李孝輝 陳新軍

（徐州醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院，江蘇 徐州 221006）

探析化學(xué)發(fā)光免疫檢測在生化檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果

李孝輝 陳新軍

（徐州醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院，江蘇 徐州 221006）

目的 探討化學(xué)發(fā)光免疫檢測在生化檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果。方法 隨機(jī)將118例甲狀腺腫瘤患者分成對照組和實(shí)驗(yàn)組，每組各59例，對照組患者選擇放射免疫分析法，實(shí)驗(yàn)組患者選擇化學(xué)發(fā)光免疫檢測法。結(jié)果 在特異性、靈敏度、檢測符合率以及甲狀腺球蛋白水平方面，實(shí)驗(yàn)組患者均顯著高于對照組患者（P＜0.05）。結(jié)論 化學(xué)發(fā)光免疫檢測法的準(zhǔn)確性和靈敏度較高，在診斷和治療各類疾病時(shí)具有非常顯著的效果，對于臨床疾病的正確診斷非常重要，具有臨床推廣價(jià)值和應(yīng)用價(jià)值。

化學(xué)發(fā)光免疫檢測；生化檢驗(yàn)；應(yīng)用效果

化學(xué)發(fā)光免疫檢測法是利用磁場分離抗體、抗原的游離部分和沉淀部分，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)定性或者定量檢測的目標(biāo)，臨床中也將其稱之為化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫測定法[1]。在臨床腫瘤、病毒標(biāo)志物、心臟疾病、免疫系統(tǒng)疾病的診治中，化學(xué)發(fā)光免疫檢測法的應(yīng)用非常廣泛。臨床中在診斷甲狀腺疾病時(shí)，需要檢測患者的甲狀腺球蛋白濃度，然而常規(guī)檢測方法的假陽性和假陰性檢測率較高，不能為臨床治療方案的制定提供科學(xué)依據(jù)[2]。本研究主要分析了化學(xué)發(fā)光免疫檢測在生化檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果，現(xiàn)做如下分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選擇我院2013年1月至2016年1月收治的甲狀腺腫瘤患者118例，全部患者均滿足（人民軍醫(yī)出版社，2011版）《甲狀腺病理診斷》的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，均簽署知情同意書；排除嚴(yán)重腎功能障礙、家族精神病史或者精神病史、特殊情況過敏以及心腦血管疾病患者。按照數(shù)字隨機(jī)方法將全部患者分成對照組和實(shí)驗(yàn)組，每組各59例。對照組中，男性33例，女性26例；年齡11～82歲，平均年齡（44.7 ±3.2）歲；病程1～5年，平均病程（2.9±1.5）年。實(shí)驗(yàn)組中，男性35例，女性24例；年齡10～81歲，平均年齡（44.2±3.8）歲；病程1～7年，平均病程（3.3±1.1）年。在年齡、性別、病程等資料方面，兩組患者比較差異具有可比性（P＞0.05）。

1.2 方法：全部患者均詳細(xì)編號(hào)，分別抽取靜脈血3 mL，在患者血液中加入一定量的肝素進(jìn)行抗凝，以每分鐘3500轉(zhuǎn)的速度進(jìn)行離心分離，選擇血漿進(jìn)行凍存，對患者甲狀腺球蛋白進(jìn)行檢測，檢測時(shí)間不能超過4 h。

對照組患者選擇放射免疫法檢測：選擇西安國營二六二廠生產(chǎn)的FJ-20003/50P型γ全自動(dòng)雙探頭放射免疫計(jì)數(shù)儀來檢測患者的甲狀腺球蛋白。實(shí)驗(yàn)組患者選擇化學(xué)發(fā)光免疫檢測法：選擇瑞士羅氏公司提供的E601型電化學(xué)發(fā)光分析儀，并選擇相關(guān)的配套化學(xué)發(fā)光試劑盒來檢測患者的甲狀腺球蛋白。第三方驗(yàn)證則選擇雅培i2000儀器和相關(guān)配套試劑。

