李燕，李蕓霞，袁岸，趙夢(mèng)杰，龔小紅，彭成

·綜述進(jìn)展·

“藥材-提取物-成分”追蹤附子強(qiáng)心作用物質(zhì)基礎(chǔ)

李燕，李蕓霞，袁岸，趙夢(mèng)杰，龔小紅，彭成

按照藥材-提取物-成分逐層跟蹤的思路，分析總結(jié)國(guó)內(nèi)外有關(guān)附子不同成分的強(qiáng)心作用及其與量-毒-效關(guān)系的研究文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)附子的強(qiáng)心作用成分主要為水溶性成分，包括去甲烏藥堿、去甲豬毛菜堿、氯化甲基多巴胺等水溶性生物堿及附子苷、尿嘧啶等非生物堿。其強(qiáng)心作用主要通過(guò)上述成分增加左心室收縮壓（LVSP）和左心室收縮壓力上升最大速率（LVdP/dt max）及降低左心室收縮壓力下降最大速率（-LVdP/dt max）實(shí)現(xiàn)。

附子；成分；強(qiáng)心作用；研究進(jìn)展

毒性中藥保證用藥安全的同時(shí)，也應(yīng)對(duì)如何充分利用其有效成分、保存其較好的療效進(jìn)行深入探索，這也是人類(lèi)千百年來(lái)追求藥物使用的目標(biāo)。截至目前，還沒(méi)有關(guān)于附子不同成分強(qiáng)心作用的全面研究。于此，本文報(bào)道如下。

1 附子的強(qiáng)心作用

近代藥理研究顯示，附子主要通過(guò)“藥材-提取物-成分”三種形式發(fā)揮對(duì)心衰大鼠、蛙、狗、貓、兔、豚鼠的明顯強(qiáng)心作用。

1.1 藥材強(qiáng)心作用研究

生附子、炮附子生藥等藥材均具有強(qiáng)心作用，炮制后作用可能增強(qiáng)。

王立巖等[3]采用0.1 g．kg-1的生附子、炮附子對(duì)股靜脈注射戊巴比妥鈉造成大鼠急性心力衰竭模型進(jìn)行十二指腸給藥，可明顯升高LVSP、LVdP/dt max，有明顯強(qiáng)心作用，且生附子、炮附子的作用無(wú)明顯差別。張?jiān)凭_[4]采用2 g．mL-1生附子、炮附子的稀釋液，按0.0125mL/只對(duì)低鈣任氏液致心衰的離體心衰蛙心模型給藥，兩者均可明顯增強(qiáng)心肌收縮力，均有一定的時(shí)效關(guān)系和量效關(guān)系，前者在0-10min內(nèi)或400-600倍稀釋時(shí)，后者在5-20min內(nèi)或300-700倍稀釋時(shí)，具有顯著強(qiáng)心作用；且后者的強(qiáng)心作用程度和強(qiáng)心作用范圍均大于前者。陳珍等[5]取0.071 g．mL-1生附子、制附子水煎液，按4mL/只對(duì)上述離體心衰蛙心模型給藥，兩者均能使離體蛙心的收縮能力明顯增強(qiáng)，兩者作用沒(méi)有明顯差異。 秦永剛等[6]采用生附子及蒸制2h、4h、6h、8h、10h、12h的附子按0.25 g．mL-1的濃度對(duì)離體蛙心給藥，可明顯增加振幅增加率，明顯增強(qiáng)強(qiáng)心作用，且經(jīng)過(guò)8、10、12h炮制的附子樣品可顯著增加強(qiáng)心作用，有一定的時(shí)效關(guān)系；同時(shí)，隨著蒸制時(shí)間的延長(zhǎng)，可顯著降低心臟毒性。

