黨富生黃林(．衡陽(yáng)市公安局刑事科學(xué)技術(shù)研究所， 湖南 衡陽(yáng) 400；．岳陽(yáng)市公安局刑事科學(xué)技術(shù)研究所， 湖南 岳陽(yáng) 44000)

應(yīng)用微波萃取-氣相色譜法測(cè)定尿液中的苯丙胺類毒品

黨富生1黃林2(1．衡陽(yáng)市公安局刑事科學(xué)技術(shù)研究所， 湖南 衡陽(yáng) 421001；2．岳陽(yáng)市公安局刑事科學(xué)技術(shù)研究所， 湖南 岳陽(yáng) 414000)

使用微波萃取-氣相色譜法(GC)檢測(cè)人尿液包括甲基苯丙胺(MA)、3，4-亞甲二氧基苯丙胺(MDA)、3,4-亞甲二氧基甲基苯丙胺(MDMA)等苯丙胺類毒品效果進(jìn)行分析，重點(diǎn)對(duì)萃取溶劑、用量、pH值、溫度、時(shí)間等因素對(duì)萃取結(jié)果的影響進(jìn)行探討。實(shí)驗(yàn)顯示萃取溶液選用以環(huán)己烷、pH值12，40℃持續(xù)微波10 min，使用微波萃取-氣相色譜法測(cè)定人尿中甲基苯丙胺、3，4-亞甲二氧基苯丙胺、3,4-亞甲二氧基甲基苯丙胺的回收率最高，且分別高達(dá)92.25%、85.92%、91.49%，相對(duì)偏差為5.6%、5.6%、6.2%。微波萃取-氣相色譜法測(cè)定尿液中苯丙胺類毒品具有快速、準(zhǔn)確且靈敏特點(diǎn)。

微波萃?。粴庀嗌V法；人尿液；苯丙胺類毒品

0 引言

苯丙胺(amphetamine)類毒品屬于人工合成有機(jī)胺類興奮藥物，藥物可直接作用于中樞神經(jīng)和交感神經(jīng)，因而苯丙胺類毒品也稱為神經(jīng)興奮類毒品[1]。苯丙胺類毒品為我國(guó)常見(jiàn)毒品類型，對(duì)廣大青少年身心健康帶來(lái)巨大影響，也帶來(lái)諸多社會(huì)問(wèn)題。根據(jù)國(guó)內(nèi)外研究成果，苯丙胺類毒品檢查方法包括氣相色譜法、高效液相色譜法、毛細(xì)管電泳法、高效液相色譜法-質(zhì)譜聯(lián)合檢測(cè)等[2]。

在檢測(cè)苯丙胺類毒品中，體內(nèi)材料檢測(cè)為當(dāng)前法庭科學(xué)研究熱點(diǎn)之一，人尿液屬于廣泛使用的體內(nèi)材料[3]。微波萃取技術(shù)屬于常用檢測(cè)技術(shù)，該技術(shù)屬于新型高效、自動(dòng)萃取方法，已用于法庭科學(xué)領(lǐng)域。本文建立微波萃取-氣相色譜分析方法，檢測(cè)甲基苯丙胺、3，4-亞甲二氧基苯丙胺、3，4-亞甲二氧基甲基苯丙胺是三種苯丙胺類毒品，對(duì)微波萃取-氣相色譜法測(cè)定尿液中的苯丙胺類毒品的效果進(jìn)行分析。

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

(1)實(shí)驗(yàn)設(shè)備 ①M(fèi)SP-100E微波萃取儀北京雷鳴科技公司生產(chǎn)；②Agilent 7890A氣相色譜儀美國(guó)安捷倫科技公司生產(chǎn)；③配氫火焰離子化檢測(cè)器FID公司生產(chǎn)；④氮吹儀北京八方世紀(jì)科技有限公式生產(chǎn)；⑤Sigma 3K15高速冷凍離心機(jī)德國(guó)生產(chǎn)。

(2)實(shí)驗(yàn)材料 健康自愿者空白尿液、甲基苯丙胺鹽酸鹽、3，4-亞甲二氧基苯丙胺鹽酸鹽、3，4-亞甲二氧基甲基苯丙胺鹽酸鹽對(duì)照品、色譜純甲醇；分析純環(huán)己烷、乙酸乙酯、無(wú)水甲醇、氯仿、碳酸氫鈉、異丙醇、氫氧化鈉。

