袁紅英，楊雪萍

(1.解放軍第88醫(yī)院藥劑科，山東 泰安　271000； 煙臺(tái)市福山區(qū)人民醫(yī)院藥劑科，山東 煙臺(tái)　265500)

小兒健胃糖漿質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升的研究

袁紅英1*，楊雪萍2#

(1.解放軍第88醫(yī)院藥劑科，山東 泰安271000； 煙臺(tái)市福山區(qū)人民醫(yī)院藥劑科，山東 煙臺(tái)265500)

摘要目的：提升小兒健胃糖漿的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法：用薄層色譜法對(duì)麥冬、陳皮進(jìn)行鑒別；用高效液相色譜法對(duì)芍藥苷含量進(jìn)行測(cè)定，采用C18色譜柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm)，以乙腈-含0.04%三乙胺的0.1%冰醋酸溶液(V ∶V=12 ∶88)為流動(dòng)相，流速為1.0 ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm。結(jié)果：在薄層色譜中，麥冬、陳皮斑點(diǎn)清晰，易于識(shí)別；芍藥苷含量在0.403～2.015 μg呈良好的線性關(guān)系，平均回收率為99.17%，RSD為1.14%。結(jié)論：建立的方法簡(jiǎn)便、重復(fù)性好，可很好地控制該藥品的質(zhì)量。

關(guān)鍵詞小兒健胃糖漿； 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)； 芍藥苷

小兒健胃糖漿為治療小兒厭食的有效藥，由沙參、稻芽、白芍、玉竹、麥芽(炒)、山楂、麥冬、陳皮等8味中藥制成，具有健脾消食、清熱養(yǎng)陰的作用，常用于脾胃陰虛所致的食欲減退、消化不良等。該藥為《中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)：中藥成方制劑(第十冊(cè))》收載品種[1]，但原標(biāo)準(zhǔn)未對(duì)該藥成分的鑒別及含量測(cè)定做出規(guī)定。為保證臨床療效，本研究對(duì)麥冬、陳皮進(jìn)行薄層色譜鑒別考察，并對(duì)芍藥苷的含量測(cè)定進(jìn)行方法學(xué)考察。

1材料

1.1儀器

島津LC-2010高效液相色譜儀(自動(dòng)進(jìn)樣、四元泵、柱溫箱，日本島津公司)；C18色譜柱(250 mm×4.6 mm，5 μm，大連依利特分析儀器有限公司)；超聲提取儀(HENGAO HS3120)；電子天平(AE-240型)。

1.2藥品與試劑

試驗(yàn)樣品為市售小兒健胃糖漿(廣東益和堂制藥有限公司)；麥冬對(duì)照藥材(中國(guó)藥品生物制品檢定所，121013-200607)、橙皮苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，110721-200613)、芍藥苷對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，736-9407)。硅膠G板(青島海洋化工試劑廠)；乙腈、三乙胺、冰醋酸均為色譜純；水為純化水；其他試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1定性鑒別

2.1.1麥冬的鑒別：精密量取本品40 ml，置于圓底燒瓶中，加氯仿20 ml及濃鹽酸2 ml，于沸水浴回流提取1 h，放冷，轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，氯仿層棄去，余水液加氯仿提取3次，每次20 ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)蛹状? ml使之溶解，制成供試品溶液。取麥冬對(duì)照藥材2 g，置于圓底燒瓶中，加水15 ml、氯仿20 ml及濃鹽酸2 ml，于沸水浴回流提取1 h，其余操作同供試品溶液，制成對(duì)照藥材溶液[2-5]。按照《中華人民共和國(guó)藥典》(2015版)[6]中的薄層色譜法，分別吸取對(duì)照藥材溶液2 μl、供試品溶液10 μl，點(diǎn)于硅膠G板上，以甲苯-丙酮(V∶V=9 ∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，于105 ℃下烘至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。

2.1.2橙皮苷的鑒別：精密量取本品20 ml，置于分液漏斗中，以乙醚洗滌3次，每次20 ml，取水液以醋酸乙酯提取3次，每次20 ml；合并醋酸乙酯液，置于分液漏斗中，以5%碳酸氫鈉溶液洗滌3次，每次20ml，水液棄去；取醋酸乙酯液，以水洗至近中性，揮干乙酸乙酯，殘?jiān)蛹状? ml使之溶解，制成供試品溶液。取橙皮苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 ml含1 mg的溶液，制成對(duì)照品溶液[2，7]。按照《中華人民共和國(guó)藥典》(2015版)[6]中的薄層色譜法，分別吸取供試品溶液10 μl、對(duì)照品溶液5 μl，于硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲醇-水(V∶V∶V=100 ∶17 ∶13)為展開劑，展開約3 cm，取出，晾干；以甲苯-醋酸乙酯-甲酸-水(V∶V∶V∶V=20 ∶10 ∶1 ∶1)的上層溶液為展開劑，進(jìn)行二次展開，展開約10 cm，取出，晾干，噴1%三氯化鋁乙醇試液，于紫外光燈(365 nm)下檢視，供試品色譜在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

2.2含量測(cè)定

2.2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-含0.04%三乙胺的0.1%冰醋酸溶液(V∶V=12 ∶88)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)230 nm，流速1.0 ml/min[2，6]。理論板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)應(yīng)不低于2 000。

