任　敏，李東霞

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050)

?

綜述

黑色素瘤動(dòng)物模型治療相關(guān)機(jī)制研究進(jìn)展

任敏，李東霞

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050)

[關(guān)鍵詞]黑色素瘤；動(dòng)物模型；治療機(jī)制

黑色素瘤源于神經(jīng)脊黑素細(xì)胞，多發(fā)生于皮膚，由細(xì)胞色素痣、發(fā)育不良痣演變或新發(fā)而成，與紫外線照射、創(chuàng)傷與刺激、免疫抑制、家族遺傳等因素有關(guān)[1]。目前，黑色素瘤占皮膚惡性腫瘤的第三位，每年仍以4%～6%的速度增長(zhǎng)[2]。多數(shù)早期患者通過(guò)手術(shù)能夠治愈，但晚期黑色素瘤患者的預(yù)后差，轉(zhuǎn)移性黑色素瘤患者中位生存期僅為6～9個(gè)月，5年生存率不足5%[3]。近年來(lái)，隨著對(duì)黑色素瘤侵襲、增殖及轉(zhuǎn)移分子機(jī)制認(rèn)識(shí)的不斷加深，黑色素瘤的基因免疫治療方面取得了顯著的成果，部分被應(yīng)用于臨床[4]。筆者就近年來(lái)相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)黑色素瘤的動(dòng)物模型建立及其治療相關(guān)機(jī)制方面進(jìn)展綜述如下。

1黑色素瘤動(dòng)物模型的構(gòu)建

目前常用于腫瘤研究的動(dòng)物模型有自發(fā)瘤模型、誘導(dǎo)模型、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型和移植模型[5]。黑色素瘤的研究中以移植模型最為常見(jiàn)，根據(jù)其移植物的不同可進(jìn)一步分為黑色素瘤外科標(biāo)本移植模型及細(xì)胞株移植模型。而影響黑色素瘤動(dòng)物移植模型建立成功的因素眾多，與黑色素瘤細(xì)胞或外科標(biāo)本的特性、移植部位及移植黑色素瘤細(xì)胞的數(shù)量、動(dòng)物的品系和周齡以及生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān)。

1.1構(gòu)建黑色素瘤動(dòng)物模型的動(dòng)物種類目前報(bào)道的應(yīng)用于抗黑色素瘤作用及機(jī)制體內(nèi)試驗(yàn)研究的動(dòng)物種類較多，主要有小鼠，其中包括BALB/c、C57BL、DBA/2、裸小鼠(nude mice)、Scid小鼠等。大鼠，其中包括Fisher、裸大鼠、SD(Sprague-Dawley)、Wistar大鼠等品種。其他還有兔、豬、恒河猴等，其中以小鼠應(yīng)用較多[6]。

1.2黑色素瘤組織移植模型取人或動(dòng)物新鮮的黑色素瘤組織，短時(shí)間內(nèi)移入動(dòng)物皮下，因免疫排異反應(yīng)，一般采用免疫缺陷動(dòng)物移植。吳海燕等[7]建立免疫細(xì)胞缺陷的BNX 小鼠 (T、B、NK 細(xì)胞功能缺陷)B16黑色素瘤細(xì)胞移植模型，通過(guò)皮下移植—肺轉(zhuǎn)移—皮下移植的途徑篩選出具有高轉(zhuǎn)移特點(diǎn)的小鼠皮下黑色素瘤模型，更好地反映了黑色素瘤的臨床特征。姚明等[8]將人黑色素瘤皮下移植至Scid小鼠皮下，反復(fù)篩選出了具有自發(fā)肺轉(zhuǎn)移并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的動(dòng)物模型。組織移植成功率較低，但移植后的黑素瘤仍保持原有的功能和形態(tài)，更能真實(shí)地反應(yīng)黑素瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的過(guò)程。

