位列其中?，F(xiàn)結合本研究結果及過往文獻，將三者與乳腺癌的關系分析如下。

3.1COX-2與乳腺癌在多種惡性腫瘤組織中存在COX-2的高表達，如胃癌[2]和惡性黑色素瘤[3]。Watanabe等[4]在對乳腺導管癌的研究中發(fā)現(xiàn)，在抽取的原位導管癌的腫瘤病灶中，有80%的細胞存在COX-2的高表達。Spizzo等[5]研究發(fā)現(xiàn)212例乳腺癌組織中的COX-2陽性率為48.6%。Singh-Ranger等[6]研究發(fā)現(xiàn)，抽取的乳腺癌標本中COX-2陽性率為56%。本文結果顯示，COX-2在乳腺癌組織中陽性率為53.33%，明顯高于正常乳腺組織和乳腺良性疾病組織；COX-2的表達與乳腺癌患者TNM分期和淋巴結轉移情況關系密切，TNM分期越晚，COX-2陽性率越高，COX-2表達在淋巴結轉移組明顯高于無淋巴結轉移組，但COX-2的表達與患者的年齡、腫瘤大小及組織學分級無關，提示COX-2與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展存在著一定的聯(lián)系。

3.2nm23與乳腺癌nm23蛋白具有NDPK功能，經(jīng)過影響微管聚合而調節(jié)細胞運動，并通過影響G蛋白的信號傳送而發(fā)揮負向調節(jié)作用，從而抑制腫瘤轉移。nm23在轉移率高的腫瘤組織中呈現(xiàn)低表達，而在轉移率低或無轉移的腫瘤組織中呈現(xiàn)高表達，提示nm23基因可能與腫瘤的轉移有關，對其起抑制作用。nm23基因是乳腺癌的一個獨立預后指標，其表達與淋巴結轉移情況、腫瘤組織學分級、疾病分期和遠隔轉移相關。Hennessy等[7]研究發(fā)現(xiàn)，在乳腺癌組織中nm23基因低表達與高轉移傾向及遠處轉移有關。閔大六等[8]研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者中，nm23蛋白在有腋窩淋巴結轉移者中的表達低于無淋巴結轉移者。本研究結果發(fā)現(xiàn)，nm23在乳腺癌中陽性率為35.56%，低于正常乳腺組織和乳腺良性疾病組織。nm23的表達與乳腺癌患者TNM分期、組織學分級和淋巴結轉移情況關系密切，TNM分期和組織學分級越晚，nm23陽性率越低，nm23陽性率在有淋巴結轉移標本中明顯低于無淋巴結轉移標本，但nm23的表達與患者的年齡及腫瘤大小無關，研究結果提示，nm23基因的高表達抑制了惡性腫瘤的浸潤和轉移，可作為判斷乳腺癌發(fā)生、發(fā)展及評估治療效果的一個有用指標。

3.3C-erbB-2與乳腺癌Her基因調節(jié)正常乳腺的生長與發(fā)育，而Her-2過表達與乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展關系密切[9]。有研究[10]認為C-erbB-2在乳腺癌組織中的表達與患者臨床分期和病理類型呈正相關關系，而其表達與腋窩淋巴結轉移無明顯相關性，而楊金巧等[11]研究認為C-erbB-2表達與乳腺癌腋窩淋巴結轉移呈正相關，通過研究隨訪5 a以上的病例發(fā)現(xiàn)，C-erbB-2高表達的患者預后差。本文結果顯示，C-erbB-2在乳腺癌組織中陽性率為46.67%，高于正常乳腺組織和乳腺良性疾病組織；C-erbB-2的表達與乳腺癌患者TNM分期和淋巴結轉移情況關系密切，TNM分期越晚，C-erbB-2陽性率越高，C-erbB-2表達在淋巴結轉移組明顯高于無淋巴結轉移組，但C-erbB-2的表達與患者的年齡、腫瘤大小及組織學分級無關，研究結果提示C-erbB-2表達情況可用來判斷乳腺癌患者TNM分期及淋巴結轉移情況，并對早期乳腺癌的診斷有一定的價值，結合以往研究結果，C-erbB-2的表達可用來預測化療和內分泌治療的療效，并可指導分子靶向藥物在乳腺癌治療中的應用。綜合患者經(jīng)濟、醫(yī)療硬件等各方面原因考慮，對于免疫組化檢測結果為C-erbB-2(+)及C-erbB-2(+++)的乳腺癌標本可不行熒光免疫雜交技術檢測，C-erbB-2(+)的患者不適合應用單克隆抗體赫賽汀，C-erbB-2(+++)的患者適合應用單克隆抗體赫賽汀，而對于行免疫組化檢測結果為C-erbB-2(++)的乳腺癌標本有必要行熒光免疫雜交檢測，檢測結果為陽性的患者適合應用單克隆抗體，而結果為陰性的患者則不適合應用。

