朱蕊，曾愛群，杜晶春

(1.廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 廣州 510120；2.廣州醫(yī)科大學金域檢驗學院，廣東 廣州 510182)

780例遺傳咨詢者外周血染色體核型分析

朱蕊1，曾愛群1，杜晶春2

(1.廣州醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，廣東 廣州 510120；2.廣州醫(yī)科大學金域檢驗學院，廣東 廣州 510182)

目的 探討外周血染色體核型分析在染色體病診斷中的價值。方法對2013年1月至2015年8月期間來我院進行遺傳咨詢的780例患者行外周血染色體核型分析。結(jié)果780例患者中共檢出異常核型30例，異常核型檢出率為3.85%，其中染色體數(shù)目異常12例，染色體結(jié)構(gòu)異常18例，新生兒表現(xiàn)異常、生長發(fā)育異常和不孕不育中以染色體數(shù)目異常為主，不良孕產(chǎn)史中以染色體結(jié)構(gòu)異常為主。結(jié)論外周血染色體核型分析對染色體病導致的新生兒表現(xiàn)異常、生長發(fā)育異常、不孕不育和不良孕產(chǎn)史等疾病的診斷具有重要價值。

遺傳咨詢；外周血；染色體核型；診斷

染色體病是一類由于染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常而導致的目前還無法根治的疾病，其對個體自身發(fā)育和生育后代都有重要影響[1]。外周血染色體檢查是確診染色體病，進而指導臨床診斷和優(yōu)生優(yōu)育的重要手段之一[2]。本文主要對近年來在我院進行遺傳咨詢的780患者的外周血染色體核型分析結(jié)果和臨床資料進行總結(jié)，報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月至2015年8月來本院進行遺傳咨詢并行外周血染色體核型分析的患者共780例，按就診原因分為新生兒表現(xiàn)異常組、生長發(fā)育異常組、不孕不育組和不良孕產(chǎn)史組。

1.2 方法

1.2.1 外周血淋巴細胞培養(yǎng) 用肝素提前潤濕的5 mL注射器無菌操作抽取2 mL靜脈血并混勻，在超凈工作臺內(nèi)將0.6 mL全血標本加入外周血淋巴細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)(一生駿，廣州白云山拜迪生物醫(yī)藥有限公司)，將接種后培養(yǎng)瓶置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72 h。

1.2.2 染色體G顯帶 在收獲細胞前2 h加入1μg/μL秋水仙素溶液200μL，將細胞懸液移入15 mL離心管中，2 000 r/min，室溫條件下離心5 min，棄上清后加入8 mL 75 mmol/L的KCl低滲液，吹打均勻后置于37℃水浴箱20 min，取出離心管加入新鮮配制的固定液(甲醇:冰醋酸=3:1)0.5 mL預(yù)固定10 min，2 000 r/min離心5 min，棄上清后加入新鮮配制的固定液8 mL，輕輕吹打混勻后室溫放置10 min，2 000 r/min離心5 min，棄上清后重復固定1次，最后用少許固定液重懸細胞。吸取2～4滴細胞懸液均勻滴于潔凈濕潤載玻片上(每份標本制片2～3張)，置入鼓風干燥箱80℃干燥處理2 h后，取出自然冷卻至室溫，再放入50 mL 0.05%的胰蛋白酶溶液中消化15 s左右，姬母薩染液處理3～8 min，室溫放置干片后分析。

1.2.3 染色體核型分析 在油鏡下計數(shù)20～30個中期分裂相核型，分析5個顯帶良好的核型，畫圖分析拍照3個核型，如果是嵌合體，計數(shù)100個或200個核型以確定其比例。

2 結(jié) 果

2.1 遺傳咨詢者特點和異常核型檢出率 本次統(tǒng)計時間段內(nèi)共有780例患者進行了外周血染色體核型檢查，按其就診原因主要分為新生兒表現(xiàn)異常19例，生長發(fā)育異常34例，不孕不育229例和不良孕產(chǎn)史497例，另外有一例是在檢查出兒子不育后發(fā)現(xiàn)其父親有相同核型故單列為其他組。780例患者中共檢出異常核型30例，異常檢出率為3.85%，見表1。

表1 780例遺傳咨詢者分類及異常染色體檢出率

2.2 異常核型分布特點 30例異常核型中，染色體數(shù)目異常12例，結(jié)構(gòu)異常18例，新生兒表現(xiàn)異常、生長發(fā)育異常和不孕不育中以染色體數(shù)目異常為主，不良孕產(chǎn)史中以染色體結(jié)構(gòu)異常為主，具體分布和每種異常核型情況及相關(guān)臨床表現(xiàn)見表2和表3。

表2 30例異常染色體核型分類(例)

表3 30例異常染色體核型及主要臨床表現(xiàn)

