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疑難單親親子鑒定1例

陳芳1，章紅星1，陳建紅1，馬武軍2

（1.浙江漢博司法鑒定中心，浙江杭州310000；2.臺州市路橋區(qū)人民法院，浙江臺州318050）

關(guān)鍵詞：親子鑒定；單親；突變

1　案例

1.1簡要案情

因申報戶口需要，自稱母親的女子與孩子（女兒）來本中心要求進(jìn)行親子鑒定。采集指血備檢。

1.2檢驗過程

1.2.1 DNA提取

采用常規(guī)Chelex-100法提取基因組DNA。采用GoldeneyeTM20A試劑盒［基點認(rèn)知技術(shù)（北京）有限公司］、AGCU EX22試劑盒（無錫中德美聯(lián)生物技術(shù)有限公司）及AGCU 21+1 STR熒光檢測試劑盒（無錫中德美聯(lián)生物技術(shù)有限公司），進(jìn)行22個常染色體的39 個STR基因座的分型，采用Investigator Argus X-12試劑盒（德國QIAGEN公司）進(jìn)行12個X-STR基因座的分型，采用MicroreaderTM19 X ID System試劑盒（蘇州閱微基因技術(shù)有限公司）進(jìn)行19個X-STR基因座的分型。擴(kuò)增體系按試劑盒使用說明書要求完成。

1.2.2 STR分型

采用9700型PCR儀（美國AB公司）進(jìn)行PCR擴(kuò)增，使用3130XL型遺傳分析儀（美國AB公司）進(jìn)行毛細(xì)管電泳，使用GeneMapper ID v3.2.1軟件處理電泳數(shù)據(jù)，實驗過程采用相關(guān)操作手冊進(jìn)行。

1.3檢驗結(jié)果

本案例中先采用GoldeneyeTM20A試劑盒進(jìn)行19個常染色體STR檢驗，發(fā)現(xiàn)Penta D、D8S1179基因座不符合孟德爾遺傳規(guī)律，采用AGCU EX22試劑盒進(jìn)行驗證，相同基因座結(jié)果一致。隨后采用AGCU 21+l試劑盒進(jìn)行20個常染色體STR基因座的檢驗，未發(fā)現(xiàn)不符合遺傳規(guī)律的基因座。進(jìn)一步采用Investigator Argus X-12試劑盒進(jìn)行12個X-STR基因座的分型，又發(fā)現(xiàn)DXS10101基因座不符合遺傳規(guī)律，最后采用MicroreaderTM19 X ID System試劑盒進(jìn)行19個XSTR基因座的分型，出現(xiàn)DXS981、DXS9902基因座不符合遺傳規(guī)律。所有不符合遺傳規(guī)律的基因座中除DXS10101基因座之外，其他基因座均表現(xiàn)為增加或減少一個重復(fù)單位的變化。

采用浙江地區(qū)人群調(diào)查數(shù)據(jù)計算親權(quán)指數(shù)（paternity index，PI），39個常染色體STR基因座的累積親權(quán)指數(shù)CPI為44.97。本案例檢測使用的試劑盒間STR基因座有交叉，可以對一些基因座結(jié)果進(jìn)行相互驗證。檢測的39個常染色體STR基因座分型結(jié)果（見表1）和X染色體X-STR分型結(jié)果（見表2）。根據(jù)常染色體STR分型結(jié)果，依據(jù)《親權(quán)鑒定技術(shù)規(guī)范》判斷標(biāo)準(zhǔn)，若0.0001＜CPI＜10000，則不排除親權(quán)關(guān)系，依據(jù)此判斷標(biāo)準(zhǔn)，此案例則不排除母親與女兒之間親生血緣關(guān)系的存在，結(jié)合X-STR分型結(jié)果，則可以排除母親與女兒之間的親生血緣關(guān)系。

表1　39個常染色體STR基因座分型結(jié)果與親權(quán)指數(shù)

表2　27個X染色體X-STR基因座分型結(jié)果

2　討論

目前，親子鑒定廣泛采用STR遺傳標(biāo)記，但是，STR基因座存在較高的突變率[1]，使得親生父（母）親與孩子之間會出現(xiàn)不符合遺傳規(guī)律的現(xiàn)象[2]，不利于親子鑒定結(jié)果的解釋。日常檢案中常出現(xiàn)1～2個遺傳標(biāo)記不符合遺傳規(guī)律的情況，本案例在檢測39個常染色體STR時出現(xiàn)2個基因座不符合遺傳規(guī)律，增加檢測27個X染色體STR基因座，又出現(xiàn)3個不符合遺傳規(guī)律的基因座，最終排除存在親子關(guān)系。

STR突變是逐步發(fā)生的，即每次突變只改變一個重復(fù)單位，兩個或更多個重復(fù)單位的變化是在前一次突變基礎(chǔ)上發(fā)生的，也就是多步突變是逐步形成的。而最終突變模式都是表現(xiàn)為增加或減少一個或幾個重復(fù)單位。90%以上的突變?yōu)橐徊酵蛔?，即表現(xiàn)為STR突變均為增加或減少一個重復(fù)單位，二步突變者少于10%，更多步突變的比例則更少[3]。本案例中當(dāng)事人告知因申報戶口的需要而做親子鑒定，且為母女關(guān)系的親子鑒定，在檢測19個常染色體STR時，有2個基因座不符合遺傳規(guī)律，且均為一個重復(fù)單位的變化，初步考慮為突變所致。增加檢測至39個STR基因座時，仍只有兩個基因座不符合遺傳規(guī)律。此時，如果不進(jìn)一步增加檢測其他遺傳標(biāo)記，結(jié)合案情，想當(dāng)然的認(rèn)為不符合遺傳規(guī)律的基因座是由于基因突變導(dǎo)致的，容易給出不排除存在親子關(guān)系的意見。