1.2 提取物強(qiáng)心作用研究

附子中的水提醇沉附子水溶部分、水溶部分、乙醇浸膏等提取物均具有強(qiáng)心作用。

周遠(yuǎn)鵬等[7]采用7.5 mg．kg-1、15.0 mg．kg-1、30.0 mg．kg-1的水提醇沉附子水溶部分給正常麻醉狗iv，可明顯增加左心室收縮壓（LVSP）和左心室收縮壓力上升最大速率（LVdP/dt max），并分別維持10min、15min以上；且在維持作用時(shí)間內(nèi)顯示一定的量效關(guān)系。周遠(yuǎn)鵬等[8]采用30.0 mg．kg-1附子乙醇浸膏、附子水溶部分、附子除鈣水溶部分分別給靜脈滴注戊巴比妥鈉造成貓心力衰竭模型靜脈給藥，水溶部分可逐漸升高LVSP、LVdP/ dt max，且兩者峰值分別恢復(fù)到正常水平的75±5%及72±6%，比心衰時(shí)增加96±20%及220±83%；除鈣水溶部分使LVSP、LVdP/dt max先降后升，前者從心衰時(shí)的67±7mmHg先降至56±8mmHg再升至104±10mmHg，即先降低19±6%后升高63±15%，后者從心衰時(shí)的531±93mmHg先降至488±90mmHg再升至1075±194mmHg，即先降低7.4±4%后升高121±25%；乙醇浸膏升高心臟功能的作用比水溶部分弱，比除鈣水溶部分強(qiáng)，結(jié)果也提示鈣離子在附子的強(qiáng)心作用中起了部分作用。

1.3 成分強(qiáng)心作用研究

附子的水溶性生物堿類(lèi)和水溶性非生物堿類(lèi)成分均具有強(qiáng)心作用。

1.3.1 水溶性生物堿類(lèi)強(qiáng)心作用 附子中的水溶性生物堿如去甲烏藥堿，去甲豬毛菜堿，消旋去甲烏藥堿，氯化甲基多巴胺，附子靈、尼奧寧等均具有強(qiáng)心作用。

去甲烏藥堿對(duì)在兔心、豚鼠心和犬心，在衰竭犬和貓心臟，離體蛙心、離體豚鼠衰竭心臟等，能明顯增加心肌收縮力、LVdP/dt max和增加心輸出量，明顯增加冠脈、腦和外周動(dòng)脈的血流及減少這些血管的阻力，也會(huì)引起心率、氧消耗量增加；其作用與異丙腎上腺的作用相似，對(duì)心室乳頭肌具α受體阻滯作用，可被心得安阻斷；例如，用濃度為1×10-8-5×10-6/ml的去甲烏藥堿對(duì)離體蟾蜍心臟給藥，可使心肌收縮幅度增加22-98%，心輸出量增加15-80%；Iv 0.5mg．kg-1可使兔的心收縮力增加51.6%，iv 2μg．kg-1．min-1可使麻醉犬和豚鼠的LVSP分別增加12%、58%，LVdp/dtmax分別增加73%、26%，且作用隨濃度的增加而加強(qiáng)[9,10,11]。同時(shí)，去甲烏藥堿還可直接作用于離體培養(yǎng)的心肌細(xì)胞，使之搏動(dòng)加強(qiáng)[12]。

研究表明，去甲豬毛菜堿( SAL)為弱的β-腎上腺素能興奮劑，它能興奮豚鼠離體心房，增加收縮頻率[13]。 3×10-6氯化甲基多巴胺可使離體豚鼠右心房的收縮幅度和頻率分別增加250%和20%，其與阿托品合用后，作用增強(qiáng)，可使心房的收縮幅度和頻率分別增加415%和215%，用兔離體心房的實(shí)驗(yàn)作用類(lèi)似；氯化甲基多巴胺具有nicotine樣作用，其升高血壓、強(qiáng)心作用和阿托品的加強(qiáng)作用均可被α-腎上腺素能受體阻滯劑酚妥拉敏和神經(jīng)節(jié)阻斷劑六烴季胺阻斷，表明其是一個(gè)α-腎上腺素能受體，也是一個(gè)神經(jīng)節(jié)和結(jié)前纖維興奮劑[14]。

一定劑量的消旋去甲烏藥堿對(duì)蟾蜍離體心臟和家兔在體心臟給藥，可明顯增加心肌收縮力和心排血量，減輕肺瘀血，可引起下肢血管擴(kuò)張，明顯減輕心臟前后負(fù)荷，減少心肌耗氧量，改善左室功能，達(dá)到強(qiáng)心的目的[15]。消旋去甲烏藥堿活性很好，即使稀釋至十億分之一的濃度，仍然有活性，其作用似異丙腎上腺素樣作用，興奮β-受體，而非強(qiáng)心苷樣作用[16]。