1.3 臨床觀察指標(biāo)：觀察比較兩組患者的甲狀腺球蛋白檢測結(jié)果；將假陰性和假陽性檢出率作為標(biāo)準(zhǔn)，來比較分析兩種檢測方法的靈敏性、特異性。甲狀腺球蛋白放射免疫法檢測的正常水平為11.45～20.25 ng/mL，化學(xué)放光免疫法檢測的正常水平為0.73～84 ng/mL。真陽性/（假陰性+真陽性）×100.0%即為靈敏度，真陰性/（假陽性+真陰性）×100.0%即為特異性，（真陰性+真陽性）/總例數(shù)×100.0%即為符合率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：將數(shù)據(jù)納入SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件中進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2比較，以率（%）表示，若（P＜0.05）則差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者的檢測結(jié)果觀察：實(shí)驗(yàn)組中，實(shí)際陽性、實(shí)際陰性分別有29例、30例；檢測出真陽性和真陰性均為28例；靈敏度為97.0%（28/29），特異性為93.3%（28/30），符合率為95.0%（56/59）。對照組中，實(shí)際陽性、實(shí)際陰性分別有30例、29例；檢測出真陽性、真陰性分別為25例、24例；靈敏度為83.3%（25/30），特異性82.7%（24/29），符合率為83.0%（49/59）。在檢測靈敏度、特異性以及符合率方面，實(shí)驗(yàn)組患者均顯著高于對照組患者（P＜0.05）。

2.2 兩組患者的甲狀腺球蛋白個(gè)數(shù)和水平觀察：實(shí)驗(yàn)組的甲狀腺球蛋白個(gè)數(shù)為（18.2±2.2）個(gè)，甲狀腺球蛋白水平為（691.3±88.5）ng/mL；對照組的甲狀腺球蛋白個(gè)數(shù)為（7.4±1.5）個(gè)，甲狀腺球蛋白水平為（627.4±49.7）ng/mL；實(shí)驗(yàn)組的甲狀腺球蛋白個(gè)數(shù)、甲狀腺球蛋白水平均顯著高于對照組（P＜0.05）。

3 討 論

化學(xué)發(fā)光免疫檢測法的具體原理為：在抗體或者抗原上標(biāo)記酶標(biāo)志物或者化學(xué)發(fā)光物，產(chǎn)生免疫反應(yīng)，然后在復(fù)合物中置入化學(xué)發(fā)光劑或者氧化劑，讓其發(fā)光，然后選擇一起來檢測發(fā)光強(qiáng)度，計(jì)算待測濃度，化學(xué)發(fā)光物常選擇有機(jī)化合物，然而利用氧化反應(yīng)讓其發(fā)光[4]。在上世紀(jì)70例年代，化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)開始在臨床中應(yīng)用，但是最開始的應(yīng)用主要是將其當(dāng)成示蹤信號(hào)，因?yàn)榘l(fā)光時(shí)間和靈敏度較差，所以對化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域造成了一定限制。在現(xiàn)代醫(yī)學(xué)技術(shù)快速發(fā)展的過程中，隨著辣根過氧化物酶標(biāo)記技術(shù)在臨床中的應(yīng)用，進(jìn)而也讓化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)的信號(hào)強(qiáng)度得以有效提升，發(fā)光時(shí)間也有效延長，最終讓化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)的不足之處得到了有效解決[5]?；瘜W(xué)發(fā)光可以分成發(fā)光酶免疫測定（LEⅠA）、發(fā)光物免疫測定（LⅠA）以及放光輔助因子免疫測定（LCⅠA）[6]。雖然化學(xué)發(fā)光的類型存在差異，但是各種類型的化學(xué)發(fā)光原理都是相通的，化學(xué)發(fā)光都是利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)，經(jīng)化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生光輻射。本研究中所選擇的兩種檢測方法，放射免疫檢測法和化學(xué)發(fā)光免疫檢測法存在類似的地方，兩種檢測方法均能選擇Ag-L+CR→light來表示，Ag-L為發(fā)光物，CR則為協(xié)同反應(yīng)物[7]?；瘜W(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)具有非常廣泛的用途，而在臨床醫(yī)學(xué)方面，化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)主要用來測定腫瘤，因?yàn)榛瘜W(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)的光輻射具有自身的特殊性，因此能測定多種腫瘤，如PSA、AFP、NES、CEA、CA242以及CA153等[8]。

