蔣雪梅，頓耀艷綜述，肖長義審校

（三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖北宜昌443002）

乳腺癌干細(xì)胞調(diào)控機(jī)制的研究進(jìn)展

蔣雪梅，頓耀艷綜述，肖長義審校

（三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院，湖北宜昌443002）

乳腺腫瘤；干細(xì)胞；微RNAs；綜述

白血病干細(xì)胞在1994年被Lapidot等［1］發(fā)現(xiàn)后癌癥干細(xì)胞（CSCs）的概念已被接受［1］，CSCs啟動(dòng)腫瘤的形成。據(jù)報(bào)道CSCs存在于多種腫瘤中，包括乳腺癌、肺癌、白血病、膠質(zhì)瘤、結(jié)腸癌、肝癌等；同時(shí)，一些分子標(biāo)志已經(jīng)被使用于分離整個(gè)癌細(xì)胞群，例如乙醛脫氫酶（ALDH）針對(duì)乳腺癌干細(xì)胞（BCSCs）、CD90和CD133針對(duì)肝癌干細(xì)胞、ABCB5和CD271+針對(duì)膠質(zhì)瘤癌干細(xì)胞、CD133針對(duì)腦腫瘤干細(xì)胞。CSCs是異源的，例如BCSCs和結(jié)腸癌干細(xì)胞包括至少2種不同的分子標(biāo)記類型鑒別CSCs［2］。從遺傳學(xué)角度來說，BCR-ABL1淋巴細(xì)胞白血病包含多種明顯的白血病干細(xì)胞亞克隆［3］。

目前，已經(jīng)揭示一些信號(hào)途徑在調(diào)節(jié)CSCs的自我更新和分化中起了關(guān)鍵作用。Wnt信號(hào)對(duì)CSCs自我更新是重要的，例如，整體存活更差的低分化的基底乳腺癌Wnt/β連環(huán)蛋白信號(hào)被激活［4］。Wnt信號(hào)的基本活化作用被腫瘤抑制劑APC的突變導(dǎo)致BCSCs的擴(kuò)增。Her2+乳腺癌Wnt抑制信號(hào)抑制腫瘤的啟動(dòng)和轉(zhuǎn)移［5-6］。Notch信號(hào)在調(diào)節(jié)CSCs是重要的，例如已有報(bào)道從肺腺癌和乳腺癌中Notch-GFP系統(tǒng)被用于分離CSCs，GFP+癌細(xì)胞能分化成GFP-癌細(xì)胞，并且有很強(qiáng)的腫瘤啟動(dòng)能力［7-8］。Notch信號(hào)誘導(dǎo)脫乙?；福⊿IRT2）具有脫乙?；图せ預(yù)LDH1A1及增加BCSCs的作用［9］。除這些信號(hào)途徑外，表皮生長因子-β（TGF-β）、IL-6/JAK/STAT3、核因子-κB（NF-κB）信號(hào)和其他信號(hào)途徑在調(diào)節(jié)CSCs上起關(guān)鍵作用，并且其在調(diào)節(jié)上有時(shí)互相干擾。

1　BCSCs

2003年Clarke等分離了假定的BCSCs作為ESA+CD44+CD24-細(xì)胞群。幾乎很少的ESA+CD44+CD24細(xì)胞在體外能夠產(chǎn)生腫瘤。另外，繼發(fā)性腫瘤與原始腫瘤表型類似（形態(tài)學(xué)和ESA/CD44/CD24表達(dá)模式，腫瘤源性的ESA+CD44+CD24-腫瘤細(xì)胞至少能被連續(xù)在體外通過4條通道。有研究使用了幾種方法適應(yīng)干細(xì)胞的研究來分離或研究BCSCs，包括SP測定、Aldefluor測定和球形測定，SP測定是根據(jù)干細(xì)胞的能力排除DNA的測定。例如，通過膜轉(zhuǎn)運(yùn)者Hoechst 33342，SP測定已經(jīng)顯示在乳腺癌細(xì)胞株內(nèi)包含最易生腫瘤的群并且在體外被移植。Aldefluor測定代表一組酶催化的氧化。在惡性乳腺上皮，在體內(nèi)外具有高度ALDH的活性與最大的自我更新和分化能力有關(guān)。ALDH免疫染色陽性與乳腺癌有較差的預(yù)后相關(guān)性［9］。當(dāng)生長在體外非黏附的類似球體BCSCs也被濃集。2個(gè)腫瘤啟動(dòng)群（ALDH+細(xì)胞和ESA+CD44+CD24-細(xì)胞）僅僅顯示有限的重疊（Box1）。通過其他組乳腺癌包含腫瘤起始細(xì)胞顯示不同細(xì)胞的表面標(biāo)記也被顯示相似的發(fā)現(xiàn)［10］。盡管BCSCs的異質(zhì)性，這些細(xì)胞通常與治療抵抗和腫瘤relapse相關(guān)，在癌癥治療中有2個(gè)主要障礙。因此，理解CSCs的生物學(xué)將幫助靶向CSCs的新治療方法的發(fā)展，以利于更有效的治療和癌癥的最終治愈。

