陸虹旻　李林鳳　高建新#

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟醫(yī)院　臨床干細胞研究中心　腫瘤發(fā)生與免疫研究室1(200127)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟醫(yī)院腫瘤科2

·特約文稿·

基于樹突細胞的腫瘤疫苗研究進展

陸虹旻1,2*李林鳳1高建新1#

上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟醫(yī)院臨床干細胞研究中心腫瘤發(fā)生與免疫研究室1(200127)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟醫(yī)院腫瘤科2

摘要腫瘤免疫治療雖然早已提出，但作為戰(zhàn)勝癌癥必不可少的途徑是近幾年才有的共識。腫瘤免疫治療可分為主動免疫治療和被動免疫治療，但要真正戰(zhàn)勝癌癥，還是需要安全、有效的主動免疫治療途徑。樹突細胞(DC)是銜接天然免疫和適應(yīng)性免疫的橋梁，也是決定適應(yīng)性免疫性質(zhì)，即免疫或耐受的關(guān)鍵細胞。因此，以DC為載體的安全、高效、特異和廣譜的腫瘤疫苗在腫瘤免疫治療中具有不可替代的重要地位。由于DC的高度異質(zhì)性，基于DC的腫瘤疫苗研究遇到了瓶頸。本文結(jié)合筆者的研究經(jīng)歷，綜述DC腫瘤疫苗的研究進展及其迫切需要解決的問題。

關(guān)鍵詞樹突細胞；癌癥疫苗；抗原，腫瘤

一、樹突細胞(dendritic cells, DC)發(fā)展簡史

“Dendritic cells”一詞于1973年由加拿大免疫學(xué)家Ralph Steinman在描述小鼠脾臟細胞中具有特異性樹枝狀形態(tài)的一小群細胞時引入[1]。關(guān)于DC的研究在經(jīng)過了發(fā)現(xiàn)后初期因細胞數(shù)量稀少而沉寂二十年后出現(xiàn)了爆發(fā)式的增長，每年有數(shù)千篇關(guān)于DC的科技論文發(fā)表，這得益于小鼠和人體外DC擴增技術(shù)的建立和漿細胞DC亞群的發(fā)現(xiàn)[2]。隨著在該領(lǐng)域研究的深入，我們越來越深刻地了解DC在機體免疫中發(fā)揮著獨特、關(guān)鍵的功能，其在固有免疫和適應(yīng)性免疫應(yīng)答中均處于關(guān)鍵性的樞紐位置。這一發(fā)現(xiàn)將免疫學(xué)帶入了一個全新的領(lǐng)域，Ralph Steinman也因此被授予2011年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎[3]。

二、DC的一般特征

DC具有職業(yè)化加工、呈遞抗原，激活幼稚T細胞或調(diào)節(jié)效應(yīng)T細胞的功能。其具有免疫原性和耐受原性，前者表達高水平白細胞介素(IL)-12，后者則表達高水平IL-10[4]，其免疫和耐受特性在環(huán)境因子的作用下可發(fā)生轉(zhuǎn)換。

DC由普通骨髓干細胞分化而來，其直接前體細胞的來源、特征至今尚不清楚，存在爭論[5]。DC幾乎存在于所有組織中，尤其更多地分布在與外界抗原接觸的部位，如淋巴器官、腸道和皮膚內(nèi)外黏膜層。組織中的DC通常是未成熟的，它們能非常有效地吞噬細胞外物質(zhì)，但不釋放細胞因子，即所謂的未成熟DC(IDC)。IDC的特點是：①前期不表達高水平主要組織相容性復(fù)合體(MHC)Ⅱ類分子；②共刺激分子如CD40、CD86、CD70、OX40L等處于較低水平；③有一組特定的趨化因子受體[6]。雖然IDC會向T細胞呈遞抗原，但在缺乏適當(dāng)?shù)墓泊碳ば盘柕那闆r下，IDC會向T細胞呈遞抑制信號，導(dǎo)致抗原特異性T細胞分化為無能T細胞(anergic T cells)，其克隆擴增受限并分化為CD4+CD25+Foxp3+調(diào)節(jié)性T細胞(Treg細胞)，最終促進免疫耐受形成[7]。

