魏紅璐，王　萍

(重慶市第五人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 400062)

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·論著·

基于WS/T 405-2012行標(biāo)的血細(xì)胞分析參考區(qū)間驗(yàn)證

魏紅璐，王萍△

(重慶市第五人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 400062)

摘要:目的探討《WS/T 405-2012 血細(xì)胞分析參考區(qū)間》(簡(jiǎn)稱WS/T 405-2012)是否適用于該實(shí)驗(yàn)室所在區(qū)域人群及實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)系統(tǒng)。方法根據(jù)《WS/T 402-2012臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定》(簡(jiǎn)稱WS/T 402-2012)與WS/T 405-2012文件要求，選擇健康參考個(gè)體40例(男、女各20例)，采用性能評(píng)價(jià)符合要求的Sysmex XN-1000全自動(dòng)血液分析儀檢測(cè)血液標(biāo)本，對(duì)WS/T 405-2012中血細(xì)胞分析項(xiàng)目的參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果參與驗(yàn)證的血細(xì)胞分析項(xiàng)目測(cè)定結(jié)果均符合WS/T 402-2012要求。結(jié)論WS/T 405-2012規(guī)定的血細(xì)胞分析參考區(qū)間可用于該實(shí)驗(yàn)室。

關(guān)鍵詞:血細(xì)胞分析；參考區(qū)間；驗(yàn)證

本室血細(xì)胞分析項(xiàng)目的參考區(qū)間一直沿用《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》(第3版)上的參考范圍或采用試劑、儀器廠家提供的參考區(qū)間，而上述范圍均不是建立在本地區(qū)人群基礎(chǔ)上的參考區(qū)間。由于年齡、性別、居住環(huán)境、民族、飲食習(xí)慣的差異，以及檢驗(yàn)方法的不同，同一檢測(cè)項(xiàng)目使用不同的檢測(cè)系統(tǒng)或不同來(lái)源的試劑都會(huì)使檢測(cè)結(jié)果不一致。目前，大多數(shù)醫(yī)院并未對(duì)所使用的參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證，而進(jìn)行了參考區(qū)間驗(yàn)證的實(shí)驗(yàn)室多參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)相關(guān)文件要求。原衛(wèi)計(jì)委選取東北、華北、西北、華東、華南和西南6地城鄉(xiāng)居民，建立我國(guó)居民血常規(guī)項(xiàng)目的參考區(qū)間，并采用《WS/T 402-2012臨床實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)項(xiàng)目參考區(qū)間的制定》(簡(jiǎn)稱WS/T 402-2012)行標(biāo)[1]對(duì)參考區(qū)間的驗(yàn)證方法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。為了確保原衛(wèi)計(jì)委規(guī)定的參考區(qū)間適用于本實(shí)驗(yàn)室，本研究按照行標(biāo)要求對(duì)血細(xì)胞分析參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證，現(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源2013年7月12～15日于本院進(jìn)行健康體檢并取得知情同意者，向其發(fā)放健康調(diào)查表，根據(jù)WS/T 402-2012標(biāo)準(zhǔn)[1]篩選出符合以下條件的人群：(1)年齡、性別等信息全面；(2)近期無(wú)就醫(yī)治療或住院史，未接受手術(shù)，未服藥，未輸血；(3)無(wú)出血史(包括牙齦出血、血尿等)；(4)無(wú)以下各種疾病如消化系統(tǒng)疾病(肝硬化、肝炎、消化性潰瘍、慢性腹瀉、炎性腸炎等)、慢性感染(結(jié)核、梅毒等)、腎病、風(fēng)濕性疾病、代謝和營(yíng)養(yǎng)相關(guān)疾病(糖尿病)、甲狀腺疾病、血液系統(tǒng)疾病(白血病、貧血)、腫瘤、高血壓等；(5)無(wú)特殊飲食；(6)無(wú)消瘦、營(yíng)養(yǎng)不良；(7)定期運(yùn)動(dòng)；(8)無(wú)吸煙、飲酒嗜好；(9)女性未處于妊娠、月經(jīng)及哺乳期，并且記錄采血情況，要求采血順利，血液標(biāo)本采集后在2 h內(nèi)檢測(cè)完畢。

1.2儀器與試劑日本Sysmex XN-1000全自動(dòng)血液分析儀(簡(jiǎn)稱XN-1000)及原裝進(jìn)口配套試劑，質(zhì)控品由四川新成生物科技有限責(zé)任公司提供，乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝靜脈真空采血管。

1.3方法

1.3.1實(shí)驗(yàn)前儀器準(zhǔn)備對(duì)XN-1000進(jìn)行校準(zhǔn)，性能驗(yàn)證后各項(xiàng)參數(shù)均達(dá)標(biāo)，最近一次室間質(zhì)評(píng)結(jié)果合格，實(shí)驗(yàn)當(dāng)天室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果良好。

