冒慧敏　劉秀華　史大卓

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·綜述·

桃紅四物湯治療冠心病的機(jī)制研究進(jìn)展

冒慧敏劉秀華史大卓

桃紅四物湯是活血化瘀的常用方之一，近年來被廣泛用于治療冠心病。研究表明，桃紅四物湯可改善冠心病患者的心絞痛癥狀及心電圖缺血的表現(xiàn)，其機(jī)制可能與減輕心肌細(xì)胞損傷、改善內(nèi)皮細(xì)胞功能、抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移、抑制血小板聚集和活化、抑制炎癥反應(yīng)、改善血脂代謝相關(guān)。但縱觀桃紅四物湯對(duì)冠心病的機(jī)制研究，仍存在一定的局限性，應(yīng)進(jìn)一步明確其治療冠心病的分子生物學(xué)作用機(jī)制，開展高質(zhì)量的隨機(jī)對(duì)照研究，以期為桃紅四物湯治療冠心病的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

桃紅四物湯；冠心?。慌R床研究；機(jī)制

心血管疾病已經(jīng)成為全球首要死因[1-2]。冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(coronary atherosclerotic heart disease,CAHD)簡(jiǎn)稱為冠心病，是最常見的心血管疾病，臨床又稱為缺血性心臟病，其藥物治療主要包括硝酸酯類、β受體阻滯劑、鈣離子拮抗劑、他汀類及抗血小板藥物等。然而，長(zhǎng)期使用西藥引起的心率減慢、血壓偏低、肝功能損害等一系列不良反應(yīng)，均限制了傳統(tǒng)西藥的廣泛應(yīng)用。因而，尋求安全、有效的補(bǔ)充替代治療，成為冠心病領(lǐng)域的重要課題。

冠心病歸屬于中醫(yī)“胸痹”“厥心痛”“真心痛”范疇，其關(guān)鍵病機(jī)為“本虛標(biāo)實(shí)”，本虛為心氣虛(陽虛)、心陰虛，標(biāo)實(shí)則為瘀血、痰濁、氣滯、寒凝[3]。血瘀貫穿于疾病始終，因而活血化瘀是中醫(yī)治療冠心病的首要治則。桃紅四物湯源于《醫(yī)宗金鑒》，為常用的活血化瘀方劑，由熟地黃、當(dāng)歸、白芍、川芎、桃仁、紅花組成，具有養(yǎng)血活血之功效。多項(xiàng)臨床研究表明，桃紅四物湯可有效改善冠心病患者心絞痛發(fā)作次數(shù)及時(shí)間、心電圖心肌缺血表現(xiàn)，減少硝酸甘油使用頻率[4-8]。筆者查閱近年來有關(guān)桃紅四物湯治療冠心病作用機(jī)制的研究，將其作用機(jī)制歸納為以下六個(gè)方面：減輕心肌細(xì)胞損傷、調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞功能、抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移、抑制血小板聚集和活化、抑制炎癥反應(yīng)、降低血清血脂水平。

1　減輕心肌細(xì)胞損傷

冠心病的基本病理過程為：冠狀動(dòng)脈粥樣硬化使血管腔狹窄或阻塞，和/或冠狀動(dòng)脈功能性改變(痙攣)，最終導(dǎo)致心肌缺血缺氧損傷[9]，因而心肌損傷是冠心病的最終環(huán)節(jié)。早在20世紀(jì)，高鳳輝等[10]研究發(fā)現(xiàn)，500 μg/mL桃紅四物湯(生藥含量為2 g/mL)可降低乳鼠缺氧缺糖心肌細(xì)胞乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)的漏出水平，提示桃紅四物湯對(duì)乳鼠缺氧缺糖心肌細(xì)胞具有保護(hù)作用。李建文等[11]采用結(jié)扎犬冠狀動(dòng)脈左前降支的方法復(fù)制急性心肌缺血模型，在造模前灌胃給予桃紅四物湯[含生藥14.0 g/(10 kg·d)]，每天1次，連續(xù)灌胃5天，并于第5天灌胃后2小時(shí)行完全結(jié)扎術(shù)。研究結(jié)果顯示，桃紅四物湯可顯著減少心肌細(xì)胞凋亡數(shù)，并促進(jìn)抗心肌組織凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，抑制促凋亡蛋白Bax的表達(dá)，從而達(dá)到保護(hù)心肌細(xì)胞的作用。王大安[12]研究發(fā)現(xiàn)，桃紅四物湯可減輕缺血造成的心肌損傷，降低LDH的漏出；提高心肌組織超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)活性、降低丙二醛(malonaldehyde，MDA)的含量、促進(jìn)Bcl-2表達(dá)、抑制Bax表達(dá)。LDH 可反映細(xì)胞膜完整性和細(xì)胞損傷程度，而SOD是機(jī)體內(nèi)存在的抗氧化酶，MDA是脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物。以上研究提示，桃紅四物湯可減輕心肌細(xì)胞的損傷，其機(jī)制可能與抑制氧化應(yīng)激和抗細(xì)胞凋亡相關(guān)。