已知某些刺激信號可促進IDC的成熟，如微生物相關(guān)分子模式(MAMPs)、損傷相關(guān)分子模式(DAMPs)、免疫復(fù)合物以及眾多的細胞因子和趨化因子。相對于IDC，成熟DC(MDC)吞噬抗原的能力有限，但具有如下特點：①細胞表面表達的MHC Ⅱ類分子水平升高；②由于表達特定趨化因子受體(如CCR7)而獲得遷移至淋巴結(jié)的能力；③分泌大量細胞因子/趨化因子[6,8]。因此，MDC能高效地激發(fā)適應(yīng)性免疫應(yīng)答，其能力遠超過包括B細胞和巨噬細胞在內(nèi)的其他抗原呈遞細胞(APC)[9]。此外，DC的免疫刺激功能并非僅限于誘導(dǎo)細胞免疫應(yīng)答，其還能影響體液免疫。

三、DC的異質(zhì)性和亞群

DC實際上是一群主要功能相似但具有高度異質(zhì)性的專職APC。DC存在數(shù)個形態(tài)和表型不同的亞群[10]，主要有髓樣DC(myeloid DC, mDC)和淋巴樣DC，對免疫系統(tǒng)具有不同的調(diào)節(jié)功能。例如，人表皮Langerhans細胞能通過分泌IL-15有效刺激CD8+T細胞，人CD14+真皮DC可產(chǎn)生高水平的IL-12，從而促進初始B細胞(naive B cells)分化成分泌抗體的漿細胞[11]；小鼠CD8α+DC(人CD141+DC)有高效的交叉呈遞能力，在體內(nèi)對外界抗原的反應(yīng)最為敏感[12]。漿細胞DC(plasmacytoid DC, PDC)是DC中一個特殊的亞群，較之傳統(tǒng)的mDC，PDC表達眾多包括Toll樣受體(TLRs)家族成員在內(nèi)的識別受體，因而能更為敏感地對MAMPs和DAMPs產(chǎn)生反應(yīng)。在病毒感染時，PDC可分泌大量Ⅰ型干擾素，引發(fā)Th1型免疫反應(yīng)，在抗病毒免疫中發(fā)揮重要作用，而mDC則不具備這種功能。

近年來，另一種兼有自然殺傷細胞(NK細胞)功能的DC或兼有DC功能的NK細胞，稱為自然殺傷性DC(natural killer DC, NKDC)，在大鼠、小鼠和人體相關(guān)研究中均有描述。但是，無論對該細胞群的來源有何種爭論, 其兼具DC和NK細胞功能的事實難以否認。NKDC不但能殺傷靶細胞并呈遞抗原，還能產(chǎn)生水平高于NK細胞的γ干擾素，調(diào)節(jié)適應(yīng)性免疫應(yīng)答，在自身免疫和腫瘤等疾病中起重要作用。在小鼠NK1.1+CD11c+群體中含有B220+和B220-NKDC亞群[13]，B220+亞群被描述為產(chǎn)生干擾素的殺傷性DC(interferon-producing killer DC, IKDC)，在抗腫瘤免疫反應(yīng)中起重要作用。事實上B220-NKDC也產(chǎn)生高水平的干擾素，尤其是在免疫反應(yīng)過程中。

四、DC與腫瘤等疾病

DC與感染、炎癥、自身免疫性疾病、過敏等多種病理生理現(xiàn)象有關(guān)，在先天免疫和適應(yīng)性免疫中均處于關(guān)鍵地位。隨著對免疫系統(tǒng)在腫瘤發(fā)生、發(fā)展和治療中作用的了解[14-15]，DC在抗腫瘤治療方面的作用也變得越來越受到重視[16-17]。已證實腫瘤內(nèi)mDC水平升高與臨床治療預(yù)后改善相關(guān)。反之，有研究表明特定的DC亞群出現(xiàn)功能缺陷會促進腫瘤發(fā)生、發(fā)展和化療耐藥。腫瘤區(qū)域免疫耐受性DC包括CD123+PDC和CD208+mDC增多，被多個研究證明是臨床預(yù)后不良因素。

