鄭文楚

硬幣表面細(xì)菌知多少？

鄭文楚

大人們總是讓我們勤洗手，因?yàn)槲覀兊氖趾屯饨缃佑|最多最頻繁，尤其當(dāng)拿過錢幣以后，媽媽會(huì)催促我快去洗手。但是，明明我們拿的是亮晶晶的硬幣或者嶄新的紙幣，何況我們的手看上去也是干干凈凈的，為什么卻要說洗洗“小臟手”呢？原來錢幣流通廣，經(jīng)過許多人轉(zhuǎn)手，接觸多種環(huán)境，不可避免地就會(huì)沾染上各種細(xì)菌甚至病毒。這些細(xì)菌、病毒呀就會(huì)跟著我們的手到處旅游，稍不留神它們可能就會(huì)入侵我們的身體，威脅我們的健康。它們是我們?nèi)庋劭床坏降摹拔ｋU(xiǎn)分子”，靜悄悄地潛伏在錢幣的表面。可能你會(huì)覺得不一定有這么嚴(yán)重，那么我們簡(jiǎn)單地設(shè)計(jì)了一個(gè)小實(shí)驗(yàn),準(zhǔn)備借助一些實(shí)驗(yàn)手段來檢測(cè)，就可以告訴你硬幣上到底有多少細(xì)菌。

采樣地點(diǎn)

我們來到南京市玄武區(qū)花園路的華潤(rùn)蘇果超市，在收銀臺(tái)換了一角、五角和一元硬幣各三枚共九枚硬幣。

實(shí)驗(yàn)材料

我們都知道植物的生長(zhǎng)離不開土壤、水和陽(yáng)光，同樣，細(xì)菌的培養(yǎng)也需要養(yǎng)分和環(huán)境。盆栽植物都有花盆，細(xì)菌的生長(zhǎng)也需要“花盆”，就是那些圓形的培養(yǎng)皿加培養(yǎng)基，而且不同的細(xì)菌喜歡“吃”的養(yǎng)料不同，所以有各種各樣不同配方的培養(yǎng)基。我們這次準(zhǔn)備的是牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，它是一種應(yīng)用十分廣泛的天然培養(yǎng)基，很多細(xì)菌都喜歡“吃”。按照配方（牛肉膏5.0克；蛋白胨10.0克；氯化鈉5克；水1000毫升；瓊脂15-20克），用天平稱取各種試劑，加適量水將試劑溶解后用量筒量度到1000毫升，pH值調(diào)整到7.2－7.4，再經(jīng)過高壓濕熱滅菌就可以了 （滅菌條件：壓力為1. 05kg/cm2，溫度為121℃，滅菌時(shí)間：30分鐘）。實(shí)驗(yàn)過程中我們還需要去離子水（清洗硬幣表面用），培養(yǎng)皿，涂棒，50毫升離心管等，所有器具都要經(jīng)過高壓濕熱滅菌30分鐘以上并烘干。

實(shí)驗(yàn)方法

制作培養(yǎng)皿平板，準(zhǔn)備“細(xì)菌生長(zhǎng)花盆”：在紫外滅菌的超凈工作臺(tái)內(nèi)，將適量滅菌后的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基 （瓊脂培養(yǎng)基加熱是液體狀的，低于40℃后成固體狀）加入到滅菌的培養(yǎng)皿內(nèi)，待其凝固后放入培養(yǎng)箱內(nèi)37℃過夜培養(yǎng)，第二天觀察平板表面是否有細(xì)菌菌落。必須確保培養(yǎng)基沒有被細(xì)菌污染才可以作為實(shí)驗(yàn)待用培養(yǎng)皿平板，否則不能證明培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的細(xì)菌是我們加入的硬幣表面的 “細(xì)菌種子”。圖1展示培養(yǎng)基制作過程。這樣，為硬幣上的細(xì)菌準(zhǔn)備的潔凈“花盆”就大功告成了。

圖1.制作培養(yǎng)皿平板，準(zhǔn)備“細(xì)菌生長(zhǎng)花盆”

圖2.超凈臺(tái)內(nèi)完成各項(xiàng)試驗(yàn)過程

清洗硬幣，準(zhǔn)備硬幣表面的“細(xì)菌種子”：在事先編號(hào)的50毫升離心管內(nèi)加入10毫升無(wú)菌水，并將準(zhǔn)備好的九枚硬幣分別放入（這個(gè)工作要在超凈工作臺(tái)完成）。接下來就要充分清洗硬幣了，首先用超聲清洗儀清洗，再用低速離心機(jī)離心清洗，目的就是盡量把附著在硬幣上的細(xì)菌充分地洗到無(wú)菌水里；經(jīng)過兩步清洗的離心管再用震蕩器混合均勻，我們假定硬幣上的細(xì)菌都被充分洗在10毫升的水里而且盡量混合均勻了。這些離心管里的水溶液就是我們準(zhǔn)備種在“細(xì)菌生長(zhǎng)花盆”里的“細(xì)菌種子”了。