采用MTT法，從附子中提取的幾種化合物按一定濃度對(duì)戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的原代培養(yǎng)的乳鼠心肌損傷模型給藥，結(jié)果顯示，在體外實(shí)驗(yàn)中，幾種化合物能顯著抑制戊巴比妥鈉的誘導(dǎo)作用；在濃度為10μM，1μM，0.1μM時(shí)，附子靈、尼奧寧顯示活性，有效保護(hù)心肌細(xì)胞，可明顯恢復(fù)心肌細(xì)胞的跳動(dòng)節(jié)奏，明顯增加心肌細(xì)胞活力和存活率[17]。

從中國(guó)附子(A.Carmichaeli Dexb)中分離出的撐棍堿也有強(qiáng)心作用；采用增高大白鼠的血壓活性實(shí)驗(yàn)檢測(cè)附子根部位分離的單體coryneine氯化物（I），結(jié)果，I可增加豚鼠離體右心房的收縮率和幅度，有強(qiáng)心作用，經(jīng)鑒定為多巴胺三甲基化合物[18]。

1.3.2 水溶性非生物堿類(lèi)強(qiáng)心作用 除水溶性生物堿以外，附子的非水溶性生物堿也被報(bào)道有強(qiáng)心作用。

王桂玲等[19]按3μg．mL-1、30μg．mL-1兩個(gè)濃度對(duì)大鼠離體工作心臟給藥，低、高濃度分別促進(jìn)對(duì)照組的LVSP從9.87±1.48增至12.48±1.77（增加26.4%），從9.87±1.48增至14.76±1.91（增加49.54%）；LVdP/dt max從707.42±35.73增至748.14±34.57（增加5.76%），從707.42±35.73增至972.98±37.41（增加37.53%）；對(duì)-LVdP/dt max作用較弱，分別降低7.33%、13.6%。上述濃度對(duì)豚鼠離體工作心臟灌流，可使LVSP、LVdP/dt max分別增加26.44%、33.13%，5.76%、12.0%，-LVdP/dt max分別降低7.32%、13.59%；可使APD50明顯升高，且有劑量依賴性，心率不變，顯示附子苷能激活心肌細(xì)胞的L型鈣通道，促進(jìn)大量心肌外鈣離子進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，促進(jìn)心肌收縮能的增加，也可能激活心室肌細(xì)胞膜上的鈉通道，通過(guò)鈉-鈣離子交換而產(chǎn)生正性肌力作用[14,20]。

韓公羽等[21]取5μmol．L-1的尿嘧啶及合成品尿嘧啶對(duì)蟾蜍離體心臟給藥，結(jié)果，尿嘧啶同作對(duì)照的合成品尿嘧啶強(qiáng)心作用一致，均在用藥后l-2min開(kāi)始增加心肌收縮幅度，3min后明顯增強(qiáng)，且此作用可隨時(shí)間的增加而增強(qiáng)，維持時(shí)間較長(zhǎng)，?？沙掷m(xù)30min以上。楊帆等[22]報(bào)道，尿嘧啶還可明顯增加失血性休克大鼠的心收縮力和心輸出量，明顯增加大鼠的存活率，但不影響心率，其增加心輸出的作用強(qiáng)而持久常超過(guò)40min ；而對(duì)正常動(dòng)物的上述指標(biāo)無(wú)明顯影響。

綜上所述，附子提取物、附子水提物、附子醇提物對(duì)心衰大鼠、離體蛙心等均具有強(qiáng)心作用[23,24]，相關(guān)研究報(bào)道附子臨床有效劑量范圍可能為5.56～44.44 g．d-1，在此劑量范圍內(nèi)附子的功效隨劑量增大而增強(qiáng)，且呈線性相關(guān)從而驗(yàn)證量效關(guān)系的可能性；當(dāng)效應(yīng)達(dá)到一定高度時(shí)并不會(huì)隨劑量增大而增強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)中毒癥狀，甚至死亡，提示附子大劑量持續(xù)增加時(shí)療效并未隨之增強(qiáng)，反而產(chǎn)生明顯毒性，臨床附子具有明顯的量-效-毒關(guān)系，用藥劑量不可無(wú)限制增大[25]。

