劉鵬軍，石紅建，張利霞，張中平，薛志新，葛亞強(qiáng)，許麗娟(江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院，江蘇常州213002)

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胃癌組織TRAF3、TRAF6陽性表達(dá)及意義

劉鵬軍，石紅建，張利霞，張中平，薛志新，葛亞強(qiáng)，許麗娟(江蘇大學(xué)附屬武進(jìn)醫(yī)院，江蘇常州213002)

摘要：目的探討胃癌組織腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子3(TRAF3)、腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)陽性表達(dá)與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移的關(guān)系。方法選擇胃癌組織及配對癌旁正常組織標(biāo)本各87份。制作組織芯片，采用免疫組化微陣列技術(shù)檢測TRAF3、TRAF6表達(dá)，分析TRAF3、TRAF6陽性表達(dá)與胃癌浸潤、轉(zhuǎn)移的關(guān)系。結(jié)果胃癌組織TRAF3陽性表達(dá)率明顯低于癌旁正常組織(P<0.01)，TRAF6陽性表達(dá)高于癌旁正常組織(P<0.05)。TRAF3陽性表達(dá)與胃癌組織分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)，TRAF6陽性表達(dá)與胃癌組織分化程度、TNM分期有關(guān)(P均<0.05)。結(jié)論胃癌組織TRAF3陽性表達(dá)下調(diào)、TRAF6陽性表達(dá)上調(diào)，其表達(dá)變化可能參與胃癌的浸潤及轉(zhuǎn)移。

關(guān)鍵詞：胃癌；腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子；組織微陣列技術(shù)；免疫組織化學(xué)

近年來胃癌的發(fā)病率呈逐年上升趨勢。多數(shù)胃癌患者起病隱匿，就診時已有浸潤及轉(zhuǎn)移[1，2]。臨床研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤浸潤及轉(zhuǎn)移與多種因子密切相關(guān)，如腫瘤壞死因子受體家族。腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子3(TRAF3)能促進(jìn)細(xì)胞凋亡[3，4]；腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6(TRAF6)可與某些蛋白配體特異性結(jié)合，阻斷該配體誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡[5，6]。但胃癌組織TRAR3、TRAR6表達(dá)與胃癌浸潤、轉(zhuǎn)移的關(guān)系鮮見報道。為此，我們進(jìn)行了如下研究。

1資料與方法

1.1臨床資料 選擇2008年10月～2012年9月在我院行胃癌根治術(shù)的胃癌患者87例，男48例、女39例，年齡45～80歲、平均56.3歲。術(shù)前未行放化療，且未服用任何靶向治療藥物。所有患者經(jīng)術(shù)后組織病理學(xué)檢查明確診斷，TNM分期：Ⅰ、Ⅱ期40例，Ⅲ、Ⅳ期47例；有淋巴轉(zhuǎn)移44例，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移46例。

1.2胃癌組織TRAF3、TRAF6表達(dá)檢測采用組織微陣列技術(shù)。所有患者術(shù)后留取胃癌組織及癌旁正常組織，制備行HE染色的組織蠟塊，并在蠟塊上進(jìn)行靶點標(biāo)記[7]。借助Beecher(微陣列制作儀)鉆取靶點組織，并轉(zhuǎn)移至相應(yīng)蠟塊的位孔。按照試劑盒說明進(jìn)行HE染色，確定微陣列中的組織樣本與形態(tài)學(xué)特征。TRAF3、TRAF6陽性主要定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，為棕黃色染色顆粒，陽性細(xì)胞分布呈彌散性片狀或散在分布。陽性判定：結(jié)果由兩位病理科醫(yī)師采用盲法判定。根據(jù)染色面積和染色強(qiáng)度綜合計分。染色面積：<2%為0分，≥2%～<25%為1分，≥25%～<50%為2分，≥50%～<75%為3分，≥75%為4分。染色強(qiáng)度：無染色為0分，淺棕黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分?？偡?2分為陰性，≥2～<4分弱陽性，≥4～<8分為陽性，≥8～<12分為強(qiáng)陽性。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1胃癌組織及癌旁正常組織TRAF3、TRAF6陽性表達(dá)比較胃癌組織中TRAF3陽性表達(dá)率為16.1%(14/87)，癌旁正常組織為74.7%(65/87)，二者比較P<0.01；胃癌組織中TRAF6陽性表達(dá)率為69.0%(60/87)，癌旁正常組織為34.5%(30/87)，二者比較P<0.05。