1.2 方法

(1)氣相色譜分析條件 使用HP-5毛細(xì)管柱，規(guī)格30 m×0．32 mm×0．5μm。依據(jù)程序提升毛細(xì)管柱溫度，首先加入至120℃，維持2 min后按照8℃/min速度提升至200℃；再以30℃/min速度升溫至280℃，維持5min。進(jìn)樣口和FID溫度分別為280℃、300℃；載氣為氮?dú)猓魉?．0mL/min，分流比10∶1，進(jìn)樣體積1μL。

(2)配置標(biāo)準(zhǔn)溶液 稱取甲基苯丙胺鹽酸鹽、3，4-亞甲二氧基苯丙胺鹽酸鹽、3，4-亞甲二氧基甲基苯丙胺對(duì)照品各9．92mg、7．2mg、7．14mg，將其分別加入1mL甲醇，使對(duì)照品完全溶解，再定容至2．0mL，分別配置成4．0 g/L、3．0g/L、3．0g/L標(biāo)準(zhǔn)溶液，放于-20℃環(huán)境中保存。將以上標(biāo)準(zhǔn)溶液配制成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，溶度分別為1．0g/L、0．1g/L。

(3)樣品前處理

①微波萃取取2mL尿液放于微波樣品罐，振蕩搖勻后靜置2h，加入4mol/L氫氧化鈉3滴和6mL環(huán)己烷，振蕩并以轉(zhuǎn)速9000r/min離心處理10min后。取上清液，加入鹽酸甲醇，常溫環(huán)境內(nèi)使用氮吹儀吹干，而使用100μL和300μL甲醇定容，最后取1μL進(jìn)行測(cè)定。

②液液萃取取2mL尿液放于錐形瓶?jī)?nèi)，振蕩并放置2h后加入4mol/L氫氧化鈉3滴和6mL環(huán)己烷。再次震蕩后離心處理10min，轉(zhuǎn)速9000r/min。提取上清液，常溫下氮吹儀吹干，使用100μL甲醇定容。取1μL溶液進(jìn)行GC-FID檢測(cè)。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜圖

微波萃取-氣相色譜法可以有效分離人尿中測(cè)甲基苯丙胺、3，4-亞甲二氧基苯丙胺、3，4-亞甲二氧基甲基苯丙胺與基體，詳見(jiàn)圖1。

2.2 微波萃取條件

(1)溶劑 分別選擇環(huán)己烷、乙酸乙酯、無(wú)水甲醇、氯仿、碳酸氫鈉、異丙醇、氫氧化鈉作為萃取劑，參照微波萃取步驟操作，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示環(huán)己烷對(duì)藥體的干擾小，提取率最高。選用環(huán)己烷和甲苯為混合溶劑萃取雖然可提高提取率，但甲基苯胺、3，4-亞甲二氧基苯丙胺、3，4-亞甲二氧基甲基苯丙胺出峰干擾大；乙酸乙酯、氯仿、異丙醇混合溶劑對(duì)藥體的干擾大。因而環(huán)己烷為最佳萃取溶劑。

(2)萃取溫度 分別設(shè)置25℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃萃取，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示萃取溫與萃取率關(guān)系呈拋物線狀，50℃前隨溫度提高，萃取率提升。溫度超過(guò)50℃后干擾增多，因而40℃為最佳萃取溫度。

(3)萃取時(shí)間以環(huán)己烷為萃取溶劑，在40℃下分別萃取2min、5min、8min、10min、12min、15min，2～10min內(nèi)，隨著萃取時(shí)間增加，萃取率也越高，10min后，萃取時(shí)間增加對(duì)萃取率影響不大，因而10min為最佳萃取時(shí)間。詳見(jiàn)圖2。

(4)萃取溶劑劑量分別選擇2mL、4mL、6mL、8mL、10mL、12mL環(huán)己烷，在40℃下萃取10min。結(jié)果顯示隨著萃取溶劑用量增加，萃取率提升。8mL和12mL對(duì)萃取率影響不大，因而選擇6mL環(huán)己烷為萃取溶液。

