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我國豬細(xì)小病毒病的流行現(xiàn)狀及實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)研究進(jìn)展

2016-03-27 12:52祖立闖謝金文王文秀沈志強(qiáng)
養(yǎng)豬 2016年6期
關(guān)鍵詞:細(xì)小抗體病毒

祖立闖,謝金文,王文秀,李 峰,沈志強(qiáng),

(1.山東綠都生物科技有限公司,山東 濱州 256600;2.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院,山東 濱州 256600)

我國豬細(xì)小病毒病的流行現(xiàn)狀及實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)研究進(jìn)展

祖立闖1,謝金文2,王文秀2,李 峰2,沈志強(qiáng)1,2

(1.山東綠都生物科技有限公司,山東 濱州 256600;2.山東省濱州畜牧獸醫(yī)研究院,山東 濱州 256600)

豬細(xì)小病毒?。≒orcine parvovirus infection,PPI)是由豬細(xì)小病毒(Porcine parvovirus,PPV)引起的一種病毒性傳染病,能導(dǎo)致母豬以產(chǎn)木乃伊胎、死胎、弱仔和流產(chǎn)、返情、不孕為主要特征的繁殖障礙,特別是對初產(chǎn)母豬的危害最為嚴(yán)重,目前發(fā)現(xiàn)一些皮炎、腸炎、呼吸道問題的病例也與PPV的感染有關(guān)[1]。我國于1983年首次分離到該病毒,目前呈全國性散發(fā)流行。PPV對環(huán)境的抵抗力很強(qiáng),豬場一旦感染后不易凈化消除,可能連續(xù)幾年不斷地出現(xiàn)母豬繁殖失敗,且PPV常與豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)等致病原混合感染,使其危害性大幅增加[2],每年都給養(yǎng)豬業(yè)帶來一定的經(jīng)濟(jì)損失。筆者就目前我國PPI的流行現(xiàn)狀及實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)進(jìn)行綜述,以期為我國PPI的綜合防控提供參考與借鑒。

1 流行現(xiàn)狀

趙光偉等[3]利用PCR的方法對川渝地區(qū)9個發(fā)病豬場的62份病料進(jìn)行了檢測,有3個豬場10份病料為陽性,陽性率為16.1%,表明重慶地區(qū)發(fā)病豬群中PPV是一個非常重要的致病原。余波等[4]采用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))方法對貴州省未免疫疫苗的176份豬血清進(jìn)行了抗體檢測,陽性率為14.20%,PPV感染在貴州省豬場中普遍存在。楊尚斌等[5]采用ELISA方法對大理地區(qū)58個散養(yǎng)戶未進(jìn)行疫苗免疫的243份豬血清進(jìn)行了檢測,陽性率為85.60%,表明大理地區(qū)散養(yǎng)戶PPI已經(jīng)普遍流行。范磊等[6]應(yīng)用ELISA對淮安市清浦區(qū)沒有免疫疫苗的5個鄉(xiāng)鎮(zhèn)的規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶共計133份血清樣品進(jìn)行抗體檢測,規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶陽性檢出率分別是8.99%和9.09%,個別鄉(xiāng)鎮(zhèn)陽性率高達(dá)20%,清浦區(qū)大部分鄉(xiāng)鎮(zhèn)規(guī)模豬場和散養(yǎng)戶已被PPV污染。李祥峰等[7]采用ELISA方法對楚雄州楚雄市、祿豐縣和南華縣未免疫豬群的276份樣品進(jìn)行了檢測,陽性率為56.9%,表明該地區(qū)豬群已被PPV感染。呂忠芬等[8]采用ELISA方法對會澤縣未免疫過疫苗的245份豬血清進(jìn)行了抗體檢測,陽性率為66.12%,表明會澤縣豬群中PPI已經(jīng)普遍流行。曾貴英等[9]采用ELISA方法對遵義市14個縣27個不同規(guī)模豬場未進(jìn)行疫苗免疫的1 238份豬血清進(jìn)行了檢測,陽性率為10.82%,其中大、中、小型豬場的陽性率分別為5.38%、11.20%、13.68%,表明遵義市不同規(guī)模豬場豬群中均存在PPV的感染。彭澤琴等[10]采用ELISA方法對臨滄地區(qū)未進(jìn)行疫苗免疫的25份豬血清進(jìn)行了檢測,陽性率為32.0%,表明臨滄地區(qū)存在PPV的感染。以上流行病學(xué)調(diào)查資料共同表明,PPI在國內(nèi)豬群中已流行廣泛,且在個別地區(qū)感染率較高,感染情況比較嚴(yán)峻,應(yīng)加強(qiáng)重視。