隨著DC基礎(chǔ)研究的發(fā)展，逐漸有研究開始利用DC進行干預(yù)治療。DC介導(dǎo)的免疫反應(yīng)作為一種治療手段被用于嘗試治療多種疾病，包括感染、自身免疫性疾病、過敏和惡性腫瘤[18-21]，其中治療惡性腫瘤的DC腫瘤疫苗是相關(guān)研究中最受關(guān)注的課題。

五、DC介導(dǎo)的腫瘤免疫治療

目前一般將基于DC的抗腫瘤治療根據(jù)不同治療方式分為4類：①空載DC回輸；②DC在體外負載腫瘤相關(guān)抗原(tumor-associated antigen, TAA)后回輸[22-23]；③DC在體內(nèi)負載TAA；④應(yīng)用DC來源的囊泡(exosomes)。

DC在體外負載抗原可有不同的方式，包括：①將IDC暴露于自體腫瘤細胞裂解液；②將IDC和重組TAA共同孵育培養(yǎng)；③以提取自惡性細胞的RNA或編碼TAA 的RNA和表達TAA的載體轉(zhuǎn)染DC；④將DC與滅活腫瘤細胞融合，形成所謂的“dendri-tomes”[24-25]。

在體內(nèi)將TAA遞送至DC的方法有兩種：①將TAA融合入針對DC表面特定標記物的單克隆抗體中，如淋巴細胞抗原75(LY75)、CD209、C-型凝集素結(jié)構(gòu)域家族成員CLEC4A和CLEC9A[26-29]；②將TAA以免疫脂質(zhì)體包裝后定向遞送至DC[30]。此外，在體內(nèi)加載TAA還需同時給DC提供足夠的促成熟信號，以避免出現(xiàn)外周免疫耐受，可選用的促成熟信號包括常用的疫苗佐劑以及包括TLR激動劑和免疫刺激細胞因子在內(nèi)的多種相對非特異性免疫刺激劑[31]。此外，影響最終免疫效應(yīng)的因素還包括T細胞表型和歸巢性能。

雖然上述這些治療在方式上存在差異，但總體治療目標相同，那就是提升機體原有的抗腫瘤免疫水平或誘導(dǎo)機體產(chǎn)生新的抗腫瘤免疫。最終治療的安全性和有效性很大程度上是由所選擇的治療相關(guān)TAA決定的。理想的TAA應(yīng)在惡性細胞中表達或呈過表達，更為重要的是要能成為腫瘤排斥抗原(tumor rejection antigens)[32]，誘導(dǎo)有效的抗腫瘤免疫效應(yīng)，除此以外TAA還應(yīng)盡可能在非惡性組織中不表達或低表達，以減少治療帶來的自身免疫反應(yīng)[33-34]。

六、DC腫瘤疫苗臨床應(yīng)用現(xiàn)狀

自1996年起截至目前(2016年2月)，在ClinicalTrials.gov注冊開展的與DC腫瘤疫苗相關(guān)的臨床試驗已超過400項，且年注冊數(shù)量呈逐漸上升趨勢，有多項試驗現(xiàn)已完成。根據(jù)臨床試驗所針對的不同腫瘤類型對其數(shù)量進行排序，依次為黑色素瘤、前列腺癌、腎癌、腦腫瘤、乳腺癌等。其中黑色素瘤、前列腺癌和腎癌這三種腫瘤的DC疫苗試驗數(shù)量占所有腫瘤試驗數(shù)量的半數(shù)以上，這是因為這些腫瘤具有更多特征性TAA。針對結(jié)直腸癌的DC腫瘤疫苗臨床試驗迄今尚無報道。

