唐文詩(shī)

桂林市婦幼保健院新生兒科，廣西 桂林 541001

人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征嬰兒治療前后外周血miRNA水平變化及意義

唐文詩(shī)

桂林市婦幼保健院新生兒科，廣西 桂林 541001

目的 探討人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征嬰兒治療前后外周血miRNA水平變化及意義。方法 選取桂林市婦幼保健院新生兒科2013年12月-2014年12月收治的人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征嬰兒30例設(shè)為觀察組，并選擇30名健康嬰兒設(shè)為對(duì)照組。結(jié)果 治療前，觀察組的各項(xiàng)miRNA表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);治療后，觀察組中更昔洛韋敏感組的hsa-miR-433與更昔洛韋不敏感組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但hsa-miR-92、hsa-miR-96、hsa-miR-183差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);觀察組中更昔洛韋不敏感組的hsa-miR-433、hsa-miR-96較治療前均顯著下降(P<0.05)；hsa-miR-92、hsa-miR-183較治療前差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。而更昔洛韋敏感組的hsa-miR-183較治療前顯著上升，hsa-miR-433較治療前顯著下降(P<0.05)；hsa-miR-92、hsa-miR-96較治療前差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論 人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征嬰兒治療前后外周血miRNA水平出現(xiàn)變化，miRNA對(duì)肝炎綜合征嬰兒的臨床治療具有一定的指導(dǎo)意義。

肝炎綜合征；巨細(xì)胞病毒；嬰兒；miRNA

人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征是一種常見(jiàn)的嬰幼兒疾病，嚴(yán)重影響到嬰兒的生長(zhǎng)發(fā)育。近年來(lái)，一些學(xué)者研究[1-2]發(fā)現(xiàn)，人體血漿中的循環(huán)微小RNA可以作為多種疾病的分子標(biāo)記物。且有研究[3]表明，人巨細(xì)胞病毒會(huì)通過(guò)對(duì)宿主細(xì)胞某些miRNA表達(dá)的調(diào)節(jié)來(lái)實(shí)現(xiàn)潛伏感染等，導(dǎo)致一些人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征患兒臨床病情緩解困難。為此，關(guān)于miRNA與人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征嬰兒預(yù)后相關(guān)問(wèn)題成為研究的焦點(diǎn)。本研究中，我們即對(duì)人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征嬰兒治療前后外周血miRNA水平變化及意義進(jìn)行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選取桂林市婦幼保健院新生兒科2013年12月-2014年12月收治的人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征嬰兒30例設(shè)為觀察組，所有患者均經(jīng)臨床診斷確診為人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征。男16例，女14例，年齡1～3個(gè)月。選取30名健康嬰兒設(shè)為對(duì)照組，男15名，女15名，年齡1～3個(gè)月，兩組一般資料經(jīng)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 給予觀察組患者常規(guī)治療，包括常規(guī)保肝治療和更昔洛韋治療及其他對(duì)癥治療等，連續(xù)治療4周。分別在觀察組治療前和治療后抽取兩組新生兒的清晨空腹靜脈血送檢，離心處理后進(jìn)行miRNA提取，并進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄與實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)。miRNA抽提試劑盒由上海晶曠生物科技有限公司提供，miRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒由北京信諾金達(dá)生物科技有限公司提供，miRNA、實(shí)時(shí)熒光定量PCR試劑盒由武漢中幟生物科技有限公司提供，引物由廣州行知生物科技有限公司合成。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。對(duì)于符合正態(tài)分布的連續(xù)變量資料行t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 更昔洛韋治療結(jié)果 經(jīng)治療，16例患兒為更昔洛韋敏感，14例為更昔洛韋不敏感。

2.2 治療前兩組miRNA表達(dá)水平比較 治療前，觀察組的各項(xiàng)miRNA表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表1)。

2.3 治療后觀察組miRNA表達(dá)水平分析 治療后，觀察組中更昔洛韋敏感組的hsa-miR-433與更昔洛韋不敏感組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；但has-miR-92、hsa-miR-96、hsa-miR-183經(jīng)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見(jiàn)表2)。

表1 治療前兩組miRNA表達(dá)水平比較±s)Tab 1 Comparison of miRNA expression levels between two groups before treatment ±s)

注：與對(duì)照組相比，*P<0.05；與更昔洛韋敏感組相比，#P<0.05。

表2 治療后觀察組miRNA表達(dá)水平比較±s)Tab 2 Comparison of miRNA expressions levels in the observation group after treatment ±s)

2.4 治療前后觀察組miRNA表達(dá)水平分析 對(duì)觀察組中更昔洛韋敏感組、更昔洛韋不敏感組的miRNA表達(dá)水平變化情況進(jìn)行分析，可得更昔洛韋不敏感組的has-miR-433、hsa-miR-96較治療前均顯著下降(P<0.05)；hsa-miR-92、hsa-miR-183較治療前差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。而更昔洛韋敏感組的hsa-miR-183較治療前顯著上升，hsa-miR-433較治療前顯著下降(P<0.05)；hsa-miR-92、hsa-miR-96較治療前差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