1.3.2參考人群數(shù)量和年齡分布根據(jù)《WS/T 405-2012 血細(xì)胞分析參考區(qū)間》(簡(jiǎn)稱WS/T 405-2012)標(biāo)準(zhǔn)[2]給出的參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證。男女使用相同參考區(qū)間的項(xiàng)目選取男、女受試者各10例，年齡23～74歲；男女使用不同參考區(qū)間的項(xiàng)目，選取男、女各20例，男性年齡24～77歲，女性年齡22～74歲。

1.3.3觀察項(xiàng)目白細(xì)胞(WBC)計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞(RBC)計(jì)數(shù)、血紅蛋白(Hb)、血細(xì)胞比容(Hct)、血小板(PLT)計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞(N)絕對(duì)值與百分比、淋巴細(xì)胞(L)絕對(duì)值與百分比、嗜酸性粒細(xì)胞(E)絕對(duì)值與百分比、嗜堿性粒細(xì)胞(B)絕對(duì)值與百分比、單核細(xì)胞(M)絕對(duì)值與百分比、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理首先對(duì)驗(yàn)證數(shù)據(jù)進(jìn)行離群值判斷，按照Dixon方法剔除各組離群值；如剔除離群值后樣本量不足，需補(bǔ)足，補(bǔ)足后再進(jìn)行離群值判斷，直到滿足要求。然后將數(shù)據(jù)與需驗(yàn)證參考區(qū)間進(jìn)行比較，若落在參考限外的測(cè)定值不超過(guò)2個(gè)，則該參考區(qū)間可以使用；若超過(guò)2個(gè)測(cè)定值在參考限外，則重新收集標(biāo)本進(jìn)行上述驗(yàn)證過(guò)程。方法學(xué)統(tǒng)計(jì)使用Excel2003軟件。

2結(jié)果

2.1XN-1000的性能評(píng)價(jià)該儀器WBC、RBC、Hb、Hct、PLT的不精密度、攜帶污染率及線性范圍均符合儀器廠家標(biāo)準(zhǔn)。見表1。

表1　　XN-1000的性能評(píng)價(jià)

2.2各血細(xì)胞分析項(xiàng)目驗(yàn)證結(jié)果各項(xiàng)血細(xì)胞分析項(xiàng)目測(cè)定值超出參考區(qū)間的個(gè)數(shù)均未超過(guò)2，其中WBC計(jì)數(shù)、N絕對(duì)值、E絕對(duì)值、N百分比、L百分比、E百分比、B百分比、M百分比、PLT計(jì)數(shù)、MCV、MCH、MCHC、女性RBC計(jì)數(shù)、男女Hb及女性Hct均無(wú)超出參考區(qū)間的測(cè)定值，L絕對(duì)值、B絕對(duì)值、M絕對(duì)值、男性RBC計(jì)數(shù)超出參考區(qū)間的測(cè)定值個(gè)數(shù)均為1，男性Hct超出參考區(qū)間的測(cè)定值個(gè)數(shù)為2。各血細(xì)胞分析項(xiàng)目的新標(biāo)準(zhǔn)參考區(qū)間均可用于本實(shí)驗(yàn)室。各項(xiàng)指標(biāo)受試者檢測(cè)結(jié)果，見表2～4(見《國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志》網(wǎng)站主頁(yè)“論文附件”)；各血細(xì)胞分析項(xiàng)目參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果，見表5。

表5　　各血細(xì)胞分析項(xiàng)目參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

續(xù)表5　　各血細(xì)胞分析項(xiàng)目參考區(qū)間驗(yàn)證結(jié)果

3討論

本次參考區(qū)間驗(yàn)證選取的參考人群年齡范圍為20～80歲，每10歲選取兩個(gè)健康體檢者納入驗(yàn)證人群，結(jié)果顯示原衛(wèi)計(jì)委發(fā)布的血細(xì)胞分析項(xiàng)目參考區(qū)間能夠用于本實(shí)驗(yàn)室。但是，由于RBC計(jì)數(shù)和Hb的參考區(qū)間與之前的標(biāo)準(zhǔn)已不同，因此在臨床應(yīng)用上如輸血指標(biāo)、貧血程度判斷指標(biāo)等是否需要修改還需要進(jìn)一步的探討。此外，特殊人群如孕婦、各年齡段兒童的參考區(qū)間也需要進(jìn)一步制訂。