BCSCs被microRNAs（miRNAs）調(diào)控，miRNA通過mRNA調(diào)節(jié)靶向。miRNA的生物機(jī)制已經(jīng)被Kim等［11］詳細(xì)總結(jié)。有研究已顯示，miRNAs在實(shí)體瘤和白血病中調(diào)節(jié)細(xì)胞增生、侵襲、轉(zhuǎn)移和腫瘤的血管形成。miR-29通過靶向Mcl-1和Bcl-2促進(jìn)肝細(xì)胞、癌細(xì)胞的凋亡［12］。在乳腺癌miR-10b通過靶向RHOC啟動(dòng)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。miRNA測定分析顯示了let-7a在乳腺分化的癌細(xì)胞被下調(diào)。一些蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶不僅催化組蛋白的甲基化，還催化非組蛋白的蛋白質(zhì)。例如，SET7/9催化組蛋白3的單甲基化，也催化K135的Lin28A的甲基化來促進(jìn)Lin28在核內(nèi)的聚集，并且增加穩(wěn)定性和Lin28的prilet-7結(jié)合能力［13］。miR-200家族包括miR-200a、miR-200b、miR-200c、miR-141和miR-429腫瘤抑制劑。通過靶向ZEB1和ZEB2而抑制EMT。通過靶向BMI1 miR-200c抑制BCSCs。miR-200b通過靶向E-連環(huán)蛋白SUZ12、H3K27me3和其他基因而抑制BCSCs［14］。近年來，Pandolfi等發(fā)現(xiàn)miR-22通過靶向TET1、TET2及TET3促進(jìn)EMT，腫瘤浸潤和正常BCSCs的轉(zhuǎn)移；miR-22的過度表達(dá)提高了一些多能性和EMT-相關(guān)基因的表達(dá)，例如BMI1、ZEB1及ZEB2。TET1、TET2及TET3能抑制miR-200啟動(dòng)子的脫甲基化。因此，miR-22通過抑制miR-200的表達(dá)促進(jìn)BCSCs，表明DNA脫甲基酶能調(diào)節(jié)BCSCs。miR-93在來自于乳腺癌不同亞型的BCSCs起不同作用。在乳腺癌細(xì)胞基底型中，例如SUM159通過靶向AKT3、SOX4和STAT3，miR-93抑制CSCs和啟動(dòng)間充質(zhì)-上皮的轉(zhuǎn)化（MET）。然而，在窗型乳腺癌中如人乳腺癌細(xì)胞（MCF-7）能促進(jìn)BCSCs，表明miR-93調(diào)節(jié)BCSCs的雙重作用是依賴細(xì)胞分化的狀態(tài)，但該機(jī)制還在被闡明［15］。除了BCSCs外，miRNAs的調(diào)節(jié)異常在其他類型的CSCs也被發(fā)現(xiàn)。在結(jié)腸癌干細(xì)胞里，miR-34a的功能主要依賴其表達(dá)水平；高miR-34a表達(dá)抑制Notch信號(hào)途徑和促進(jìn)CSCs的分化；低miR-34a的表達(dá)促進(jìn)Notch信號(hào)途徑和保持CSCs表型。越來越多的研究顯示，miRNAs通過被鏈接到治療載體，例如，納米粒子能潛在地被用于治療腫瘤。

2　lncRNAs在調(diào)節(jié)乳腺癌和CSCs的調(diào)節(jié)發(fā)揮重要作用

長非編碼RNAs（lncRNAs）是長度大于200 nt的非編碼RNA。大量lncRNAs已被發(fā)現(xiàn)，但只有少數(shù)lncRNAs現(xiàn)在已被充分研究。最近，lncRNAs已在許多癌癥中被研究，例如，lncRNA-ATB在肝細(xì)胞癌、乳腺癌和結(jié)腸癌里通過TGF-β激活誘發(fā)EMT［16］。其不僅作為競爭內(nèi)源性RNA（ceRNA）競爭性的結(jié)合miR-200家族上調(diào)其目標(biāo)和誘發(fā)EMT，但是還結(jié)合IL-11 mRNA，增加IL-11的穩(wěn)定性和誘導(dǎo)IL-11的自分泌來激活STAT3通路，這個(gè)通路在調(diào)節(jié)BCSCs發(fā)揮至關(guān)重要的作用。lncRNA-ATB可能通過調(diào)節(jié)miR-200家族和STAT3來調(diào)控BCSCs。

