宗　婭,李馳坤,張永和

(長春中醫(yī)藥大學(xué),長春 130117)

?

參葉緩癡膠囊對東莨菪堿所致大鼠認(rèn)知功能障礙模型的影響

宗婭,李馳坤,張永和*

(長春中醫(yī)藥大學(xué),長春 130117)

摘要：目的觀察參葉緩癡膠囊對東莨菪堿所致認(rèn)知功能障礙模型動物跳臺檢測行為學(xué)指標(biāo)以及腦內(nèi)神經(jīng)介質(zhì)AChE、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影響。方法經(jīng)跳臺法篩選對電擊反應(yīng)較敏感大鼠60只供實(shí)驗(yàn)用，隨機(jī)分為6組：空白對照組、模型組、吡拉西坦陽性組(0.3 g/kg)、緩癡膠囊高、中、低劑量組(2、1、0.5 g/kg體質(zhì)量)，正常對照組,病理模型組給予同劑量蒸餾水。各組動物于實(shí)驗(yàn)前14 d開始灌胃給藥，于實(shí)驗(yàn)第12天給藥后1 h，除對照組外，其他5組分別經(jīng)腹腔注射東莨菪堿2 mg/kg,空白對照組腹腔注射等劑量生理鹽水。分別于給藥第12、13天進(jìn)行被動性跳臺實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練。第14天，動物給藥后1 h，分別進(jìn)行電刺激逃避檢測。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后處死動物，取腦組織，剝離海馬區(qū)組織。酶聯(lián)免疫法測試SOD、MDA和AChE變化情況。結(jié)果治療組跳臺躲避錯誤次數(shù)明顯減少,參葉緩癡膠囊可提高模型動物腦組織中SOD、MDA的含量，降低AchE的活力。結(jié)論參葉緩癡膠囊可以改善東莨菪堿所致認(rèn)知功能障礙,其改善作用可能與其調(diào)節(jié)腦內(nèi)與學(xué)習(xí)記憶有關(guān)的神經(jīng)介質(zhì)的含量及相關(guān)代謝調(diào)節(jié)酶活性有關(guān)。

關(guān)鍵詞：參葉緩癡膠囊;東莨菪堿;認(rèn)知功能障礙;神經(jīng)介質(zhì)

本實(shí)驗(yàn)以東莨菪堿致學(xué)習(xí)記憶障礙模型大鼠為對象，探討參葉緩癡膠囊對學(xué)習(xí)記憶能力的改善作用及其機(jī)制。東莨菪堿所致學(xué)習(xí)記憶障礙動物模型被廣泛應(yīng)用于研究學(xué)習(xí)認(rèn)知功能方面的有效藥物方面[1-4]。研究[5-9]表明，腹腔注射2～5 mg/kg東莨菪堿可造成記憶障礙模型，故本實(shí)驗(yàn)采用腹腔注射2 mg/kg東莨菪堿造模，并用跳臺實(shí)驗(yàn)法研究參葉緩癡膠囊對東莨菪堿所致大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的作用機(jī)制。

1材料

1.1動物Wistar大鼠60只，清潔級，雌雄各半，雌雄兼用，體質(zhì)量200～250 g。動物合格證號:SCXK(吉)-2008-0005，購于吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。

1.2藥品緩癡膠囊，棕色粉末(長春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)中心產(chǎn)品，批號20130901)；東莨菪堿：系德國E.Merk公司產(chǎn)品；吡拉西坦(東北制藥集團(tuán)沈陽第一制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H21021775)；SOD、MDA、AChE測試試劑盒(南京建成生物工程研究所，20140506，20140508，E30063R)。

2方法

2.1動物與分組取Wistar大鼠80只，經(jīng)跳臺法篩選，選擇活躍、對電擊反應(yīng)較敏感、逃避反應(yīng)迅速者60只供實(shí)驗(yàn)用。隨機(jī)分為6組，每組10只，空白對照組、模型組、陽性對照組、緩癡膠囊高劑量組、緩癡膠囊中劑量組、緩癡膠囊低劑量組。2.2給藥劑量與方法各組動物于實(shí)驗(yàn)前14 d開始灌胃給藥，緩癡膠囊高、中、低劑量組(2、1、0.5 g/kg體質(zhì)量)，陽性對照組:吡拉西坦0.3 g/kg體質(zhì)量(3%，10 mL/kg)，對照組，病理模型組給同劑量蒸餾水。所有動物每天上午灌胃給藥1次，于實(shí)驗(yàn)第12天，給藥后1 h，除對照組外，其他5組動物分別經(jīng)腹腔注射東莨菪堿2 mg/kg，空白對照組腹腔注射等劑量生理鹽水。然后分別于給藥第12、13天進(jìn)行被動性跳臺實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練。第14天，動物給藥后1 h，分別進(jìn)行電刺激逃避檢測。

3結(jié)果

3.1緩癡膠囊對東莨菪堿所致大鼠記憶障礙的影響見表1。

組 別劑量/(g/kg)平均錯誤反應(yīng)次數(shù)正常對照組 —0.75±0.71 模型對照組 —3.70±1.04 陽性對照組 0.31.80±1.10##高劑量組 2.02.00±1.51# 中劑量組 1.02.62±1.30# 低劑量組 0.53.00±1.06

注：與模型組比較，#P<0.05，##P<0.01

3.2緩癡膠囊對東莨菪堿所致記憶障礙大鼠腦組織SOD、MDA含量的影響見表2。

組 別劑量/(g/kg) SOD活力/(NU/mL)MDA/(NU/mL)正常對照組 —43.40±11.24 3.82±1.31 模型對照組 —31.68±7.49 5.41±1.09 陽性對照組 0.342.83±7.25##3.66±1.16# 高劑量組 2.040.19±5.01##3.84±1.23# 中劑量組 1.039.05±6.54# 4.65±1.45 低劑量組 0.533.18±8.57 4.93±1.96

