劉秋偉，姜亞玲，李占靈

(鄭州工業(yè)應(yīng)用技術(shù)學(xué)院 藥學(xué)院，河南 鄭州 451150)

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小兒吐瀉寧散劑薄層層析鑒別

劉秋偉，姜亞玲，李占靈*

(鄭州工業(yè)應(yīng)用技術(shù)學(xué)院 藥學(xué)院，河南 鄭州 451150)

摘要：小兒吐瀉寧散劑作為芳香化濕藥，主要含廣藿香、甘草、厚樸、陳皮、半夏等藥材.實(shí)驗(yàn)通過(guò)薄層層析色譜法來(lái)鑒別這五種藥材的有效成分進(jìn)而來(lái)鑒別小兒吐瀉寧散劑.通過(guò)制備五種藥物主要成分的供試液、陰性、陽(yáng)性對(duì)照液，在經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的薄層色譜鑒別后繪制了完善的色譜圖.通過(guò)直觀的色譜圖觀察，得到了滿(mǎn)意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果.成功地鑒別了小兒吐瀉寧散劑中的五種主藥.

關(guān)鍵詞：小兒吐瀉寧散劑；薄層層析；鑒別

小兒吐瀉寧散劑[1]用于治療因小兒脾胃不和引起的腹脹、嘔吐瀉、食欲不振等癥狀，具有健脾化濕、理氣和中氣的療效，主要成分有厚樸、廣藿香、陳皮、甘草、β-谷甾醇.厚樸主要含生物堿及揮發(fā)油等，主要成分為厚樸酚、四氫厚樸酚、異厚樸酚以及和厚樸酚.廣藿香的提取成分主要是廣藿香醇、百秋李醇、丁香酚、桂皮醛和廣藿香吡啶等.甘草的主要有效提取成分為甘草酸、甘草次酸、甘草酸銨及甘草苷.陳皮主要含揮發(fā)油、生物堿等.陳皮的主要有效提取成分為橙皮苷、β-月桂烯及柑橘素等.β-谷甾醇本身是一種植物的內(nèi)在甾醇，用在本藥中可以達(dá)到適當(dāng)減弱血清中膽固醇的含量，能夠有效地降低人的血脂.

實(shí)驗(yàn)中用到的提取溶劑，主要有石油醚、乙醚、乙醇、甲苯.根據(jù)不同的藥品檢測(cè)方法，主要用到的顯色劑有三氯化鐵、氯化鋁、碘、四氯化碳、氫氧化銨、正丁醇、磷鉬酸的10%乙醇溶液等.

薄層層析色譜法[2](thin lager chromatography ,TLC)是平板檢測(cè)色譜法中應(yīng)用比較廣泛的方法之一.該方法是將細(xì)微粉狀的吸附劑均勻涂滿(mǎn)于玻璃板、塑料板、或者是鋁箔上，使之形成一層均勻的薄層，對(duì)薄層進(jìn)行活化，然后將實(shí)驗(yàn)試樣和對(duì)照品溶液，點(diǎn)在同一層析板的同一側(cè).然后再選取適當(dāng)?shù)娜芤鹤鳛檎归_(kāi)劑.展開(kāi)后可以適當(dāng)使用顯色劑進(jìn)行顯色，將顯色后的樣板上的斑點(diǎn)和對(duì)照品即標(biāo)準(zhǔn)品的斑點(diǎn)進(jìn)行技術(shù)上的測(cè)定比較，以此來(lái)鑒別實(shí)驗(yàn)品的真?zhèn)位蜻M(jìn)行含量的定性檢測(cè).

隨著中藥藥物制劑學(xué)的不斷發(fā)展，大多數(shù)的中藥原料已被制成各種制劑，以便臨床上使用，并發(fā)揮出傳統(tǒng)西藥難以媲美的治療效果，在藥學(xué)界受到廣泛的重視.薄層層析色譜法是一種成熟的簡(jiǎn)便快捷的鑒別方法，受到學(xué)術(shù)界的一致好評(píng).

1實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器與藥品

實(shí)驗(yàn)所用器材見(jiàn)表1.

表1　實(shí)驗(yàn)器材

實(shí)驗(yàn)所用藥品：廣藿香(廣東省湛江市)；半夏(甘肅省隴南市)；陳皮(廣東省新會(huì)市)；厚樸(四川省綿陽(yáng)市)；甘草(新疆喀什).

1.2薄層色譜法層析板的制備

選取玻璃板作為薄層板.薄層板的黏合劑[3]為CMC-Na.將0.5%的羧甲基纖維素鈉以1∶3的比例與硅膠混合，作為固定相，放置于燒杯中，用玻璃棒攪勻，使之充分混合均勻.由于橙皮苷具有一定的弱酸性，所以在制備鑒定橙皮苷所用薄層板時(shí)，加入0.5%的氫氧化鈉來(lái)使橙皮苷由分子形式改變?yōu)殡x子的形式，以此來(lái)增加其在吸附時(shí)的溶解度.在薄層板[4]制作完成后，可采用自然晾干或使用烘干機(jī)進(jìn)行干燥.然后將薄層板置于104～111 ℃下活化50 min～1 h.取出，置于干燥環(huán)境中，避免與水分接觸，放置留用.