從近幾年以DC為基礎(chǔ)的抗腫瘤免疫治療臨床試驗的設(shè)計中可以看出，目前最主流的治療模式還是將自體DC在體外擴增后再經(jīng)一種或多種純化TAA或多肽刺激，再單獨或聯(lián)合化療或免疫治療，最后評估其誘導(dǎo)腫瘤特異性免疫反應(yīng)和發(fā)揮抗腫瘤作用的能力。這些TAA包括人表皮生長因子受體(HER)2、癌胚抗原(CEA)、腫瘤血管抗原或NY-ESO-1衍生多肽，而治療對象包括黑色素瘤[35]、神經(jīng)膠質(zhì)瘤[36]、膠質(zhì)母細胞瘤[37]、肝細胞癌[38]和乳腺癌[39]。也有少數(shù)DC疫苗試驗在體外刺激DC時使用的是腫瘤細胞裂解液，試驗對象有腎細胞癌[40]、膠質(zhì)母細胞瘤[41]、骨肉瘤[42]和一些其他實體腫瘤患者[43]。一部分試驗還同時使用共刺激分子，如CD40配體、CD70和TLR4激動劑。另外還有DC疫苗聯(lián)合自然殺傷T細胞(NKT細胞)激活劑α-半乳糖[44]，或同時靶向CD4+、CD8+T細胞[35]，或聯(lián)合免疫刺激性化療藥物(如環(huán)磷酰胺、來那度胺)[17,45]?？偨Y(jié)這些已發(fā)表的研究結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)以DC為基礎(chǔ)的疫苗用于腫瘤患者總體上是安全的，但是僅在一小部分患者中誘發(fā)特異性抗腫瘤免疫反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為客觀的臨床獲益。

七、商業(yè)化DC腫瘤疫苗存在的問題

總體而言，目前商業(yè)化DC腫瘤疫苗的療效并不理想。

2010年，Sipuleucel-T[Provenge?，為富集自體細胞后體外擴增的DC，呈遞前列腺酸性磷酸酶(PAP)/粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)融合蛋白]作為第一個DC疫苗，被美國食品和藥品管理局(FDA)批準用于治療無癥狀或癥狀輕微的轉(zhuǎn)移性去勢治療無效的難治性前列腺癌。與安慰劑組相比，Sipuleucel-T組死亡風(fēng)險降低22%(P=0.03)，中位總生存期(mOS)延長4.1個月(25.8個月對21.7個月)。Sipuleucel-T組與安慰劑組的36個月生存率分別為31.7%和23.0%。事實上，所謂Sipuleucel-T富集的DC與期望得到的免疫原性DC相差甚遠。Sipuleucel-T中含有大量NK細胞和T細胞，大量輸注后未能根本逆轉(zhuǎn)患者的免疫耐受狀態(tài)。

在Sipuleucel-T上市以后，包括DC腫瘤疫苗在內(nèi)的腫瘤疫苗研發(fā)商品化出現(xiàn)了停頓，直至2015年10月FDA批準T-VEC作為首次手術(shù)后復(fù)發(fā)的黑色素瘤患者不可切除病灶的局部治療方案。T-VEC是繼Sipuleucel-T后的第二個治療性腫瘤疫苗，是一種經(jīng)過基因修飾的Ⅰ型單純皰疹病毒(HSV-1)，其可在腫瘤細胞內(nèi)復(fù)制并表達DC誘導(dǎo)蛋白GM-CSF。將其直接注射至黑色素瘤病灶中可造成腫瘤細胞溶解、破裂并釋放出腫瘤源性抗原和GM-CSF，加速抗腫瘤免疫應(yīng)答[46]。之所以之前研發(fā)的眾多腫瘤基因疫苗均告失敗而T-VEC獲得了相對成功，原因可能是T-VEC表達的GM-CSF誘導(dǎo)腫瘤局部生成更多的DC，可進一步激發(fā)更強的抗腫瘤免疫反應(yīng)。因此，雖然T-VEC從成分上來說是一個基因疫苗，但它利用了DC疫苗的作用機制。2014年，美國臨床腫瘤學(xué)會(ASCO)報道的T-VEC Ⅲ期臨床試驗的首要終點持續(xù)緩解率為治療組16%，對照組2%，總生存率亦較理想(P=0.051)。這一結(jié)果再次啟示臨床放化療時使用GM-CSF作為升白細胞治療藥應(yīng)慎重，因為GM-CSF不利于體內(nèi)DC的分化和成熟。理想的化療后升白細胞藥應(yīng)能同時促進DC分化和成熟，至少不會強化患者體內(nèi)的免疫耐受環(huán)境。

