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肽菌素替代抗生素在斷奶仔豬生產上的應用研究

徐海燕①周開鋒②*汪官保①曹銀生①谷 巍①
（①山東寶來利來生物工程股份有限公司山東 泰安271000②山東省畜牧總站山東 濟南）

摘要本試驗旨在研究復合微生態(tài)制劑產品肽菌素對斷奶仔豬生長性能、腹瀉率及微生物菌群等的影響。試驗選取60頭定遠黑斷奶仔豬，隨機分為2個組，對照組飼喂基礎日糧+抗生素，試驗組飼喂基礎日糧+0.1%的肽菌素，每個組3個重復，每個重復10頭豬。飼養(yǎng)試驗期21d。結果表明：試驗組日增重比對照組提高了22.5%，差異顯著（P＜0.05），料肉比降低了7.87%（P＜0.05）；在14d時，試驗組的大腸桿菌數(shù)比對照組低5.87%（P＜0.05）；在21d時，試驗組的乳桿菌數(shù)高出對照組4.18%（P＜0.05），大腸桿菌數(shù)比對照組低6.68%（P＜0.05）；試驗組的IgG水平分別比對照組提高了18.5%（P＜0.05）；試驗組的總蛋白含量比對照組提高了9.46%，血清尿素氮比對照組降低了22.9%（P＜0.05）；在14d時，試驗組的sIgA水平比對照組提高了27.8%（P＜0.05）；在21d時，比對照組提高了33.0%（P＜0.05）；在14d時，試驗組的蛋白酶比對照組提高了84.0%（P＜0.01），淀粉酶提高了3.98%（P＞0.05）；在21d時，試驗組的蛋白酶比對照組提高了77.4%（P＜0.01），淀粉酶提高了13.1%（P＞0.05）。由此可以得出，肽菌素能夠減少斷奶仔豬的腹瀉，提高其生長性能，還能夠改善其微生物菌群，增強其免疫功能。

關鍵詞仔豬微生態(tài)制劑生長性能腸道菌群免疫功能

項目支持：山東省農業(yè)重大應用技術創(chuàng)新項目《高效標準化家畜健康養(yǎng)殖模式建立與示范》

隨著規(guī)模化養(yǎng)殖快速發(fā)展，生豬日糧中添加抗生素具有顯著的促生長和抗病效果，故飼料中添加抗生素成為十分普遍的做法。然而，飼料中添加抗生素的危害日益顯現(xiàn)，受到社會廣泛關注，禁用抗生素成為社會安全需要，并將成為一種養(yǎng)殖規(guī)范［1］。越來越多的研究顯示，規(guī)?；B(yǎng)殖條件下，盡早建立和維持動物腸道菌群平衡是取代抗生素的可行途徑。微生態(tài)制劑能調控動物腸道微生物平衡、增殖有益菌、抑制有害菌、降低腸道pH、提高消化道酶的活性、提高營養(yǎng)物質消化率和提高動物機體免疫力等方面的作用和功能［2］，具有無毒、無殘留、無副作用、安全可靠、不污染環(huán)境等特點，其開發(fā)及利用受到業(yè)界廣泛關注。仔豬斷奶是豬生長發(fā)育的關鍵環(huán)節(jié)，剛斷奶仔豬面臨多重應激，通常表現(xiàn)為食欲差、易腹瀉、生長緩慢、成活率低等，這些問題限制了集約化養(yǎng)豬效率和效益。在斷奶前后合理利用微生態(tài)制劑，減少應激的發(fā)生，有利于仔豬的生長，可有效預防和治療仔豬腹瀉，降低生豬生產全程治療費用，不產生耐藥和肉品藥物殘留。

微生態(tài)制劑肽菌素是山東寶來利來生物工程股份有限公司生產的微生態(tài)制劑產品，其生產菌株主要是乳酸菌、酵母菌和芽孢桿菌等。本試驗旨在研究肽菌素在斷奶仔豬上的應用效果，為肽菌素在養(yǎng)豬生產的推廣應用提供試驗依據。

