王文龍,黃瀟慧,張金盈

(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院,鄭州450052)

急性心肌梗死伴血小板計(jì)數(shù)減少患者血小板表面膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa復(fù)合物表達(dá)觀察

王文龍,黃瀟慧,張金盈

(鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院,鄭州450052)

目的 觀察急性心肌梗死伴血小板減少患者血小板表面糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa復(fù)合物表達(dá)變化并探討其臨床意義。方法 選擇急性心肌梗死伴血小板減少患者50例為急性心肌梗死伴血小板減少組，急性心肌梗死血小板正?；蛟龆嗷颊?2例為急性心肌梗死伴血小板正?；蛟龆嘟M，健康人20例為對(duì)照組。用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血小板表面CD41和CD61，二者其中之一陽性或者均陽性視為GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物表達(dá)陽性。計(jì)算各組血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率。結(jié)果 急性心肌梗死伴血小板減少組、急性心肌梗死伴血小板正?；蛟龆嘟M、對(duì)照組患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率分別89.0%±7.4%、97.0%±10.9%、79.0%±4.2%。急性心肌梗死伴血小板減少組、急性心肌梗死伴血小板正常或增多組患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率均高于與對(duì)照組，P均<0.05。按照血小板計(jì)數(shù)對(duì)急性心肌梗死伴血小板減少組患者進(jìn)行分層，結(jié)果血小板計(jì)數(shù)80×109/L～<100×109/L者、50×109/L～<80×109/L者、30×109/L～<50×109/L者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率分別為96.5%±18.9%、92.4%±8.0%、50.1%±4.1%。與對(duì)照組相比，血小板計(jì)數(shù)80×109/L～<100×109/L、50×109/L～<80×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率升高(P均<0.05)，血小板計(jì)數(shù)30×109/L～<50×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率降低(P<0.05)。結(jié)論 急性心肌梗死伴血小板減少患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率高于健康人，血小板50×109/L～<100×109/L的急性心肌梗死患者有必要進(jìn)行抗血小板聚集治療。

急性心肌梗死；血小板減少癥；糖蛋白Ⅱ b/Ⅲa復(fù)合物

急性心肌梗死是指冠狀動(dòng)脈某支嚴(yán)重狹窄或完全閉塞而致部分心肌缺血性壞死。90%的急性心肌梗死患者有斑塊血栓形成。血小板在血栓形成過程中發(fā)揮著重要的作用。血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱb/Ⅲa在血小板黏附、聚集和血栓形成過程中發(fā)揮重要作用,也是抗血小板聚集藥的靶點(diǎn)。急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物表達(dá)升高，但是急性心肌梗死伴血小板減少患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物表達(dá)情況并不明確。臨床上抗血小板聚集藥物只用于血小板數(shù)值正常及偏高的患者，急性心肌梗死伴血小板減少患者是否應(yīng)該應(yīng)用抗血小板聚集藥物并不明確。本研究觀察了急性心肌梗死伴血小板減少患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物表達(dá)變化，探討急性心肌梗死伴血小板減少患者是否應(yīng)該抗血小板聚集。

1 資料與方法

1．1 臨床資料 選擇2015年7月～2016年7月收治的急性心肌梗死伴血小板減少患者50例為急性心肌梗死伴血小板減少組，其中男25例、女25例，年齡42～65歲。血小板計(jì)數(shù)(72±11)×109/L，其中血小板計(jì)數(shù)80×109/L～<100×109/L者20例，50×109/L～<80×109/L者15例，30×109/L～<50×109/L者15例。選擇同期收治的急性心肌梗死血小板正?；蛟龆嗷颊?2例為急性心肌梗死伴血小板正?；蛟龆嘟M，其中男30例、女22例，年齡41～66歲，血小板計(jì)數(shù)(382±29)×109/L。同期接受體檢的健康人20例為對(duì)照組，其中男14例、女6例，年齡45～65歲,血小板計(jì)數(shù)(194±27)×109/L。均排除心、 肝、 腎及血液系統(tǒng)疾患。所有受試者近 1周均未使用影響血小板活性的藥物。均無特殊疾病史。三組患者性別、年齡分布相比,P均>0.05。

1．2 血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物檢測(cè)方法 采集三組患者空腹靜脈血2 mL，乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，1 000 r/min離心5 min，制備富血小板血漿。取富血小板血漿200 μL，加等量0.1%多聚甲醛固定30 min。用于流式細(xì)胞儀和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)血小板表面CD41和CD61，操作按試劑盒說明書進(jìn)行。二者其中之一陽性或者均陽性視為GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物表達(dá)陽性。計(jì)算各組血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率。