1.3黑色素瘤細(xì)胞移植模型黑色素瘤細(xì)胞移植模型是指將人或動(dòng)物黑素瘤細(xì)胞接種于動(dòng)物體內(nèi)，張燕等[9]采用不同濃度的B16黑色素瘤細(xì)胞懸液注射于C57BL/6小鼠背部，發(fā)現(xiàn)隨著濃度的升高小鼠的出瘤時(shí)間及生存期隨之縮短。當(dāng)濃度太大時(shí)不宜推注，以109L-1時(shí)為最適濃度。黑色素瘤細(xì)胞移植模型成功率高于組織移植，并且黑色素瘤組織可由細(xì)胞移植獲得，獲取時(shí)間較為確定，是目前研究最多的黑色素瘤移植模型。

2黑色素瘤動(dòng)物模型的中藥治療研究

近幾年，黑色素瘤的中藥治療引起了越來(lái)越多國(guó)內(nèi)外專家學(xué)者的關(guān)注。 中藥成分抗黑色素瘤作用具有多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)、多效應(yīng)的特點(diǎn)，其在抑制黑色素瘤血管生成、DNA的合成以及增強(qiáng)腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的表達(dá)等方面有顯著作用。

2.1影響腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因的表達(dá)袁波等[10]對(duì)黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移B16小鼠的研究中發(fā)現(xiàn)益氣敗毒湯組與環(huán)磷酰胺(CTX)組相比療效尚有差距，與生理鹽水組相比小鼠肺轉(zhuǎn)移的腫瘤數(shù)明顯減少，實(shí)驗(yàn)證實(shí)CTX及益氣敗毒湯經(jīng)胃管給藥治療后，小鼠肺腫瘤組織中腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因nm23的表達(dá)強(qiáng)度明顯增強(qiáng)，且組間nm23基因強(qiáng)度的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?？梢?jiàn)中藥制劑益氣敗毒湯可通過(guò)調(diào)控腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因nm23影響黑色素瘤的轉(zhuǎn)移。

2.2對(duì)免疫系統(tǒng)的影響來(lái)改善黑色素瘤程序性死亡因子1/程序性死亡因子配體(PD-1/PD-Ls)通路的活化可抑制效應(yīng)T細(xì)胞的細(xì)胞因子分泌以及增殖活化并促進(jìn)T細(xì)胞的凋亡，進(jìn)而引發(fā)抗腫瘤免疫的失活及腫瘤免疫逃逸[11]。中藥黃芪多糖可抑制與免疫細(xì)胞活性負(fù)相關(guān)PD-1/PD-Ls通路以及減少免疫負(fù)性調(diào)控細(xì)胞調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)的數(shù)目來(lái)抑制黑色素瘤的生長(zhǎng)。負(fù)性調(diào)控細(xì)胞Treg可直接抑制T細(xì)胞的活化、增殖及相關(guān)免疫功能來(lái)影響腫瘤生長(zhǎng)。王潔茹等[12]在黃芪多糖調(diào)節(jié)黑色素瘤小鼠PD-1/PD-Ls分子表達(dá)的研究中證明黃芪多糖抑制共刺激分子 PD-1/PD-Ls 的表達(dá)，推測(cè)這種作用通過(guò)增強(qiáng)小鼠 T 淋巴細(xì)胞抗腫瘤免疫活性而抑制腫瘤的生長(zhǎng)。張舒玉等[13]認(rèn)為黃芪多糖可能通過(guò)降低荷瘤鼠脾臟中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)數(shù)目，抑制轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)，白細(xì)胞介素-10(IL-10)分泌，從而實(shí)現(xiàn)其抑瘤作用。

2.3對(duì)黑色素瘤血管生成的影響近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)三氧化二砷(As2O3)及白術(shù)內(nèi)酯I抑制黑色素瘤的主要機(jī)制是抑制腫瘤中血管的生成。李楠等[14]通過(guò)活體成像技術(shù)發(fā)現(xiàn)經(jīng)三氧化二砷腹腔注射的小鼠黑色素瘤組織血管密度顯著降低，腫瘤組織中心發(fā)生壞死，抑制了腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移，其抑制腫瘤血管的機(jī)制還需進(jìn)一步研究。潘利文等[15]實(shí)驗(yàn)證實(shí)白術(shù)內(nèi)酯I能夠顯著抑制血管內(nèi)皮成管可能與其抑制荷瘤小鼠腫瘤的生長(zhǎng)有關(guān)。