涂布培養(yǎng)皿平板，開始“種細(xì)菌種子”：在超凈工作臺(tái)中，分別取混合均勻的各硬幣清洗液0.1毫升，拿出準(zhǔn)備好的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基平板，用滅菌的玻璃涂棒把0.1毫升“細(xì)菌種子”均勻涂布在平板上，每個(gè)硬幣清洗液涂布三個(gè)平板，方便記錄時(shí)取平均值。這一步操作起來比我們種植盆栽植物要麻煩一些，定量取硬幣的清洗液是為了方便計(jì)數(shù)，另外用玻璃涂棒反復(fù)涂布也是為了讓“細(xì)菌種子”們能均勻地生長(zhǎng)在培養(yǎng)基上。圖2顯示試驗(yàn)過程。

細(xì)菌培養(yǎng)需要合適的環(huán)境溫度：將涂布好的所有培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱內(nèi)37℃培養(yǎng)至少18小時(shí)。一般細(xì)菌可在有氧條件下，37℃中放18～24小時(shí)即可生長(zhǎng)。

計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)，觀察硬幣上的細(xì)菌的生長(zhǎng)情況：對(duì)培養(yǎng)皿內(nèi)菌落計(jì)數(shù)統(tǒng)計(jì)，通過統(tǒng)計(jì)0.1毫升硬幣清洗液里細(xì)菌的菌落個(gè)數(shù)，推算出10毫升硬幣清洗液中的細(xì)菌菌落總數(shù)，從而可以估算出每個(gè)硬幣上的細(xì)菌菌落數(shù)量。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

經(jīng)過一系列的實(shí)驗(yàn)過程，18小時(shí)后，培養(yǎng)箱內(nèi)的“細(xì)菌花盆”里都長(zhǎng)出了形態(tài)不同、數(shù)量不同的細(xì)菌菌落，符合我們的預(yù)期。不過可能由于稀釋度過低，五角硬幣有兩個(gè)都沒有長(zhǎng)出細(xì)菌，另外，我們觀察和記錄了硬幣表面細(xì)菌菌落的生長(zhǎng)情況。

1.觀察培養(yǎng)皿里細(xì)菌生長(zhǎng)情況。圖3和圖4展示細(xì)菌菌落照片。

圖3.一元硬幣②培養(yǎng)基上大量細(xì)菌菌落生長(zhǎng)情況

圖4.牛肉膏蛋白胨瓊脂平板上細(xì)菌菌落形態(tài)不同

表1.統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)皿上細(xì)菌菌落并估算硬幣表面細(xì)菌菌落個(gè)數(shù)

2.利用電子掃描顯微鏡直接觀察硬幣表面微生物形態(tài)特征，如圖5所示。

3.統(tǒng)計(jì)每個(gè)硬幣0.1毫升清洗液在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)皿上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)，記錄時(shí)取三個(gè)培養(yǎng)皿菌落總數(shù)的平均值，并估算硬幣表面細(xì)菌情況，結(jié)果在表1中給出。

通過實(shí)驗(yàn)我們發(fā)現(xiàn)除了用無(wú)菌棉簽直接涂抹硬幣的方法，用清洗硬幣的方式來檢測(cè)硬幣表面細(xì)菌菌落個(gè)數(shù)的方法也是可行的，另外，我們選取硬幣的時(shí)候特意找的是眼睛看上去潔凈程度不同的硬幣，通過實(shí)驗(yàn)證明，看上去臟的硬幣并不一定上面的細(xì)菌就很多，因?yàn)橛矌疟砻嫔系奈蹪n可能只是灰塵污垢。所以即使錢幣看上去干干凈凈的，也并不代表上面的細(xì)菌或者病毒的數(shù)量少，因?yàn)樗鼈兊膫€(gè)體很小，是我們?nèi)庋塾^察不到的。

圖5.電子掃描顯微鏡直接觀察一元硬幣表面細(xì)菌形態(tài)特征

我們可以觀察到在“細(xì)菌花盆”了生長(zhǎng)的細(xì)菌的菌落大小不同、顏色也不盡相同，有乳白色的，有發(fā)淡黃色的，也有帶有嫩粉色的，從菌落的形態(tài)看，大小不均一，有光滑型的，表面光滑濕潤(rùn)有光澤；有粗糙型的，菌落扁平干澀，邊緣不整齊；還有黏液型的，但是以光滑型居多。另外掃描電鏡圖片也顯現(xiàn)出不同形態(tài)的細(xì)菌，從圖中可以看出硬幣表面至少有三種以上的細(xì)菌。至于具體是哪幾種細(xì)菌還需要通過一系列細(xì)菌的分類和鑒定實(shí)驗(yàn)才能最終確定。

通過做實(shí)驗(yàn)，我們了解到硬幣表面細(xì)菌真不少，也深刻認(rèn)識(shí)到養(yǎng)成良好的衛(wèi)生習(xí)慣的重要性。而且這樣看來，勤洗手的確能有效地幫助我們減少病從口入的機(jī)會(huì),人們常說的 “愛干凈，勤洗手，病菌走”最好牢記在心中，落實(shí)在行動(dòng)。

（作者為北京東路小學(xué)學(xué)生，指導(dǎo)老師王馨）