2 結(jié)果

急性心肌梗死伴血小板減少組、急性心肌梗死伴血小板正?；蛟龆嘟M、對(duì)照組患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率分別為89.0%±7.4%、97.0%±10.9%、79.0%±4.2%。急性心肌梗死伴血小板減少組、急性心肌梗死伴血小板正?；蛟龆嘟M患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率均高于與對(duì)照組，P均<0.05；急性心肌梗死伴血小板減少組患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率與急性心肌梗死伴血小板正?；蛟龆嘟M相比，P>0.05。進(jìn)一步按照血小板計(jì)數(shù)對(duì)急性心肌梗死伴血小板減少組患者進(jìn)行分層，結(jié)果血小板計(jì)數(shù)80×109/L～<100×109/L者、50×109/L～<80×109/L者、30×109/L～<50×109/L者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率分別為96.5%±18.9%、92.4%±8.0%、50.1%±4.1%。與對(duì)照組相比，血小板計(jì)數(shù)80×109/L～<100×109/L、50×109/L～<80×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率升高(P均<0.05)，血小板計(jì)數(shù)30×109/L～<50×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率降低(P<0.05)。

3 討論

急性心肌梗死后血漿中含有豐富的促血小板激活物質(zhì)， 使血小板活性及黏附性明顯增高[3]。已證實(shí)急性心肌梗死后血小板α-顆粒膜蛋白 (GMP-140) 釋放增多[4]。血小板膜表面糖蛋白Ⅳ(GPⅣ) 分布增多及血小板內(nèi)凝血敏感蛋白 (TSP) 釋放是血小板激活敏感指標(biāo)[5,6]， 其敏感性較血小板膜 GMP-140增多更高[5]， 二者在血小板膜表面的結(jié)合， 參與血小板的不可逆聚集。血小板表面主要由糖萼蛋白和細(xì)胞膜組成。糖萼蛋白為細(xì)胞外衣，由糖蛋白和糖鏈部分組成。膜蛋白主要為糖蛋白，其中GPΙb參與血小板的黏附，GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物與血小板聚集有關(guān)。GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物廣泛分布于血小板表面,每一細(xì)胞上大約有50 000個(gè)GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物。GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物主要由α和β亞單位兩部分組成。GPⅢa即β亞單位，相對(duì)分子質(zhì)量為92 kD，由762個(gè)氨基酸組成，包括短胞內(nèi)區(qū)、跨膜區(qū)和長(zhǎng)胞外區(qū)。GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物是血小板聚集和血栓形成的一個(gè)關(guān)鍵因子，是各種血小板激活劑所產(chǎn)生的激活信號(hào)的最后傳導(dǎo)通路，也是抗血小板聚集藥物的主要靶點(diǎn)。本研究結(jié)果顯示，急性心肌梗死伴血小板減少組、急性心肌梗死伴血小板正?；蛟龆嘟M患者血小板正常或表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率均高于與對(duì)照組；急性心肌梗死伴血小板減少組患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率與急性心肌梗死伴血小板增多組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與健康人相比，血小板計(jì)數(shù)80×109/L～<100×109/L、50×109/L～<80×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率升高，血小板計(jì)數(shù)30×109/L～<50×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率降低。提示即使是伴血小板減少(50×109/L～<100×109/L)的急性心肌梗死患者，血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物陽性表達(dá)率仍高于正常人，應(yīng)該進(jìn)行抗血小板聚集治療。

常規(guī)臨床醫(yī)學(xué)工作中，血小板減少患者在出現(xiàn)血栓的情況下，是否應(yīng)行抗血小板聚集抗凝治療一直不明確。筆者查閱了國(guó)內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，均未明確表述在合并血小板減少的急性心肌梗死患者中抗血小板聚集的方法[8～12]。本研究結(jié)果顯示，血小板50×109/L～<100×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物的表達(dá)仍高于健康人，需要進(jìn)行抗血小板聚集治療。筆者推測(cè)其原因是血小板存在特殊的膜系統(tǒng)，包括開放管道系統(tǒng)、致密管道系統(tǒng)以及膜復(fù)合物。開放管道系統(tǒng)和致密管道系統(tǒng)存在著相互聯(lián)系，通常在1～2個(gè)細(xì)胞質(zhì)區(qū)域內(nèi)可見到兩種管道系統(tǒng)構(gòu)成的復(fù)合體(膜復(fù)合體)，外形多不規(guī)則。在復(fù)合物體內(nèi)，開放管道系統(tǒng)成堆地或成串地在一起，而致密管道系統(tǒng)交錯(cuò)穿插排列在開放管道系統(tǒng)之間[13～17]。血小板減少患者，體內(nèi)存在的抗凝系統(tǒng)功能反饋性增強(qiáng)，血友病因子升高，血小板GP數(shù)量及構(gòu)象改變。這種構(gòu)象的改變會(huì)使GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物被更多的暴露于血小板膜[13～16]， 血小板活性增高。但本研究結(jié)果顯示，血小板數(shù)值<30×109/L的急性心肌梗死患者血小板表面GPⅡb/Ⅲa復(fù)合物的表達(dá)低于正常人,不需要抗血小板聚集治療。

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張金盈(E-mail: Vellonvon@foxmail.com)

10.3969/j.issn.1002-266X.2016.47.019

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B 文章編號(hào)：1002-266X(2016)47-0064-03

2016-09-05)