3.4乳腺癌組織中COX-2、nm23和C-erbB-2表達之間的關系乳腺癌的發(fā)生是經(jīng)歷了多種癌基因的激活及抑癌基因的失活導致腫瘤細胞的增殖和分化異常的多基因、多步驟的發(fā)展過程。在腫瘤發(fā)生的不同階段，發(fā)生了癌基因、抑癌基因、凋亡相關基因及轉移相關基因之中的一種或幾種同時發(fā)生異常改變，從而導致腫瘤發(fā)生、發(fā)展與轉移。本研究的3個指標關系到這一過程的多個方面，包括腫瘤細胞的增殖與凋亡、細胞信號的傳導等，三者之間的關系還沒有明確的結論。本文結果顯示，乳腺癌組織中COX-2與C-erbB-2表達呈顯著正相關(r=0.78，P<0.05)，nm23與COX-2、C-erbB-2表達呈顯著負相關(r=-0.87、-0.93，P<0.05)。

綜上所述，乳腺癌組織中COX-2和C-erbB-2的高表達、nm23的低表達與乳腺癌的疾病進展關系密切，三者聯(lián)合檢測有利于乳腺癌的生物學行為和預后判斷。但由于本研究對象均來自同一家醫(yī)院，有一定的局限性和地域性，可能對研究結果產(chǎn)生不可避免的偏倚作用，因此，仍需進一步的研究證實。

參考文獻：

[1]孫強.乳腺癌的早期診斷[J].實用醫(yī)學雜志，2007,23(1)：1-3.

[2]Da MX,Wu XT,Wang J,et al.Expression of cyclooxygenase-2 and vascular endothelial growth factor-C correlates with lymphangiogenesisand lymphatic invasion in human gastric cancer[J].Arch Med Res,2008,39(1):92-99.

[3]Scuderi MR,Anfuso CD,Lupo G,et al.Expression of Ca(2+)-independent and Ca(2+)-dependent phospholipases A(2) and cyclooxygenases in humanmelanocytes and malignant melanoma cell lines[J].Biochim Biophys Acta,2008，1781(10):635-642.

[4]Watanabe O,Shimizu T,Imamura H,et al.Expression of cyclooxygenase-2 in malignant and benign breast tumors[J].Anticancer Res,2003,23(4):3215-3221.

[5]Spizzo G,Gastl G,Wolf D,et al.Correlation of COX-2 and Ep-CAM overexpression in human invasive breast cancer and its impact on survival[J].Br J Cancer,2003，88(4):574-578.

[6]Singh-Ranger G,Kirkpatrick KL,Clark GM,et al.Cyclo-oxygenase-2 (COX-2) mRNA expression correlates with progesterone receptor positivity in human breast cancer[J].Curr Med Res Opin,2003，19(2):131-134.

[7]Hennessy C,Henry JA,May FE,et al.Expression of the antimetastatic gene nm23 in human breast cancer: an association with good prognosis[J].J Natl Cancer Inst,1991，83(4):281-285.

[8]閔大六，徐曉麗，孫孟紅，等.乳腺癌組織中uPA、uPAR及nm23-H1的表達 [J].臨床與實驗病理學雜志，2003,19(3)：249-251.

[9]Carraway KL 3rd,Weber JL,Unger MJ,et al.Neuregulin-2,a new ligand of ErbB3/ErbB4-receptor tyrosine kinases[J].Nature,1997,387(6632):512-516.

[10]Linderholm B,Andersson J,Lindh B,et al.Overexpression of C-erbB-2 is related to a higher expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and constitutes an independent prognostic factor in primary node-positive breast cancer after adjuvant systemic treatment[J].Eur J Cancer,2004,40(1):33-42.

[11]楊金巧，陳琳，幸天勇.乳腺癌中C-erbB2癌基因與雌、孕激素受體和PS2的關系及其預后意義 [J].四川大學學報：醫(yī)學版，2004,35(3)：334-336.