1　材料與方法

1.1試驗材料

肽菌素由植物乳桿菌、產朊假絲酵母和枯草芽孢桿菌及其代謝產物等組成，活菌總數(shù)不低于5.0×108cfu/g；仔豬由山東寶來利來巴夫巴夫農業(yè)科技有限公司提供。（1）斷奶仔豬料基礎飼料配方（%）：玉米59.8、膨化豆粕28、進口魚粉4、乳清粉4、磷酸氫鈣0.8、預混料1、植物油1、石粉1.2、食鹽0.2；（2）營養(yǎng)水平：消化能1380.8千焦/kg、粗蛋白20.2%、賴氨酸1.1%、蛋+胱氨酸0.701%、色氨酸0.269%、鈣0.8%、磷0.65%?；A日糧未使用抗菌藥物，為粉料，由亞太中慧集團提供。

1.2試驗設計與飼養(yǎng)管理

試驗選用28日齡健康定遠黑斷奶仔豬45頭，按體重相近、性別比一致原則隨機分成2組，即對照組（基礎飼料+抗生素）、試驗組（基礎飼料+0.1%肽菌素），每組30頭，分成3個重復，每個重復10頭。試驗期為21d。仔豬以自由采食、飲水等常規(guī)方法進行飼養(yǎng)，按常規(guī)免疫程序進行疾病預防及飼養(yǎng)管理。

1.3樣品采集及測定指標

1.3.1生長性能測定試驗開始及結束時，對仔豬逐只進行空腹稱重，詳細記錄各組采食量，計算各處理組的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料肉比（F/G）。

1.3.2腹瀉率測定在試驗周期內，詳細記錄各組仔豬腹瀉情況，計算腹瀉率，計算公式如下：腹瀉率=［該圈日腹瀉仔豬頭數(shù)總和/（仔豬總頭數(shù)×天數(shù)）］×100%。

1.3.3糞中微生物菌群測定在試驗的第14d、21d早上收取每頭仔豬排出的新鮮糞樣少許（不低于5g），用無菌塑料袋封裝，選擇仔豬腸道菌群中具有代表性的乳酸桿菌、大腸埃希氏菌及腸球菌，采用平板涂布法進行細菌計數(shù)［ 5］。

1.3.4血清免疫指標測定血液收集與處理：試驗結束（第21天）早上8：00，每重復選取1頭仔豬，前腔靜脈采血10ml，用于測定血清生化指標。血樣于37℃靜置0.5h，3000r/min離心10min，分離血清，用于測定血清IgG、IgM、IgA、血清總蛋白（TP）及血清尿素氮（SUN），血清免疫球蛋白采用南京建成生物工程研究所生產的試劑盒測定，血清總蛋白（TP）及血清尿素氮（SUN）采用全自動生化測定儀（卓越330）測定。

1.3.5糞便中分泌型IgA測定在試驗的第14和21d，每重復隨機取1頭斷奶仔豬的新鮮糞便，采用豬分泌型免疫球蛋白A（sIgA）ELISA試劑盒（購自南京建成生物工程研究所）測定糞便中sIgA。

1.3.6糞便中消化酶測定分別于試驗的14和21d，每重復隨機采集1頭斷奶仔豬新鮮糞便，測定其蛋白酶及淀粉酶活性。采用福林酚試劑法［6］測定蛋白酶活性，1個蛋白酶活力單位為pH7.5、酪蛋白濃度為10mg/ml。37℃下保溫10min，產生1μg/min酪氨酸的酶量，以U/g表示。采用淀粉一碘顯色法［6］測定淀粉酶活性，1個淀粉酶活力單位為pH6.0、60℃下保溫5min，液化1mg/h可溶性淀粉的酶量以U/g表示。