3 討論

巨細(xì)胞病毒感染的特征是出現(xiàn)有典型的胞漿及核內(nèi)包涵體的巨大細(xì)胞，故名巨細(xì)胞病毒[4]。該病毒在人群中感染非常廣泛，多數(shù)感染者無(wú)臨床癥狀，但在一定條件下侵襲多個(gè)器官和系統(tǒng)，可產(chǎn)生嚴(yán)重疾病，母嬰傳播是巨細(xì)胞病毒感染引起嬰兒肝炎綜合征的主要途徑[5]。

miRNA是一類(lèi)基因表達(dá)調(diào)節(jié)物，近年來(lái)，通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，miRNA屬于轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控靶基因表達(dá)的小分子RNA[6],并可以在機(jī)體免疫調(diào)控中發(fā)揮一定的作用，多種miRNA分子都可以通過(guò)影響調(diào)控免疫細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑而對(duì)機(jī)體的免疫應(yīng)答產(chǎn)生不同的影響[7-9]。hsa-miR-433可以與野生型的主要組織相容性復(fù)合物Ⅰ類(lèi)鏈相關(guān)基因發(fā)生互補(bǔ)結(jié)合，導(dǎo)致重組人MHCⅠ類(lèi)相關(guān)基因B(MICB)表達(dá)量下降，引發(fā)自然殺傷細(xì)胞(NK)細(xì)胞毒性和免疫監(jiān)視功能的下降。本次研究結(jié)果顯示，觀察組的各項(xiàng)miRNA表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，治療后觀察組中更昔洛韋敏感組的hsa-miR-433與更昔洛韋不敏感組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但hsa-miR-92、hsa-miR-96、hsa-miR-183差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)觀察組中更昔洛韋敏感組、更昔洛韋不敏感組的miRNA表達(dá)水平變化情況進(jìn)行分析，可得更昔洛韋不敏感組的hsa-miR-433、hsa-miR-96較之治療前均顯著下降；hsa-miR-92、hsa-miR-183較治療前差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而更昔洛韋敏感組的hsa-iniR-183較治療前顯著上升，hsa-miR-433較治療前顯著下降；hsa-miR-92、hsa-miR-96較治療前差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。即提示，人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征嬰兒治療前后外周血miRNA水平會(huì)出現(xiàn)一定的變化。用藥前后更昔洛韋敏感組患兒的hsa-miR-96表達(dá)水平均高于更昔洛韋不敏感組患兒，且治療之后更昔洛韋敏感組患兒的hsa-miR-183表達(dá)也高于更昔洛韋不敏感組患兒。治療過(guò)程中，通過(guò)檢測(cè)患兒hsa-miR-96與has-miR-183的表達(dá)水平，可以更好地了解臨床治療情況。如果has-miR-96表達(dá)水平低，且更昔洛韋敏感治療中hsa-miR-183表達(dá)下降的患兒可能會(huì)出現(xiàn)病程延長(zhǎng)的情況，更昔洛韋治療無(wú)法獲得滿(mǎn)意的效果[10]。因此，臨床對(duì)肝炎綜合征嬰兒進(jìn)行治療時(shí)，可以通過(guò)對(duì)患兒miRNA的檢測(cè)來(lái)指導(dǎo)臨床治療，以更好地提高治療效果。

綜上所述，人巨細(xì)胞病毒致肝炎綜合征嬰兒治療前后外周血miRNA水平會(huì)出現(xiàn)一定的變化，臨床可以通過(guò)對(duì)患兒miRNA水平的檢測(cè)來(lái)指導(dǎo)臨床治療。

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(責(zé)任編輯：王全楚)

Changes of miRNA levels in peripheral blood before and after treatment in patients with hepatitis syndrome caused by human cytomegalovirus

TANG Wenshi

Department of Newborn Pediatrics,Guilin Maternal and Child Health Care Hospital,Guilin 541001,China

Objective To investigate the changes of miRNA levels in peripheral blood before and after treatment in patients with hepatitis syndrome caused by human cytomegalovirus. Methods Thirty infants with hepatitis syndrome were selected as observation group in Guilin Maternal and Child Health Care Hospital from Dec. 2013 to Dec. 2014,and 30 healthy infants were selected as control group. Results Before the treatment,the expression levels of the miRNA in the observation group were significantly higher than those in the control group (P<0.05). After the treatment,there was no difference in hsa-miR-433 between ganciclovir sensitive group and ganciclovir insensitive group in observation group (P>0.05),but hsa-miR-92,hsa-miR-96,and hsa-miR-183 had statistical significance (P<0.05); compared with before treatment,there were significant differences in hsa-miR-433,hsa-miR-96 in ganciclovir insensitive group of observation group after treatment (P<0.05); compared with before treatment,there were significant differences in hsa-miR-183 and hsa-miR-433 in ganciclovir sensitive group of observation group after treatment (P<0.05),but there were no significant differences in hsa-miR-92 and hsa-miR-96 in ganciclovir sensitive group of observation group after treatment (P>0.05). Conclusion The levels of miRNA in peripheral blood of patients with hepatitis syndrome caused by human cytomegalovirus may be changed,and the miRNA has certain guiding significance for the clinical treatment of hepatitis syndrome infants.

Hepatitis syndrome; Cytomegalovirus; Infant; miRNA

10.3969/j.issn.1006-5709.2016.02.016

唐文詩(shī)，主治醫(yī)師，研究方向：新生兒相關(guān)疾病。E-mail: 42345378@qq.com

R575.1

A

1006-5709(2016)02-0178-03

2015-02-04