?

·綜述·

血漿D-二聚體檢測(cè)的臨床應(yīng)用價(jià)值

石恩榮 綜述，周格琛 審校

(柳州市工人醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西柳州 545005)

關(guān)鍵詞:血漿D-二聚體； 檢測(cè)； 應(yīng)用價(jià)值

D-二聚體是交聯(lián)纖維蛋白通過(guò)纖溶酶降解產(chǎn)生的最終產(chǎn)物，其抗原性較強(qiáng)，濃度的升高是體內(nèi)纖溶系統(tǒng)的激活和血栓形成的證據(jù)之一，也是臨床上溶栓治療療效觀察的重要指標(biāo)。目前，隨著方法學(xué)的不斷更新，血漿D-二聚體的檢測(cè)已廣泛應(yīng)用于多種疾病的診斷，對(duì)臨床上的許多疾病的早期診斷，療效監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)估有重要的臨床價(jià)值，受到臨床越來(lái)越多的重視。該文對(duì)D-二聚體的檢測(cè)在靜脈血栓塞疾病的形成，心腦血管疾病，彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)，惡性腫瘤等疾病的診斷和療效監(jiān)測(cè)，病情的觀察及預(yù)后的臨床應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行綜述。

1D-二聚體的產(chǎn)生

D-二聚體是交聯(lián)纖維蛋白通過(guò)血漿纖溶酶作用形成的一種特異性代謝產(chǎn)物，體內(nèi)濃度的升高是繼發(fā)性纖溶的特異性指標(biāo)[1]。在血栓的形成過(guò)程中纖維蛋白原通過(guò)凝血酶作用形成不穩(wěn)定的血漿纖維蛋白單體，它們之間以非共價(jià)鍵結(jié)合，在a和Ca2+作用下，經(jīng)r鍵結(jié)合形成不溶性的和穩(wěn)定的交聯(lián)纖維蛋白聚合體[2],交聯(lián)纖維蛋白通過(guò)纖溶酶作用，纖溶酶溶解酶降解血漿中的纖維蛋白凝塊轉(zhuǎn)變成多種可溶片段(X、Y、D、E等碎片)[3]，經(jīng)r鏈的交聯(lián)形成r鍵鏈結(jié)的兩個(gè)D片段即D-二聚體。其相對(duì)分子質(zhì)量為180×103，半衰期為8 h,經(jīng)腎臟代謝。因此，D-二聚體是血漿交聯(lián)纖維蛋白的特異性代謝產(chǎn)物，如果引起繼發(fā)性纖溶活性增強(qiáng)時(shí)，體內(nèi)D-二聚體濃度也相應(yīng)升高，是反映機(jī)體纖溶亢進(jìn)和高凝狀態(tài)分子標(biāo)志物之一。

2D-二聚體的檢測(cè)方法

目前D-二聚體的檢測(cè)實(shí)質(zhì)上是包含對(duì)D-二聚體的纖維蛋白片段的測(cè)定，有賴于單克隆抗體技術(shù)的發(fā)展。常用的檢測(cè)方法包括乳膠凝集法，膠體金免疫滲透法，酶聯(lián)免疫吸附法，免疫比濁法。

2.1乳膠凝集法測(cè)定原理為血漿中的D-二聚體與吸附D-二聚體單抗的乳膠顆粒結(jié)合形成肉眼可見的凝集反應(yīng)，熊志剛等[4]研究表明此方法操作簡(jiǎn)單，快速適用于急診快速檢測(cè)。但是存在主觀差異性，靈敏度較低，只能做篩查，不適用于大批量的標(biāo)本檢測(cè)。

2.2膠體金免疫滲透法基于免疫濾滲實(shí)驗(yàn)原理D-二聚體與濾過(guò)膜的單抗結(jié)合，然后與膠體金偶聯(lián)的D-二聚體單克隆抗體發(fā)生反應(yīng)后產(chǎn)生顏色變化，再通過(guò)光度計(jì)定量檢測(cè)結(jié)果[5]。該方法不僅簡(jiǎn)單快速，而且不受其他因素影響，適用于單個(gè)或批量標(biāo)本的及時(shí)定量檢測(cè)。

2.3酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)ELISA是將D-二聚體單抗包被于固相載體上，血漿中的D-二聚體與包被在固相載體上的D-二聚體抗體結(jié)合再與酶標(biāo)記的D-二聚體抗體結(jié)合形成復(fù)合物，與底物顯色后定量測(cè)定D-二聚體，顏色的深淺與D-二聚體含量呈正相關(guān)。此方法不受FDP、Fib、血紅蛋白,膽紅素等因素干擾，因此結(jié)果更精確。但此方法操作時(shí)間長(zhǎng)，不適合急診標(biāo)本測(cè)定。但是已有改進(jìn)的快速型進(jìn)行單個(gè)標(biāo)本的測(cè)定[6]。