2.2胃癌組織TRAF3、TRAF6陽性表達(dá)與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系TRAF3、TRAF6陽性表達(dá)與胃癌患者性別、年齡均無關(guān)。TRAF3陽性表達(dá)與組織分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P均<0.05)，TRAF6陽性表達(dá)與組織分化程度、TNM分期有關(guān)(P均<0.05)。見表1。

3討論

組織微陣列技術(shù)最早由Kononen于1998年報道，該技術(shù)具有高通量、大樣本、可信度較高等優(yōu)點[8]。目前已廣泛用于腫瘤標(biāo)記物的篩選，對腫瘤分子診斷及治療靶點定位等具有重要意義[9，10]。

表1　胃癌組織TRAF3、TRAF6陽性表達(dá)與患者

TRAF3、TRAF6均為腫瘤壞死因子受體家族成員。臨床研究表明，TRAF3、TRAF6表達(dá)變化與多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，如肝癌、膀胱癌等[11，12]。TRAF3可通過調(diào)控TNF受體家族信號通路與NF-κB信號通路，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡[13]。TRAF3還可在TLR4信號通路調(diào)控中發(fā)揮重要作用。如TRAF3可負(fù)向調(diào)控MAPK信號通路，阻斷JNK與p38磷酸化，進(jìn)而參與腫瘤細(xì)胞凋亡。此外，TRAF3還可抑制TRAF2與TRAF5介導(dǎo)的NF-κB信號通路，參與腫瘤細(xì)胞凋亡。TRAF6與某些蛋白配體特異性結(jié)合，競爭性抑制配體誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡[14]。研究表明，骨肉瘤組織TRAF6表達(dá)高于正常組織，且伴肺轉(zhuǎn)移的骨肉瘤患者較未發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者水平升高，說明TRAF6可能與骨肉瘤細(xì)胞的侵襲有關(guān)[15]。TRAF6高表達(dá)的食管癌細(xì)胞株EC109經(jīng)小分子RNA干擾技術(shù)沉默后，細(xì)胞增殖受到顯著抑制，細(xì)胞凋亡進(jìn)程加快。此外，晚期非小細(xì)胞肺癌患者TRAF6表達(dá)上調(diào)，且與化療療效呈負(fù)相關(guān)[16]。但目前TRAF3、TRAF6在胃癌組織中的表達(dá)鮮見報道，其與轉(zhuǎn)移及預(yù)后的關(guān)系也不明確。

本研究采用組織微陣列技術(shù)檢測胃癌組織TRAF3、TRAF6表達(dá)。結(jié)果顯示，與癌旁正常組織比較，胃癌組織TRAF3陽性表達(dá)下調(diào)、TRAF6陽性表達(dá)上調(diào)；TRAF3陽性表達(dá)與胃癌組織分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，TRAF6陽性表達(dá)與胃癌組織分化程度、TNM分期有關(guān)。由此推測，胃癌組織TRAF3陽性表達(dá)下調(diào)、TRAF6陽性表達(dá)上調(diào)可能參與抑制胃癌細(xì)胞凋亡，進(jìn)而促進(jìn)胃癌的浸潤及轉(zhuǎn)移。

綜上所述，胃癌組織TRAF3陽性表達(dá)下調(diào)、TRAF6陽性表達(dá)上調(diào)，其表達(dá)變化可能與胃癌浸潤及轉(zhuǎn)移有關(guān)。

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(收稿日期：2015-09-15)

中圖分類號：R735.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)08-0042-02

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2016.08.016

基金項目：常州市武進(jìn)區(qū)科技項目(WS201421)。