3 討 論

本研究結(jié)果顯示，外周血染色體核型異常檢出率在新生兒表現(xiàn)異常組和發(fā)育異常組中最高，這一結(jié)果與這兩組患者通常表現(xiàn)出較明顯的外部表型特征有一定關(guān)系，新生兒染色體異常主要為21-三體。目前21-三體綜合征還不能徹底根治，僅限于對癥治療[3]，該病發(fā)病率高且患者存活時間長，一旦出生將會給家庭和社會帶來沉重的負擔，這一結(jié)果也提示做好優(yōu)生遺傳咨詢和產(chǎn)前篩查及診斷工作的重要性。生長發(fā)育異常主要與性染色體異常有關(guān)，從本研究中發(fā)現(xiàn)的8例異常核型可以看出該類患者主要是X染色體的數(shù)目或者結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，如數(shù)目減少、增多、部分缺失、臂間倒位等，從而影響到第一性征和第二性征的發(fā)育，男女均有可能受到影響，造成原發(fā)性閉經(jīng)、先天卵巢發(fā)育不全、男性乳房發(fā)育等。

不孕不育的原因多種多樣，染色體異常是其中重要原因之一。229例不孕不育就診患者中共檢出染色體異常者5例，異常檢出率為2.18%，這與相關(guān)報道基本一致[4]。其中女性1例，主要表現(xiàn)為X染色體嵌合型，男性4例，其中1例表現(xiàn)為Y染色體短臂p11.3長度增加，其父親有相同染色體，疑為正常；1例表現(xiàn)為X染色體增加伴Y染色體短臂p11.3長度增加；1例表現(xiàn)為X染色體增加伴正常核型嵌合；1例表現(xiàn)為單純X染色體增加核型。值得注意的是47,XXY核型在發(fā)育異常組和不孕不育組中均有出現(xiàn)，該類核型又被稱為Klinefelter綜合征[5]，主要是由于父母的生殖細胞在減數(shù)分裂形成精子或卵子的過程中，性染色體發(fā)生不分離引起的，該類個體多數(shù)呈現(xiàn)男性外貌，在兒童期無明顯異常，進入青春期或成年期時常出現(xiàn)異常，如乳房發(fā)育、睪丸顯著縮小、無精子和不孕不育等。

497例不良孕產(chǎn)史患者中共檢出異常核型12例，異常檢出率為2.41%，其中平衡易位8例，臂間倒位2例，染色體部分缺失2例。平衡易位攜帶者和臂間倒位攜帶者一般無遺傳物質(zhì)的丟失，所以個體表型正常，但由于涉及到兩條染色體的異常故其產(chǎn)生正常配子的概率小，易發(fā)生流產(chǎn)、死胎和畸形兒等。

綜上所述，染色體異常是導致新生兒表現(xiàn)異常、生長發(fā)育異常、不孕不育及不良孕產(chǎn)史等疾病的重要原因之一，及時進行外周血染色體核型分析對指導臨床診斷和開展優(yōu)生優(yōu)育具有重要意義。

[1]陳海偉,楊丹.人類染色體病研究進展[J].赤峰學院學報(自然科學版),2012,28(2):113-117.

[2]唐芳,陶曉海,盧航,等.染色體異常、染色體多態(tài)性與生殖異常的相關(guān)性分析[J].海南醫(yī)學,2015,26(16):2379-2381.

[3]王玉豐,羊軼駒,林玲,等.三亞地區(qū)新生兒唐氏綜合征流行病學調(diào)查及相關(guān)發(fā)病因素研究[J].重慶醫(yī)學,2015,44(2):235-236.

[4]周靜,惠偉戎,許爭峰.南京地區(qū)4335例遺傳咨詢者外周血染色體核型分型[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2012,20(9):28-30.

[5]張正果,陳斌.Klinefelter綜合征研究的新進展[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2010,18(10):7-9.

Analysis of the peripheral blood chromosomal karyotype from 780 genetic consultants.

ZHU Rui1,ZENG Ai-qun1, DU Jing-chun2.1.Department of Gynecology and Obstetrics,the First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, Guangzhou 510120,Guangdong,CHINA;2.Kingmed College of Laboratory Medicine of Guangzhou Medical University, Guangzhou 510182,Guangdong,CHINA

Objective To evaluate the role of peripheral blood chromosomal karyotype analysis in disease diagnosis of chromosomal disorder.MethodsThe cytogenetic karyotype of peripheral blood derived from 780 genetic counseling cases were analyzed during January 2013 to August 2015.ResultsThere were 30 cases of chromosomal aberrations to be detected and the abnormal rate was 3.85%,including 12 cases of numeric aberrations and 18 cases of structural aberrations.In neonatal disorder group,developmental disorder group and infertile group,the main type of chromosomal aberrations was the numeric abnormality,and it was mainly structural abnormality in the abnormal gestation and birth group.ConclusionThe detection of the peripheral blood chromosomal karyotype may play an important role in the diagnosis of neonatal disorder,developmental disorder,infertility and abnormal gestation and birth.

Genetic counseling;Peripheral blood;Chromosomal karyotype;Diagnosis

R394

A

1003—6350（2016）14—2249—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.14.005

2016-02-19)

廣東省廣州市屬高?？蒲许椖?編號：1201430338)

杜晶春。E-mail：hndjc@aliyun.com