高紅梅

【摘要】 目的：探討自身免疫性肝病患者自身抗體檢測(cè)的臨床意義。方法：選取筆者所在醫(yī)院2013年10月-2014年9月收治的自身免疫性肝?。ˋILD）患者185例，選擇同期內(nèi)病毒性肝炎患者170例和健康體檢者80例（對(duì)照組），分別檢測(cè)ANA（抗核抗體）、AMA（抗線粒體抗體）、SMA（抗平滑肌抗體）、ANCA（抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體）和抗MPO（抗髓過(guò)氧化物酶抗體），統(tǒng)計(jì)并比較三組檢測(cè)結(jié)果差異。結(jié)果：在自身抗體檢出率上，AILD組為97.3%（180/185），病毒性肝炎組為40.6%（69/170），對(duì)照組為7.5%（6/80），AILD組遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于病毒性肝炎組和對(duì)照組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在ANA、AMA、SMA、ANCA和抗MPO抗體檢測(cè)陽(yáng)性率上，AILD組顯著高于病毒性肝炎組和對(duì)照組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：利用自身抗體檢測(cè)的方法，可有效提高自身免疫性肝病的診斷準(zhǔn)確率，對(duì)患者的預(yù)后和生存質(zhì)量有著重要意義，值得臨床推廣使用。

【關(guān)鍵詞】 自身免疫性肝病； 自身抗體檢測(cè)； 臨床意義

中圖分類號(hào) R575 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805（2016）7-0054-02

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.7.029

自身免疫性肝?。ˋILD）包括自身免疫性肝炎（AIH）、原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）和原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）三種[1]，其發(fā)病原因是患者肝臟被自身免疫系統(tǒng)攻擊后發(fā)生炎癥、肝細(xì)胞或膽管壞死引起的，在組織學(xué)變化和臨床表現(xiàn)上有相互交叉、各不相同的特點(diǎn)，增加了診斷難度[2-3]。近年來(lái)，自身抗體檢測(cè)成為自身免疫性肝病臨床診斷的重要手段，筆者選取同期的自身免疫性肝病患者185例、病毒性肝炎患者170例、健康體檢者80例為研究對(duì)象，探討自身免疫性肝病診斷中自身抗體檢測(cè)的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取筆者所在醫(yī)院2013年10月-2014年9月收治的自身免疫性肝病患者185例，選擇同期內(nèi)病毒性肝炎患者170和健康體檢者80例（對(duì)照組）。所有患者均簽署知情同意書(shū)。其中，自身免疫性肝炎（AIH）75例，男29例，女46例，年齡19～63歲，平均（45.3±2.4）歲；原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）53例，

男22例，女31例，年齡27～61歲，平均（47.5±3.2）歲；原發(fā)性硬化性膽管炎（PSC）57例，男23例，女34例，年齡16～65歲，

平均（43.6±4.4）歲，所有自身免疫性肝病患者檢查均無(wú)病毒感染指標(biāo)，肝功能出現(xiàn)異常。病毒性肝炎患者中，HAV（甲型肝炎）

44例，男19例，女25例，年齡18～62歲，平均（44.1±3.4）歲；

HBV（乙型肝炎）62例，男28例，女34例，年齡20～66歲，平均（46.3±4.5）歲；HCV（丙型肝炎）36例，男15例，女

21例，年齡19～64歲，平均（43.5±2.9）歲；HEV（戊型肝炎）

28例，男11例，女17例，年齡22～61歲，平均（43.9±5.1）歲。健康體檢者確診無(wú)任何肝病，男38例，女42例，年齡21～64歲，

平均（44.3±3.5）歲。所有自身免疫性肝病患者檢查均無(wú)病毒感染指標(biāo)，肝功能出現(xiàn)異常。不同組人員性別、年齡等一般資料上比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

（1）由專業(yè)護(hù)士人員對(duì)試驗(yàn)者進(jìn)行靜脈采血，患者保持空腹，采血量為5 ml，靜置1 h后用離心機(jī)以3000 r/min轉(zhuǎn)速離心5 min，留取血清，在-20 ℃下保存，得到檢驗(yàn)標(biāo)本。（2）在自身抗體檢測(cè)中，ANA、AMA、SMA和ANCA采取的是間接免疫熒光法，試劑盒來(lái)自德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)診斷有限公司，采用的抗原依次為Hep-2細(xì)胞和猴肝、大鼠的冰凍腎組織切片、大鼠的胃冰凍組織切片、覆有中性粒細(xì)胞生物薄片復(fù)合片。在具體檢測(cè)過(guò)程中，要先將生物載片恢復(fù)室溫，將檢測(cè)樣本進(jìn)行1∶100倍稀釋，在檢測(cè)加樣板上設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照，加樣板每一反應(yīng)區(qū)加入