2.4抑制黑色素瘤組織內(nèi)細(xì)胞表達(dá)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)MMPs是一組Zn2+依賴性肽酶，可以降解多種細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜中的膠原成分，從而促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及血管生成，其中又以MMP-2和MMP-9研究較多[16]。姜新等[17]實(shí)驗(yàn)證實(shí)人參皂苷Rg3能夠抑制小鼠黑色素瘤細(xì)胞表達(dá)MMP-9，使腫瘤的侵襲能力降低抑制黑色素瘤的轉(zhuǎn)移。韓麗娜等[18]在木鱉子醇提物抑制小鼠黑素瘤B16細(xì)胞體內(nèi)外侵襲轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究中證實(shí)木鱉子醇提物能下調(diào)B16細(xì)胞中MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白水平，但不能降低金屬蛋白酶組織抑制因子(TIMP-1、TIMP-2)的表達(dá)。推測(cè)木鱉子醇提物抑制黑素瘤B16細(xì)胞侵襲的作用機(jī)制與其抑制MMP-2和MMP-9的表達(dá)有關(guān)。

3黑色素瘤動(dòng)物模型的基因治療研究

基因治療作為黑色素瘤的一種靶向治療已取得一定效果。常見(jiàn)的有自殺基因療法、癌基因信號(hào)通路的阻斷、基因失活、增強(qiáng)抑癌基因的表達(dá)、阻斷腫瘤血液供應(yīng)等。

3.1自殺基因療法自殺基因療法是將某些細(xì)菌和病毒的基因?qū)肽[瘤細(xì)胞，通過(guò)相關(guān)藥物殺死攜帶該基因的受體細(xì)胞。曾玲等[19]建立具有綠色熒光蛋白(GFP)示蹤功能的單純皰疹病毒 1 型胸苷激酶基因/更昔洛韋自殺基因系統(tǒng)(HSV1-tkGFP/GCV)，實(shí)驗(yàn)證實(shí)重組 HSV1-tkGFP/GCV 系統(tǒng)存在一定的旁殺效應(yīng)，對(duì)小鼠黑色素瘤有明顯抑制作用。

3.2癌基因信號(hào)通路的阻斷細(xì)胞信號(hào)通路是細(xì)胞通過(guò)胞膜或胞內(nèi)受體感受信息分子的刺激，經(jīng)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)轉(zhuǎn)換，從而影響細(xì)胞生物學(xué)功能的一系列酶促反應(yīng)通路。研究發(fā)現(xiàn),Notch 信號(hào)通路與腫瘤的發(fā)生關(guān)系密切，可通過(guò)Notch受體與相鄰細(xì)胞表面的配體結(jié)合導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生[20-21]。齊艷霞等[22]在Notch1 siRNA對(duì)小鼠惡性黑色素瘤細(xì)胞抑瘤作用的研究中證實(shí)靶向 Notch1基因小干擾RNA(siNotch)下調(diào)Notch1的表達(dá)，明顯減緩了小鼠成瘤速度，從而抑制黑色素瘤的發(fā)展。