2 實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)

PPV常常與豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)、偽狂犬病病毒(PRV)、豬瘟病毒(CSFV)、豬乙型腦炎病毒(JEV)、豬鏈球菌、副豬嗜血桿菌、豬肺炎支原體等病原混合感染?;旌细腥炯又亓思膊〉膰?yán)重程度,同時也增加了PPI臨床診斷的難度,故目前對PPV感染的確診主要依靠實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)。目前,PPV常用的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)包括病毒的分離與鑒定、分子生物學(xué)和血清學(xué)診斷技術(shù)。

2.1 病毒的分離與鑒定

病毒分離鑒定方法一直是動物病毒病的經(jīng)典方法,通過易感接種細(xì)胞、觀察病變特征等進(jìn)行診斷,但該方法的試驗(yàn)周期長,操作較繁瑣,不適合快速診斷。張婉華等[11]將采集的豬木乃伊胎兒內(nèi)臟組織處理后接種ST細(xì)胞進(jìn)行病毒分離,ST細(xì)胞產(chǎn)生規(guī)律性病變,表現(xiàn)為細(xì)胞圓縮、拉網(wǎng)、灶性脫落等變化,分離毒適應(yīng)于ST細(xì)胞培養(yǎng),并可凝集豚鼠紅細(xì)胞,TCID50隨著傳代次數(shù)升高而逐漸增高,分離毒能被PPV特異性陽性血清中和,而不能被PPV陰性血清中和,分離毒對溫度、酸堿不敏感,對乙醚、氯仿等脂溶性溶劑具有較強(qiáng)的抗性,并能抵抗短時間的胰酶處理,接種豚鼠可產(chǎn)生PPV特異性抗體,證實(shí)分離毒株為PPV。

2.2 分子生物學(xué)診斷技術(shù)

2.2.1 PCR方法 PCR方法是根據(jù)目的基因設(shè)計引物,以病毒基因組DNA為模板,借助DNA聚合酶體外大量擴(kuò)增目的片段,具有簡便、迅速、特異、靈敏等優(yōu)點(diǎn),但該方法的敏感性有限,容易漏檢。鄒敏等[12]參考Gen Bank中發(fā)表的PPV VP2基因序列,應(yīng)用Primer 5.0軟件設(shè)計1對引物,經(jīng)PCR反應(yīng)條件的優(yōu)化,建立了檢測PPV的PCR方法,該方法檢測CSFV、PCV2、PRRSV、PRV均為陰性,使用該方法對215份病料進(jìn)行了檢測,檢出陽性樣品25份,陽性檢出率為11.63%,可用于PPI的診斷及流行病學(xué)監(jiān)測。

2.2.2 熒光定量PCR方法 熒光定量PCR技術(shù)是融匯PCR技術(shù)和光譜技術(shù)的一種核酸檢測技術(shù),融匯了傳統(tǒng)PCR技術(shù)靈敏、快速、特異的特點(diǎn)以及光譜技術(shù)的高敏感性和高精確定量的優(yōu)點(diǎn),但該方法對儀器設(shè)備和技術(shù)人員操作水平要求均較高。沈志強(qiáng)等[13]根據(jù)GenBank登錄的PPV VP2基因序列設(shè)計1對特異性引物,經(jīng)PCR擴(kuò)增出431 bp的目的片段,產(chǎn)物回收與pMD18-T Vector連接后轉(zhuǎn)化到基因工程菌DH5α中,提取重組質(zhì)粒,經(jīng)PCR及測序鑒定后,作為標(biāo)準(zhǔn)模板建立了檢測PPV的SYB GreenⅠ熒光定量PCR方法,該方法標(biāo)準(zhǔn)曲線循環(huán)閾值與模板濃度呈良好的線性關(guān)系,R2=0.997 6,產(chǎn)物Tm在82.3~82.9℃之間,檢測靈敏度為72.1個拷貝/μL,檢測PRRSV、JEV、CSFV、PRV、PCV2均為陰性。實(shí)時定量PCR方法具有良好的特異性、敏感性、重復(fù)性,為PPV的致病機(jī)制研究、臨床早期診斷及定量分析PPV感染程度提供了準(zhǔn)確、敏感的診斷技術(shù),是一種值得推廣的快速診斷技術(shù),可用于PPV感染的診斷和流行病學(xué)調(diào)查。