分析本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在檢測甲狀腺球蛋白濃度時(shí)，化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)的檢測靈敏度、特異性以及符合率均顯著高于放射免疫檢測，二者比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。臨床中在檢測甲狀腺球蛋白濃度時(shí)，化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)的操作比較簡單，而且比較實(shí)用，在對甲狀腺疾病進(jìn)行檢測時(shí)，具有較高的靈敏度和準(zhǔn)確率，能讓甲狀腺疾病臨床檢驗(yàn)的難題得以有效解決。甲狀腺蛋白的主要形式為甲狀腺球蛋白，在蛋白總量中的占比大約為75%，是合成甲狀腺激素生物的基礎(chǔ)。甲狀腺激素在蛋白水解酶的作用下，會(huì)從TG中脫離，然后釋放到血液中，正常情況下，循環(huán)血中存在微量的甲狀腺球蛋白。甲狀腺球蛋白的半衰期一般為4～60 h，甲狀腺疾病特別是甲狀腺腫瘤患者血液中的甲狀腺球蛋白濃度存在一定程度的增加。分析本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)組的甲狀腺球蛋白個(gè)數(shù)、甲狀腺球蛋白水平均顯著高于對照組（P＜0.05）；研究結(jié)果顯示可以將甲狀腺球蛋白水平作為反映甲狀腺腫瘤患者術(shù)前、術(shù)后變化的指標(biāo)，而且靈敏性較高，所以對甲狀腺腫瘤患者來講，應(yīng)對甲狀腺球蛋白水平進(jìn)行定期復(fù)查。

在臨床生化檢驗(yàn)中，化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)的應(yīng)用非常廣泛，如心臟疾病的檢測、病毒的檢測等[9-12]。詳細(xì)情況如下：①檢測梅毒螺旋體：臨床中常用化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)來檢測患者體內(nèi)的非密螺旋體特異性抗體，檢測后還需要實(shí)施確證檢測，然后結(jié)合檢測結(jié)果來對患者進(jìn)行確診，臨床中在檢測梅毒螺旋體時(shí)，人工檢測方法需要較長的時(shí)間，而且檢測效率不高，操作也比較復(fù)雜，臨床要求不能得以有效滿足，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光免疫檢測技術(shù)對梅毒螺旋體進(jìn)行檢測，通過全自動(dòng)分析儀，選擇兩步法對梅毒螺旋體進(jìn)行定性檢測，能讓假陽性率得以有效降低，讓臨床檢出準(zhǔn)確率有效提高。②檢測乙肝病毒標(biāo)志物：過往在檢測乙型病毒性肝炎時(shí)，常選擇ELⅠSA法實(shí)施定性檢測，但是傳統(tǒng)檢測方法并不能臨床定量需求得以有效滿足，現(xiàn)階段臨床中在判斷病毒感染時(shí)，一般都選擇HBsAg作為標(biāo)志物，所以可以選擇化學(xué)發(fā)光免疫測定法來測定乙肝HBsAg抗原，不僅能滿足定性的要求，也能滿足定量的標(biāo)準(zhǔn)，而且檢測的特異性、靈敏度和符合率較高，相關(guān)檢測指標(biāo)均能滿足臨床診斷和治療的需求，在較大范圍內(nèi)具有比較理想的線性。③檢測腫瘤標(biāo)志物：在組織和細(xì)胞中均存在激素、酶以及蛋白質(zhì)等腫瘤標(biāo)志物，臨床中在對腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行檢測時(shí)，化學(xué)發(fā)光免疫檢測法的應(yīng)用非常廣泛，能為早期診斷腫瘤患者及預(yù)后監(jiān)測提供科學(xué)依據(jù)；比如選擇化學(xué)發(fā)光免疫檢測法來測定血清中的鱗狀細(xì)胞癌抗原和cy-fra21-1濃度，能有效診斷食管癌患者，而且還能有效觀察患者的病情，效果比較理想。④檢測心臟疾病：臨床相關(guān)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，肌紅蛋白、心肌損傷標(biāo)志物和心臟病的發(fā)生有直接關(guān)系，所以臨床中可以選擇化學(xué)發(fā)光免疫檢測法來檢測患者的肌紅蛋白和心肌損傷標(biāo)志物，進(jìn)而來對心臟疾病患者進(jìn)行有效、準(zhǔn)確和及時(shí)的診斷，而且還能監(jiān)護(hù)患者的臨床癥狀。