3.3抑癌基因的研究抑癌基因通過(guò)表達(dá)抑制細(xì)胞增殖和促進(jìn)細(xì)胞分化的各種因子在細(xì)胞的正常周期中發(fā)揮重要的作用，抑癌基因的失活使激活的癌基因發(fā)揮作用，導(dǎo)致細(xì)胞失去正常生長(zhǎng)的調(diào)控發(fā)生癌癥。LKB1基因?yàn)楣J(rèn)的抑癌基因，實(shí)驗(yàn)證實(shí)LKB1基因與黑色素瘤關(guān)系密切，它的失活將導(dǎo)致高轉(zhuǎn)移性黑色素瘤細(xì)胞的產(chǎn)生[23]。發(fā)生LKB1基因缺失的黑色素瘤患者預(yù)后不良，黑色素瘤發(fā)生LKB1基因缺失的發(fā)生率約占10%。目前尚不能確定LKB1缺失導(dǎo)致腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)制，推測(cè)LKB1的缺失與激活驅(qū)動(dòng)腫瘤轉(zhuǎn)移蛋白的src激酶有關(guān)。李宗河等[24]采用不同濃度的腺病毒介導(dǎo)攜帶綠色熒光蛋白的nm23-H1基因藥物(Ad-GFP-nm23-H1)對(duì)裸鼠移植A375實(shí)體瘤注射，發(fā)現(xiàn)對(duì)裸鼠黑色素瘤具有明顯的抑制作用，且隨著劑量的增大抑瘤作用越明顯。李鶴等[25]采用攜帶mda-7基因的腺病毒(Ad·mda-7)與達(dá)卡巴嗪(DTIC)聯(lián)合治療裸鼠惡性黑色素瘤移植瘤模型，瘤體內(nèi)注射病毒Ad·mda-7，腹腔注射DTIC，腫瘤生長(zhǎng)速度明顯變慢。

3.4對(duì)腫瘤血管生成的影響腫瘤新生血管壁薄，缺乏基底膜，為腫瘤的轉(zhuǎn)移提供了良好的條件，新生血管的不斷形成可為腫瘤提供營(yíng)養(yǎng)支持，是腫瘤生長(zhǎng)步驟之一[26]。在抵抗腫瘤的血管生成中，內(nèi)皮抑素的作用至關(guān)重要。曹瑞華等[27]采用腺病毒介導(dǎo)的內(nèi)皮抑素基因(Ad-mES)于小鼠黑色素瘤瘤體內(nèi)注射，腫瘤體積增長(zhǎng)減慢，認(rèn)為原因可能為腫瘤血管的內(nèi)皮細(xì)胞在內(nèi)皮抑素的作用下凋亡，阻斷了腫瘤的血液供應(yīng)，從而達(dá)到抑制腫瘤生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移的效果，除了這種經(jīng)典腫瘤血管生成途徑之外，亦有研究發(fā)現(xiàn)多種惡性腫瘤中存在由腫瘤細(xì)胞圍成的管道結(jié)構(gòu)血管生成擬態(tài)(VM)，謝群等[28]在對(duì)小鼠黑色素瘤VM的研究中發(fā)現(xiàn)蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制劑重組蛋白(sv-cystatin)能抑制VM的形成。

4黑色素瘤動(dòng)物模型的免疫治療研究

黑色素瘤的免疫治療是采用主動(dòng)免疫和被動(dòng)免疫治療的方法，激發(fā)和調(diào)動(dòng)機(jī)體的免疫系統(tǒng)，增強(qiáng)腫瘤微環(huán)境抗腫瘤免疫力，從而控制和殺傷腫瘤細(xì)胞。

4.1樹突狀細(xì)胞疫苗激活小鼠T淋巴細(xì)胞免疫反應(yīng)樹突狀細(xì)胞(DC)為功能最強(qiáng)的抗原提呈細(xì)胞，在腫瘤的免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要的作用，在腫瘤的免疫反應(yīng)中樹突狀細(xì)胞提呈的抗原與主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ(MHC-Ⅰ)相結(jié)合，抗原被T細(xì)胞識(shí)別，促進(jìn)腫瘤殺傷性T細(xì)胞的活化與增殖[29]。齊淵元等[30]通過(guò)靜脈注射體外制備的荷載CD8殺傷性T細(xì)胞表位雞卵蛋白(OVA)257-264肽段的成熟DC，成功誘導(dǎo)小鼠細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)免疫反應(yīng)，抵抗黑色素瘤的成瘤，為DC腫瘤疫苗的研發(fā)提供了一種可行的方法，同時(shí)證明了采用靜脈注射樹突狀細(xì)胞疫苗能夠使疫苗分布于非淋巴器官以及淋巴器官進(jìn)行T細(xì)胞的激活。

