鄧小紅， 胡 偉， 李桃梅， 袁萬哲

（1.中英合資伊科拜克動物保健品有限公司，上海 200063； 2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，河北 保定 071001）

一例高致病性豬藍(lán)耳病混合感染診治體會

鄧小紅1， 胡 偉1， 李桃梅1， 袁萬哲2

（1.中英合資伊科拜克動物保健品有限公司，上海 200063； 2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，河北 保定 071001）

2016年3月，筆者受江蘇某養(yǎng)豬場老板邀請，前往診斷一病例，并診治和跟蹤了3個多月?，F(xiàn)將該案例診治情況介紹如下，以便同行參考。

1 發(fā)病情況

該場600多頭斷奶仔豬在轉(zhuǎn)入保育舍15 d后陸續(xù)發(fā)病，已經(jīng)有40余頭仔豬死亡，且發(fā)病率在10%以上。病豬主要表現(xiàn)為食欲下降或廢絕、咳嗽、氣喘、體溫升高、結(jié)膜炎和淚痕斑。部分病豬后肢關(guān)節(jié)腫脹、跛行?；钾i多于發(fā)病后10 d內(nèi)死亡。發(fā)病初期曾使用泰樂菌素、阿莫西林、強(qiáng)力霉素等抗生素進(jìn)行治療，患豬癥狀只是減輕，停藥3 d后再次發(fā)病。臨床解剖3頭病豬，發(fā)現(xiàn)主要病理變化：心包積液，心臟表面有纖維素性滲出物，且與胸膜粘連（如圖1），肺間質(zhì)增寬、水腫，脾臟邊緣鋸齒狀梗死（圖2）。

圖1 絨毛心及心包積液

圖2 脾臟邊緣梗死和肺間質(zhì)增寬

腎臟表面點(diǎn)狀或片狀壞死白斑，腎盂出血，淋巴結(jié)腫大出血，腹股溝淋巴結(jié)腫大出血特別嚴(yán)重（如圖3）。

圖3 腎臟和淋巴結(jié)病變

該場場長自述：2015年6月前，保育豬生產(chǎn)成績很穩(wěn)定，保育階段死淘率在3%以下。2015年下半年豬價行情較好，老板從屠宰場收購育肥豬中選取300多頭體型好的作為后備豬并入豬場。接下來一直到2016年3月份，豬場生產(chǎn)成績一直不好，表現(xiàn)后備母豬難以配上種，返情率高，不同胎次母豬零星流產(chǎn)或產(chǎn)死胎、木乃伊胎，仔豬斷奶后轉(zhuǎn)入保育舍體溫升高、咳嗽和關(guān)節(jié)腫大，死淘率達(dá)5%以上。

2 實驗室診斷

2.1 病毒性疾病PCR/RT-PCR檢測

采取發(fā)病豬的淋巴結(jié)、脾、肺、腦及血液送往河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院做豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬圓環(huán)病毒病、豬偽狂犬病原檢測。豬藍(lán)耳病毒（PRRSV）檢測方法及標(biāo)準(zhǔn)：該實驗室以通過擴(kuò)增ORF5基因，判定是否感染PRRSV（如果樣品中有PRRSV存在則可擴(kuò)增出321 bp的片段）。豬瘟病毒（HCV）檢測方法及判定標(biāo)準(zhǔn)：該實驗室通過擴(kuò)增5'UTR基因，判定是否感染HCV（如果樣品中有HCV存在則可擴(kuò)增出186 bp的片段）。豬偽狂犬病毒（PRV）檢測方法及判定標(biāo)準(zhǔn)：該實驗室通過擴(kuò)增gH基因，判定是否感染PRV（如果樣品中有PRV存在則可擴(kuò)增出349 bp的片段）。豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）檢測方法及判定標(biāo)準(zhǔn)：該實驗室通過擴(kuò)增ORF2基因，判定是否感染PCV2（如果樣品中有PCV2存在則可擴(kuò)增出440 bp的片段）。其電泳圖和結(jié)果如（圖4）：

