周浩 翟一凡 胡澤章 吳光安 邵莒南 代小彥 于毅 鄭禮

摘要：以地熊蜂工蜂為試材，參照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》，測(cè)定7種溫室設(shè)施常用殺蟲劑對(duì)地熊蜂的毒力，并對(duì)其進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)性評(píng)價(jià)。結(jié)果表明，烯啶蟲胺和吡蟲啉對(duì)地熊蜂的LD50值分別為0.030mg/L和0.223mg/L，均為高毒；苦參堿和吡蚜酮對(duì)地熊蜂的LDso分別為7.721mg/L和8.376mg/L，均為中毒；啶蟲脒、螺蟲乙酯和氟苯蟲酰胺對(duì)地熊蜂的LDso≥31.371mg/L，均表現(xiàn)為低毒，其中氟苯蟲酰胺的毒性最低。因此，在設(shè)施作物上使用地熊蜂授粉時(shí)，建議禁用烯啶蟲胺和吡蟲啉，且在施用苦參堿和吡蚜酮或啶蟲脒、螺蟲乙酯和氟苯蟲酰胺時(shí)，可將地熊蜂分別搬出溫室3天或l天，來減少農(nóng)藥對(duì)地熊蜂的危害。

關(guān)鍵詞：地熊蜂；溫室設(shè)施；殺蟲劑；毒力；安全評(píng)價(jià)

中圖分類號(hào)：S894.2

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A 文章編號(hào)：1001-4942（2016）02-0098-03

熊蜂為膜翅目（Hymenoptera）蜜蜂總科（Apoidea）熊蜂屬（Bombus）昆蟲。相比較蜜蜂而言，熊蜂具有吻長(zhǎng)、飛行聲震大、花粉采集能力強(qiáng)、耐低溫和高濕環(huán)境和趨光性差等優(yōu)點(diǎn)，是公認(rèn)的溫室授粉最理想的昆蟲。熊蜂在歐美等農(nóng)業(yè)發(fā)達(dá)國(guó)家已經(jīng)被廣泛應(yīng)用，并取得了良好的生態(tài)效益和經(jīng)濟(jì)效益。我國(guó)熊蜂研究與應(yīng)用起步較晚，地熊蜂（Bombus terrestris Linnaeus）為我國(guó)從荷蘭等國(guó)引進(jìn)的品種，也是在全球范圍內(nèi)研究和商業(yè)化應(yīng)用最為成熟的熊蜂種類，應(yīng)用范圍廣，在歐洲、非洲北部、亞洲、澳洲均有應(yīng)用。隨著我國(guó)熊蜂研究的深入和相關(guān)條件的成熟，熊蜂在溫室設(shè)施內(nèi)的應(yīng)用越來越普遍。

溫室設(shè)施內(nèi)高溫、密閉小氣候環(huán)境和重茬種植使病蟲害的發(fā)生較為嚴(yán)重，其病蟲害防治主要以化學(xué)防治為主，種類繁多的化學(xué)藥劑雖然防治了病蟲害，保證了作物產(chǎn)量，卻不可避免地對(duì)溫室熊蜂的使用產(chǎn)生了一定影響。本研究選取了7種近年來溫室設(shè)施常用殺蟲劑作為研究對(duì)象，測(cè)定其對(duì)地熊蜂的毒力，以期提出合理的農(nóng)藥使用方案，為地熊蜂授粉技術(shù)在溫室設(shè)施內(nèi)的推廣提供技術(shù)指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 供試蜂種

供試蜂種為地熊蜂工蜂，于溫度（25±2）℃、相對(duì)濕度（60±10）%、黑暗條件下進(jìn)行飼養(yǎng)，飼養(yǎng)過程未接觸化學(xué)農(nóng)藥和試劑。試驗(yàn)所用地熊蜂均為個(gè)體大小基本一致的健康成年工蜂。