4.2MAGE-A基因疫苗誘導(dǎo)特異性CTL的產(chǎn)生MAGE-A基因編碼的腫瘤特異性抗原肽能被MHC-Ⅰ分子提呈給細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞特異的殺傷腫瘤細(xì)胞，發(fā)揮抗腫瘤作用。Vogel等[31]在治療黑色素瘤臨床預(yù)實(shí)驗(yàn)探索中，將痘病毒載體重組的MAGE基因制成疫苗，導(dǎo)入HLA-A2/K轉(zhuǎn)基因小鼠。結(jié)果證實(shí)靶細(xì)胞轉(zhuǎn)染MAGE-A1、MAGE-A3和MART-1抗原肽疫苗后可誘導(dǎo)特異性CTL的產(chǎn)生，從而發(fā)揮CTL細(xì)胞的抗腫瘤作用溶解自體和異體同源的腫瘤細(xì)胞。

4.3黑色素瘤的過(guò)繼免疫治療將具有特異性的腫瘤殺傷性細(xì)胞在體外大量擴(kuò)增后回輸?shù)胶闪鲶w內(nèi)達(dá)到抗腫瘤的目的，但由于腫瘤微環(huán)境中復(fù)雜的免疫抑制網(wǎng)絡(luò)，使腫瘤發(fā)生免疫耐受。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Tregs)在腫瘤的免疫耐受中發(fā)揮著重要的作用[32]。李衛(wèi)泊等[33]將體外制備的針對(duì)B16細(xì)胞的大量CTLs回輸?shù)胶闪鲂∈篌w內(nèi)并聯(lián)合CTX腹腔注射治療，發(fā)現(xiàn)對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用。李冬斌等[34]在研究半相合基因腫瘤特異性樹突狀細(xì)胞活化的特異性CTL(DCs-CTL)對(duì)小鼠黑色素瘤的抑制作用及其移植物抗宿主反應(yīng)(GVHD)反應(yīng)中，采用半相合基因鼠來(lái)源的DCs-CTLs效應(yīng)細(xì)胞經(jīng)鼠尾靜脈回輸，小鼠腫瘤質(zhì)量減少且均未見(jiàn)明顯GVHD病理變化。

5展望

黑色素瘤是個(gè)多因素、多環(huán)節(jié)、多階段的復(fù)雜疾病，隨著對(duì)黑色素瘤發(fā)病機(jī)制認(rèn)識(shí)的不斷加深，近年來(lái)，黑色素瘤動(dòng)物試驗(yàn)的研究取得了巨大的成果，本研究已列舉了眾多黑色素瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，中藥、基因靶向研究及免疫研究方面的進(jìn)展，為其應(yīng)用于臨床試驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)。但是目前仍存在一些問(wèn)題有待解決。首先，探索黑色素瘤侵襲轉(zhuǎn)移的分子生物關(guān)鍵機(jī)制，并尋找阻斷其發(fā)展的關(guān)鍵藥物將成為今后研究的熱點(diǎn)之一；其次，實(shí)現(xiàn)黑色素瘤的早發(fā)現(xiàn)，早診斷，早治療，在此基礎(chǔ)上探索針對(duì)黑色素瘤早期的、敏感的、特異的診斷指標(biāo)。最后，在藥物的聯(lián)合應(yīng)用方面值得深入研究，關(guān)注藥物的聯(lián)合應(yīng)用是否進(jìn)一步提高抗腫瘤效果。這些將成為今后黑色素瘤動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的重點(diǎn)。

[參考文獻(xiàn)]