圖4結(jié)果顯示：豬圓環(huán)病毒2型PCR檢測陽性，豬藍(lán)耳病毒RT-PCR檢測結(jié)果陽性，豬瘟病毒RT-PCR檢測結(jié)果陰性，豬偽狂犬病毒PCR檢測為陰性。

另對豬藍(lán)耳病毒株進(jìn)行測序，與現(xiàn)有市場疫苗毒株同源性做了對比，結(jié)果如表1。

2.2 細(xì)菌分離及鑒定

無菌采取病豬的肺臟病變部分、心包積液、關(guān)節(jié)液，接種在10%兔血瓊脂培養(yǎng)基上，同時上面接種葡萄球菌，經(jīng)37 ℃培養(yǎng)24 h后，在接種病料中均發(fā)現(xiàn)在分離菌劃線周圍生長出邊緣整齊、圓形隆起、淺灰色、半透明、濕潤菌落。挑取單個菌落經(jīng)革蘭氏染色鏡檢，可見形態(tài)相同的革蘭氏陰性細(xì)小桿菌，另將單個菌落培養(yǎng)做PCR鑒定，判定該分離菌為副豬嗜血桿菌。

根據(jù)發(fā)病情況、解剖狀況、實驗室檢測情況診斷此次發(fā)病原因主要是高致病性豬藍(lán)耳病、豬圓環(huán)病毒病和副豬嗜血桿菌混合感染。

圖4 PCR檢測電泳結(jié)果

表1 該場毒株和常見毒株的同源性比對結(jié)果

圖5 豬場所送樣本的PRRSV ORF5基因的進(jìn)化樹

3 防控措施

3.1 發(fā)病保育豬

因采食量下降，前5 d采用飲水給藥：上午，每噸水添加25%泰萬菌素400 g、氟苯尼考500 g；下午，某中藥（主要成分為黃芪多糖）500 g、10%阿莫西林1 500 g。每次飲水給藥時間持續(xù)在1.5 h左右，在飲水給藥前根據(jù)環(huán)境溫度、豬群飼養(yǎng)密度停水1～2 h。5 d飲水給藥后采用拌料給藥方法：每噸料20%泰萬菌素800 g+某中藥1 000 g+10%阿莫西林2 000 g拌料；飼喂7 d。

3.2 核心豬群（公豬、母豬）

全場核心豬群做3個月保?。好繃嶏暳霞?0%泰萬菌素800 g，配合黃芪多糖或10%阿莫西林或磺胺類藥物（按使用說明），泰萬菌素3個月給藥時間分別為：第1月給藥15 d停藥15 d，第2個月給藥10 d 停藥20 d，第3個月再給藥10 d。

3.3 疫苗免疫接種

3.3.1 豬圓環(huán)病毒病疫苗

核心豬群實行普免后，妊娠母豬產(chǎn)前一個月實行接種，仔豬在21日齡和45日齡左右分別免疫接種。公豬每年普免3次，后備母豬在配種前免疫兩次，間隔時間為21 d。

3.3.2 豬藍(lán)耳病疫苗

根據(jù)此次對送樣本的PRRSV ORF5基因的進(jìn)化樹分析如圖5和同源性比較，建議豬場選擇HUN4毒株活疫苗。

豬藍(lán)耳病疫苗免疫：建議對核心豬群實行普免前，在飼料中添加20%泰萬菌素800 g/ t，連續(xù)使用7 d。避開懷孕100 d以后重胎期和妊娠40 d以內(nèi)的母豬進(jìn)行免疫。母豬實行產(chǎn)后14 d跟胎免疫接種1頭份，同時14日齡仔豬接種0.5頭份，后備種豬在70 kg和90 kg各接種1頭份。

4 診治結(jié)果與感悟

4.1 案例確診

本次診斷豬病是根據(jù)問診、臨床癥狀、解剖癥狀和實驗室診斷來確證了發(fā)病由高致病性豬藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病2型和副豬嗜血桿菌混合感染引起。