2.4免疫比濁法D-二聚體與吸附D-二聚體特異性抗體的乳膠顆粒發(fā)生凝集反應(yīng)，在405 nm波長(zhǎng)下檢測(cè)透射光的強(qiáng)度的變化來(lái)測(cè)定D-二聚體的含量。封莉等[7]研究表明該方法檢測(cè)快速，穩(wěn)定準(zhǔn)確，是由自動(dòng)化儀器完成檢測(cè)，自動(dòng)稀釋，具有較高的靈敏度和精密度，可為臨床提供準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)，便于臨床診斷，病情觀察和用藥監(jiān)測(cè)。

3D-二聚體的臨床應(yīng)用

3.1VTE的排除診斷深靜脈血栓(DVT)和肺栓塞(PE)稱為靜脈血栓栓塞(VTE)，是臨床上常見的一種血栓性疾病。D-二聚體對(duì)VTE的早期排除診斷已在臨床上廣泛應(yīng)用。VTE患者體內(nèi)血漿D-二聚體濃度明顯高于正常健康組，表明患者存在繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)和血栓的形成，可作為排除靜脈血栓栓塞的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法[8]。因此D-二聚體檢測(cè)陰性可以有效排除血栓性栓塞疾病，而不必進(jìn)行進(jìn)一步檢查。若D-二聚體陽(yáng)性則須進(jìn)一步影像學(xué)檢查以明確診斷[9]。張健華等[10]研究表明檢測(cè)血漿D-二聚體水平有助于臨床對(duì)患者VTE形成的危險(xiǎn)性進(jìn)行監(jiān)測(cè)，對(duì)臨床早期發(fā)現(xiàn)及預(yù)防具有重要的指導(dǎo)意義。

3.2心、腦血管疾病冠心病和腦梗是最常見的心腦血管疾病特別是急性心肌梗死和缺血性腦卒中，心、腦血管疾病患者的D-二聚體明顯升高，升高的程度與預(yù)后有直接關(guān)系。Charoensri等[11]研究結(jié)果表明冠心病患者D-二聚體高于健康者。水平高低與心、腦血管硬化程度呈正相關(guān)且顯示D-二聚體可用于評(píng)估冠心病患者病變程度，預(yù)測(cè)和預(yù)后。D-二聚體在急性心梗治療上也有應(yīng)用價(jià)值，可指導(dǎo)溶栓。Matsumoto等[12]等研究表明，急性腦卒中患者D-二聚體水平升高與心、腦梗死范圍呈正相關(guān)。臨床上動(dòng)態(tài)觀察D-二聚體的變化發(fā)現(xiàn)其水平高低和梗死范圍有關(guān)而且和病情進(jìn)展有關(guān)，因此D-二聚體含量的變化可以預(yù)測(cè)腦梗死范圍和預(yù)后，給臨床進(jìn)行積極干預(yù)，預(yù)防復(fù)發(fā)有重要作用。研究顯示，急性腦?；颊逥-二聚體水平升高是快速診斷腦卒中的有效生化檢測(cè)方法[13]。

3.3DICDIC是一種以繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)為特征的獲得性全身血栓出血綜合征[13]。DIC的發(fā)生是多系統(tǒng)疾病嚴(yán)重并發(fā)癥的表現(xiàn)[14]。主要表現(xiàn)為微循環(huán)阻塞，出血栓塞和溶血等。當(dāng)DIC發(fā)生時(shí)，由于繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)，大量的纖維蛋白降解，交聯(lián)纖維蛋白的降解產(chǎn)物D-二聚體就會(huì)大量增加[15]。在DIC形成的早期即有D-二聚體升高，D-二聚體在DIC診斷中陽(yáng)性率是100℅。如D-二聚體正常可排除DIC診斷[16]。刁翔文等[17]研究結(jié)果顯示，血漿D-二聚體是DIC的敏感指標(biāo)。D-二聚體水平與患者體內(nèi)的纖溶狀況呈正相關(guān)，隨著病程的變化而相應(yīng)增高，病情越嚴(yán)重預(yù)后越差，因此機(jī)體內(nèi)D-二聚體水平高低可作為DIC病情變化，療效評(píng)估的指標(biāo)。

3.4惡性腫瘤惡性腫瘤患者大多伴有凝血和纖溶異常，隨著腫瘤病情進(jìn)展D-二聚體增高，體內(nèi)高凝狀態(tài)加重。有凝血活性亢進(jìn)和繼發(fā)纖溶狀態(tài)，易發(fā)生血栓和DIC[18]。Ay等[19]進(jìn)行一項(xiàng)前瞻性研究，結(jié)果表明D-二聚體水平高低與癌癥患者死亡風(fēng)險(xiǎn)明顯相關(guān)，可作為癌癥患者的預(yù)后，因此有學(xué)者認(rèn)為,D-二聚體是一種可能的預(yù)后標(biāo)志物[20]。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)D-二聚體水平對(duì)惡性腫瘤患者的預(yù)后和療效觀察有重要意義。