1.3實(shí)驗(yàn)比對(duì)樣品的制備

(1)藥材陽(yáng)性對(duì)照液制備

①取廣藿香藥材10 g，經(jīng)研磨機(jī)粉末化研磨.選一定目數(shù)篩后，經(jīng)揮發(fā)油提取，獲得廣藿香藥材對(duì)照品.

②取陳皮2 g經(jīng)粉末化研磨過(guò)篩，所得粉末加入揮發(fā)油提取裝置之中，再加入75%的乙醇溶液20 mL進(jìn)行揮發(fā)油提取.加熱提取約1 h，重復(fù)兩次后合并溶液.將該溶液置于水浴中加熱使乙醇揮發(fā)，再用甲醇溶液約2 mL使之溶解，即得陳皮的陽(yáng)性對(duì)照液.

③取厚樸藥材經(jīng)粉碎研磨機(jī)粉末化研磨過(guò)篩，放好以便使用.本實(shí)驗(yàn)采用乙醇提取法提取厚樸酚.取厚樸粉末2 g置入揮發(fā)油提取裝置中，加入65%乙醇溶液10 mL進(jìn)行揮發(fā)油提取，總共使用30 mL,均分三次提取.合并溶液，水浴加熱使之蒸干.殘留物用2 mL甲醇溶液溶解，即得厚樸的陽(yáng)性對(duì)照液.

④取甘草藥材經(jīng)粉碎研磨機(jī)粉碎研磨過(guò)40目篩.本實(shí)驗(yàn)采用水提醇法進(jìn)行甘草酰胺的提取.取甘草粉末置于揮發(fā)油提取裝置中，加水提取2 h，重復(fù)兩次后合并濾液，過(guò)濾三次濃縮后用60%正丁醇溶解.將溶液水浴蒸干后用甲醇使殘留物溶解，即得甘草的陽(yáng)性對(duì)照液.

⑤取半夏藥材經(jīng)粉碎研磨機(jī)粉碎研磨過(guò)篩，經(jīng)石油醚浸泡好留用.運(yùn)用提取散劑中的有效成分β-谷甾醇的方法提取出主要成分.

(2)對(duì)照液的制備

①取百秋李醇標(biāo)準(zhǔn)品與醋酸乙酯制成1.5 mg/mL溶液留用.

②取厚樸酚標(biāo)準(zhǔn)品鉀與甲醇制成1.0 mg/mL溶液留用.

③取橙皮苷標(biāo)準(zhǔn)品，加入甲醇，制備成飽和的溶液留用.

④取甘草酸銨標(biāo)準(zhǔn)品，加入甲醇，制備成1.5 mg/mL溶液留用.

⑤取β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品，加入甲醇，制備成1.0 mg/mL溶液留用.

(3)陰性對(duì)照品的制作與備用

分別按照散劑的制備工藝和處方藥量的比例，將五種主藥制備成散劑，在散劑中加入填充劑淀粉作為陰性對(duì)照品.

1.4進(jìn)行試驗(yàn)鑒別

(1) 廣藿香的薄層層析鑒別

分別取廣藿香的四種樣液5 mL，點(diǎn)在同一薄層板上.依中國(guó)藥典，以石油醚、醋酸乙酯、冰醋酸(體積為95∶5∶0.2)為展開(kāi)劑.待向上展開(kāi)約15 cm時(shí)取出.自然晾干后用烘干機(jī)烘干涼至室溫.將顯色劑5%的三氯化鐵乙醇溶液用噴壺均勻噴在薄層板上使顯色明顯.如不明顯可將之放入100 ℃下觀察直至出現(xiàn)藍(lán)紫色斑點(diǎn).

(2) 陳皮的薄層層析鑒別

分別取陳皮的四種樣液各5 mL，點(diǎn)在同一薄層板上.以醋酸乙酯、甲醇、水(體積比為6∶1∶3)為展開(kāi)劑.待向上展開(kāi)10～12 cm時(shí)取出.自然晾干后用烘干機(jī)烘干，涼至室溫.配制三氯化鋁(溶質(zhì))和乙醇(溶液)，以溶質(zhì)與溶液比為1∶100的液體為顯色劑.顯色后將薄層板置于紫外燈(波長(zhǎng)約為365 nm)下進(jìn)行檢查勘視.如果供試液與對(duì)照品在相同位置上出現(xiàn)熒光斑點(diǎn)即為檢驗(yàn)合格.