2　調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞功能

血管內(nèi)皮細(xì)胞位于血液和組織的分界面，除具有機(jī)械性屏障和傳遞信息傳遞外，還可分泌血管活性物質(zhì)，如內(nèi)皮素-1(endothelin-1，ET-1)、血管緊張素Ⅱ、一氧化氮(nitric oxide,NO)、生長(zhǎng)因子等。在心血管危險(xiǎn)因素(如糖尿病、高血脂、氧化應(yīng)激等)刺激下，內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生結(jié)構(gòu)和功能損傷。一方面內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)黏附分子，募集白細(xì)胞和單核/巨噬細(xì)胞，并分泌白細(xì)胞介素-1(interleukin-1，IL-1)、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)等炎癥介質(zhì)，觸發(fā)炎癥反應(yīng)；另一方面，內(nèi)皮細(xì)胞合成分泌NO的能力下降，而合成分泌生長(zhǎng)因子的能力增強(qiáng)，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移；此外，損傷后的內(nèi)皮細(xì)胞可募集血小板，激活凝血過程[13]。因而內(nèi)皮細(xì)胞功能損傷是冠心病發(fā)生發(fā)展的始動(dòng)環(huán)節(jié)。

臨床研究顯示，桃紅四物湯可抑制氣滯血瘀型冠脈痙攣性心絞痛患者的血清ET-1水平，提示其改善心絞痛癥狀的作用可能與降低血清ET-1水平、改善血管內(nèi)皮功能相關(guān)[7]。桃紅四物湯調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用在離體實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步得到驗(yàn)證。池曉霞[14]用不同濃度的桃紅四物湯含藥血清干預(yù)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)桃紅四物湯含藥血清均可促進(jìn)HUVEC增殖，并促進(jìn)內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase，eNOS)活化及NO分泌。劉竹青等[15]研究發(fā)現(xiàn)，桃紅四物湯可顯著提高過氧化氫損傷的HUVEC SOD活性、降低MDA和LDH含量，并能下調(diào)caspase-3蛋白表達(dá)。

3　抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移

生理狀態(tài)下，位于血管中層的血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell，VSMCs)為收縮型，維持血管正常張力。血管損傷后，在生長(zhǎng)因子、炎癥介質(zhì)等活性物質(zhì)的刺激下，VSMCs發(fā)生表型轉(zhuǎn)化，即由收縮型變?yōu)楹铣尚?，使VSMCs過度增殖，由中膜向內(nèi)膜遷移，并合成分泌細(xì)胞外基質(zhì)導(dǎo)致血管內(nèi)膜增厚，這也是引起管腔狹窄的重要因素[16]。易善清等[17]用不同濃度的桃紅四物湯含藥血清干預(yù)VSMCs，用Boyden小室法檢測(cè)細(xì)胞遷移距離，研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，桃紅四物湯含藥血清可劑量依賴性地抑制VSMCs遷移，且可抑制β3整合素和基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)的表達(dá)。MMP可廣泛降解細(xì)胞外基質(zhì)，進(jìn)而促進(jìn)VSMCs增殖和遷移。MMP-9是MMP家族的重要成員，可由VSMCs合成[18]。β3整合素是整合素家族成員，可促進(jìn)MMP生成，發(fā)揮調(diào)控VSMCs增殖和遷移的作用[19]。該研究提示，桃紅四物湯含藥血清可能通過抑制MMP-9及β3整合素表達(dá)，發(fā)揮抑制VSMCs遷移的作用。胡蘇華等[20]進(jìn)一步研究其抑制VSMCs遷移的信號(hào)通路機(jī)制，研究發(fā)現(xiàn)，桃紅四物湯可能通過下調(diào)FAK/P38MAPK信號(hào)通路，發(fā)揮抑制VSMCs遷移的作用。FAK是一種非受體蛋白酪氨酸激酶，定位于黏著斑，是整合素與下游信號(hào)分子的媒介，參與細(xì)胞生長(zhǎng)、凋亡、黏附、轉(zhuǎn)化和遷移等多種生命過程，在整合素介導(dǎo)的VSMC遷移信號(hào)傳導(dǎo)中起關(guān)鍵作用。在其下游信號(hào)通路中，p38MAPK通路在參與調(diào)控VSMCs遷移中占主要地位[21]。