2.2.3 納米PCR方法 納米PCR是一種新型的PCR技術(shù),是在PCR緩沖液加入含有粒徑為1~100 nm的納米金屬顆粒,當(dāng)反應(yīng)時納米金屬顆粒懸浮在液體里形成納米流體,這種納米流體相對于普通流體具有更強(qiáng)的導(dǎo)熱性,高導(dǎo)熱性能夠加快溫度升高和下降的速度,使反應(yīng)體系快速達(dá)到目標(biāo)溫度,減少在非目標(biāo)溫度的停留時間,增加特異性反應(yīng)時間,從而最終達(dá)到消除非特異性擴(kuò)增,提高擴(kuò)增效率和敏感性的目的。納米PCR比普通PCR更加敏感,比熒光定量PCR更加方便快捷。崔宇超等[14]針對PPV VP2基因的保守區(qū)域設(shè)計1對擴(kuò)增472 bp片段的特異性引物,優(yōu)化反應(yīng)條件后建立了PPV納米PCR檢測方法,該方法的最低核酸檢出量為4拷貝/μL,敏感性是普通PCR的1 000倍,檢測PCV2、PRV、豬捷申病毒(PTV)、PRRSV、CSFV均為陰性,分別采用納米PCR和普通PCR對3個省份送檢的43份臨床樣品進(jìn)行了檢測,PPV陽性率分別為95%(41/43)和72%(31/43),表明該納米PCR檢測方法具有更高的敏感性,是一種高效的檢測手段,適用于PPV低含量臨床樣品的檢測,可以應(yīng)用于PPV感染的早期診斷。

2.2.4 LAMP方法 環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增方法(LAMP)是2000年以后發(fā)展起來的一種新型核酸擴(kuò)增新技術(shù),其依賴于能夠識別靶DNA上6個特定區(qū)域的4條引物和一種具有鏈置換活性的DNA聚合酶,在恒溫條件下擴(kuò)增核酸,能從僅相差一個核苷酸的基因標(biāo)本中找出相應(yīng)靶序列進(jìn)行擴(kuò)增,根據(jù)擴(kuò)增與否即可判斷目的基因是否存在。LAMP只需在恒溫條件下就能完成擴(kuò)增反應(yīng),不需要特殊儀器設(shè)備,并且擴(kuò)增結(jié)果可通過反應(yīng)體系的濁度或加入染料來直觀判斷,特別適合在現(xiàn)場和基層部門應(yīng)用,但LAMP方法容易形成氣溶膠污染,造成假陽性的結(jié)果。陳星瑤等[15]根據(jù)PPV VP2基因序列設(shè)計LAMP引物,經(jīng)反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間等反應(yīng)條件的優(yōu)化,建立了檢測PPV的LAMP方法,該方法在恒溫60℃水浴鍋中作用45 min即可完成整個反應(yīng)過程,該方法檢測PCV2、PRRSV、PRV、CSFV、豬水皰病病毒(SVDV)、豬流感病毒(SIV)、口蹄疫病毒(FMDV)、豬鏈球菌均為陰性,該方法的最低檢測量為10拷貝/μL。LAMP方法為PPI的診斷提供了一種快速、便捷且特異性強(qiáng)、敏感性高的檢測方法,可用于PPI的臨床檢測,并具有非常良好的應(yīng)用前景。

2.2.5 液相芯片方法 液相芯片是一種被用于臨床診斷的新型生物芯片,該方法先用PCR將靶基因數(shù)量放大,再與探針雜交,能大大克服單項(xiàng)PCR中的假陽性和假陰性,保證了結(jié)果特異性,是一項(xiàng)突破性的生物芯片分子檢測新技術(shù),具有高通量、靈敏度高、重復(fù)性好、靈活性大的特點(diǎn)。王晶鈺等[16]依據(jù)GenBank中PPV結(jié)構(gòu)蛋白VP2基因及PCV2全基因序列,設(shè)計PPV和PCV2特異性探針、引物及探針互補(bǔ)序列,將探針與磁性微球偶聯(lián),對下游引物和探針互補(bǔ)序列標(biāo)記生物素,采用不對稱性二重PCR擴(kuò)增靶序列,將PCR產(chǎn)物與偶聯(lián)好的探針進(jìn)行雜交,用液相芯片儀進(jìn)行檢測,通過對檢測條件優(yōu)化,建立檢測PPV、PCV2兩種病毒的二重液相芯片方法,該方法對PPV基因拷貝數(shù)檢測下限為1.53×104,該方法與PPV單項(xiàng)PCR檢測結(jié)果符合率為100%,該方法可用于PPV出入境檢疫和獸醫(yī)臨床診斷。