BCAR4可以誘導(dǎo)GLI目標(biāo)基因的激活和促進(jìn)乳腺癌的轉(zhuǎn)移，特別是三陰性乳腺癌。GLI的靶基因在BCSCs發(fā)揮關(guān)鍵作用。這些表明BCAR4可調(diào)節(jié)BCSCs，并通過進(jìn)一步的研究被證明。此外，lncRNA lncTCF7調(diào)控肝細(xì)胞癌干細(xì)胞自我更新證明了通過體外腫瘤球形形成能力和體內(nèi)腫瘤啟動(dòng)頻率。lncTCF7重新募集SWI/SNF復(fù)合體結(jié)合TCF7啟動(dòng)子和激活TCF7的表達(dá)，TCF7激活Wnt途徑來擴(kuò)充肝細(xì)胞癌干細(xì)胞［17］。lncRNA-ROR是一個(gè)細(xì)胞重新編程和多能性的調(diào)制器。對(duì)于乳腺癌，lncRNA-ROR誘導(dǎo)EMT和促進(jìn)其轉(zhuǎn)移，lncRNA-ROR過度表達(dá)會(huì)增加CD24-CD44+細(xì)胞群百分比和微球體數(shù)量。進(jìn)一步的分析表明，其可以作為靶向EMT誘導(dǎo)者ZEB2和阻斷ZEB2退化來促進(jìn)EMT［18］。隨著lncRNAs研究進(jìn)展，越來越多的lncRNAs將在調(diào)節(jié)CSCs被得到證實(shí)。lncRNAs代表一種新型的CSCs調(diào)節(jié)器，其通過調(diào)節(jié)miRNAs、mRNAs和其他的lncRNAs。lncRNAs的研究將提高CSCs新型分子調(diào)節(jié)的理解，lncRNAs可以針對(duì)新的治療方法和預(yù)后因素作為目標(biāo)功能。

3　組蛋白調(diào)節(jié)器

組蛋白H2A、H2B、H3和H4被組蛋白修飾酶，包括組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶、組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶和組蛋白去乙酰酶修改。通過調(diào)節(jié)染色質(zhì)的狀態(tài)在調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄中發(fā)揮作用，其也彼此串道。H3K4脫甲基酶Jarid1B/KDM5B在乳腺癌被放大和過度表達(dá)來促進(jìn)細(xì)胞增殖。RNA-seq和ChIP-seq分析揭示了Jarid1的結(jié)合位點(diǎn)是顯著富集在啟動(dòng)子和增強(qiáng)基因腔型的比基底型的高，表明其是一個(gè)腔型聯(lián)系的啟動(dòng)致癌基因［19］。共激活劑相關(guān)的精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶1（CARM1）甲醇化物BAF155在R1064。BAF155甲基化在體內(nèi)和體外促進(jìn)乳腺癌的入侵和轉(zhuǎn)移。染色質(zhì)免疫沉淀反應(yīng)（ChIP）分析表明，CARM1控制c-myc通路中的基因表達(dá)［20］。

3.1NYD1/KDM2BH3K36me1/2和H3K4me3脫甲基酶NYD1/KDM2B在ES和iPS中起一個(gè)重要作用。其被多能性因素OCT4和SOX直接調(diào)控，且與Ploycomb抑制性復(fù)合物1（PRC1）的核心單元相互作用，如Ring1B和征募PRC1到控制細(xì)胞分化的啟動(dòng)子基因的CpG島，導(dǎo)致分化基因的抑制。這也表明KDM2B可以作為Polycomb組抑制元素（PRE）來抑制分化基因的表達(dá)［21］。KDM2B是一種致癌基因，不僅促進(jìn)乳腺癌還維持BCSCs。KDM2B結(jié)合的部位編碼miR-200家族，miR-101、miR-181及miR-203。SUZ12、EZH2、RING1B、BMI1是這些miRNA的直接目標(biāo)，并且KDM2B通過抑制這些miRNA抑制BCSCs和上調(diào)PcG蛋白的核心亞單元［22］。