臨床生化檢測中，滿足疾病標(biāo)記的抗原不多，所以在臨床生化檢驗(yàn)中，應(yīng)充分優(yōu)化生化檢驗(yàn)方法，具體措施為：①對分析結(jié)果的靈敏度和準(zhǔn)確性進(jìn)行有效提高，并對分析結(jié)果的放大倍數(shù)進(jìn)行有效提升，讓檢驗(yàn)下限有效延長，對化學(xué)發(fā)光免疫檢測法的應(yīng)用范圍進(jìn)行不斷拓展，讓其臨床價(jià)值能得以充分發(fā)揮。②讓化學(xué)發(fā)光免疫檢測分析儀器的準(zhǔn)確性得以有效提升，促進(jìn)儀器智能化、小型化的發(fā)展。③在選擇化學(xué)發(fā)光免疫檢測法進(jìn)行生化檢驗(yàn)時(shí)，比較依賴催化劑效果和發(fā)光物生成，所以要想讓化學(xué)發(fā)光免疫檢測法的應(yīng)用范圍有效擴(kuò)大，讓檢測靈敏度提升，就需要對新型催化劑和發(fā)光物進(jìn)行不斷研發(fā)，而且還應(yīng)對化學(xué)發(fā)光反應(yīng)效果進(jìn)行不斷增強(qiáng)和修飾，對新型分析方法進(jìn)行不斷探究，進(jìn)而讓化學(xué)發(fā)光免疫檢測的準(zhǔn)確性得以有效提升。

總之，化學(xué)發(fā)光免疫檢測法的準(zhǔn)確性和靈敏度較高，在診斷和治療各類疾病時(shí)具有非常顯著的效果，對于臨床疾病的正確診斷非常重要，具有臨床推廣價(jià)值和應(yīng)用價(jià)值。

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Application Analysis of Chemiluminescence Immune Detection in the Biochemical T est

LI Xiao-hui, CHEN Xin-jun
(Second Affiliated Hospital of Xuzhou Medical University, Xuzhou 221006, China)

Objective To study the chemical luminescence immune detection application in the biochemical test results; Methods Randomly divide 118 cases of thyroid cancer patients into control group and experimental group, 59 cases in each group, control group patients choose radioimmunity analytic method, the experimental group patients choose chemiluminescence immunoassays. Results The specificity, sensitivity, detection of coincidence rate and thyroglobulin level, the experimental group patients were significantly higher than the control group patients (P<0.05). Conclusion Chemiluminescence immune sensitivity is higher, and the accuracy of test in the diagnosis and treatment of various diseases has very significant effect, is important for accurate diagnosis of clinical disease, has clinical value and application value.

Chemiluminescence immune detection; Biochemical examination; Application effect

R446.1

B

1671-8194（2016）32-0017-02