2.3 血清學(xué)診斷技術(shù)

2.3.1 血凝和血凝抑制試驗(yàn) 豬細(xì)小病毒具有血凝性,利用病毒的這一特性可以分別建立檢測病原的血凝試驗(yàn)(HA)和檢測抗體的血凝抑制試驗(yàn)(HI)方法。HA和HI方法操作簡便、檢測快速、高通量,是基層獸醫(yī)檢測PPV抗原和抗體較為常用的方法,也是PPV最常規(guī)、最經(jīng)典的診斷方法。但HA和HI結(jié)果判定的主觀性強(qiáng),難以標(biāo)準(zhǔn)化,而且靈敏度較低、特異性不強(qiáng),在低滴度感染時難以檢出,因此只能作為輔助診斷方法。張婉華等[17]進(jìn)一步優(yōu)化了PPV HA、HI微量法試驗(yàn),比較了不同紅細(xì)胞懸液濃度、不同液體體積、不同形狀微量板對試驗(yàn)的影響,表明豚鼠紅細(xì)胞懸液濃度由原來的0.25%提高到0.50%,用50 μL體積進(jìn)行HA試驗(yàn),用25 μL體積進(jìn)行HI試驗(yàn),在“V”型微量板上的試驗(yàn)結(jié)果更清晰、更易判斷。

2.3.2 間接ELISA方法 間接ELISA方法主要用于檢測抗體,首先用特異性抗原包被固相載體,加入含待測抗體的樣品,使之與固相抗原結(jié)合,再加入酶標(biāo)記的第二抗體,使之與待測抗體結(jié)合,再加入底物顯色,顏色的深淺與標(biāo)本中待測抗體的量成正比。我國目前統(tǒng)一使用PPV滅活疫苗,滅活疫苗只能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗結(jié)構(gòu)蛋白抗體,而不能產(chǎn)生抗非結(jié)構(gòu)蛋白抗體,但自然感染的病毒卻可以同時產(chǎn)生抗結(jié)構(gòu)蛋白抗體與抗非結(jié)構(gòu)蛋白抗體,故檢測NS1非結(jié)構(gòu)蛋白的抗體可對滅活疫苗免疫豬和野毒感染豬進(jìn)行區(qū)分。劉建等[18]分別采用PPV NS1和VP2基因主要抗原區(qū)域經(jīng)原核表達(dá)后的NS1和VP2重組蛋白作為包被抗原,分別建立了檢測PPV野毒抗體的NS1-ELISA方法和檢測免疫抗體的VP2-ELISA方法,2種方法檢測PRV、CSFV、PRRSV、PCV2、JEV、FMDV等6種常見豬病病毒的陽性血清均為陰性,檢測靈敏度均為1∶12 800,批內(nèi)、批間重復(fù)性試驗(yàn)變異系數(shù)均小于10%,NS1-ELISA方法與HI的符合率為100%,VP2-ELISA方法與HI的符合率為94.7%。說明所建立的NS1-ELISA和VP2-ELISA方法均具有良好的重復(fù)性、敏感性和特異性,這兩種方法的聯(lián)合運(yùn)用,可實(shí)現(xiàn)PPV野毒感染的快速鑒別診斷和流行病學(xué)調(diào)查以及豬群免疫疫苗后的抗體水平監(jiān)測。