[1]馬家芳,孔燕,郭軍. MITF在黑素瘤中的研究現(xiàn)狀及進(jìn)展[J]. 腫瘤,2013，33(12):1130-1134

[2]趙辨. 中國(guó)臨床皮膚病學(xué)[M]. 南京：江蘇鳳凰科學(xué)技術(shù)出版社，2009:1644-1654

[3]曹水,杜偉嬌,宋鑫,等. 惡性黑色素瘤生物治療進(jìn)展[J]. 實(shí)用腫瘤志,2010,25(2):113-117

[4]CSCO黑色素瘤專家委員會(huì). 中國(guó)黑色素瘤診治指南(2011版)[J]. 臨床腫瘤學(xué)雜志,2012,17(2):159-171

[5]萬(wàn)繼英,韓庶勇. 腫瘤實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的建立及應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 醫(yī)學(xué)綜述,2009,15(19):2959-2961

[6]牛青霞,周艷春,許燕璇,等. B16黑色素瘤皮內(nèi)移植瘤模型的建立[J]. 癌變·畸變·突變,2009,21(3):238-240

[7]吳海燕,姚明,閆明霞,等. 黑色素瘤小鼠高轉(zhuǎn)移模型體內(nèi)篩選和細(xì)胞系的建立[J]. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與比較醫(yī)學(xué),2008,28(2):67-73

[8]姚明,孔韓衛(wèi),戚錦芳,等. 人黑色素瘤SCID小鼠高轉(zhuǎn)移模型的篩選和建立[J]. 上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué),2001,21(4):195-197；225

[9]張燕,郭伶俐,趙發(fā),等. B16黑色素瘤動(dòng)物模型制備方法探討[J]. 現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2009,18(34):4206-4207

[10] 袁波,蔡綏勍,繆慧群,等. 益氣敗毒湯對(duì)B16黑素瘤腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因表達(dá)的影響[J]. 中國(guó)皮膚性病學(xué)雜志,2009,23(4):199-201；242

[11] Zhou Q，Munger ME，Veenstra RC，et al. Coexpression of Tim-3 and PD-1 identifies a CD8+T-cell exhaustion phenotype in mice with disseminated acute myelogenous leukemia[J]. Blood，2011，117(17):4501-4510

[12] 王潔茹,王金英,張婷婷,等. 黃芪多糖調(diào)節(jié)黑色素瘤小鼠PD-1/PD-Ls分子表達(dá)的研究[J]. 上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2014,28(5):74-79

[13] 孫舒玉,何小鵑,柴旺,等. 黃芪多糖對(duì)黑色素瘤小鼠調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的作用[J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志,2013,19(12):176-178

[14] 李楠,羅旭飛,李娜,等. 三氧化二砷通過(guò)抑制新生血管形成發(fā)揮抗小鼠惡性黑色素瘤作用[J]. 中藥藥理與臨床,2015,31(1):114-117

[15] 潘利文,宋捷. 白術(shù)內(nèi)酯I體內(nèi)外的抗黑色素瘤研究[J]. 中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志,2015,35(8)：682-685

[16] Biswas MH,Du C,Zhang C,et al. Protein kinase D1 inhibits cell proliferation through matrix metalloproteinase-2 and matrix metalloproteinase-9 secretion in prostate cancer[J]. Cancer Res,2010,70(5)：2095-2104

[17] 姜新,辛穎,許天敏,等. 人參皂苷Rg3對(duì)小鼠B16黑素瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移及MMP-9表達(dá)的影響[J]. 腫瘤,2011,31(2):117-121

[18] 韓麗娜,趙連梅,胡彩霞,等. 木鱉子醇提物抑制小鼠黑素瘤B16細(xì)胞體內(nèi)外侵襲轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 腫瘤,2010,30(12):1015-1021

[19] 曾玲,吳映雅,譚宇蕙,等. 重組HSV1-tkGFP/GCV熒光蛋白示蹤系統(tǒng)的構(gòu)建及對(duì)小鼠黑色素瘤的抑制作用[J]. 中藥新藥與臨床藥理,2014,25(5):546-551；631