八、DC腫瘤疫苗需要解決的問題

綜上所述，在過去的二十年中，研究者們進行了大量利用DC的免疫刺激活性對抗癌癥的嘗試，尤其是在Sipuleucel-T用于去勢后難治性前列腺癌的審批通過后，DC免疫療法的轉(zhuǎn)化和臨床研究出現(xiàn)了一波高潮。目前基于DC的抗腫瘤免疫治療雖然數(shù)量眾多，但最終成功通過臨床試驗驗證并得以付諸應(yīng)用的只有Sipuleucel-T和T-VEC，絕大多數(shù)DC治療最后止步于臨床試驗階段。有幾個問題可能導(dǎo)致這些DC腫瘤疫苗的最終療效不盡如人意：①缺乏理想的腫瘤特異性抗原。目標抗原應(yīng)具有廣譜的腫瘤特異性，只在腫瘤細胞內(nèi)表達，但并不限于一種或幾種腫瘤，尤其是在腫瘤干細胞內(nèi)亦有表達。但目前已知的廣譜腫瘤特異性抗原極少，大多數(shù)是針對重要組織不表達或少表達的TAA。②TAA免疫原性較弱。雖然已有數(shù)種TAA被選擇性地作為靶點用于以DC為基礎(chǔ)的疫苗，但這些TAA由于特異性不足、組織分布不廣，誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)通常無法產(chǎn)生足夠強度的腫瘤排斥作用，大多數(shù)還不能作為真正的廣譜腫瘤排斥抗原。事實上，只有極少數(shù)TAA能成為真正的腫瘤排斥抗原誘導(dǎo)有效的免疫效應(yīng)。如免疫原性不強，負載DC缺乏足夠的刺激T細胞成熟信號，則DC介導(dǎo)的將是免疫耐受，而不是免疫增強。尤其是對于那些靶向于體內(nèi)DC的療法而言，更可能存在這一隱患。③缺乏高效誘導(dǎo)免疫原性DC的技術(shù)。由于對DC來源特別是免疫原性DC前體細胞的認識不足，阻礙了免疫原性DC體外誘導(dǎo)、擴增技術(shù)的發(fā)展，目前在體外還難以誘導(dǎo)治療所需劑量的免疫原性DC。雖然Sipulencel-T和E-VEC的設(shè)計試圖以GM-CSF在體內(nèi)或體外誘導(dǎo)免疫原性DC，實際臨床效果并不理想。Sipulencel-T實質(zhì)上仍然是多種免疫細胞的混合物，類似DC-細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞(CIK細胞)，以致由熱至冷，臨床應(yīng)用不佳。④臨床應(yīng)用個體化效率不高。個體化和精準化醫(yī)療近年在腫瘤診斷領(lǐng)域得到眾多學(xué)者甚至政府部門的推崇，DC疫苗的發(fā)展一定是向安全、經(jīng)濟、廣譜、特異和高效的方向精準發(fā)展。目前，由于疫苗靶標的限制，如Sipulencel-T，只有部分患者有條件接受治療。以腫瘤細胞裂解物或腫瘤細胞來源的RNA體外刺激自體DC的方案只適用于那些能通過活檢取得腫瘤組織的患者。⑤DC疫苗接種途徑不符合DC分化和成熟規(guī)律。如體外致敏DC靜脈回輸方法不能有效激活DC分化、成熟。體外擴增的DC在局部注射后， 往往缺乏遷移能力而難以成熟。實體腫瘤免疫微環(huán)境的屏障作用使免疫細胞不易進入腫瘤內(nèi)部，DC在全身回輸后歸巢至局部腫瘤病灶的數(shù)量和功能可能有限，不足以克服局部免疫耐受環(huán)境，引發(fā)足夠的免疫效應(yīng)。⑥對DC不同亞群在功能上的異質(zhì)性還認識不足，如NKDC在抗腫瘤中的作用需要特別重視。⑦缺乏可靠的分子或細胞生物學(xué)標記物用于預(yù)測DC疫苗的療效。腫瘤形成時惡性腫瘤細胞已建立起一個復(fù)雜的免疫耐受網(wǎng)絡(luò)，因此限制了DC誘導(dǎo)的抗腫瘤免疫反應(yīng)的能力?；贒C的抗腫瘤免疫治療，目前尚無可靠的分子或細胞生物學(xué)標記物用于預(yù)測患者是否能從治療中獲益。⑧療效評價標準錯位。臨床試驗方面，療效評價往往選用基于影像學(xué)的實體瘤療效評價標準(RECIST)或世界衛(wèi)生組織(WHO)標準，而實際上免疫治療的療效反應(yīng)不同于傳統(tǒng)放化療，目前尚缺乏基于免疫治療的療效評價標準。