4　抑制血小板聚集和活化

血小板活化包括黏附、聚集、釋放三個(gè)環(huán)節(jié)，活化后的血小板形成富血小板血栓，引起急性心肌梗死、缺血性卒中等血栓性疾病的發(fā)生。韓嵐等[22]對(duì)正常大鼠灌胃給予桃紅四物湯7天后，腹主動(dòng)脈取血，采用旋轉(zhuǎn)玻球法測(cè)定血小板黏附率，比濁法測(cè)定經(jīng)二磷酸腺苷(adenosine-5′-diphosphate，ADP)、腎上腺素誘導(dǎo)的血小板聚集率。結(jié)果顯示，桃紅四物湯能有效降低大鼠血小板黏附率，且呈現(xiàn)劑量依賴性；并可抑制ADP、腎上腺素誘導(dǎo)的血小板聚集率，其效果與阿司匹林相近。血小板在誘導(dǎo)劑(如ADP、腎上腺素)的作用下可釋放一系列活性物質(zhì)，如血栓素A2(thromboxane A2，TXA2)、血小板顆粒膜蛋白-140(platelet granule membrane protein-140，GMP-140)、β-血小板球蛋白(β-thromboglobulin，β-TG)、血小板因子-4(platelet factor 4，PF-4)等，促進(jìn)血小板聚集[23]。韓嵐等[22]進(jìn)一步采用腎上腺注射加冰水浴的方法建立大鼠急性血瘀模型，在造模前5天開始給予桃紅四物湯灌胃，持續(xù)給藥至造模后2天，結(jié)果顯示，桃紅四物湯可顯著降低大鼠血漿TXA2、GMP-140水平。尹登科等[24]發(fā)現(xiàn)，桃紅四物湯在0.5～2.5 mg/mL范圍內(nèi)，可劑量依賴性抑制凝血酶和蛋白酶激活受體-1(protease-activated receptor 1，PAR1)選擇性激動(dòng)劑誘導(dǎo)的血小板聚集。以上研究提示，桃紅四物湯可作用于血小板活化的3個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)，從而發(fā)揮抗血小板的作用。

5　抑制炎癥反應(yīng)

炎性反應(yīng)在動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)斑塊形成及發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用，其決定著斑塊的形成速度及穩(wěn)定性[25]。多種炎癥因子，如高敏C反應(yīng)蛋白(high-sensitivity C-reactive protein，hs-CRP)、可溶性白細(xì)胞分化抗原CD40配體(soluble CD40 ligand，sCD40L)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforming growth factor，TGF-β)、IL-10等，已經(jīng)逐漸成為判斷冠心病患者預(yù)后的生物學(xué)標(biāo)志物[26]。褚麗秀等[27]將88例不穩(wěn)定型心絞痛合并hs-CRP升高的患者隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組，對(duì)照組僅給予常規(guī)西藥治療，治療組在常規(guī)西藥的基礎(chǔ)上加用桃紅四物湯治療。治療4周后，2組患者血清hs-CRP水平均較治療前明顯降低，且治療組患者血清hs-CRP水平顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，提示桃紅四物湯可進(jìn)一步抑制炎癥反應(yīng)，從而達(dá)到穩(wěn)定斑塊的作用。張兵[28]研究發(fā)現(xiàn)，桃紅四物湯含藥血清可抑制經(jīng)脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)刺激的HUVECs炎癥反應(yīng)，表現(xiàn)為降低TNF-α、IL-1β mRNA表達(dá)和單核細(xì)胞趨化因子-1(monocyte chemotactic protein-1，MCP-1)蛋白表達(dá)。