附子對(duì)離體心臟、在體心臟及實(shí)驗(yàn)性衰竭心臟均有明顯的強(qiáng)心作用，其作用于心臟，可促進(jìn)心肌收縮，提高心率，擴(kuò)大心搏出量，同時(shí)也會(huì)增加心肌耗氧量；其藥效成分主要為水溶性成分，包括去甲烏藥堿等水溶性生物堿類(lèi)及附子苷、尿嘧啶等非生物堿類(lèi)，其藥效主要通過(guò)成分對(duì)神經(jīng)膜蛋白、激素受體作用實(shí)現(xiàn)，可減少M(fèi)受體數(shù)量，增加β受體數(shù)量，如去甲烏藥堿顯著的正性肌力作用就是因?yàn)槠涫铅率荏w部分激動(dòng)劑；對(duì)于內(nèi)分泌和交感神經(jīng)系統(tǒng)的功能均處于低下的機(jī)體，其可使腦中去甲腎上腺素(NA)和多巴胺(DA)的含量回升，而降低5-HT的含量，從而調(diào)整機(jī)體到平衡狀態(tài)[26]。同時(shí)，在附子的臨床應(yīng)用中應(yīng)找出既能發(fā)揮療效又能保證安全的劑量平衡點(diǎn)，如果劑量過(guò)大則會(huì)產(chǎn)生毒性。附子中可能還含有其他強(qiáng)心成分，或許因?yàn)楹刻倩蜓芯抠Y料欠缺未能進(jìn)行報(bào)道，今后還需在改進(jìn)提取方法等方面進(jìn)一步研究。

[1] 巫碧輝,李玉純,李小芳,等.烏頭、附子等微量元素測(cè)定及其強(qiáng)心作用的探討(第一報(bào))[J].微量元素,1988,(4)：19.

[2] 曹航.附子強(qiáng)心膠囊治療充血性心力衰30例總結(jié)[J].湖南中醫(yī)雜志,2002,18(4)：4.

[3] 王立巖,張大方,曲曉波,等.附子炮制前后有效部位強(qiáng)心作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)中藥雜志,2009,34(5)：596.

[4] 張?jiān)凭_.炮制對(duì)附子強(qiáng)心作用的影響[J].黑龍江醫(yī)藥,2011,24(6)：884.

[5] 陳 珍,趙有亮.生附子和制附子對(duì)離體蛙心的強(qiáng)心作用[J].科技視界,2013,(36)：390.

[6] 秦永剛,張美榮,張建平,等.不同蒸煮時(shí)間對(duì)附子強(qiáng)心作用及心臟毒性的影響[J].醫(yī)學(xué)信息,2002,15(10)：618.

[7] 周遠(yuǎn)鵬,劉文化.附子水溶部分對(duì)心血管系統(tǒng)的影響[J].中草藥,1983,14(6)：29.

[8] 周遠(yuǎn)鵬,劉文化.附子對(duì)心血管系統(tǒng)作用和毒性的比較[J].中西醫(yī)結(jié)合雜志,1984,4(1)：48.

[9] 周遠(yuǎn)鵬,范理禮,張麗英,等.附子藥理作用研究I.去甲烏藥堿對(duì)心血管系統(tǒng)的作用[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,1978,13(11)：664.

[10] 劉文化,周遠(yuǎn)鵬,曾貴云.去甲烏藥堿對(duì)實(shí)驗(yàn)性心力衰竭的治療作用[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),1988,23(2)：81.

[11] 周遠(yuǎn)鵬,江京莉. 附子的研究V.附子的強(qiáng)心有效成分之一-去甲烏藥堿的實(shí)驗(yàn)及臨床研究概況[J]. 中藥藥理與臨床,1992,8(3)：43.

[12] 韓慧婉,王家珍,孫福立,等.去甲烏藥堿對(duì)培養(yǎng)心肌細(xì)胞B-腎上腺素受體的作用[J].藥學(xué)通報(bào),1980,15(10)：41.

[13] 周遠(yuǎn)鵬.附子及其主要成分的藥理作用和毒性[J].藥學(xué)學(xué)報(bào),1983,18(5)：394.