注：與模型組比較，#P<0.05，##P<0.01

3.3緩癡膠囊對東莨菪堿所致記憶障礙大鼠腦組織乙酰膽堿脂酶含量的影響見表3。

組 別劑量/(g/kg)AchE/(U/mg)正常對照組 —0.498±0.114 模型對照組 —0.834±0.143 陽性對照組 0.30.508±0.127##高劑量組 2.00.519±0.138##中劑量組 1.00.561±0.154# 低劑量組 0.50.618±0.157#

注：與模型組比較，#P<0.05，##P<0.01

4小結(jié)

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，參葉緩癡膠囊可明顯改善東莨菪堿所致癡呆大鼠在跳臺實(shí)驗(yàn)中的學(xué)習(xí)記憶障礙，增強(qiáng)膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)功能，具有一定的預(yù)防與治療阿爾茨海默病的作用,其改善作用可能與其調(diào)節(jié)腦內(nèi)與學(xué)習(xí)記憶有關(guān)的神經(jīng)介質(zhì)的含量及相關(guān)代謝調(diào)節(jié)酶活性有關(guān)。

參考文獻(xiàn)：

[1]衛(wèi)敏麗.我國老年人口達(dá)1.67億[N].人民日報(bào),2010-01-30(4).

[2]DUGU M,NEUGROSCHL J,SEWELL M,et al.Review of dementia [J].Mt Sinai J Med,2003,70:45-53.

[3]BROOKMEYER R,JOHNSON E,ZIEGLER-GRAHAM K,et al.Forecasting the global burden of Alzheimer’s disease[J].Alzheimers Dement,2007(3):186-191.

[4]黃琴,王飛,沈偉艷.輕度認(rèn)知障礙的中西醫(yī)研究進(jìn)展[J].四川中醫(yī),2013,31(3):137-139.

[5]CHERTKOW H,BERGMAN H,SCHIPPER H M,et al.Assessment of suspected dementia[J].Can J Neurol Sci,2001,28(suppll):S28-S41.

[6]王湘.老年性癡呆患者護(hù)理模式的國內(nèi)外比較及其啟示[J].解放軍護(hù)理雜志,2006,23(1):44-46.

[7]SONG X,BAO M,LI D,et al.Advanced glycation in D-galactose induced mouse aging model[J].Mech Ageing Dev,1999,108(3):239-251.

[8]劉瑾,劉永偉,李巖,等.桑椹補(bǔ)腦膏對東莨菪堿所致記憶獲得障礙大鼠學(xué)習(xí)記憶能力影響[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2015,17(1):22-24.

[9]李儀奎.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,2006:254.

Scopolamine on cognitive impairment induced by disability model experiment study on effect of Shen Ye Huan Chi Capsule

ZONG Ya,LI Chikun,ZHANG Yonghe*

(Changchun University of Chinese Medicine,Changchun 130117,China)

Abstract：ObjectiveTo observe the influence of the Shen Ye Huan Chi Capsule made on animal models with cognitive dysfunction caused by scopolamine,detection platform behavioural indicators and neurotransmitter in the brain AChE,superoxide dismutase (SOD),malondialdehyde (MDA).Investigate the related mechanism of the effect of the ginseng leaf chi capsule to improve cognitive dysfunction inhibition.MethodsTo select 60 rats which is sensitive to shock response by platform method for the experiment,were randomly divided into 6 groups:Blank control group,model group,positive pyrazole rasching (0.3 g/kg) group,the Shen Ye Huan Chi Capsule high dose group of 2 g/kg body weight (20%,10 mL/kg),the Shen Ye Huan Chi Capsule middle dose group 1 g/kg body weight (10%,10 mL/kg),the Shen Ye Huan Chi Capsule low-dose group 0.5 g/kg body weight (5%,10 mL/kg).Normal control group and pathologic model group were given the same dose of distilled water.Before 14 days of the experiment,12 days in experiment 1 hour after the treatment,except the control group,the other 5 groups of animals by intraperitoneal injection of scopolamine respectively 2 mg/kg,blank control group isodose physiological saline intraperitoneal injection.Then respectively in dosing 12 and 13 days for passive training platform experiments.The 14 th days,after 1 hour of the treatment,respectively to test escape detection by electrical stimulation.After the experiment to kill animals,take brain tissue,stripping the hippocampus tissue.Enzyme-linked immunoassay testing SOD,MDA and AChE.ResultsThe wrong number decreased significantly of the treatment group platform,and Shen Ye Huan Chi Capsule can improve the model animal brain tissue SOD,MDA content,reduce AchE.ConclusionShen Ye Huan Chi Capsule shows that it can improve the cognitive dysfunction caused by scopolamine,its role to regulate the brain associated with learning and memory of the content of neurotransmitters and related metabolic regulation related enzyme activity,the detailed mechanism remains to be further in-depth study.

Keywords：Shen Ye Huan Chi Capsule;scopolamine;cognitive dysfunction;neurotransmitters

(收稿日期:2015-12-30)

文章編號：2095-6258(2016)02-0248-03

中圖分類號：R285.5

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

*通信作者：張永和，男，教授，博士研究生導(dǎo)師，電話-15948000739，電子信箱-zyh1955@163.com

作者簡介：宗婭(1988-)，女，碩士研究生，主要從事心腦血管疾病中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)研究。

基金項(xiàng)目：吉林省科技廳自然科學(xué)基金項(xiàng)目(201215161)。

DOI:10.13463/j.cnki.cczyy.2016.02.009