4.2 防控效果

發(fā)病的400多頭保育豬在實行上述3所述的方案后，全程僅死亡6頭，大大降低了死亡率（之前類似情況死亡率在20%以上）。方案執(zhí)行4個月后，回訪豬場，發(fā)現(xiàn)豬場配種率得到大幅度提升、流產(chǎn)和木乃伊胎幾乎消失，豬群背部出血點(diǎn)、結(jié)膜炎、淚痕斑比例大量減少，斷奶仔豬轉(zhuǎn)入保育舍發(fā)病比例也得到降低，整個保育階段成活率達(dá)到97%，基本上恢復(fù)到正常水平，說明了此次防控保健方案、疫苗選擇和免疫程序?qū)υ撠i場疾病防控是切實可行的。

4.3 豬藍(lán)耳病與豬圓環(huán)病毒病的關(guān)系

豬藍(lán)耳病與豬圓環(huán)病毒病相互作用導(dǎo)致多種機(jī)會性致病原有機(jī)可趁。豬藍(lán)耳病防控是豬場一個頭痛問題，因為該病毒易變異和重組，病毒傳播不僅可以通過水平傳播，還可以通過公豬精液、母豬胎盤垂直傳播，造成初生仔豬帶毒，產(chǎn)生免疫抑制，從而很容易遭受副豬嗜血桿菌和鏈球菌等細(xì)菌感染。另外，如果豬場豬藍(lán)耳病控制不好，豬圓環(huán)病毒病也很難控制，豬藍(lán)耳病與豬圓環(huán)病毒病兩者就好比“爛兄爛弟”或“狼狽為奸”關(guān)系，該案例就是一個很好的例證，兩者之間并發(fā)導(dǎo)致養(yǎng)豬場保育豬高死淘率。

4.4 豬場疾病綜合防控

豬場疾病防控是一個綜合的過程，該場保育豬發(fā)病后其死淘率和生產(chǎn)成績在方案執(zhí)行3個月多后恢復(fù)正常：一方面除了根據(jù)檢測結(jié)果正確地選擇豬藍(lán)耳病疫苗（該場通過測序選擇了同源性高的疫苗）、豬圓環(huán)病毒病疫苗，制定相應(yīng)免疫程序外，另一方面與泰萬菌素和黃芪多糖類藥物使用息息相關(guān)的。泰萬菌素改變巨噬細(xì)胞（豬藍(lán)耳病毒的主要靶細(xì)胞）的pH抑制豬藍(lán)耳病毒生長，本案例通過核心豬群添加泰萬菌素來阻斷豬藍(lán)耳病毒血癥，讓豬藍(lán)耳病發(fā)生垂直傳播幾率減少或停止，從而讓帶毒仔豬減少，保育豬不發(fā)病易于飼養(yǎng)。豬藍(lán)耳病毒和豬圓環(huán)病毒感染破壞了豬只免疫系統(tǒng)，黃芪多糖能提高豬體免疫力，科學(xué)使用能讓豬群免疫力得到提高，免疫系統(tǒng)得到一定修復(fù)。

4.5 阻斷外來新毒株是豬藍(lán)耳病防控的重要思路

外來毒株傳入豬場通常有以下3種方式：隨意變更疫苗帶來新毒株或新的重組毒株、引種和人為帶進(jìn)（消毒措施不嚴(yán)）。本案例通過收購?fù)鈦碛守i作為后備豬造成引種帶入；豬場育肥豬做種用是一大忌：因為育肥豬到了快出欄時候，體內(nèi)注射疫苗保護(hù)性抗體不高，很容易攜帶病原。

4.6 養(yǎng)殖場管理人員要有“養(yǎng)重于防，防重于治”的理念

平時要加強(qiáng)保溫、通風(fēng)、適度密度、環(huán)境衛(wèi)生、營養(yǎng)飼養(yǎng)管理和保健，一年3～4次定時對豬群主要疾病抗體和病原監(jiān)測，做到科學(xué)接種疫苗。

2016-11-08）