4小結(jié)

綜上所述，D-二聚體是體內(nèi)高凝狀態(tài)和纖溶亢進(jìn)的特異性指標(biāo)。D-二聚體的檢測(cè)在臨床上得到廣泛的應(yīng)用，成為臨床凝血檢查的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。隨著方法學(xué)的提高，D-二聚體檢測(cè)方法具有高度敏感性和陰性預(yù)測(cè)能力。對(duì)VTE，心腦血管疾病，DIC，惡性腫瘤等許多疾病的診斷、病情監(jiān)測(cè)、療效評(píng)估等具有重要的臨床指導(dǎo)作用，隨著認(rèn)識(shí)和研究深入相信D-二聚體將有更廣闊的臨床應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]Zamagni E,Brioli A,Tacchetti P,et al.Multiple myeloma,venous thromboembolism,and treatment-related risk of thrombosis[J].Semin Thromb Hemost,2011,37(3)：209-219.

[2]李丹丹,馬聰.D2聚體檢測(cè)的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J].血栓與止血，2011，17(3)：138-141.

[3]王梅,王金良.D2聚體檢測(cè)的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(1):82-84.

[4]熊志剛,張慶怡.乳膠凝集法和免疫比濁法檢測(cè)D聚體結(jié)果比較[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2011,8(2):219-220.

[5]李莉.兩種檢測(cè)D2聚體方法的比較[J].中外醫(yī)療,2012,7(20):74-75.

[6]許文榮,王建中.臨床血液學(xué)檢驗(yàn)[M].5版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2012:313-328.

[7]封莉,吳興福,王鳳平.淺析提高免疫比濁法測(cè)定D2聚體的準(zhǔn)確性[J].血栓與止血學(xué),2012,18(5):224-226.

[8]King A.Thrombosis:selective D-dinmer testing improves efficiency of DVT diagnosis[J].Nature Reviews Cardiology,2013,10(3):118.

[9]Bates SM,Jaeschke R,Stevens SM,et al.Diagnosis of DVT:antithrombotic therapy and prevention of thrombosis,9th ed:american college of chest physicians evidence-based clinical practice guidelines[J].Chest,2012,141(2):351-418.

[10]張健華,徐丹,張麗芬,等.不同年齡段下肢骨折病人檢測(cè)血漿D2聚體的臨床意義[J].血栓與止血學(xué),2012,18(5):227-228.

[11]Charoensri N,Pornratanarangsi S.D-dimer plasma levels in NSTE-ACS patient[J].J Med Assoc Thai,2011,94(1):39-45.

[12]Matsumoto M,Sakaguchi M,Okazaki S,et al.Relationship between plasma D-Dimer level and cerebral infarction volume in patients with nonvalvular atrial fibrillation[J].Cerebrovasc Dis,2013,35(1):64-72.

[13]Montaner J,Mendioroz M,Ribó M,et al.A panel of biomarkers including caspase-3 and D-dimer may differentiate acute stroke from stroke-mimicking conditions in the emergency department[J].J Intern Med,2011,270(2):166-174.

[14]余杏,姚敏,魏小斌,等.血漿D2聚體在臨床疾病診斷中的應(yīng)用[J].海南醫(yī)學(xué),2012,23(6):129-130.

[15]王梅,王金良.D2聚體檢測(cè)的臨床應(yīng)用進(jìn)展[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,2(1):88-90.

[16]Bates SM.D-dimer assays in diagnosis and management of thrombot-ic and bleeding disorders[J].Semin Thromb Hemost,2012,38(2):673-682.

[17]刁翔文,陳雅瑩,田婧,等.彌漫性血管內(nèi)凝血98例臨床分析[J].醫(yī)學(xué)信息,2011,6(1):11-13.

[18]Kono T,Ohtsuki T,Hosomi N,et al.Clinical characteristics of is-chemic stroke in elderly patients with cancer[J].Nihon Ronen Igakkai Zasshi,2011,48(1):57-62.

[19]Ay C,Dunkler D,Pirker R,et al.High D-dimer levels are associat-ed with poor prognosis in cancer patients[J].Haematologica,2012,97(8):1158-1164.

[20]Nagy Z,Horvath O,Kadas J,et al.D-dimer as a potential prognostic marker[J].Pathol Oncol Res,2012,18(3):669-674.

(收稿日期：2015-12-04)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.06.025

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)06-0779-02

作者簡(jiǎn)介：石恩榮，男，主管技師，主要從事臨床檢驗(yàn)研究。