2.3.3 雙抗夾心ELISA方法 雙抗夾心ELISA是將特異性抗體結(jié)合到固相載體上形成固相抗體,然后和待檢血清中的相應(yīng)抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物,洗滌后再加酶標(biāo)記抗體,與免疫復(fù)合物中抗原結(jié)合形成酶標(biāo)抗體-抗原-固相抗體復(fù)合物,加底物顯色,判斷抗原含量。田莉莉等[19]以原核表達(dá)的重組VP2蛋白作為免疫原,免疫6周齡BALB/c雌鼠,取其脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞SP2/0進(jìn)行融合,經(jīng)間接ELISA方法篩選,成功獲得了能穩(wěn)定分泌抗PPV VP2蛋白的單克隆抗體,以多克隆抗體和單克隆抗體分別作為捕獲抗體和檢測抗體,通過雙抗夾心ELISA各個反應(yīng)條件的優(yōu)化,建立檢測PPV的雙抗夾心ELISA方法。該方法檢測JEV、PEDV、PRV、PRRSV、CSFV均為陰性,與RT-PCR相比較的符合率、敏感性和特異性分別為93.6%、90.9%、94.4%。雙抗夾心ELISA具有良好的重復(fù)性、敏感性和特異性,且具有快速、簡便、經(jīng)濟(jì)、安全、高通量等優(yōu)點(diǎn),可應(yīng)用于PPV感染的早期診斷,為我國PPV感染的診斷、流行病學(xué)調(diào)查等提供一種簡便、快速的高通量檢測方法。

2.3.4 IPMA方法 免疫過氧化物酶單層細(xì)胞試驗(yàn)(IPMA)是在感染病毒的多孔細(xì)胞培養(yǎng)板中加入待檢標(biāo)本,再加入標(biāo)有辣根過氧化物酶抗免疫球蛋白特異抗體,經(jīng)底物顯色后利用光學(xué)顯微鏡即可觀察結(jié)果。劉杉杉等[20]采用病毒感染細(xì)胞后固定作為檢測抗原,建立了檢測PPV血清抗體的IPMA方法,該方法中PPV種毒按照1∶100的劑量接種后48 h固定效果最佳,辣根過氧化物酶-葡萄球菌A蛋白標(biāo)記物的最適稀釋度為1∶1 000,待檢血清最適稀釋度為1∶100。該IPMA方法與PCV2、PRV、PRRSV和CSFV的參考血清無交叉反應(yīng),PPV陽性血清稀釋至1∶1 600時仍能檢出,該IPMA方法與HI和間接ELISA的符合率分別為96.0%與98.0%,對現(xiàn)地送檢的400份豬血清樣本進(jìn)行檢測,平均檢出陽性率為86.5%。該IPMA方法試驗(yàn)過程所需時間短、操作方便、性能穩(wěn)定、易于臨床推廣,并且觀察時只需普通的光學(xué)顯微鏡,適用于基層流行病學(xué)調(diào)查、臨床檢測和疫苗免疫后血清抗體的監(jiān)測。

3 小結(jié)與展望

現(xiàn)階段的流行病學(xué)調(diào)查表明,PPI在我國豬群中呈全國性、散發(fā)性、區(qū)域性流行,其感染率一直居高不下,感染情況比較嚴(yán)峻,應(yīng)加強(qiáng)重視。對于PPV的各種實(shí)驗(yàn)室檢測方法,病毒分離與鑒定試驗(yàn)周期長,不利于快速檢測。PCR操作簡單,但敏感性有限,且其擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳使用的溴化乙錠(EB)對環(huán)境具有一定的污染。LAMP方法對儀器設(shè)備要求較低,但敏感性太高,易產(chǎn)生氣溶膠污染。納米PCR提高了常規(guī)PCR方法的敏感性,但仍然沒有解決EB對環(huán)境的污染問題。熒光定量PCR方法彌補(bǔ)了常規(guī)PCR敏感性有限、不能定量以及EB對環(huán)境的污染問題,但對儀器、試劑、操作人員技術(shù)水平要求均較高,有條件的實(shí)驗(yàn)室可選擇使用。血清學(xué)檢測方法在病毒感染的早期無法檢測到抗體,具有一定的滯后性,但血清學(xué)方法操作簡單、檢測快速、高通量,可以作為大面積流行病學(xué)調(diào)查的初篩以及疫苗免疫后的抗體監(jiān)測。相信隨著研究學(xué)者對PPV研究的不斷深入,以及分子生物學(xué)與免疫學(xué)技術(shù)的進(jìn)一步完善與標(biāo)準(zhǔn)化,PPI的各種實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)必將會走向不斷成熟與完善,從而逐步提高我國PPI實(shí)驗(yàn)室診斷水平,保障我國PPI防控事業(yè)的穩(wěn)定發(fā)展。

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[19]田莉莉,李麗.豬細(xì)小病毒VP2蛋白單克隆抗體的制備及抗原捕捉ELISA方法的建立[J].畜牧與獸醫(yī),2012,44(7):14-17.

