趙筱倩，陸肖瑋

（江蘇省無(wú)錫市婦幼保健院乳腺病科，江蘇無(wú)錫214000）

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長(zhǎng)鏈非編碼核糖核酸牛磺酸上調(diào)基因1在乳腺癌中的表達(dá)及其對(duì)細(xì)胞增殖凋亡的影響

趙筱倩，陸肖瑋

（江蘇省無(wú)錫市婦幼保健院乳腺病科，江蘇無(wú)錫214000）

摘要：目的探討長(zhǎng)鏈非編碼核糖核酸（lncRNA）?；撬嵘险{(diào)基因1（TUG1）在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌（IDC）中的表達(dá)及其對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖及凋亡功能的影響。方法篩選2013年1月～12月該院乳腺病科行手術(shù)切除并經(jīng)病理檢查證實(shí)為IDC患者的乳腺癌及對(duì)應(yīng)癌旁組織40例。運(yùn)用熒光定量PCR（qRT-PCR）技術(shù)檢測(cè)lncRNA-TUG1在IDC患者腫瘤及癌旁組織中的表達(dá)水平，整理分析lncRNA-TUG1表達(dá)與患者臨床病例資料間的相關(guān)性；采用lncRNA-TUG1特異性siRNA轉(zhuǎn)染人乳腺癌MCF-7細(xì)胞，采用CCK-8試驗(yàn)檢測(cè)轉(zhuǎn)染siRNA后MCF-7細(xì)胞增殖能力的變化；流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染后MCF-7細(xì)胞凋亡變化。采用qRT-PCR、Western-blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后P27表達(dá)變化。結(jié)果lncRNA-TUG1在IDC組織中表達(dá)水平顯著高于對(duì)應(yīng)癌旁組織（t =4.273，P<0.001），IDC組織中l(wèi)ncRNA-TUG1高表達(dá)與腫瘤直徑增大（P=0.033）及高TNM分期（P= 0.045）顯著相關(guān)；lncRNA-TUG1特異性siRNA轉(zhuǎn)染MCF-7細(xì)胞后可顯著抑制細(xì)胞增殖（P=0.041）并上調(diào)凋亡細(xì)胞比例（t=3.206，P=0.007）；qRT-PCR及Western-blot結(jié)果證實(shí)，沉默lncRNA-TUG1后可顯著促進(jìn)P27 mRNA及蛋白表達(dá)水平（P<0.001）。結(jié)論lncRNA-TUG1在IDC組織中表達(dá)上調(diào)并與腫瘤惡性臨床病理特征有關(guān)，lncRNA-TUG1可能通過(guò)下調(diào)抑癌基因P27的表達(dá)來(lái)促進(jìn)IDC生長(zhǎng)。

關(guān)鍵詞：lncRNA-TUG1；乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌；增殖；凋亡；P27

乳腺癌是女性生殖系統(tǒng)常見(jiàn)惡性腫瘤[1]，由于其具有發(fā)病隱匿、進(jìn)展快及術(shù)后易復(fù)發(fā)的特點(diǎn)，已成為危害我國(guó)女性身體健康的重大公共衛(wèi)生問(wèn)題[2]。乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌（invasive ductal carcinoma，IDC）是乳腺癌較為常見(jiàn)且惡性程度較高的病理類(lèi)型之一[3]，對(duì)IDC細(xì)胞分子生物學(xué)特性的研究對(duì)于尋找IDC新的治療靶點(diǎn)及提高我國(guó)乳腺癌診治水平具有重要意義。