可以預(yù)見的是，一旦上述問題被逐一解決，必將研發(fā)出安全、經(jīng)濟、高效、廣譜和特異的DC腫瘤疫苗用于臨床。目前，我們正向這方面努力，并出現(xiàn)了可喜的曙光。例如，體外制備和擴增能產(chǎn)生IL-12而不是IL-10免疫原性DC，并從腫瘤共同抗原制備不受個體MHC約束和腫瘤組織特異性限制的多肽致敏這些免疫原性DC，預(yù)期能獲得比現(xiàn)有DC疫苗更好的療效。對于消化系統(tǒng)惡性腫瘤的免疫治療，任重而道遠。

參考文獻

1 Steinman RM, Cohn ZA. Identification of a novel cell type in peripheral lymphoid organs of mice. Ⅰ. Morphology, quantitation, tissue distribution[J]. J Exp Med, 1973, 137 (5): 1142-1162.

2 Cella M, Jarrossay D, Facchetti F, et al. Plasmacytoid monocytes migrate to inflamed lymph nodes and produce large amounts of type Ⅰ interferon[J]. Nat Med, 1999, 5 (8): 919-923.

3 Mellman I, Nussenzweig M. Retrospective. Ralph M. Steinman (1943-2011)[J]. Science, 2011, 334 (6055): 466.

4 Gao JX, Madrenas J, Zeng W, et al. CD40-deficient dendritic cells producing interleukin-10, but not interleukin-12, induce T-cell hyporesponsivenessinvitroand prevent acute allograft rejection[J]. Immunology, 1999, 98 (2): 159-170.

5 Lutz MB, Inaba K, Schuler G, et al. Still Alive and Kicking:In-Vitro-Generated GM-CSF Dendritic Cells![J]. Immunity, 2016, 44 (1): 1-2.

6 Palucka K, Banchereau J. Cancer immunotherapy via dendritic cells[J]. Nat Rev Cancer, 2012, 12 (4): 265-277.

7 Galluzzi L, Kepp O, Kroemer G. Mitochondria: master regulators of danger signalling[J]. Nat Rev Mol Cell Biol, 2012, 13 (12): 780-788.

8 Merad M, Sathe P, Helft J, et al. The dendritic cell lineage: ontogeny and function of dendritic cells and their subsets in the steady state and the inflamed setting[J]. Annu Rev Immunol, 2013, 31: 563-604.

9 Steinman RM. Decisions about dendritic cells: past, present, and future[J]. Annu Rev Immunol, 2012, 30: 1-22.

10Satpathy AT, Wu X, Albring JC, et al. Re(de)fining the dendritic cell lineage[J]. Nat Immunol, 2012, 13 (12): 1145-1154.

11Klechevsky E, Morita R, Liu M, et al. Functional specializations of human epidermal Langerhans cells and CD14+dermal dendritic cells[J]. Immunity, 2008, 29 (3): 497-510.

12Shortman K, Heath WR. The CD8+dendritic cell subset[J]. Immunol Rev, 2010, 234 (1): 18-31.

13Chen L, Calomeni E, Wen J, et al. Natural killer dendritic cells are an intermediate of developing dendritic cells[J]. J Leukoc Biol, 2007, 81 (6): 1422-1433.

14Schreiber RD, Old LJ, Smyth MJ. Cancer immunoediting: integrating immunity’s roles in cancer suppression and promotion[J]. Science, 2011, 331 (6024): 1565-1570.

15Zitvogel L, Tesniere A, Kroemer G. Cancer despite immunosurveillance: immunoselection and immuno-subversion[J]. Nat Rev Immunol, 2006, 6 (10): 715-727.

16Kroemer G, Galluzzi L, Kepp O, et al. Immunogenic cell death in cancer therapy[J]. Annu Rev Immunol, 2013, 31: 51-72.