(3) 厚樸的薄層層析鑒別

分別取厚樸的四種樣液5 mL，點(diǎn)在同一薄層板上.因?yàn)楹駱阒写嬖诤駱惴优c和厚樸酚,斑點(diǎn)較易重合,所以選用以石油醚、乙酸乙酯(體積比為85∶15)為展開(kāi)劑.展開(kāi)10～12 cm時(shí)取出.自然晾干后用烘干機(jī)烘干，放至室溫.使用碘蒸氣為顯色劑，在整個(gè)薄層色譜中直至顯色明顯，各斑點(diǎn)均在相同位置上時(shí)鑒別成功.

(4) 甘草的薄層層析鑒別

分別取甘草的四種樣液4 mL，點(diǎn)在同一薄層板上.以乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸、水(體積比為15∶1∶1∶2)為展開(kāi)劑.待向上展開(kāi)13～15 cm時(shí)取出，自然晾干后用烘干機(jī)烘干，冷卻至室溫.將10 mL硫酸倒入90 mL乙醇中配制成顯色劑使用.加熱至105 ℃左右使顯示清晰置于紫外燈(波長(zhǎng)約為365 nm)下檢視.

(5) 半夏的薄層層析鑒別

分別取半夏的四種樣液5 mL，點(diǎn)在同一薄層板低端的相同高度位置上.用氯仿-甲醇溶液作為展開(kāi)劑.將之放入層析缸中展開(kāi).待展開(kāi)距離為18 cm左右時(shí)取出，采用自然晾干或人工烘干的辦法使其完全干燥.接著使用磷鉬酸的10%乙醇溶液顯色.觀察是否標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品會(huì)不會(huì)在相同位置出現(xiàn)藍(lán)灰色斑點(diǎn).

2結(jié)果與討論

2.1結(jié)果

(1)小兒吐瀉寧散劑的四種主要有效成分均符合藥品的薄層色譜鑒別預(yù)期；

(2)散劑中的五種主要成分與對(duì)照品的出現(xiàn)斑點(diǎn)的位置一致.

2.2討論

(1) 實(shí)驗(yàn)中制備薄層板時(shí)應(yīng)注意厚度，由于是手工制作更需要小心謹(jǐn)慎.

(2) 在薄層板制備完成后必須將板置于105～110 ℃下進(jìn)行活化0.5～1 h，如若不然會(huì)大大改變實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)準(zhǔn)確性.

(3) 在展開(kāi)之前應(yīng)該將薄板置于層析缸中飽和20 min左右.

(4) 由于供試液及對(duì)照藥材中含有其他化學(xué)物質(zhì)，所以在色譜圖中會(huì)出現(xiàn)不同位置的斑點(diǎn).不過(guò)只要找出和標(biāo)準(zhǔn)品相同位置的斑點(diǎn)即可，避免受到干擾.

參考文獻(xiàn)：

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典第一部[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社,2010.

[2]饒淑華,消鴻.小兒吐瀉寧散劑薄層層析鑒別[J].江西中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，1995(S1):6-7.

[3]仝小林,彭智平,焦擁政.中藥“散”的研究概況與述評(píng)[J].中醫(yī)雜志，2013，54(1)：12-16.

[4] 劉紅安,饒淑華.小兒吐瀉寧口服液薄層層析鑒別[J].中國(guó)藥業(yè)，2000(8):15-16.

Children better powder identified by thin-layer chromatography

LIU Qiuwei,JIANG Yaling,LI Zhanling

(School of Pharmacy, Zhengzhou University of Industrial Technology, Zhengzhou 451150,China)

Abstract:As aromatization wet medicine mainly containing patchouli, liquorice, magnolia bark and herbs such as dried tangerine or orange peel. This experiment made by thin-layer chromatography to identify the active ingredients of the medicinal materials to identify four children in children better dispersing agent.By making four drugs main composition of the fluid，feminine positive control under test, and the purchase of four main components: the autumn lee alcohol, ammonium glycyrrhetatehonokiol,Beta sitosterol. After strict TLC was used to prepare the perfect chromatogram.Through intuitive chromatogram observation, the satisfactory experimental results were obtained,and successfully identify the pediatric children better dispersing agent`s five ingredients.

Key words:children better powder; thin-layer chromatography; identify

收稿日期：2015-03-20;修回日期：2015-09-24

作者簡(jiǎn)介：劉秋偉(1984- )，女，河南平頂山人，講師，主要從事醫(yī)用化學(xué)教學(xué)及藥物的研制及開(kāi)發(fā). *通信李占靈(1953- )，男，河南淮陽(yáng)人，副教授，主要從事醫(yī)用化學(xué)教學(xué)及藥物的研制及開(kāi)發(fā).

中圖分類(lèi)號(hào)：R927

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1671-9476(2016)02-0104-03

DOI：10.13450/j.cnki.jzknu.2016.02.026