(5)尿液pH值將尿液pH值分別調(diào)節(jié)為9～13，選擇6mL環(huán)己烷，在40℃下萃取10min。結(jié)果顯示，pH至為9～12，萃取率隨pH值提高而增加，尿液pH值為12和13下的萃取率差異不明顯，因而尿液pH值選12。(見(jiàn)圖3)2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線和最低檢出限

圖2 萃取時(shí)間與萃取率關(guān)系

圖1 尿液色譜

圖3 尿液pH值與萃取率的關(guān)系

將甲基苯丙胺、3，4-亞甲二氧基苯丙胺、3，4-亞甲二氧基甲基苯丙胺混合標(biāo)準(zhǔn)溶液加入空白尿液，制備系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行GC-FID分析。根據(jù)藥物峰面積繪制藥物質(zhì)量濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線。最低檢出限以微波萃取處理樣品檢測(cè)的尿液藥物濃度，結(jié)果見(jiàn)表1。藥物濃度為3mg/L的日內(nèi)和日間回收率詳見(jiàn)表2。

表1 藥物標(biāo)準(zhǔn)曲線方程、相關(guān)系數(shù)和檢出限

表2 藥物濃度為3 mg/L的日內(nèi)和日間回收率、精密度

2.4 回收率及精密度

將甲基苯丙胺、3，4-亞甲二氧基苯丙胺、3，4-亞甲二氧基甲基苯丙胺混合標(biāo)準(zhǔn)溶液加入空白尿液，配置1 mg/L、3 mg/L、5 mg/L尿液各5份，依據(jù)微波萃取和液液萃取方式分析GC-FID，計(jì)算回收率和精密度，結(jié)果詳見(jiàn)表3。

表3 兩種萃取方法的回收率和精密度

3 結(jié)語(yǔ)

本文采用微波萃取-氣相色譜法檢測(cè)人尿中苯丙胺類毒品，重點(diǎn)對(duì)萃取溶劑、溶劑劑量、溫度、時(shí)間、pH值等因素與萃取率的關(guān)系進(jìn)行分析，建立檢測(cè)尿液苯丙胺類毒品檢測(cè)方法，結(jié)果顯示該檢測(cè)方法具有快速高效特點(diǎn)，回收率高，可用于檢測(cè)苯丙胺類毒品濫用人員尿液檢測(cè)。

[1]王燕燕,孟品佳,李寧.場(chǎng)放大樣品堆積毛細(xì)管區(qū)帶電泳檢測(cè)尿液中苯丙胺類毒品[J]. 分析試驗(yàn)室,2008,05:5-8.

[2]李 瑤,劉 榮,張 琳,王 朝 虹，等. UPLC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定尿液中的6種苯丙胺類毒品[J]. 分析試驗(yàn)室,2015,09:1072-1075.

[3]張文文,孟品佳,孟梁，等.中空纖維膜液相微萃取-氣相色譜/質(zhì)譜法檢測(cè)尿液中的苯丙胺類興奮劑[J].分析試驗(yàn)室,2013,01:44-47.

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Determination of amphetamines in urine by microwave extraction and gas chromatography

using microwave extraction gas chromatography(GC) detection of human urine including methamphetamine(MA), 3,4-methylene two oxygen thamphetamine(MDA), 3,4- methylene two oxy methamphetamine(MDMA) analysis such as amphetamines, focusing on the extraction solvent, dosage, pH value. Impact of temperature, time and other factors on the extraction results. Experimental results show that the extraction solution used to cyclohexane, pH 12,40 DEG C for 10 min microwave, using microwave extraction gas chromatography method for the determination of methamphetamine in urine, 3,4- methylene two oxygen thamphetamine, recovery of 3,4- methylene two oxy methamphetamine. The highest rate and were as high as 92.25%, 85.92%, 91.49%, the relative deviation is 5.6%. 5.6%, the determination of amphetamines in urine has a rapid method of 6.2%. microwave extraction - gas chromatography, accurate and sensitive features.

microwave extraction; gas chromatography; urine; amphetamines

黨富生(1982-),男,漢，大學(xué)本科,山西運(yùn)城人，理化檢驗(yàn)工程師,研究方向：從事毒物、毒品案件檢驗(yàn)工作。