17Zitvogel L, Galluzzi L, Smyth MJ, et al. Mechanism of action of conventional and targeted anticancer therapies: reinstating immunosurveillance[J]. Immunity, 2013, 39 (1): 74-88.

18Blattman JN, Greenberg PD. Cancer immunotherapy: a treatment for the masses[J]. Science, 2004, 305 (5681): 200-205.

19García F, Climent N, Guardo AC, et al; DCV2/MANON07-ORVACS Study Group. A dendritic cell-based vaccine elicits T cell responses associated with control of HIV-1 replication[J]. Sci Transl Med, 2013, 5(166): 166ra2.

20Gross CC, Wiendl H. Dendritic cell vaccination in autoimmune disease[J]. Curr Opin Rheumatol, 2013, 25 (2): 268-274.

21Lombardi V, Akbari O. Dendritic cell modulation as a new interventional approach for the treatment of asthma[J]. Drug News Perspect, 2009, 22 (8): 445-451.

22Errington F, Jones J, Merrick A, et al. Fusogenic membrane glycoprotein-mediated tumour cell fusion activates human dendritic cells for enhanced IL-12 production and T-cell priming[J]. Gene Ther, 2006, 13 (2): 138-149.

23Paczesny S, Beranger S, Salzmann JL, et al. Protection of mice against leukemia after vaccination with bone marrow-derived dendritic cells loaded with apoptotic leukemia cells[J]. Cancer Res, 2001, 61 (6): 2386-2389.

24Koido S, Homma S, Okamoto M, et al. Fusions between dendritic cells and whole tumor cells as anticancer vaccines[J]. Oncoimmunology, 2013, 2 (5): e24437.

25Orentas RJ, Schauer D, Bin Q, et al. Electrofusion of a weakly immunogenic neuroblastoma with dendritic cells produces a tumor vaccine[J]. Cell Immunol, 2001, 213 (1): 4-13.

26Bonifaz LC, Bonnyay DP, Charalambous A, et al.Invivotargeting of antigens to maturing dendritic cells via the DEC-205 receptor improves T cell vaccination[J]. J Exp Med, 2004, 199 (6): 815-824.

27Schreibelt G, Klinkenberg LJ, Cruz LJ, et al. The C-type lectin receptor CLEC9A mediates antigen uptake and (cross-)presentation by human blood BDCA3+myeloid dendritic cells[J]. Blood, 2012, 119 (10): 2284-2292.

28Tacken PJ, Ginter W, Berod L, et al. Targeting DC-SIGN via its neck region leads to prolonged antigen residence in early endosomes, delayed lysosomal degradation, and cross-presentation[J]. Blood, 2011, 118 (15): 4111-4119.

29Tacken PJ, Zeelenberg IS, Cruz LJ, et al. Targeted delivery of TLR ligands to human and mouse dendritic cells strongly enhances adjuvanticity[J]. Blood, 2011, 118 (26): 6836-6844.

30van Broekhoven CL, Parish CR, Demangel C, et al. Targeting dendritic cells with antigen-containing liposomes: a highly effective procedure for induction of antitumor immunity and for tumor immunotherapy[J]. Cancer Res, 2004, 64 (12): 4357-4365.

31Vacchelli E, Galluzzi L, Eggermont A, et al. Trial watch: FDA-approved Toll-like receptor agonists for cancer therapy[J]. Oncoimmunology, 2012, 1 (6): 894-907.

32Kroemer G, Zitvogel L. Can the exome and the immunome converge on the design of efficient cancer vaccines?[J]. Oncoimmunology, 2012, 1 (5): 579-580.

33Amos SM, Duong CP, Westwood JA, et al. Autoimmunity associated with immunotherapy of cancer[J]. Blood, 2011, 118 (3): 499-509.

34Koon H, Atkins M. Autoimmunity and immunotherapy for cancer[J]. N Engl J Med, 2006, 354 (7): 758-760.

35Aarntzen EH, De Vries IJ, Lesterhuis WJ, et al. Targeting CD4(+) T-helper cells improves the induction of antitumor responses in dendritic cell-based vaccination[J]. Cancer Res, 2013, 73 (1): 19-29.

36Akiyama Y, Oshita C, Kume A, et al. α-type-1 polarized dendritic cell-based vaccination in recurrent high-grade glioma: a phase Ⅰ clinical trial[J]. BMC Cancer, 2012, 12: 623.

