段衛(wèi)華 于佳慧 高秀梅
【摘要】目的:觀察中藥杜仲、續(xù)斷藥對配伍前后對于SAMP6小鼠脂代謝的影響。方法:采用快速老化SAMP6小鼠及其同源正常對照SAMR1為研究對象,應(yīng)用杜仲續(xù)斷1∶[KG-*3/5]1配伍及單味藥進行治療12周,觀察血清和肝臟的總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白等指標(biāo)變化,并進行組間比較。結(jié)果:與模型組相比,杜仲續(xù)斷1∶[KG-*3/5]1配伍低劑量組能顯著降低血清低密度脂蛋白,升高血清高密度脂蛋白,顯著降低血清和肝組織的LDL-C水平,升高血清HDL-C水平,降低肝組織中HDL-C水平。結(jié)論:杜仲續(xù)斷藥對具有調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用。
【關(guān)鍵詞】杜仲;續(xù)斷;配伍;衰老;SAMP6小鼠;脂代謝
【中圖分類號】R285.5【文獻標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517(2016)09-0014-02
根據(jù)《中國人口老齡化發(fā)展趨勢預(yù)測研究報告》預(yù)測,到2020年我國老年人口將達到2.48億。隨著社會人口的老齡化,老年性骨質(zhì)疏松癥、老年性學(xué)習(xí)記憶受損及AD等與衰老相關(guān)疾病發(fā)病率明顯增高,嚴(yán)重影響老年人的生活質(zhì)量和健康水平。隨著增齡,血脂異?;疾÷试龈遊1],除氧化脂質(zhì)除誘發(fā)動脈粥樣硬化外,較高的血清總膽固醇水平是老年人AD患病率增加的危險因子[2-3]。與此同時,伴高脂血癥的骨質(zhì)疏松患者存在由氧化脂質(zhì)誘導(dǎo)的骨PTH抵抗[4],骨形成減少。杜仲與續(xù)斷配伍是中醫(yī)臨床常用藥對,雖然對于單味藥研究較多,但對于二者配伍的研究報道較少。研究以快速老化SAMP6及其同源正常對照SAMR1小鼠為研究對象,觀察杜仲和續(xù)斷配伍前后對動物模型的血液和肝臟中脂代謝主要生化指標(biāo)的影響,為中藥配伍理論和中醫(yī)臨床提供實驗依據(jù)。
1儀器與材料
1.1實驗動物6月齡清潔級雄性快速老化骨質(zhì)疏松模型小鼠SAMP650只,正常同源對照小鼠SAMR110只,均購自天津中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院實驗動物中心SAM鼠繁育屏障系統(tǒng),合格證號為實驗動物(飼)字0003499。
1.2藥品及其制備杜仲、續(xù)斷生藥購自安國市順全隆中藥材有限公司,由天津中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室馬琳教授鑒定。杜仲生藥、續(xù)斷生藥分別用70%乙醇10倍量回流提取2次,每次2h,合并提取液濃縮,真空干燥得杜仲、續(xù)斷提取物。按照上述提取方法,杜仲續(xù)斷按照生藥量1:1比例配伍,制備杜仲續(xù)斷配伍提取物。
1.3儀器VITALAB MTCRO半自動生化儀(荷蘭威圖公司)。
1.4試劑總膽固醇測定試劑盒(TC,批號:111271)、甘油三酯測定試劑盒(TG,批號:114951)、低密度脂蛋白-膽固醇測定試劑盒(LDL-C,批號:110421)、高密度脂蛋白-膽固醇測定試劑盒(HDL-C,批號:110431),以上試劑盒均由北京中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)。
2方法
2.1分組及給藥正常老化對照SAMR1組10只,SAMP6小鼠按照體重隨機分為SAMP6組、配伍高劑量組、配伍低劑量組、杜仲組、續(xù)斷組5組,每組10只。SAMR1組和SAMP6組分別灌服蒸餾水;配伍高劑量組:灌服配伍提取物(每日杜仲、續(xù)斷各用3g生藥/kg);配伍低劑量組:灌服配伍提取物(每日杜仲、續(xù)斷各用1.5g生藥/kg);杜仲組和續(xù)斷組:分別灌胃杜仲、續(xù)斷提取物(每日用藥劑量均為3g生藥/kg)。各組每日灌胃1次,連續(xù)給藥12周。實驗期間自由飲水?dāng)z食。每周稱量1次體重,根據(jù)體重變化調(diào)整給藥量。