長(zhǎng)鏈非編碼核醣核酸（long noncoding ribonucleic acid，lncRNA）是一類(lèi)長(zhǎng)度大于200個(gè)核苷酸的非編碼單鏈RNA[4]。越來(lái)越多的證據(jù)表明[5]，lncRNA能夠通過(guò)多種方式調(diào)節(jié)包括腫瘤生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移及血管生成在內(nèi)的多種病理過(guò)程來(lái)促進(jìn)惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。lncRNA的異常表達(dá)及其所發(fā)揮的生物學(xué)功能是近年來(lái)乳腺癌分子病理學(xué)的研究熱點(diǎn)之一。最新研究指出，長(zhǎng)鏈非編碼核糖核酸?；撬嵘险{(diào)基因1（long noncoding ribonucleic acid taurine up-regulated gene 1，lncRNA-TUG1）在癌癥進(jìn)展過(guò)程中具有重要的調(diào)節(jié)作用[6]，而其在乳腺癌中的臨床意義及生物學(xué)功能尚不清楚。本研究通過(guò)檢測(cè)lncRNA-TUG1的表達(dá)及對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖、凋亡過(guò)程的調(diào)控作用，研究lncRNA-TUG1在乳腺癌生長(zhǎng)中的臨床意義及作用機(jī)制，為乳腺癌的分子診斷與靶向治療提供一定的理論依據(jù)。

1　資料與方法

1.1臨床標(biāo)本及主要試劑

篩選2013年1～12月于江蘇省無(wú)錫市婦幼保健院乳腺病科行手術(shù)切除并經(jīng)病理檢查證實(shí)為IDC患者的乳腺癌及對(duì)應(yīng)癌旁組織（距腫瘤邊緣>2 cm）40例。平均年齡（51.2±1.1）歲。所有患者術(shù)前均未行新輔助放化療。所得組織標(biāo)本均保存于液氮當(dāng)中。lncRNA-TUG1 siRNA及陰性對(duì)照siRNA均購(gòu)自上海吉瑪生物科技有限公司，CCK-8試劑盒及Annexin V-FITC細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自上海生工生物科技有限公司，lncRNA-TUG1引物（正向引物5'-TAGCAGTTCCCCAATCCTTG-3'；反向引物5'-TA GCAGTTCCCCAATCCTTG-3'），P27引物（正向引物5'-GATGGACGCCAGACAAGC-3'；反向引物5'-CTC CTGCCATTCGTATCTGC-3'），β-actin引物（正向引物5'-CTCCATCCTGGCCTCGCTGT-3'；反向引物5'-GCTGTCACCTTCACCGTTCC-3'）由上海生工生物科技有限公司合成，RNA提取試劑盒fast200購(gòu)自上海飛捷生物科技有限公司，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）試劑盒[PrimeScriptTMRT reagent Kit （Perfect Real Time）]及實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)（Real-time PCR）試劑盒[SYBR Premix Ex TaqTMⅡ（Tli RNaseH Plus）]均購(gòu)自寶生物工程（大連）有限公司，兔抗人P27多克隆抗體及鼠抗人β-actin單克隆抗體購(gòu)自美國(guó)CST公司，胎牛血清購(gòu)自浙江天杭生物科技有限公司，1×DMEM液體培養(yǎng)基購(gòu)自美國(guó)HyClone公司，人正常乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A及乳腺癌細(xì)胞MCF-7購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究院細(xì)胞資源中心，轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine 2000購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司，RIPA裂解液、BCA蛋白定量試劑盒及ECL試劑盒均購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)研究所。

1.2RNA提取及熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）

按fast200說(shuō)明書(shū)分別提取癌、癌旁組織及MCF-10A、MCF-7細(xì)胞中總RNA，經(jīng)紫外分光光度計(jì)檢測(cè)，OD260/OD280者為合格樣品。取500 ng總RNA為模板，按RT-PCR試劑盒說(shuō)明書(shū)配制逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系，采用Random 6及Oligo-dT雙引物法逆轉(zhuǎn)錄細(xì)胞內(nèi)lncRNA及mRNA。逆轉(zhuǎn)錄完成后，以2μl cDNA配制Real-time PCR體系，按Real-time PCR說(shuō)明書(shū)要求擴(kuò)增靶基因。