6　降低血清血脂水平

血脂水平增高是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一[29]。臨床研究顯示，桃紅四物湯聯(lián)合常規(guī)西藥治療可降低不穩(wěn)定型心絞痛患者的血清總膽固醇、甘油三酯(triglyceride，TG)、低密度脂蛋白水平[30]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，桃紅四物湯可降低動(dòng)脈粥樣硬化兔血清TG水平、TG/高密度脂膽白膽固醇(high-density lipoprotein,HDL-C)比值，升高載脂蛋白A1水平[31]。此外，有研究報(bào)道，桃紅四物湯亦可降低動(dòng)脈粥樣硬化兔紅細(xì)胞壓積、全血黏度(高、低切)[32]。以上研究提示，桃紅四物湯可改善血脂水平及血流動(dòng)力狀態(tài)。

7　總結(jié)與展望

桃紅四物湯是活血化瘀的常用方之一，近年來被廣泛用于治療冠心病。研究表明桃紅四物湯可改善冠心病患者的心絞痛癥狀及心電圖缺血的表現(xiàn)，其機(jī)制可能與減輕心肌細(xì)胞損傷、改善內(nèi)皮細(xì)胞功能、抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移、抑制血小板聚集和活化、抑制炎癥反應(yīng)、改善血脂代謝相關(guān)?？v觀目前研究來看，仍存在以下幾個(gè)問題：(1)關(guān)于桃紅四物湯治療冠心病的臨床研究雖較多，但隨訪時(shí)間均較短，最長(zhǎng)為2月[33]，其治療冠心病的遠(yuǎn)期療效仍有待證實(shí)，且未有系統(tǒng)評(píng)價(jià)其治療冠心病療效及安全性的薈萃分析；(2)研究中桃紅四物湯各中藥組成含量比值不一致，中藥的質(zhì)量不一，可能會(huì)對(duì)研究的結(jié)果產(chǎn)生影響；(3)桃紅四物湯治療冠心病的分子生物學(xué)機(jī)制仍有待進(jìn)一步闡明。

綜上所述，桃紅四物湯在治療冠心病方面，展現(xiàn)出廣闊的前景，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)藥物的質(zhì)量控制，明確其治療冠心病的分子生物學(xué)作用機(jī)制，并開展多中心、大樣本的隨機(jī)對(duì)照研究，明確其臨床療效及安全性，以期為桃紅四物湯治療冠心病的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

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(本文編輯： 董歷華)

Research progress on the mechanism ofTaohongSiwudecoction in the treatment of coronary atherosclerotic heart disease

MAOHui-min，LIUXiu-hua，SHIDa-zhuo.

GraduateSchool，BeijingUniversityofChineseMedicine，Beijing100029，China

Correspondingauthor：LIUXiu-hua，E-mail：liuxiuhua98@163.com；SHIDa-zhuo，E-mail：shidazhuo@126.com

TaohongSiwudecoction is the commonly-used prescription for promoting blood circulation and removing blood stasis，and the prescription has been widely used in coronary atherosclerotic heart disease (CAHD). It is reported thatTaohongSiwudecoction can relieve angina symptoms and improve electrocardiogram (ECG). The possible mechanisms may be related to reducing myocardial cell damage, improving endothelial function, inhibiting the proliferation and migration of vascular smooth muscle cells, inhibiting platelet aggregation and activation, inhibiting inflammatory reaction and improving blood lipid metabolism. However，there are several limitations of the relevant articles. More researches should be conducted on the mechanisms and clinical effects ofTaohongSiwudecoction for CAHD patients，to provide evidence for clinical application ofTaohongSiwudecoction.

TaohongSiwudecoction；Coronary atherosclerotic heart disease；Clinical trials；Mechanism

國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(973計(jì)劃)(2015CB554402)；國(guó)家“十二五”科技支撐計(jì)劃(2013BAI02B01)

100029北京中醫(yī)藥大學(xué)研究生院[冒慧敏(博士研究生)]；中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院心血管病研究所[冒慧敏(博士研究生)、史大卓]；中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院病理生理研究室(劉秀華)

冒慧敏(1989- )，女，2014級(jí)在讀博士研究生。研究方向：中西醫(yī)結(jié)合治療心血管病。E-mail：maomolly@sina.com

劉秀華(1957- )，女，博士，研究員，博士生導(dǎo)師。研究方向：病理與病理生理學(xué)。E-mail：xiuhualiu98@163.com；史大卓(1960- )，博士，研究員，博士生導(dǎo)師。研究方向：中西醫(yī)結(jié)治療合心血管病。E-mail：shidazhuo@126.com

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10.3969/j.issn.1674-1749.2016.09.039

2016-02-22)