3.2EZH2和SUZ12EZH2和SUZ12屬于PRC2。EZH2是組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶并催化H3K27me3、SUZ12刺激EZH2的活性。EZH2在胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞和癌癥中起關(guān)鍵作用。例如，在乳腺EZH2維持腔型祖細(xì)胞的自我更新［23］。EZH2也是一個(gè)致癌基因且在pRB-E2F通路的下游。EZH2可以作為癌癥早期診斷的分子標(biāo)記，并且EZH2在正常乳腺上皮細(xì)胞超表達(dá)增加了患癌癥的風(fēng)險(xiǎn)。此外，EZH2在乳腺癌被上調(diào)，高水平的EZH2與侵襲性的乳腺癌相關(guān)。在臨床樣本中，EZH2的表達(dá)和Notch1呈正相關(guān)。EZH2降解抑制來自三陰性乳腺癌的異種移植的出現(xiàn)和增長，并且當(dāng)EZH2過表達(dá)相反的表型也出現(xiàn)。EZH2過度表達(dá)激活Notch1信號(hào)活動(dòng)來促進(jìn)BCSCs的自我更新。進(jìn)一步分析表明，EZH2調(diào)節(jié)Notch轉(zhuǎn)錄活動(dòng)依賴直接結(jié)合Notch1啟動(dòng)子而非組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶的活性。在惡性膠質(zhì)瘤干細(xì)胞，EZH2激活STAT3信號(hào)，促進(jìn)致腫瘤性［24］。Jung等［25］發(fā)現(xiàn)PAF（PCNA-相關(guān)因子）與β-連環(huán)蛋白相互作用來募集EZH2和形成轉(zhuǎn)錄復(fù)合物，該復(fù)合物特別反式激活Wnt信號(hào)的目標(biāo)基因，暗示EZH2通過激活Wnt通路擴(kuò)充BCSCs，這表明EZH2可能是中心蛋白質(zhì)，并由幾個(gè)關(guān)鍵的信號(hào)通路調(diào)節(jié)CSCs。進(jìn)一步的研究還需要揭示調(diào)控機(jī)制。

SUZ12促進(jìn)Hox基因的沉默、細(xì)胞增殖和胚胎發(fā)生。在一些癌癥里SUZ12經(jīng)常被發(fā)現(xiàn)突變，例如，SUZ12突變引起周圍神經(jīng)鞘瘤的惡性轉(zhuǎn)換［26］。SUZ12也是一個(gè)直接目標(biāo)miR-200b，其是BCSCs抑制劑。miR-200b部分通過SUZ12抑制BCSCs，但SUZ12調(diào)節(jié)BCSCs的分子機(jī)制還有待闡明。

3.3BMI1BMI1-PRC1是規(guī)范的組成部分，一個(gè)E3泛素連接酶和壓縮的多聚核小體的輔助因子。越來越多的證據(jù)表明，BMI1在調(diào)節(jié)正常的和CSCs的自我更新方面起著重要作用。BMI1是腸道干細(xì)胞的標(biāo)志，并且BMI1抑制劑已被發(fā)現(xiàn)抑制結(jié)直腸癌干細(xì)胞［27］。BMI1在BCSCs的自我更新中起著關(guān)鍵作用。Neven等［28］報(bào)道了lncRNA FAL1在某些類型的癌癥，包括乳腺癌里過度表達(dá)，且其和BMI1-PRC1復(fù)合體相互作用，通過阻斷其蛋白酶體的降解來增強(qiáng)其穩(wěn)定性，且影響了H2AK119的泛素化水平表觀遺傳抑制基因的表達(dá)，例如，CDKN1A［28］。PRC1通過PREs結(jié)合目標(biāo)位點(diǎn)，且PREs也許是ncRNAs或蛋白質(zhì)，例如，Jarid2、KDM2B和HOTAIR［29］。這些表明BMI1能與ncRNAs互相干擾。