1.3細(xì)胞培養(yǎng)

MCF10A及MCF-7細(xì)胞均接種于含10%胎牛血清的1×DMEM培養(yǎng)基中，在含5%二氧化碳CO2的37℃培養(yǎng)箱中以飽和濕度進(jìn)行培養(yǎng)。待細(xì)胞穩(wěn)定傳代2～3代后，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

1.4細(xì)胞轉(zhuǎn)染

MCF-7細(xì)胞接種于6孔板中，接種密度以過(guò)夜培養(yǎng)后融合度可達(dá)50%為準(zhǔn)。依據(jù)Lipofectamine?2000說(shuō)明書(shū)，以無(wú)血清DMEM培養(yǎng)基按表1配制轉(zhuǎn)染體系，分別向MCF-7細(xì)胞中轉(zhuǎn)染lncRNA-TUG1 siRNA及NC siRNA。轉(zhuǎn)染6 h后更換為含10%胎牛血清的完全培養(yǎng)基。

表1　6孔板轉(zhuǎn)染體系（每孔）

1.5CCK-8檢測(cè)

分別收集轉(zhuǎn)染24、48及72 h后的MCF-7細(xì)胞，重懸后以2 000/孔接種于96孔板中，調(diào)整細(xì)胞懸液體積為100μl/孔，培養(yǎng)至細(xì)胞貼壁。每孔加入10μl CCK-8溶液，繼續(xù)孵育2 h，棄上清液，15 min內(nèi)用酶標(biāo)儀檢測(cè)450 nm波長(zhǎng)下的光密度（optical density，OD）值。

1.6細(xì)胞凋亡檢測(cè)

MCF-7細(xì)胞轉(zhuǎn)染72 h后使用PBS溶液洗滌細(xì)胞2次，按試劑盒說(shuō)明書(shū)要求，采用Binding buffer （1×）重懸細(xì)胞并調(diào)整細(xì)胞密度至2×105/ml，于檢測(cè)管中加入195μl細(xì)胞懸液后加入5μl Annexin V-FITC，避光孵育15 min后，使用200μl Binding buffer（1×）洗滌細(xì)胞并以1 000 r/min離心細(xì)胞3 min，再次以190μl Binding buffer（1×）溶液重懸細(xì)胞后加入10μl Propidium Iodide，避光孵育15 min后于流式細(xì)胞儀上進(jìn)行檢測(cè)。

1.7Western blot檢測(cè)

收集轉(zhuǎn)染72 h的MCF-7細(xì)胞，使用RIPA裂解液裂解細(xì)胞，BCA法測(cè)定總蛋白濃度。垂直電泳分離蛋白后，以1∶1 000稀釋的P27及β-actin一抗結(jié)合相應(yīng)目的蛋白，以1∶5 000稀釋的HRP標(biāo)記羊抗兔二抗結(jié)合一抗，ECL法發(fā)光檢測(cè)蛋白相對(duì)表達(dá)量。

1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)或ANOVA檢驗(yàn)。以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1IDC及癌旁組織中l(wèi)ncRNA-TUG1的表達(dá)差異

IDC組織中l(wèi)ncRNA-TUG1的相對(duì)表達(dá)量為（5.186±0.231），而對(duì)應(yīng)癌旁組織中l(wèi)ncRNA-TUG1表達(dá)量?jī)H為（1.644±0.047）。Student-t檢驗(yàn)證明兩組標(biāo)本間lncRNA-TUG1表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=4.273，P<0.001），見(jiàn)圖1。