通過該案例，讓我們體會到，因申報戶口而做親子鑒定，看似簡單的鑒定需求，其實存在很大潛在風(fēng)險。首先，在對鑒定方案的選擇上，對于父母子均參加鑒定的案例，不同機(jī)構(gòu)采取的處理方式不同，有的作為父母皆疑進(jìn)行處理，有的當(dāng)成兩個二聯(lián)體進(jìn)行處理，也有些先把母親與孩子當(dāng)成二聯(lián)體處理，再作為標(biāo)準(zhǔn)三聯(lián)體進(jìn)行處理。不同的處理方式，在系統(tǒng)效能上存在一定的差異。其次，在案件受理時，對一些因申報戶口而做親子鑒定的案例，充分了解被鑒定人的需求是必需的，但不可盲目相信當(dāng)事人所述，切不可因其用于申報戶口而降低判斷標(biāo)準(zhǔn)，本案例就是一個很好的證明。單親親子鑒定中，遇到不符合遺傳規(guī)律的情形，一定要增加檢測足夠多的遺傳標(biāo)記，且結(jié)合累積親權(quán)指數(shù)進(jìn)行判斷[4]，方可下意見。此案中，如果盲目相信當(dāng)事人因申報戶口而做鑒定，潛意識里就會理所當(dāng)然的認(rèn)為是存在母女關(guān)系，對一些不具備多種遺傳標(biāo)記的鑒定機(jī)構(gòu)，特別是對一些針對申報戶口而不計算親權(quán)指數(shù)的鑒定機(jī)構(gòu)，容易給出不排除的結(jié)論，從而導(dǎo)致結(jié)果的誤判。

此案例通過增加檢測X-STR，聯(lián)合常染色體STR結(jié)果，最終排除存在親子關(guān)系。性染色體由于其自身特點，可以用于同一父系鑒定或姐妹關(guān)系鑒定等，但目前尚無統(tǒng)一的判斷標(biāo)準(zhǔn)。此類鑒定中，當(dāng)有一個性染色體STR基因座不符合遺傳規(guī)律時該如何處理，又或者應(yīng)該累積檢測多少個性染色體STR方可滿足系統(tǒng)效能，從而給出支持的意見，這些都是我們目前需要解決的問題。建議在采用性染色體STR做鑒定時，遇到不符合遺傳規(guī)律的基因座，切勿因為結(jié)果無法解釋而刪除不符合遺傳規(guī)律的基因座，應(yīng)在分析說明中如實說明，最好不要給出任何結(jié)論性的意見，從而避免結(jié)果誤判。

在鑒定實踐中，常常會遇到1～2個基因座不符合的疑難案例，遇到這類案例時，首先要確認(rèn)不符合基因座是否是真實存在的，可以通過重復(fù)實驗，不同試劑盒驗證進(jìn)行確認(rèn)。確認(rèn)真實存在之后，需進(jìn)一步確認(rèn)不符合基因座是否是由于基因突變導(dǎo)致。首先觀察突變步數(shù)，突變的步數(shù)越多其發(fā)生的機(jī)會就越小，如果基因座不符合為兩個以上重復(fù)單位的變化，這種情況被鑒定人之間排除存在親子關(guān)系的可能性更大，增加遺傳標(biāo)記并計算累計親權(quán)指數(shù)，當(dāng)累計親權(quán)指數(shù)CPI＜0.0001時，便可排除存在親子關(guān)系。如果不符合遺傳規(guī)律的基因座均為一個重復(fù)單位的變化，增加檢測其他遺傳標(biāo)記，未發(fā)現(xiàn)更多不符合基因座的存在，此時要考慮被鑒定人父母與可疑父母之間是否存在近親血緣關(guān)系，綜合多種遺傳標(biāo)記，方可做出定論，以保證鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性和科學(xué)性。

參考文獻(xiàn)：

[1]蔡穎，周廣彪，趙書民，等.中國人群親權(quán)鑒定常用STR基因座平均突變率的估計[J].中國司法鑒定，2010，（5）：56-59.

[2]Brinkmann B，Klintschar M，Neuhuber F，et al.Mutation rate in human microsatellites：influence of the structure and length of the tandem repeat[J]. Am J Hum Genet，1998，62（6）：1408-1415.

[3]呂德堅，陸惠玲.親子鑒定STR突變的考慮[J].中國司法鑒定，2009，45（4）：43-45.

[4]伍新堯，楊慶恩，等.親權(quán)鑒定判斷標(biāo)準(zhǔn)和結(jié)論表述的建立[J].中山大學(xué)學(xué)報，2010，31（1）:20-22.

（本文編輯：李成濤）

鑒定制度

Forensic System

作者簡介：陳芳（1983—），女，主檢法醫(yī)師，主要從事法醫(yī)物證學(xué)鑒定。E-mail:chen-fang@zju.edu.cn。

收稿日期：2015-01-30

文章編號：1671-2072-（2015）05-0121-03

doi:10.3969/j.issn.1671-2072.2015.05.026

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B

中圖分類號:DF795.4