劉　偉，賈紹華，項　崢

(1.哈爾濱商業(yè)大學(xué) 藥學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150076；2. 生命科學(xué)與環(huán)境科學(xué)研究中心，哈爾濱商業(yè)大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150076)

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GC-MS法檢測白花敗醬草與黃花敗醬草揮發(fā)性成分

劉偉1，賈紹華1，項崢2

(1.哈爾濱商業(yè)大學(xué) 藥學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150076；2. 生命科學(xué)與環(huán)境科學(xué)研究中心，哈爾濱商業(yè)大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150076)

摘要：利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)分析白花敗醬草與黃花敗醬草中揮發(fā)性成分.采用水蒸氣蒸餾法提取敗醬草中揮發(fā)性成分，利用氣質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對成分進行分析并應(yīng)用NIST 05a.L標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫檢索鑒定各成分、采用面積歸一化法計算各成分的相對百分含量. 結(jié)果表明：黃花敗醬草揮發(fā)油中鑒定54個成分，占總量的94.56%.白花敗醬草揮發(fā)油中共鑒定36種成分，占總量的89.87%.兩種揮發(fā)油共同含有成分9種，分別為hexanal，2-Pentylfuran，benzeneacetaldehyde，α-Ionene，1,2,3,4-Tetrahydro-1,6,8-trimthylnaphthalene，1,2,3,4-Tetrahydro-1,5,7-trimethylnaphthalene，β-Damascenone，hexahydrofarnesylacetone，palmitic acid.首次對白花敗醬草與黃花敗醬草揮發(fā)性成分進行對比分析，為白花敗醬草與黃花敗醬草的鑒別、質(zhì)量評價以及揮發(fā)性成分開發(fā)利用提供基礎(chǔ).

關(guān)鍵詞：白花敗醬草；黃花敗醬草；揮發(fā)油；氣相色譜-質(zhì)譜；單萜；倍半萜.

敗醬草為敗醬科多年生草本植物白花敗醬草(Patrinia villosa (Thunb.) Juss.)和黃花敗醬草(Patrinia scabiosaefolia Fisch)的帶根全草，廣泛分布于東亞及北美地區(qū)[1].《神農(nóng)本草經(jīng)》中列為中品，味辛、苦，性寒，它具有清熱解毒，消癰排膿，活血化瘀，清心安神等功效，曾被《中國藥典》收載.在臨床上常用于闌尾炎、瘧疾等疾病的治療.現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)敗醬草具有良好的抗炎、鎮(zhèn)靜催眠、抗病毒、抗腫瘤的藥理活性，敗醬草主要含有三萜皂苷類、環(huán)烯醚萜類、揮發(fā)油類、黃酮類以及多糖類等成分[2-7].

敗醬草具有刺激性氣味，這種特殊的揮發(fā)性氣味與其揮發(fā)油的含量和種類有明顯的相關(guān)性，而有關(guān)敗醬草揮發(fā)油類成分的研究較少，文獻報道從白花敗醬草根莖鑒定5種揮發(fā)性成分，從葉中鑒定20種成分[8]，而從黃花敗醬草中則鑒定9個成分[9].由于揮發(fā)油類成分普遍具有較強的抗腫瘤、抗菌、抗氧化活性.為了深入研究這二者敗醬草的藥理活性，本文首次對比白花敗醬草與黃花敗醬草中揮發(fā)性成分進行比較.

1儀器與試藥

Agilent 6890 氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀(安捷倫科技有限公司)，F(xiàn)W- 80高速萬能粉碎機(北京市永光明醫(yī)療器械儀器廠)，CS-2001分析天平(Globe公司)

白花敗醬草購于河北新祁中藥飲品公司，黃花敗醬草購于安徽永剛中藥飲品公司.藥材經(jīng)哈爾濱商業(yè)大學(xué)吳健博士鑒定為白花敗醬草Patrinia villosa (Thunb.) Juss.和黃花敗醬草Patrinia scabiosaefolia Fisch正品.石油醚(30～60 ℃)、無水硫酸鈉購于天津科密歐化學(xué)試劑有限公司，水為純凈水.