37Phuphanich S, Wheeler CJ, Rudnick JD, et al. Phase Ⅰ trial of a multi-epitope-pulsed dendritic cell vaccine for patients with newly diagnosed glioblastoma[J]. Cancer Immunol Immunother, 2013, 62 (1): 125-135.

38Tada F, Abe M, Hirooka M, et al. Phase Ⅰ/Ⅱ study of immunotherapy using tumor antigen-pulsed dendritic cells in patients with hepatocellular carcinoma[J]. Int J Oncol, 2012, 41 (5): 1601-1609.

39Sharma A, Koldovsky U, Xu S, et al. HER-2 pulsed dendritic cell vaccine can eliminate HER-2 expression and impact ductal carcinomainsitu[J]. Cancer, 2012, 118 (17): 4354-4362.

40Fl?rcken A, Kopp J, van Lessen A, et al. Allogeneic partially HLA-matched dendritic cells pulsed with autologous tumor cell lysate as a vaccine in metastatic renal cell cancer: a clinical phase Ⅰ/Ⅱ study[J]. Hum Vaccin Immunother, 2013, 9 (6): 1217-1227.

41Cho DY, Yang WK, Lee HC, et al. Adjuvant immunotherapy with whole-cell lysate dendritic cells vaccine for glioblastoma multiforme: a phase Ⅱ clinical trial[J]. World Neurosurg, 2012, 77 (5-6): 736-744.

42Himoudi N, Wallace R, Parsley KL, et al. Lack of T-cell responses following autologous tumour lysate pulsed dendritic cell vaccination, in patients with relapsed osteosarcoma[J]. Clin Transl Oncol, 2012, 14 (4): 271-279.

43Kamigaki T, Kaneko T, Naitoh K, et al. Immunotherapy of autologous tumor lysate-loaded dendritic cell vaccines by a closed-flow electroporation system for solid tumors[J]. Anticancer Res, 2013, 33 (7): 2971-2976.

44Hunn MK, Hermans IF. Exploiting invariant NKT cells to promote T-cell responses to cancer vaccines[J]. Oncoimmunology, 2013, 2 (4): e23789.

45Hsu A, Ritchie DS, Neeson P. Are the immuno-stimulatory properties of Lenalidomide extinguished by co-administration of Dexamethasone?[J]. Oncoimmunology, 2012, 1 (3): 372-374.

46Andtbacka RH, Kaufman HL, Collichio F, et al. Talimogene Laherparepvec Improves Durable Response Rate in Patients With Advanced Melanoma[J]. J Clin Oncol, 2015, 33 (25): 2780-2788.

(2016-03-11收稿)

Advances in Research on Dendritic Cell-based Tumor Vaccine

LUHongmin1,2,LILinfeng1,GAOJianxin1.

1LaboratoryofTumorigenesisandImmunity,ClinicalStemCellResearchCenter,RenjiHospital,ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai(200127);2DepartmentofOncology,RenjiHospital,ShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai

Correspondence to: GAO Jianxin, Email: 15618820486@163.com

AbstractAlthough tumor immunotherapy has been proposed for many years, the consensus denoting it as an essential approach for fighting against cancer is reached only in recent years. Tumor immunotherapy can be categorized as active and passive ones. In order to successfully cure cancer, safe and efficient active immunotherapy is required. Dendritic cells (DCs) are not only the bridge linking innate and adaptive immunity, but also the key determinants of the quality of adaptive immunity: immunity versus immune tolerance. Therefore, the safe and efficient DC-based tumor-specific and broad-spectral tumor vaccine has an irreplaceable important position in tumor immunotherapy. Because of the high heterogeneity of DCs, the research on DC-based tumor vaccine has encountered a bottleneck. Here, we reviewed the progress in research on DC-based tumor vaccine and related problems needed to be resolved with the incorporation of our experiences.

Key wordsDendritic Cells;Cancer Vaccines;Antigens, Neoplasm

DOI:10.3969/j.issn.1008-7125.2016.05.001

*Email: luhaong-mMin@163.com

#本文通信作者，Email: 15618820486@163.com