在本次參考區(qū)間驗(yàn)證過(guò)程中，筆者開始發(fā)現(xiàn)本實(shí)驗(yàn)室男性MCHC參考區(qū)間無(wú)法通過(guò)驗(yàn)證，但是RBC計(jì)數(shù)、Hb、Hct、MCV、MCH等RBC相關(guān)項(xiàng)目的參考區(qū)間都能通過(guò)驗(yàn)證。因此，筆者將男性MCHC的均值與原衛(wèi)計(jì)委給定參考區(qū)間的中位數(shù)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)男性MCHC的均值遠(yuǎn)高于參考區(qū)間中位數(shù)，由于選取參考人群樣本量較小(20例)，于是筆者回顧了實(shí)驗(yàn)室近一個(gè)月參與體檢的男性MCHC測(cè)定值，發(fā)現(xiàn)超過(guò)20%的男性MCHC值在參考區(qū)間的上限。而本次參考區(qū)間驗(yàn)證前已對(duì)用于參考區(qū)間驗(yàn)證的儀器進(jìn)行了校準(zhǔn)及性能評(píng)價(jià)，且在性能評(píng)價(jià)符合要求后進(jìn)行參考區(qū)間驗(yàn)證試驗(yàn)，因此筆者認(rèn)為儀器性能符合要求，考慮是儀器校準(zhǔn)問(wèn)題。由于MCHC是計(jì)算值，Hb與RBC共同影響下可導(dǎo)致MCHC測(cè)定值較大的偏差，于是對(duì)儀器進(jìn)行重新調(diào)試，糾正了儀器出廠后一般不需要修改的參數(shù)值，經(jīng)調(diào)試校準(zhǔn)后再重新進(jìn)行參考區(qū)間驗(yàn)證，結(jié)果MCHC參考區(qū)間通過(guò)驗(yàn)證。通過(guò)本次參考區(qū)間的驗(yàn)證，發(fā)現(xiàn)并解決了本實(shí)驗(yàn)室在平時(shí)標(biāo)本檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)MCHC結(jié)果偏高的問(wèn)題，在儀器處于正常狀態(tài)和標(biāo)本采集方法正確的情況下，本地區(qū)人群的PLT參考區(qū)間也能順利通過(guò)驗(yàn)證，說(shuō)明判斷本地區(qū)PLT普遍偏低的現(xiàn)象是有誤的。本次驗(yàn)證試驗(yàn)表明，在做參考區(qū)間驗(yàn)證試驗(yàn)的過(guò)程中若發(fā)現(xiàn)參考區(qū)間不合適，并不要盲目地認(rèn)為此參考區(qū)間不適用于本實(shí)驗(yàn)室或者不采取措施馬上重新收集參考人群標(biāo)本進(jìn)行重新驗(yàn)證，應(yīng)該檢查儀器的校準(zhǔn)記錄與性能評(píng)價(jià)結(jié)果，查看是否是因?yàn)闇?zhǔn)確度的偏移或者儀器本身原因?qū)е聟⒖紖^(qū)間驗(yàn)證無(wú)法通過(guò)，再重新收集標(biāo)本進(jìn)行驗(yàn)證。

生物參考區(qū)間是醫(yī)生判斷患者正常和出現(xiàn)異常的參考標(biāo)準(zhǔn)，建立合適的參考區(qū)間對(duì)臨床判斷機(jī)體健康與否具有重要意義。但是，按照國(guó)際臨床化學(xué)協(xié)會(huì)提出的建立實(shí)驗(yàn)室生物參考區(qū)間的方法建立各實(shí)驗(yàn)室的參考區(qū)間又存在客觀難度[3]，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室的每個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目及不同檢測(cè)系統(tǒng)分別建立參考區(qū)間并不現(xiàn)實(shí)，根據(jù)NCCLS C28-A2文件[4]及WS/T 402/2012文件[1]的要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室參考區(qū)間驗(yàn)證，更加方便實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目的開展。雖然原衛(wèi)計(jì)委針對(duì)我國(guó)人群建立了各檢測(cè)項(xiàng)目相應(yīng)的參考區(qū)間，形成WS/T 405/2012標(biāo)準(zhǔn)[2]，但是由于各地氣候、海拔、民族、飲食存在差異，加上各實(shí)驗(yàn)室使用儀器廠家不同，在此種情況下，實(shí)驗(yàn)室也有必要對(duì)標(biāo)準(zhǔn)中的參考區(qū)間進(jìn)行驗(yàn)證，以判斷該參考區(qū)間是否能夠用于本地區(qū)人群。

參考文獻(xiàn)

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Validation for reference intervals of blood cell analysis based on WS/T 405-2012

WeiHonglu，WangPing△

(DeparementofClinicalLaboratory,theFifthPeople′sHospitalofChongqingCity,Chongqing400062,China)

Abstract:ObjectiveTo explore whether or not the WS/T 405-2012 reference intervals for blood cell analysis(WS/T 405-2012) was suitable for population in this area and testing systems in this laboratory.MethodsAccording to the requirements of documents WS/T 402-2012 define and determine the reference intervals in clinical laboratory(WS/T 402-2012 ) and WS/T 405-2012,40 cases of healthy individuals,including 20 male cases and 20 female cases,were selected.The blood samples were detected by using the Sysmex XN-1000 automatic blood cell analyzer which had met the requirements of performance assessment,then reference intervals of blood cell analysis from WS/T 405-2012 were verified.ResultsThe detection results of all items of blood cell analysis involved in this validation met requirements of WS/T 402-2012.ConclusionThe reference intervals of blood cell analysis from WS/T 405-2012 could be applied for this laboratory.

Key words:blood cell analysis；reference interval；validation

(收稿日期：2015-12-11)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.05.017

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)05-0621-03

作者簡(jiǎn)介：魏紅璐，女，檢驗(yàn)技師，主要從事質(zhì)量控制與標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范研究?！魍ㄓ嵶髡?，E-mail：437408052@qq.com。