1.2 供試藥劑

供試藥劑為20%烯啶蟲胺水分散粒劑（北京華戎生物激素廠）、10%吡蟲啉可濕性粉劑（浙江海正化工股份有限公司）、0.5%苦參堿水劑（日本農(nóng)藥株式會(huì)社）、60%吡蚜酮水分散粒劑（北京華戎生物激素廠）、3%啶蟲脒微乳劑（昆明云大科技農(nóng)化有限公司）、22.4%螺蟲乙脂懸浮劑（拜耳作物科學(xué)公司）和20%氟苯蟲酰胺水分散粒劑（日本農(nóng)藥株式會(huì)社）。

1.3 試驗(yàn)操作

依照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》（GB/T 31270.10-2014）提出的蜜蜂急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)進(jìn)行。

1.3.1 試驗(yàn)方法將各供試殺蟲劑母液用50%（質(zhì)量濃度，蔗糖：水）蔗糖水溶液稀釋，設(shè)置成等比的5個(gè)試驗(yàn)濃度組（見表1），每組至少10只工蜂，并設(shè)不加藥劑的蔗糖水為空白對(duì)照。將挑選的工蜂引入試驗(yàn)籠中，在飼喂器中加入100μL各試驗(yàn)濃度藥液。含藥蔗糖水消耗完后，將飼喂器取出，換不含藥液的蔗糖水進(jìn)行飼喂（不限量）。各處理均設(shè)3次重復(fù)。觀察記錄處理48 h后地熊蜂死亡數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理

用Spss 19.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和計(jì)算，求出相應(yīng)的半致死劑量LDso。依照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》（GB/T 31270.10-2014）附錄《農(nóng)藥對(duì)蜜蜂毒性等級(jí)劃分》的劃分標(biāo)準(zhǔn)，按照蜜蜂急性經(jīng)口毒性半致死劑量LD50（48h），將農(nóng)藥對(duì)地熊蜂的毒性分為四個(gè)等級(jí)（劇毒LD50<0.001，高毒0.00111.0）。

2 結(jié)果與分析

2.1 7種殺蟲劑對(duì)地熊蜂的毒力

7種殺蟲劑對(duì)地熊蜂的毒力測(cè)定結(jié)果見表2。在供試的7種殺蟲劑中，烯啶蟲胺對(duì)地熊蜂工蜂的毒力最高，其次為吡蟲啉，毒力指數(shù)分別為9835.067和1323.103；苦參堿和吡蚜酮對(duì)地熊蜂工蜂的毒力較高，毒力指數(shù)分別為38.214和35.226；而啶蟲脒、螺蟲乙酯和氟苯蟲酰胺對(duì)地熊蜂工蜂的毒力較低，毒力指數(shù)<10，其中氟苯蟲酰胺的毒力最低，毒力指數(shù)僅為1.000。

2.2 風(fēng)險(xiǎn)性評(píng)價(jià)

由表2可見，參照農(nóng)藥對(duì)蜜蜂的毒性分級(jí)，烯啶蟲胺和吡蟲啉對(duì)地熊蜂48h的LDso值分別為0.030mg/L和0.223mg/L，其毒性均為高毒，對(duì)地熊蜂具有較高風(fēng)險(xiǎn)；苦參堿和吡蚜酮對(duì)地熊蜂48h的LD50分別為7.721mg/L和8.376mg/L，其毒性均為中毒，具有一定風(fēng)險(xiǎn)；啶蟲脒、螺蟲乙酯和氟苯蟲酰胺對(duì)地熊蜂48h的LD50≥31.371mg/L，其毒性均為低毒，風(fēng)險(xiǎn)性較低，其中氟苯蟲酰胺對(duì)地熊蜂的毒性最低。