2　結果與分析

2.1肽菌素對斷奶仔豬生長性能的影響（結果見表1）

表1　肽菌素對斷奶仔豬生長性能的影響　　（kg/頭）

由表1可知：試驗組與對照組相比，日增重和日采食量分別提高了22.5%和12.9%（P＜0.05）；料肉比降低了7.87%（P＜0.05）。

2.2肽菌素對仔豬腹瀉率的影響（結果見表2）

表2　肽菌素對仔豬腹瀉率的影響　　　　　?。?）

由表2可知：在第1周內，試驗組的腹瀉率略高于對照組；在第2周內，腹瀉率與第一周相比均呈下降趨勢，并且試驗組下降幅度遠遠高于對照組的；在第3周內，對照組的腹瀉率較第2周有所上升，且高于試驗組，試驗組的腹瀉率與第2周相比呈下降趨勢。由試驗期的觀察可知，在試驗前期，試驗組的腹瀉率與對照組相差不大，而中后期試驗組的腹瀉較輕，對照組的腹瀉較為嚴重。結果表明微生態(tài)制劑肽菌素對于減輕仔豬的腹瀉癥狀有明顯的作用。

2.3肽菌素對糞中微生物菌群的影響（結果見表3）

表3　肽菌素對仔豬微生物菌群的影響　?。╨gcfu/g鮮樣）

由表3可知，在14d時，試驗組的乳桿菌數(shù)高出對照組1.08%，糞腸球菌數(shù)高出對照組0.77%，差異不顯著，大腸桿菌數(shù)比對照組低5.87%（P＜0.05）；在21d時，試驗組的乳桿菌數(shù)高出對照組4.18%（P＜0.05），糞腸球菌數(shù)高出對照組1.72%（P＜0.05），大腸桿菌數(shù)比對照組低6.68% （P＜0.05）。

2.4肽菌素對仔豬血清免疫指標的影響（結果見表4）

表4　肽菌素對仔豬血清免疫指標的影響

由表4可以看出，對IgG來說，試驗組比對照組提高了18.5% （P＜0.05）；對IgM來說，試驗組有提高的趨勢，但差異不顯著（P＞0.05）；對IgA來說，基本無變化。對總蛋白來說，試驗組對照組提高了9.46%（P＜0.05）；對血清尿素氮來說，試驗組比對照組降低了22.9%（P＜0.05）。

2.5肽菌素對仔豬糞便中分泌型IgA的影響（結果見表5）

表5　肽菌素對仔豬糞便中分泌型IgA的影響　　?。é蘥/g）

由表5可以看出，在14d時，試驗組比對照組提高了27.8%，差異顯著（P＜0.05）；在21d時，試驗組比對照組提高了33.0%，差異顯著（P＜0.05）。

2.6肽菌素對仔豬糞便中消化酶的影響（結果見表6）

表6　肽菌素對仔豬糞便中蛋白酶及淀粉酶的影響　?。║/g）

由表6可以看出，在14d時，試驗組的蛋白酶比對照組提高了84.0%（P＜0.01），淀粉酶提高了3.98%（P＞0.05）；在21d時，試驗組的蛋白酶比對照組提高了77.4%（P ＜0.01），淀粉酶提高了13.1%（P＞0.05）。

3　討論

3.1肽菌素對斷奶仔豬生長性能的影響

本試驗中肽菌素組仔豬平均日增重比對照組提高了22.5%，料肉比降低了7.87%。結果表明飼料中添加肽菌素能夠促進斷奶仔豬的生長發(fā)育，提高日增重，降低飼料增重比，這與武英等（1998）［7］報道的結果一致。肽菌素通過改善仔豬胃腸道微生態(tài)環(huán)境，保證了動物對飼料具有良好的消化和利用效率，從而獲得良好的飼養(yǎng)效果。

3.2肽菌素對斷奶仔豬腹瀉率的影響

本試驗結果表明，在飼料中添加肽菌素能夠有效防治仔豬的腹瀉。研究認為特定原因引起腸道菌群失調是斷奶仔豬腹瀉發(fā)生主要原因，致病菌大量增殖，有益菌減少，最終導致腹瀉。進入動物體內的益生菌可通過定植繁殖來維持消化道有益菌的優(yōu)勢作用，并與有害菌競爭營養(yǎng)物質來維持微生物區(qū)系的平衡，從而提高機體的抗應激能力［8］。