[20]劉杉杉,趙亞榮,張超范,等.豬細(xì)小病毒抗體IPMA檢測方法的建立及應(yīng)用[J].中國獸醫(yī)科學(xué),2011,41(4):387-391.

(編輯:柳青)

忽思慧:節(jié)制飲食 調(diào)和喜怒

忽思慧是元代蒙古族著名醫(yī)學(xué)家,兼通蒙、漢醫(yī)學(xué)。他撰寫了我國第一部營養(yǎng)學(xué)專著《飲膳正要》。他的養(yǎng)生觀簡介如下。

重視飲食 忽思慧指出,要饑前進(jìn)食,吃得太飽,容易造成過度飽食,易患肥胖癥及其他各種慢性病。要未渴先飲,已渴則體內(nèi)缺水嚴(yán)重,易造成飲水過多,而飲水過多則使心腎受害。要少食多餐,少餐多食損傷胃腸,又易患肥胖癥。

忽思慧認(rèn)為,早晨一定要吃好早餐;夜晚不可飽食;主張飯后及時漱口。他說:“凡食訖溫水漱口,令人無齒疾、口臭?!庇终f:“清旦鹽刷牙,平日無齒疾。”這些論述對于護(hù)牙固齒和保持口腔清潔衛(wèi)生來說,至今仍然很有參考價值。飯后或夜晚漱口刷牙,可及時清除牙縫間的食物殘?jiān)?,既能保護(hù)牙齒,又可防止口臭;漱口水用溫水特別是冬天更要用溫水而不用冷水,這對防止牙齒松動很有好處;可隔三岔五地用鹽水刷牙,對護(hù)牙固齒亦有益處。

起居有常 忽思慧說,凡人坐,必要端坐,使正其心;凡人立,必要正立,使直其身。無論做的姿勢或站的姿勢都要端正,這不但關(guān)系到一個人儀表風(fēng)度,也關(guān)系到身心健康。立不可久,久立傷骨;坐不可久,久坐傷肉;行不可久,久行傷筋;臥不可久,久臥傷氣;視不可久,久視傷血。無論站、坐、行走、睡臥、視聽,均要掌握時間,適可而止,不可過久,過久則容易招致各種損傷。凡日光射,勿凝視,損人目。不可凝望烈日,否則強(qiáng)烈的紫外線會灼傷眼睛。夜晚若亮著燈睡臥,腦垂體就難以正常分泌激素,勢必降低睡眠質(zhì)量,影響人體健康。夜晚就寢以前用溫水洗腳,即可溫暖四肢,又可使人安眠。

控制情緒 無論喜怒哀樂,均不可太過。忽思慧說,怒不可暴,怒生氣疾、惡瘡。經(jīng)常暴怒的人既會損傷正氣,又易生癰疽惡瘡。常默,元?dú)獠粋?;少思,慧濁?nèi)光;不怒,百神安暢;不惱,心地清涼。樂不可極,欲不可縱。經(jīng)常少言語而保持清靜,就不會損傷元?dú)?;不過度思考問題,則頭腦清晰,思維敏捷;不憤怒則精神安寧舒暢;不煩惱則心靜自然涼。有可喜可樂之事絕不狂喜狂樂,一切嗜欲都必須有所節(jié)制,切忌任意放縱。倘能這樣做,自然有利于身心健康和延年益壽。

古人自幼重視養(yǎng)生,忽思慧提出,養(yǎng)生保健應(yīng)從娃娃抓起,不論青少年還是中老年人,都應(yīng)當(dāng)高度重視防病健身這一重大問題,絕不可等閑視之。這一觀點(diǎn)對現(xiàn)代人養(yǎng)生保健仍有指導(dǎo)作用。

(摘自《中國中醫(yī)藥報》,2016-10-26 王東升/文)

S858.285.3

A

1002-1957(2016)06-0125-04

2016-10-31

山東省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系生豬產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)建設(shè)任務(wù)(SDAIT-08-17);海南省熱帶動物繁育與疫病研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放課題(HKL201601)

祖立闖(1981-),男,黑龍江賓縣人,助理研究員,碩士,主要從事動物疫病診斷技術(shù)研究.E-mail:zulichuang2008@126.com

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