2方 法

2.1揮發(fā)油的提取

白花敗醬與黃花敗醬分別粉碎，取粗粉30 g，精密稱定，置于500 mL圓底燒瓶中，加純凈水300 mL，浸泡30 min，參照2010版《中國藥典》揮發(fā)油測定法進行提?。哼B接揮發(fā)油提取器與回流冷凝管，加水充滿揮發(fā)油提取器的刻度部分，并溢流入圓底燒瓶時為止.置電熱套中緩緩加熱至微沸、保持3 h至測定器中油量不再增加，停止加熱，放置片刻.開啟提取器下端的活塞，將水緩緩放出，至油層上端到達刻度0線上面5 mm處為止.放置1 h以上，吸取揮發(fā)油，過無水硫酸鈉，即得.

2.2色譜與質(zhì)譜條件

色譜柱：Elite-1彈性石英毛細(xì)管柱(30 m × 0.32 mm × 0.25 mm)；進樣口溫度220 ℃；檢測器溫度250 ℃；傳輸線溫度290 ℃；載氣為氦氣，體積流量1.0 mL/min；分流比60∶1，進樣量1 μL；升溫程序柱溫55 ℃，以5 ℃/min升至265 ℃.

質(zhì)譜條件: 電離方式EI；電子轟擊能量70 eV；離子源溫度250 ℃；加速電壓34.6 V；分辨率2 500；倍增器電壓1 388 V；掃描范圍40～450 amu；掃描次數(shù)4.45次/s.

2.3數(shù)據(jù)分析

根據(jù)保留時間并應(yīng)用NIST05a.L標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫檢索鑒定各成分，采用面積歸一化法計算各成分的相對百分含量.

3結(jié)果

通過GC/MS對白花敗醬草與黃花敗醬草中揮發(fā)油類化學(xué)成分進行分析，總離子流圖見圖1、2，應(yīng)用GC-MS從黃花敗醬草揮發(fā)油中鑒定54個化學(xué)成分，占揮發(fā)油總量的94.56%.其中3-Methylbutanoic acid為最主要成分，占總量的25.11%，Palmitic acid，Hexanoic acid以及cis-Anethol也是主要成分，分別占總量的10.84%，9.25%及7.51%.此外，白花敗醬草揮發(fā)性成分中還含有8種單萜以及6種倍半萜類成分，分別占總量的12.20%和7.09%.白花敗醬草中共鑒定36種成分，占總量的89.87%.含量較高的分別是Camphogen (10.72%)，2-Methyl-6-hydroxyquinoline (7.03%)，β-Damascenone (6.75%)以及β-Ionone (6.26%).黃花敗醬草揮發(fā)性成分中共含有6種單萜類成分以及1種倍半萜類成分，分別占總量的27.87%及2.67%.

圖1　黃花敗醬草揮發(fā)性成分GC-MS總離子流圖

圖2　白花敗醬草揮發(fā)性成分GC-MS總離子流圖

根據(jù)保留時間并應(yīng)用NIST 05a.L標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜圖庫檢索鑒定各成分，并采用面積歸一化法計算各成分的相對百分含量，白花敗醬草與黃花敗醬草揮發(fā)性成分及百分含量結(jié)果見表1.

表1　白花敗醬草與黃花敗醬草揮發(fā)性成分(n=3)

續(xù)表1　白花敗醬草與黃花敗醬草揮發(fā)性成分(n=3)

4討論

白花敗醬草和黃花敗醬草是敗醬屬植物的兩個主要品種，這兩個品種曾共同作為“敗醬”而被《中國藥典》收載，具有相同的藥理作用.但是由于敗醬屬植物品種較多，鑒定較為困難，本實驗首次將白花敗醬草與黃花敗醬草中揮發(fā)油成分進行鑒定，分別鑒定出33種和51種成分，經(jīng)過進一步分析，確定9個共有成分，具體名稱及百分含量見表2.該結(jié)果對白花敗醬草與黃花敗醬草的鑒別、質(zhì)量評價以及揮發(fā)性成分開發(fā)利用奠定工作基礎(chǔ).