3.3肽菌素對斷奶仔豬糞中微生物菌群的影響

本試驗結果表明，肽菌素能明顯促進仔豬糞便中乳桿菌等厭氧菌的增殖，并且能抑制腸道內需氧菌大腸桿菌的繁殖。乳桿菌等益生菌是動物腸道中的優(yōu)勢菌種，它能在腸道中迅速生長繁殖，產生大量酸，使腸道的pH值和Eh下降，既可抑制病原微生物的生長繁殖，又能促進腸道中其它厭氧菌的生長繁殖。腸道中酸性環(huán)境有利于營養(yǎng)物質的消化吸收，也有利于提高飼料利用率。仔豬出生后盡早攝入乳酸菌等益生菌可以幫助其盡早形成優(yōu)勢乳酸菌、雙歧桿菌等菌群，有助于動物提高抵抗力，避免外來有害細菌的感染。

3.4肽菌素對血清免疫指標的影響

（1）本試驗研究結果表明，添加肽菌素能顯著提高血清IgG的水平（P＜0.05），但對其他免疫球蛋白影響較小或無顯著影響。這與吳石金等［9］在北京鴨上的研究結果一致。其機理可能是微生態(tài)制劑中有益微生物菌群在體內的活動大大地改善了機體有益菌生長的內環(huán)境，各種有益微生物代謝產生大量活性物質，如超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）［10］等，增強了機體生理機能，提高了機體的體液免疫水平。（2）血清總蛋白是多種蛋白質的混合物，有營養(yǎng)、運輸及參與機體免疫等功能，同時有利于維持機體的代謝，一定程度上反映機體的蛋白質代謝狀況和營養(yǎng)狀況。同時尿素作為蛋白質和氨基酸在哺乳動物體內的代謝終產物，對照組仔豬血清尿素含量比試驗組高，說明進入對照組仔豬體內的蛋白質和氨基酸有更多被轉化為尿素而損失，因此，可以這樣認為肽菌素有利于提高仔豬對蛋白質和氨基酸的利用。其機理可能是微生態(tài)制劑有利于飼料氨基酸的平衡性吸收，使進入機體的各種氨基酸的組成與機體的需要更一致，更有利于合成動物機體的蛋白質。

3.5肽菌素對仔豬糞便中分泌型IgA的影響

試驗表明，益生菌可維持健康的胃腸道微生態(tài)平衡，有助于粘膜免疫正確區(qū)分病原體和潛在過敏性抗原并加以清除，促進sIgA分泌。動物腸道與外界環(huán)境相通，長期與大量的病原微生物接觸，為抵抗病原體感染，粘膜免疫系統(tǒng)構成了機體抵抗病原體入侵的第1道屏障［11］。粘膜相關淋巴組織主要部位是腸道相關淋巴組織（GALT），且GALT是構成這道屏障的主要物質基礎，而黏膜免疫的主要效應因子是分泌型免疫球蛋白A（sIgA）。消化道粘膜表面定植、生長的大量的有益菌，則是粘膜免疫系統(tǒng)中的重要組成部分。

3.6肽菌素對仔豬糞便中消化酶的影響

國內相關研究認為微生態(tài)制劑具有消化酶活性［12-14］。本試驗中試驗組斷奶仔豬糞便中中性蛋白酶活性明顯高于對照組，淀粉酶活性較對照組也有所提高，是肽菌素促生長的一個重要因素。其原因可能是由于所添加芽孢桿菌、乳酸菌等益生菌刺激動物腸道，或是仔豬攝入的益生菌引起了腸道的適應性分泌所致，也可能是某些益生菌本身所產生的胞外酶所致［15］。

4　結論

本試驗結果表明，在基礎日糧中添加適量的肽菌素能夠促進斷奶仔豬的生長發(fā)育，提高飼料的吸收利用率和轉化率，有效防治仔豬的腹瀉，提高斷奶仔豬的免疫力，是目前飼用抗生素的理想替代品之一。

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中圖分類號：S816.76

文獻標識碼：A

文章編號：1007-1733（2016）06-0001-03

*通訊作者

收稿日期：（2016-03-20）