表2　lncRNA-TUG1表達(dá)與乳腺癌患者臨床病理特征的關(guān)系（n=40，±s）

注：?P<0.05

項(xiàng)目　lncRNA-TUG1相對(duì)表達(dá)量　P值年齡＜50歲　5.179±0.201　0.737 ≥50歲　5.281±0.132絕經(jīng)與否已絕經(jīng)　5.193±0.111　0.868未絕經(jīng)　5.134±0.207腫瘤直徑＜2 cm　3.483±0.097　0.033?≥2 cm　6.959±0.114腫瘤數(shù)量1個(gè)　5.374±0.211　0.068 ≥2個(gè)　5.937±0.182組織學(xué)分級(jí)G1～G2　5.089±0.107　0.083 G3　5.313±0.132淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無(wú)5.043±0.037　0.057 有5.588±0.071 TNM分期無(wú)4.117±0.068　0.045?有5.883±0.120

2.2IDC組織中l(wèi)ncRNA-TUG1異常表達(dá)與患者臨床特征間的相關(guān)性

為探究IDC組織中l(wèi)ncRNA-TUG1的異常表達(dá)是否會(huì)影響IDC患者的臨床病理表現(xiàn)，筆者對(duì)表2所列的臨床病理特征進(jìn)行二分類(lèi)，并計(jì)算lncRNA-TUG1相對(duì)表達(dá)量。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，IDC組織中高表達(dá)水平的lncRNA-TUG1與腫瘤直徑增大（>2 cm）及高TNM分期（III+IV期）具有一定的相關(guān)性。提示lncRNA-TUG1在乳腺癌進(jìn)展過(guò)程中可能具有一定的生物學(xué)功能。

2.3沉默lncRNA-TUG1對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖凋亡的影響

筆者通過(guò)PCR檢測(cè)證實(shí)，乳腺癌MCF-7細(xì)胞中l(wèi)ncRNA-TUG1的相對(duì)表達(dá)量高于人正常乳腺上皮細(xì)胞MCF-10A（P<0.001），見(jiàn)圖2A，其表達(dá)差異約2.31倍。然后，筆者采用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù)，以Lipo-fectamine?2000為媒介，將lncRNA-TUG1特異性siRNA或NC siRNA轉(zhuǎn)染入MCF-7細(xì)胞中。通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)證實(shí)，lncRNA-TUG1特異性siRNA能敲低細(xì)胞內(nèi)lncRNA-TUG1的表達(dá)水平（P<0.001），見(jiàn)圖2B。

圖2　siRNA沉默MCF-7細(xì)胞lncRNA-TUG1表達(dá)

圖3　沉默lncRNA-TUG1對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖凋亡的影響

成功沉默MCF-7細(xì)胞內(nèi)lncRNA-TUG1表達(dá)后，筆者首先采用CCK-8法檢測(cè)lncRNA-TUG1表達(dá)水平變化對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖能力的影響。如圖3A所示，與NC組比較，敲低lncRNA-TUG1后可顯著抑制MCF-7細(xì)胞增殖能力（P=0.041）。如圖3B、3C所示，進(jìn)一步通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)沉默lncRNA-TUG1對(duì)MCF-7細(xì)胞的凋亡具有顯著的促進(jìn)作用[（18.435±1.377）vs（9.833±1.024），t =3.206，P=0.007]。

2.4下調(diào)lncRNA-TUG1對(duì)MCF-7細(xì)胞中P27表達(dá)的影響

P27是一種具有細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶（cyclin dependent kinases，CDKs）活性抑制作用的蛋白，能通過(guò)與細(xì)胞周期蛋白-CDK復(fù)合物結(jié)合來(lái)抑制細(xì)胞周期進(jìn)展，最終抑制細(xì)胞增殖。筆者在MCF-7細(xì)胞內(nèi)沉默lncRNA-TUG1表達(dá)后，通過(guò)qRT-PCR和Western-blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，P27 mRNA及蛋白水平均較NC組出現(xiàn)升高（P<0.001），見(jiàn)圖4A、4B，提示lncRNA-TUG1可能是通過(guò)抑制P27表達(dá)而現(xiàn)促腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)作用的。