2.2標(biāo)本采集與處理
2.2.1血清脂質(zhì)檢測用藥治療第12周末,所有小鼠禁食不禁水8h,末次灌胃給藥lh后,乙醚吸入麻醉,摘眼球取血,分離血清,按照試劑盒要求檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C。
2.2.2肝臟脂質(zhì)檢測取血后迅速取出肝臟,勻漿,離心取上清液,按照試劑盒要求檢測TC、TG、LDL-C、HDL-C。
2.3統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件分析實驗數(shù)據(jù),用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,采用單因素方差分析(One-WayANOVA),方差齊采用LSD法,方差不齊采用Dunnett′s T3法比較,進行組間兩兩比較,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
3結(jié)果
3.1杜仲續(xù)斷藥對不同配比對SAMP6小鼠血清脂質(zhì)的影響SAMP6組小鼠血清LDL-C水平顯著高于SAMR1組(P<0.05)。灌胃給藥12周,配伍低劑量組和杜仲組小鼠血清LDL-C水平顯著低于SAMP6組(P<0.05),配伍低劑量組小鼠血清HDL-C水平顯著高于SAMP6組,配伍低劑量組的HDL-C/TC有升高趨勢。見表1。
3.2杜仲續(xù)斷藥對不同配比對SAMP6小鼠肝組織脂質(zhì)的影響SAMP6組肝組織LDL-C,HDL-C,HDL-C/TC均顯著高于SAMR1組(P<0.01,P<0.05)。經(jīng)治療12周后,配伍低劑量組肝組織TG顯著低于SAMP6組(P<0.01),配伍低劑量組和杜仲組肝組織LDL-C顯著低于SAMP6組(P<0.05,P<0.01),配伍高、低劑量組和杜仲組肝組織HDL-C顯著低于SAMP6組(P<0.01,P<0.05),配伍高劑量組和配伍低劑量組肝組織HDL-C/TC顯著低于SAMP6組(P<0.01,P<0.05)。見表2。
4討論
中醫(yī)并無高脂血癥的病名,認(rèn)為其病因病機與痰濁、瘀血等有關(guān),肝脾腎虛衰,致痰瘀內(nèi)生,以臟虛為本,特別是腎虛,痰濁瘀血內(nèi)阻為標(biāo),屬本虛標(biāo)實之證[5]?!毒霸廊珪吩疲骸澳I主水,水泛亦為痰。故痰之化無不在脾,痰之本無不在腎”。臨床治療高脂血癥杜仲、續(xù)斷為常用補腎中藥,均具有補肝腎,強筋骨,安胎等功效。藥理研究表明,杜仲和續(xù)斷均具有抗骨質(zhì)疏松、神經(jīng)保護、調(diào)節(jié)血脂、抗衰老等多種藥理作用[6-8]。SAMP6小鼠為快速自發(fā)老年性骨質(zhì)疏松模型,且血糖、甘油三酯、胰島素水平、瘦素水平、肝脂質(zhì)水平均高于同齡SAMR1和AKR/J小鼠,并具肥胖癥和高脂血癥[9]。
研究發(fā)現(xiàn),與SAMR1組相比,SAMP6小鼠血清LDL-C顯著升高,肝組織LDL-C、HDL-C、HDL-C/TC顯著升高。經(jīng)給藥治療后,配伍低劑量組和杜仲組小鼠血清LDL-C水平顯著低于SAMP6組。配伍低劑量組小鼠血清HDL-C水平顯著高于SAMP6組,HDL-C/TC有升高趨勢。配伍低劑量組肝組織TG和LDL-C、杜仲組肝組織LDL-C均顯著低于SAMP6組,配伍高、低劑量組和杜仲組肝組織中HDL-C水平顯著低于SAMP6組。研究結(jié)果表明,杜仲續(xù)斷配伍后能顯著降低血清和肝組織的LDL-C水平,升高血清HDL-C水平,降低肝組織中HDL-C水平,提示杜仲續(xù)斷配伍使用可調(diào)節(jié)血脂水平,具有提高機體轉(zhuǎn)運和清除膽固醇的能力,調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用。
參考文獻
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(收稿日期:2016.03.17)