[14] 周遠(yuǎn)鵬.作用于心血管系統(tǒng)的水溶性活性成分研究回顧和評(píng)價(jià)[J].中藥藥理與臨床,2011,27(6)：106.

[15] 王浴生.中藥藥理與應(yīng)用[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,1983,63.

[16] 呂蘭薰.強(qiáng)心中藥的研究動(dòng)態(tài)[J].陜西中醫(yī),1988,9(3)：128.

[17] Xiong L, Peng C, Xie XF, et al. Alkaloids Isolated from the Lateral Root of Aconitum carmichaelii[J]. Molecules,2012,17：9939.

[18] Konno C,Shiruasaka M, Hikino H. Caedio active principle of Aconitum carmichae roots[J].Planta Medica,1979,35：150.

[19] 王桂玲,徐雅娟,房建強(qiáng).附子非生物堿成分的研究[J].泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,28(3)：179.

[20] 徐東銘,徐雅娟,楊世杰,等.附子苷及同系物,其制備方法和以該化合物為活性成分的藥物組合物 發(fā)明專(zhuān)利申請(qǐng)公開(kāi)說(shuō)明書(shū),2004年 申請(qǐng)?zhí)?2133091.3；公開(kāi)號(hào)CN 1488636A.

[21] 韓公羽,梁華清,廖耀中,等.四川江油附子新的強(qiáng)心成分[J].第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),1991,12(l)：10.

[22] 楊 帆,林樹(shù)新,張福琴,等.四川江油附子提取物抗失血性休克的作用[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào),1996,(2)：116.

[23] 王 懿.基于心臟靶器官的附子效-毒關(guān)聯(lián)評(píng)價(jià)[D].濟(jì)南：山東中醫(yī)藥大學(xué),2014.

[24] 劉甜甜.基于“有故無(wú)損”思想的附子量-效-毒關(guān)系研究[D].成都：成都中醫(yī)藥大學(xué),2014.

[25] 范麗麗,鄭作文,楊柯,等.毒性中藥附子量效關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究[J].四川中醫(yī),2011,29(5)：53.

[26] 丁濤.附子的現(xiàn)代藥理研究與臨床新用[J].中醫(yī)學(xué)報(bào),2012,27(175)：1630.

(責(zé)任編輯：何瑤)

Exploration of the material basis for cardiotonic effect of Fuzi under the guidance “Herb- Extract-Ingredient”

/LI Yan, LI Yun-xia, YUAN An, ZHAO Meng-jie, GONG Xiao-hong, PENG Cheng//( School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; Key Laboratory of Standardization for Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan)

In accordance with the guidance of “Herb-Extract-Ingredients” , literatures related to the cardiotonic effect of different components in Fuzi and dose-toxicity-effect relationship of Fuzi at home and abroad were analyzed and summarized in the study. The cardiotonic effect was mainly caused by water-soluble components in Fuzi, including water-soluble alkaloids such as higenamine, salsolinol, methyl chloride, and non-alkaloids such as fuzinoside and uracil, and so on. The left ventricular systolic pressure (LVSP) and maximal rate of the increase of left ventricular pressure (LVdP/dt max) were increased, and the maximal rate of the decrease of left ventricular pressure (-LVdP/dt max) was reduced by the above ingredients to achieve the cardiotonic effect.

Fuzi ; ingredients; cardiotonic effect; research progress

R285.5

A

1674-926X(2016)05-016-03

國(guó)家自然科學(xué)基金（81573583, 81373943）, 四川省科技廳青年基金（2013JQ0018）

成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥材標(biāo)準(zhǔn)化教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，中藥資源系統(tǒng)研究與開(kāi)發(fā)利用省部共建國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，四川 成都 611137

李燕，女，研究生在讀，主要從事中藥物質(zhì)基礎(chǔ)以及藥動(dòng)學(xué)方向研究

Email：993603736@qq.com

彭成，男，博士生導(dǎo)師，研究員，主要從事疾病動(dòng)物模型與中藥復(fù)方研究

Email： pengchengchengdu@126.com

李蕓霞， 女，博士生導(dǎo)師，研究員，主要從事藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究 Email：lyxcdutcm@126.com

2015-10-13