4　小結(jié)

ncRNA的作用和組蛋白調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)BCSCs。越來越多的非編碼RNA已經(jīng)被發(fā)現(xiàn)調(diào)節(jié)CSCs，并且組蛋白調(diào)節(jié)器的新功能和機(jī)制也變得越來越清晰。miRNAs是短序列ncRNAs，并且其容易與納米向量共價(jià)結(jié)合。當(dāng)miRNAs或特定的miRNAs反義核苷酸能被納米向量傳遞給腫瘤細(xì)胞，腫瘤細(xì)胞將被nanovectors根除。所以，藥物的納米載體發(fā)展是很重要的。lncRNAs是CSCs新發(fā)現(xiàn)的監(jiān)管者，并且調(diào)節(jié)機(jī)制通過調(diào)查越來越多的lncRNAs變得越來越清晰。lncRNAs也可以作為治療目標(biāo)起作用。例如，抑制lncRNA具有鎖核酸的BCAR4（LNA），基于反義的寡核苷酸抑制乳腺癌的轉(zhuǎn)移［30］。迄今為止，CSCs不能像胚胎干細(xì)胞一樣在體外未分化的狀態(tài)被培養(yǎng)，具有特定標(biāo)記的流式細(xì)胞術(shù)是分離CSCs的主要方法。一些重要的技術(shù)用于研究機(jī)制，例如，ChIP和ChIP-seq需要一個(gè)更大的細(xì)胞數(shù)量，其不適合CSCs的研究。但是新技術(shù)單細(xì)胞RNA測序等和ChIP-seq 500細(xì)胞［31］，將為CSCs的研究帶來新的希望。例如，表觀遺傳調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)在CSCs的調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用，但監(jiān)管調(diào)節(jié)機(jī)制仍未深入研究是由于CSCs細(xì)胞量少，單細(xì)胞RNA-序列和500細(xì)胞ChIP-seq將最終會(huì)解決該問題。單細(xì)胞RNA-序列的承諾和挑戰(zhàn)已被評(píng)估［32］。信號(hào)通路之間的相互作用，ncRNAs和組蛋白調(diào)節(jié)器在調(diào)節(jié)CSCs起著至關(guān)重要的作用。信號(hào)通路網(wǎng)絡(luò)的完全理解，ncRNAs和組蛋白調(diào)節(jié)器將有利于腫瘤的治療。

［1］Lapidot T，Sirard C，Vormoor J，et al.Acell initiating human acute myeloid leukaemia after transplantationinto SCIDmice［J］.Nature，1994，367（6464）：645-648.

［2］Liu S，Cong Y，Wang D，et al.Breast cancer stem cells transition between epithelialandmesenchymalstatesreflectiveoftheirnormalcounterparts［J］. Stem Cell Reports，2014，2（1）：78-91.

［3］Notta F，Mullighan CG，Wang JC，et al.Evolution of human BCR-ABL1 lymphoblastic leukaemia-initiating cells［J］.Nature，2011，469（7330）：362-367.

［4］Khramtsov AI，Khramtsova GF，Tretiakova M，et al.Wnt/beta-catenin pathway activation is enriched in basal-like breast cancers and predicts poor outcome［J］.Am J Pathol，2010，176（6）：2911-2920.

［5］Monteiro J，Gaspar C，Richer W，et al.Cancer stemness in Wnt-driven mammary tumorigenesis［J］.Carcinogenesis，2014，35（1）：2-13.

［6］Schade B，Lesurf R，Sanguin-Gendreau V，et al.β-Catenin signaling is a critical event in ErbB2-mediated mammary tumor progression［J］.Cancer Res，2013，73（14）：4474-4487.

［7］D′Angelo RC，Ouzounova M，Davis A，et al.Notch reporter activity in breastcancercelllines identifies a subset of cells with stem cell activity［J］. Mol Cancer Ther，2015，14（3）：779-787.

［8］Hassan KA，Wang L，Korkaya H，et al.Notch pathway activity identifies cells with cancer stem cell-like properties and correlates with worse survivalinlungadenocarcinoma［J］.ClinCancerRes，2013，19（8）：1972-1980.

［9］Zhao D，Mo Y，Li MT，et al.NOTCH-induced aldehyde dehydrogenase 1A1 deacetylation promotes breast cancer stem cells［J］.J Clin Invest，2014，124（12）：5453-5465.

［10］Wright MH，Robles AI，Herschkowitz JI，et al.Molecular analysis reveals heterogeneity of mouse mammary tumors conditionally mutant for Brcal［J］. Mol Cancer，2008，7：29.

［11］Kim VN，Han J，Siomi MC.Biogenesis of small RNAs in animals［J］.Nat Rev Mol Cell Biol，2009，10（2）：126-139.

［12］Xiong YJ，F(xiàn)ang JH，Yun JP，et al.Effects of microRNA-29 on apoptosis，tumorigenicity，and prognosis of hepatocellular carcinoma［J］.Hepatology，2010，51（3）：836-845.