[20] Li DM,Masiero M,Banham AH,et al. The notch ligand JAG-GEDI as a target for anti-tumor therapy[J]. Front Oncol,2014,25(4):254-267

[21] Guruharsha KG,Kankel MW,Artavanis-Tsakonas S. The Notch signalling system:recent insights into the complexity of a conserved pathway[J]. Nat Rev Genet,2012,13(9):654-666

[22] 齊艷霞,康世均,劉新會(huì),等. Notch1 siRNA對(duì)小鼠惡性黑色素瘤細(xì)胞體內(nèi)外增殖的抑制作用研究[J]. 山東醫(yī)藥,2014,54(10)：14-16；20

[23] Li WJ,Monahan KB,Pfefferle AD,et al. LKB1/STK11 inactivation leads to expansion of a prometastatic tumor subpopulation in melanoma[J]. Cancer Cell，2012,21(6)：751-764

[24] 李宗河,王琦,尹海林. Ad-GFP-nm23-H1裸鼠體內(nèi)抑制人惡性黑色素瘤A375作用的研究[J]. 四川動(dòng)物,2008,27(6):1007-1011

[25] 李鶴,魏志平,蔣冠,等. 攜帶mda-7基因的腺病毒聯(lián)合達(dá)卡巴嗪對(duì)人黑素瘤裸鼠移植瘤生長(zhǎng)的抑制作用[J]. 中國(guó)麻風(fēng)皮膚病雜志,2010,26(7):474-477

[26] Boehm-Viswanathan T. Is angiogenesis inhibition the HolyGrail of cancer therapy?[J]. Curr Opin Oncol，2000，12(1):89-94

[27] 曹瑞華,廖萬(wàn)清,溫海,等. 腺病毒載體介導(dǎo)的內(nèi)皮抑素基因治療小鼠黑素瘤的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 中華皮膚科雜志,2009,42(10):711-714

[28] 謝群,林揚(yáng)元,林麗琳,等. 蛇毒半胱氨酸蛋白酶抑制劑重組蛋白對(duì)小鼠黑色素瘤血管生成擬態(tài)的影響及其機(jī)制[J]. 西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版,2014,35(2):169-174

[29] Rolinski J,Hus I. Dendritic-cell tumor vaccines[J]. Transplant Proc,2010,42(8):3306-3308

[30] 齊淵元,王雪,張晗,等. 靜脈免疫樹突狀細(xì)胞疫苗激活抗小鼠黑色素瘤CTL反應(yīng)機(jī)制初探[J]. 現(xiàn)代免疫學(xué),2014,34(6):492-496

[31] Vogel TU，Visan L，Ljutic B，et al. Preclinical qualification of a new multiantigen candidate vaccine for metastatic melanoma[J]. J Immunother，2010，33(8):743-758

[32] Cao X. Regulatory T cells and immune tolerance to tumors[J]. Immunol Res，2010，46(1/3):79-93

[33] 李衛(wèi)波,尹昱,張峻嶺,等. 循環(huán)應(yīng)用低劑量環(huán)磷酰胺聯(lián)合過(guò)繼免疫治療的抗黑色素瘤作用[J]. 中國(guó)免疫學(xué)雜志,2013,29(4):395-399

[34] 李冬斌,司洪濤,鄭志剛,等. 半相合基因DCs-CTL對(duì)小鼠黑色素瘤的抑制作用及GVHD反應(yīng)[J]. 世界華人消化雜志,2015,23(3):415-420

[收稿日期]2015-10-10

[中圖分類號(hào)]R739.5

[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼]A

[文章編號(hào)]1008-8849(2016)09-1021-04

doi:10.3969/j.issn.1008-8849.2016.09.042

[基金項(xiàng)目]2014年內(nèi)蒙古自治區(qū)科技計(jì)劃項(xiàng)目(2014 kjt14sf16)

[通信作者]李東霞，E-mail:ldx828@sina.com