圖4　沉默lncRNA-TUG1對(duì)MCF-7細(xì)胞P27表達(dá)的影響

3　討論

在全球，女性乳腺癌年患病人數(shù)逾百萬(wàn)。目前，無(wú)論是我國(guó)[7]還是西方發(fā)達(dá)國(guó)家[8]，乳腺癌發(fā)病率均占女性惡性腫瘤發(fā)病首位。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，生物靶向治療已成為乳腺癌重要的輔助治療手段，曲妥珠單抗（Trastuzumab，商品名赫賽汀）及帕妥珠單抗（Omnitarg，商品名奧密塔克）已在乳腺癌治療上獲得巨大成功[9-10]。因而，尋找和研究有效的的乳腺癌分子治療靶點(diǎn)對(duì)改善廣大乳腺癌患者預(yù)后具有重要意義。

目前，越來(lái)越多的證據(jù)顯示，包括微小核糖核酸（microRNA）及l(fā)ncRNA在內(nèi)的多種非編碼核糖核酸（noncoding RNA，ncRNA）對(duì)細(xì)胞的生理及病理過(guò)程具有重要影響。并且，針對(duì)ncRNA在疾病中的異常表達(dá)，具有極大的藥物研發(fā)潛力，目前已有miR-122 和miR-34 2個(gè)microRNA進(jìn)入了臨床研究階段[11]。lncRNA-TUG1是近年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的1種lncRNA，其對(duì)于組織發(fā)育及多種良惡性疾病的發(fā)展均具有調(diào)控作用，在小鼠大腦皮層發(fā)育的多個(gè)關(guān)鍵時(shí)期均能夠檢測(cè)到lncRNA-TUG1表達(dá)的顯著上調(diào)[12]。而在惡性腫瘤中，lncRNA-TUG1的異常表達(dá)具有重要的臨床治療監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)價(jià)意義，Zhang等[13]的研究表明，lncRNA-TUG1在骨肉瘤組織中的表達(dá)顯著上調(diào)且與腫瘤體積增大、術(shù)后化療抵抗及高Enneking分期顯著相關(guān)，生存分析曲線結(jié)果也證實(shí)高表達(dá)的lncRNA-TUG1預(yù)示著較短的術(shù)后無(wú)瘤生存時(shí)間和總生存時(shí)間。因而，lncRNA-TUG1表達(dá)水平的改變被認(rèn)定與腫瘤進(jìn)展、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)密切相關(guān)。

在本研究中，筆者首先在臨床組織標(biāo)本中檢測(cè)證實(shí)，lncRNA-TUG1高表達(dá)于浸潤(rùn)性乳腺導(dǎo)管癌組織當(dāng)中。以患者不同臨床病理特征為亞組的分析表明，lncRNA-TUG1高表達(dá)與IDC患者腫瘤直徑增大及高TNM分期密切相關(guān)，本研究結(jié)果與在骨肉瘤、膀胱癌[14]及腦膠質(zhì)瘤[15]中的研究結(jié)果相一致。為進(jìn)一步探討lncRNA-TUG1在乳腺癌細(xì)胞中的生物學(xué)功能，筆者應(yīng)用siRNA特異性敲低MCF-7細(xì)胞中l(wèi)ncRNA-TUG1表達(dá)，通過(guò)CCK-8試驗(yàn)及流式細(xì)胞儀分析證實(shí)沉默lncRNA-TUG1能夠抑制細(xì)胞增殖并促進(jìn)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。組織學(xué)及細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致表明，lncRNA-TUG1在乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中具有一定的促進(jìn)作用。