［13］Kim SK，Lee H，Han K，et al.SET7/9 methylation of the pluripotency factor LIN28A is a nucleolar localization mechanism that blocks let-7 biogenesis in human ESCs［J］.Cell Stem Cell，2014，15（6）：735-749.

［14］Iliopoulos D，Lindahl-Allen M，Polytarchou C，et al.Loss of miR-200 inhibition of Suz12 leads to polycomb-mediated repression required for the formation and maintenance of cancer stem cells［J］.Mol Cell，2010，39（5）：761-772.

［15］Liu S，Patel SH，Ginestier C，et al.MicroRNA93 regulates proliferation and differentiation of normal and malignant breast stem cells［J］.PLoS One，2012，8（6）：e1002751.

［16］Yuan JH，Yang F，Wang F，et al.A long noncoding RNA activated by TGF-beta promotes the invasion-metastasis cascade in hepatocellular carcinoma［J］.Cancer Cell，2014，25（5）：666-681.

［17］Wang Y，He L，Du Y，et al.The long noncoding RNA lncTCF7 promotes selfrenewal of human liver cancer stem cells through activation of Wnt signaling［J］.Cell Stem Cell，2015，16（4）：413-425.

［18］Hou P，Zhao Y，Li Z，et al.LincRNA-ROR induces epithelial-to-mesenchymal transition and contributes to breast cancer tumorigenesis and metastasis［J］.Cell Death Dis，2014，5：e1287.

［19］Yamamoto S，Wu ZH，Russnes HG，et al.JARID1B is a luminal lineagedriving oncogene in breast cancer［J］.Cancer Cell，2014，25（6）：762-777.

［20］Wang L，Zhao Z，Meyer MB，et al.CARM1 methylates chromatin remodeling factor BAF155 to enhance tumor progression and metastasis［J］. Cancer Cell，2014，25（1）：21-36.

［21］He J，Shen L，Wan M，et al.Kdm2b maintains murine embryonic stem cell status by recruiting PRC1 complex to CpG islands of developmental genes［J］.Nat Cell Biol，2013，15（4）：373-384.

［22］Kottakis F，F(xiàn)oltopoulou P，Sanidas I，et al.NDY1/KDM2B functions as a master regulator of polycomb complexes and controls self-renewal of breast cancer stem cells［J］.Cancer Res，2014，74（14）：3935-3946.

［23］Michalak EM，Nacerddine K，Pietersen A，et al.Polycomb group gene Ezh2 regulates mammary gland morphogenesis and maintains the luminal progenitor pool［J］.Stem Cells，2013，31（9）：1910-1920.

［24］Kim E，Kim M，Woo DH，et al.Phosphorylation of EZH2 activates STAT3 signaling via STAT3 methylation and promotes tumorigenicity of glioblastoma stem-like cells［J］.Cancer Cell，2013，23（6）：839-852.

［25］Jung HY，Jun S，Lee M，et al.PAF and EZH2 induce Wnt/beta-catenin signaling hyperactivation［J］.Mol Cell，2013，52（2）：193-205.

［26］Zhang M，Wang Y，Jones S，et al.Somatic mutations of SUZ12 in malignant peripheral nerve sheath tumors［J］.Nat Genet，2014，46（11）：1170-1172.

［27］Kreso A，van Galen P，Pedley NM，et al.Self-renewal as a therapeutic target in human colorectal cancer［J］.Nat Med，2014，20（1）：29-36.

［28］Neven E，De Schutter TM，Dams G，et al.A magnesium based phosphatebinder reduces vascular calcification without affecting bone in chronic renal failure rats［J］.PLoS One，2014，9（9）：e107067.

［29］Schwartz YB，Pirrotta V.A new world of Polycombs：unexpected partnerships and emerging functions［J］.Nat Rev Genet，2013，14（12）：853-864.［30］Xing Z，Lin A，Li C，et al.lncRNA directs cooperative epigenetic regulationdownstreamofchemokinesignals［J］.Cell，2014，159（5）：1110-1125.

［31］Lara-Astiaso D，Weiner A，Lorenzo-Vivas E，et al.Immunogenetics.Chromatin state dynamics during blood formation［J］.Science，2014，345（6199）：943-949.

［32］Stegle O，Teichmann SA，Marioni JC.Computational and analytical challenges in single-cell transcriptomics［J］.Nat Rev Genet，2015，16（3）：133-145.

10.3969/j.issn.1009-5519.2016.19.019

A

1009-5519（2016）19-2994-04

（2016-04-18）