3 討論與結(jié)論

烯啶蟲胺、吡蟲啉和啶蟲脒屬于新煙堿類殺蟲劑，具有較好的內(nèi)吸作用。本試驗(yàn)結(jié)果表明，烯啶蟲胺對(duì)地熊蜂的毒力最高，其次為吡蟲啉，兩者對(duì)地熊蜂均表現(xiàn)為高毒，而啶蟲脒表現(xiàn)為低毒。季守民等通過急性接觸和急性經(jīng)口試驗(yàn)表明烯啶蟲胺和吡蟲啉對(duì)意大利蜜蜂的毒性均為高毒，啶蟲脒對(duì)意大利蜜蜂的毒性為中毒。于偉麗等通過攝人試驗(yàn)以及間接接觸試驗(yàn)表明，100mg/L啶蟲脒72h內(nèi)對(duì)蜜蜂的致死率為O，對(duì)蜜蜂表現(xiàn)為低毒。啶蟲脒是一種對(duì)人類低毒的殺蟲劑，目前還沒有關(guān)于該藥“三致”和導(dǎo)致人類代謝紊亂及神經(jīng)失調(diào)方面的報(bào)道，其在土壤中的半衰期僅為0.14～2.6d，正常田間使用濃度的啶蟲脒對(duì)土壤微生物群落無明顯影響。

苦參堿為天然植物性農(nóng)藥，屬于殺蟲殺菌劑，通過麻痹害蟲中樞神經(jīng)起作用。韓志華等研究表明，苦參堿對(duì)意大利蜜蜂的毒性表現(xiàn)為中毒。本試驗(yàn)結(jié)果表明，苦參堿對(duì)地熊蜂工蜂也表現(xiàn)為中毒。

吡蚜酮屬于吡啶雜環(huán)類新型內(nèi)吸性殺蟲劑，通過拒食作用專一作用于刺吸式害蟲，對(duì)地熊蜂表現(xiàn)為中毒，國(guó)內(nèi)未見吡蚜酮對(duì)熊蜂毒性的報(bào)道。徐華強(qiáng)報(bào)道了吡蚜酮大田推薦劑量下處理赤眼蜂后，赤眼蜂寄生率和壽命均顯著低于空白對(duì)照。

螺蟲乙酯屬于季酮酸類化合物，具有雙向內(nèi)吸作用，干擾昆蟲的脂肪生物合成導(dǎo)致幼蟲死亡，并可降低成蟲的繁育能力，能有效防治多種刺吸式害蟲，對(duì)設(shè)施蔬菜上常見害蟲如蚜蟲、粉虱、薊馬等有較好防效，且其與其他殺蟲劑無交互抗性。氟苯蟲酰胺屬新型鄰苯二甲酰胺類殺蟲劑，通過激活蘭尼堿受體細(xì)胞內(nèi)鈣釋放通道，導(dǎo)致貯存鈣離子的失控性釋放起作用。鄰苯二甲酰胺類殺蟲劑為近幾年新開發(fā)的一類新型殺蟲劑，自開發(fā)以來，該類農(nóng)藥引起了農(nóng)藥界的廣泛關(guān)注，在設(shè)施作物上的使用也更頻繁。氟苯蟲酰胺為人工合成的第一個(gè)魚尼丁受體殺蟲劑，對(duì)絕大多數(shù)鱗翅目害蟲有良好的毒性。本研究表明啶蟲脒、螺蟲乙酯和氟苯蟲酰胺對(duì)地熊蜂表現(xiàn)為低毒，可代替其他高毒農(nóng)藥與地熊蜂一起在設(shè)施蔬菜上使用。

在溫室設(shè)施果蔬上使用授粉熊蜂時(shí)，根據(jù)本試驗(yàn)結(jié)果和各藥劑的安全間隔期，提出以下用藥建議：禁止使用吡蟲啉和烯啶蟲胺2種高毒農(nóng)藥；在使用苦參堿和吡蚜酮2種中毒農(nóng)藥時(shí)，將地熊蜂授粉群搬出溫室3天；在使用啶蟲脒、螺蟲乙脂和氟苯蟲酰胺3種低毒農(nóng)藥時(shí)，將地熊蜂授粉群搬出溫室1天。

本試驗(yàn)僅研究了室內(nèi)條件下7種殺蟲劑對(duì)地熊蜂的毒力，對(duì)于溫室設(shè)施內(nèi)實(shí)際使用條件下7種殺蟲劑對(duì)地熊蜂的影響還有待進(jìn)一步觀察和研究。