表2　白花敗醬草與黃花敗醬草共有成分及其百分含量 (n=3)

參考文獻：

[1]XIE Y, PENG J Y, G R FAN,etal. Chemical composition and antioxidant activity of volatiles from Patrinia Villosa Juss obtained by optimized supercritical fluid extraction [J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2008(48): 796-801.

[2]GAO L, Zhang L, LI N,etal. New triterpenoid saponins from Patrinia scabiosaefolia [J]. Carbohydrate Research, 2011(346): 2881-2885.

[3]XU J C, ZENG X Y, YU D Q. Studies on the chemical constituents of Patrinia villosa Juss[J]. Acta Pharmacologica Sinica, 1985(20): 652-656.

[4]ZHANG T, LI Q W, LI K,etal. Antitumor effects of saponin extract from Patrinia villosa (Thunb.) Juss on mice bearing U14 cervical cancer [J]. Phytotherapy Research, 2008(22): 640-645.

[5]CHIU L C M, HO T S,WONG E Y L,etal. Ethyl acetate extract of Patrinia scabiosaefolia downregulates anti-apoptotic Bcl-2/Bcl-XL expression, and induces apoptosis in human breast carcinoma MCF-7 cells independent of caspase-9 activation [J]. Journal of Ethnopharmacology, 2006(105): 263-268.

[6]PENG J Y, YANG G J, FAN G R,etal. Preparative isolation and separation of a novel and two known flavonoids from Patrinia villosa Juss by high-speed counter-current chromatography[J]. Journal of Chromatography A, 2005(1092): 235-240.

[7]TAGACHI H,YOKOKAWA Y,ENDO T. Studies on the constituents of Patrinia villosa Juss [J]. Yakugaku Zasshi, 1973(93): 607-611.

[8]黃曉冬, 黃曉昆, 李潔楨, 等. 白花敗醬葉揮發(fā)物化學(xué)成分及其DPPH自由基清除活性[J]. 食品科技, 2012, 37(10): 187-190.

[9]田智勇, 曹繼華. 黃花敗醬和異葉敗醬揮發(fā)油的研究[J]. 河南大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版, 2004, 23(1): 35-38.

Determination of volatile component from Patrinia villosa (Thunb.) Juss. and Patrinia scabiosaefolia Fisch by GC-MS

LIU Wei1, JIA Shao-hua1, XIANG Zheng2

(1.School of Pharmaceutical,Harbin University of Commerce,Harbin 150076,China;2.Research Center on Life Sciences and Environmental Sciences,Harbin University of Commerce,Harbin 150076,China)

Abstract：To analyze the chemical constituents in the essential oil of Patrinia villosa (Thunb.) Juss and Patrinia scabiosaefolia Fisch. The essential oil obtained by the hydrodistillation of the leaves of Patrinia scabiosaefolia Fisch and Patrinia villosa (Thunb.) Juss. were analyzed by a combination of capillary GC/MS analytic techniques. Results indicated that 54 components comprising 94.56% of essential oil in leaves of P. scabiosaefolia Fisch and 36 components comprising 89.87% of oil in leaves of P. Villosa Juss. were identified, respectively. 9 common constituents, hexanal, 2-Pentylfuran, benzeneacetaldehyde, α-Ionene, 1,2,3,4-Tetrahydro-1,6,8-trimthylnaphthalene, 1,2,3,4-Tetrahydro-1,5,7-trimethylnaphthalene, β-Damascenone, Hexahydrofarnesylacetone and palmitic acid, were identified in two species of Baijiangcao. This was the first report to make a comparison of essential oil constituents in two species of BaiJiangCao, which could have identification between the two leaves on essential oil ingredient, and even could give a support for quality control.

Key words：Patrinia villosa (Thunb.) Juss.; Patrinia scabiosaefolia Fisch; essential oil; GC-MS; monoterpene; sesquiterpene

中圖分類號：R284

文獻標(biāo)識碼：A

文章編號：1672-0946(2016)01-0006-05

通訊作者：項崢(1981-)，男，博士，助理研究員，研究方向：抗腫瘤中藥活性成分.

作者簡介：劉偉(1980-)，女，碩士，研究方向：中藥藥理.

基金項目：中國博士后科學(xué)基金(2013M5403)

收稿日期：2015-12-02.