25 μl稀釋后的血清，然后覆蓋生物薄片，在室溫下放置30 min，用PBS緩沖液沖洗后加入25 μl熒光素標(biāo)記二抗，再在室溫下放置30 min后再次用PBS緩沖液沖洗，最后封片用熒光顯微鏡觀察結(jié)果。參考值選取間接免疫熒光試劑診斷標(biāo)準(zhǔn)，ANA、AMA、SMA和ANCA的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)為>1∶100。（3）抗MPO抗體檢測(cè)采用的是酶聯(lián)免疫吸附法，其試劑盒也是德國(guó)歐蒙醫(yī)學(xué)診斷有限公司生產(chǎn)，在檢測(cè)操作中，需要先將樣本進(jìn)行1∶100倍稀釋，然后將100 μl的稀釋血清、陰性、陽(yáng)性對(duì)照加入相應(yīng)微孔中，在室溫條件下孵育30 min后進(jìn)行3次洗板；加入100 μl酶標(biāo)抗體后，再在室溫條件下孵育30 min并洗板3次，然后加入100 μl底物顯色，最后加入終止液終止反應(yīng)，以450 nm波長(zhǎng)進(jìn)行比色，得到結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 18.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組自身抗體檢出率及檢測(cè)陽(yáng)性率比較

在自身抗體檢出率上，AILD組為97.3%（180/185），病毒性肝炎組為40.6%（69/170），對(duì)照組為7.5%（6/80），AILD組遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于病毒性肝炎組和對(duì)照組（P<0.05）。在AILD組中，ANA、AMA、SMA、ANCA和抗MPO抗體檢測(cè)陽(yáng)性率分別為45.4%、46.5%、29.7%、49.7%、35.7%，均顯著高于病毒性肝炎組和對(duì)照組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見(jiàn)表1。而PSC的SMA檢測(cè)陽(yáng)性率與非自身免疫性肝病、對(duì)照組差別均不顯著，無(wú)法作為PSC檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，不同類型肝病自身抗體檢測(cè)陽(yáng)性率見(jiàn)表2。

3 討論

自身免疫性肝病是一種常見(jiàn)的臨床肝臟疾病，其病因、組織學(xué)變化等存在相互交叉的特點(diǎn)，在臨床上經(jīng)常發(fā)生誤診，如果采取抗病毒和增強(qiáng)免疫方法進(jìn)行治療，反而會(huì)加重患者的病情，給患者的預(yù)后和生存質(zhì)量造成嚴(yán)重威脅。近些年來(lái)，隨著醫(yī)療水平的不斷提升，對(duì)自身免疫性肝病的認(rèn)識(shí)逐步加深，自身抗體檢測(cè)成為自身免疫性肝病臨床診斷的重要措施[4-6]。

自身免疫性肝病是由于肝臟受機(jī)體免疫系統(tǒng)攻擊引起的，表現(xiàn)為肝功能異常，與病毒性肝炎在臨床癥狀上有一定的相似性，部分自身抗體在病毒性肝炎血清中也存在，僅通過(guò)常規(guī)的檢查容易被誤診為普通肝炎或肝硬化[7]。

自身免疫性肝病是一個(gè)慢性發(fā)展的過(guò)程，AIH、PBC和PSC會(huì)表現(xiàn)出不同的特點(diǎn)，其自身抗體的種類、含量也會(huì)隨著病情的進(jìn)展發(fā)生改變，根據(jù)這一特點(diǎn)，通過(guò)自身抗體檢測(cè)的方式，能夠準(zhǔn)確區(qū)分自身性免疫肝病和病毒性肝炎，并確診患者自身性免疫肝病的具體類型[8]。

在本組研究中，自身免疫性肝病組的ANA、AMA、SMA、ANCA和抗MPO抗體檢測(cè)陽(yáng)性率顯著高于非自身免疫性肝病組和對(duì)照組，而PSC的SMA檢測(cè)陽(yáng)性率與非自身免疫性肝病、對(duì)照組差別均不顯著，無(wú)法作為PSC檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。

綜上所述，利用自身抗體檢測(cè)的方法，可以有效提高自身免疫性肝病的診斷準(zhǔn)確率，對(duì)于患者的預(yù)后和生存質(zhì)量有著重要意義，值得臨床推廣使用。

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（收稿日期：2015-11-18）