位于人類(lèi)染色體12p12.0～12p13.1處的P27基因，能編碼1個(gè)長(zhǎng)度為198個(gè)氨基酸的多肽。P27能分別與Cyclin E-CDK2和Cyclin D-CDK4結(jié)合形成三元復(fù)合物而抑制CDK的活性，通過(guò)阻礙細(xì)胞周期進(jìn)展而實(shí)現(xiàn)抗細(xì)胞增殖效應(yīng)[16]。研究表明[15]，多梳蛋白抑制復(fù)合物2（polycomb repressive complex 2，PRC2）能通過(guò)對(duì)P27啟動(dòng)子H3K27位點(diǎn)進(jìn)行甲基化修飾而抑制P27的表達(dá)。而肝細(xì)胞癌中的lncR-NA-TUG1能夠通過(guò)與PRC2復(fù)合物中EZH2和SUZ12兩種組分的結(jié)合而將PRC2募集至抑癌因子KLF2的啟動(dòng)子區(qū)域，進(jìn)而促進(jìn)HCC的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移[17]。綜上，筆者推測(cè)，lncRNA-TUG1的促乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)作用可能是在表觀遺傳學(xué)層面通過(guò)啟動(dòng)子區(qū)域甲基化修飾作用而抑制P27的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。為證實(shí)這一假說(shuō)，筆者通過(guò)siRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)，特異性敲低MCF-7細(xì)胞內(nèi)lncRNA-TUG1的表達(dá)，通過(guò)qRT-PCR檢測(cè)及Western-blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，沉默lncRNA-TUG1可明顯提高M(jìn)CF-7細(xì)胞內(nèi)P27的表達(dá)水平，初步探明了lncRNA-TUG1的作用機(jī)制。

綜上所述，lncRNA-TUG1在浸潤(rùn)性乳腺導(dǎo)管癌組織中表達(dá)升高。lncRNA-TUG1可能通過(guò)下調(diào)P27的表達(dá)來(lái)抑制乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。因此，lncRNA-TUG1在乳腺癌生物靶向治療中具有一定的研發(fā)價(jià)值。

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（張蕾編輯）

論著

Expression of long noncoding RNA TUG1 and its role in cell proliferation and apoptosis of breast cancer

Xiao-qian Zhao, Xiao-wei Lu
(Department of Breast Diseases, Wuxi Maternal and Child Health-Care Hospital of Jiangsu Province, Wuxi, Jiangsu 214000, China)

Abstract:Objective To study the expression of long noncoding RNA TUG1 (lncRNA-TUG1) in invasive ductal carcinoma (IDC) and its role in regulating cell proliferation and apoptosis. Methods Fourty IDC and matched tumor adjacent tissues were collected between January and December in 2013. The expression of lncRNA-TUG1 tissues were detected by qRT -PCR. The relationship between lncRNA -TUG1 and clinical features was analyzed by student-t test. lncRNA-TUG1 siRNA was transfected into MCF-7 cells. CCK-8 assay and flow cytometry (FCM) were used to measure cell proliferation and apoptosis, respectively. The expression of P27 in transformed cells was detected by qRT-PCR and Western blot. Results The expression of lncRNA-TUG1 was significantly higher in IDC tissues than in tumor adjacent tissues (P < 0.001). High expression of lncRNA-TUG1 was positively associated with large tumor diameter (P = 0.033) and advanced TNM stage (P = 0.045). Knockdown of lncRNA-TUG1 significantly suppressed cell proliferation and induced apoptosis in MCF-7 cells (P < 0.05). P27 expression was upregulated when lncRNA-TUG1 was silenced (P < 0.05). Conclusions lncRNA-TUG1 is overexpressed in IDC tissues and associated with cell growth. lncRNA-TUG1 may promote IDC progression by inhibiting P27 expression.

Keywords:lncRNA-TUG1; invasive ductal carcinoma; proliferation; apoptosis; P27

[通信作者]陸肖瑋，E-mail：zhaoxiaoq1980@126.com；Tel：13815100097

收稿日期：2015-10-30

文章編號(hào)：1005-8982（2016）08-0022-06

DOI:10.3969/j.issn.1005-8982.2016.08.005

中圖分類(lèi)號(hào)：R737.9

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A