2.2.2溶液的制備：精密吸取本品20 ml，置于分液漏斗中，依次加乙醚、醋酸乙酯分別洗滌2次，每次25 ml，取余水液以水飽和的正丁醇提取5次，每次25 ml，合并正丁醇溶液，蒸干，殘?jiān)恿鲃?dòng)相使之溶解，定量轉(zhuǎn)移至10 ml容量瓶中，并加流動(dòng)相至刻度，搖勻，以微孔濾膜(0.45 μm)濾過，制成供試品溶液；取芍藥苷對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相制成每1 ml含40 μg的溶液，以微孔濾膜(0.45 μm)濾過，制成對(duì)照品溶液；按處方比例不加白芍和牡丹皮藥材，制得缺白芍和牡丹皮的模擬制劑，按供試品溶液制備的方法，制成陰性對(duì)照溶液[8-10]。

2.2.3方法學(xué)考察：(1)線性關(guān)系考察：取五氧化二磷中干燥至恒質(zhì)量的芍藥苷對(duì)照品適量，精密稱定，加流動(dòng)相制成0.403 mg/ml的對(duì)照品溶液。分別精密吸取上述溶液1、2、3、4、5 ml置于10 ml容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度；分別進(jìn)樣10 μl，以芍藥苷進(jìn)樣量(X，μg)為橫坐標(biāo)，以相應(yīng)的峰面積(Y)為縱坐標(biāo)，計(jì)算得線形回歸方程，Y=1 576 551.42X-1 674.11，r=0.999 9[11-13]。結(jié)果表明，芍藥苷進(jìn)樣量在0.403～2.015 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。(2)陰性對(duì)照試驗(yàn)：取陰性對(duì)照溶液，按供試品溶液測(cè)定方法檢測(cè)，在芍藥苷保留時(shí)間處無(wú)吸收，見圖1。(3)穩(wěn)定性試驗(yàn)：取供試品溶液，分別于0、4、8、16、24 h測(cè)定1次。結(jié)果顯示，RSD=1.15%(n=5)，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。(4)精密度試驗(yàn)：取芍藥苷對(duì)照品溶液(40.45 μg/ml)，連續(xù)進(jìn)樣5次，計(jì)算RSD。結(jié)果顯示，RSD=0.89%(n=5)，表明儀器精密度良好。(5)重復(fù)性試驗(yàn)：精密吸取樣品5份各20 ml，按供試品液的制備方法制備樣品，測(cè)定。結(jié)果顯示，平均值為0.435 mg/g，RSD=1.14%。(6)加樣回收率試驗(yàn)：精密吸取樣品5份各10 ml，至于50 ml容量瓶中，分別精密加入用流動(dòng)相溶解的芍藥苷對(duì)照品溶液(0.369 6 mg/ml)各1 ml，加水至刻度，搖勻，按供試品溶液的制備方法制備，測(cè)定，計(jì)算回收率，結(jié)果見表1。(7)3批樣品含量測(cè)定：取本品3批，分別按供試品液的制備方法制備，測(cè)定。結(jié)果顯示，3批樣品中芍藥苷含量分別為16.24、15.23、16.10 μg/ml。

A.對(duì)照品；B.樣品；C.陰性對(duì)照A.control；B.sample；C.negative control圖1　HPLC圖Tab 1 HPLC chromatogram

取樣相當(dāng)量/mg添加量/mg測(cè)得量/mg回收率/%平均回收率/%RSD/%0.36970.36960.738199.680.36970.36960.736899.320.36970.36960.734398.6599.171.140.36970.36960.730497.590.36970.36960.7416100.62

3討論

本研究采用薄層色譜法分別對(duì)麥冬、陳皮進(jìn)行了鑒別，結(jié)果特異性強(qiáng)，重現(xiàn)性良好。對(duì)方中稻芽、谷芽、山楂、玉竹、山藥等也曾做薄層鑒別，但由于無(wú)特征性斑點(diǎn)、陽(yáng)性結(jié)果不明顯或干擾太嚴(yán)重等原因未獲成功。

小兒健胃糖漿為含沙參、稻芽、白芍等藥材的復(fù)方制劑，原標(biāo)準(zhǔn)無(wú)含量測(cè)定。沙參、稻牙中主要含多糖類、酶類等成分，本方其他藥材中亦含有該類成分，專屬性較差，含量測(cè)定研究較少，不適宜作為含量測(cè)定指標(biāo)。白芍亦為方中要藥，芍藥苷專屬性較強(qiáng)，含量測(cè)定的方法報(bào)道較多，高效液相色譜法比較成熟。因此，綜合以上因素考慮，本試驗(yàn)采用高效液相色譜法對(duì)該制劑中的芍藥苷進(jìn)行含量測(cè)定。

在高效液相色譜法測(cè)定芍藥苷含量的過程中，對(duì)水飽和的正丁醇提取次數(shù)進(jìn)行優(yōu)選，結(jié)果顯示，用水飽和的正丁醇提取5次即可提取完全。

本法測(cè)定芍藥苷的含量，有效成分分離較好，該制劑中其他成分對(duì)測(cè)定基本不形成干擾，并且穩(wěn)定、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可作為小兒健胃糖漿含量測(cè)定的檢測(cè)方法。

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Study on Improvement of Quality Standard of Xiao’erjianwei Syrup

YUAN Hongying1, YANG Xueping2

(1.Dept.of Pharmacy, the 88th Hospital of PLA, Shandong Tai’an 271000, China; 2.Dept.of Pharmacy, Pepole’s Hospital of Yantai Fushan Districst, Shandong Yantai 265500, China)

ABSTRACTOBJECTIVE：To improve the quality standard of Xiao’erjianwei syrup. METHODS: ophiopogonis radix and citri reticulatae pericarpium in Xiao’erjianwei syrup were identified by TLC and paeoniflorin was determined by HPLC. The analysis was carried out on C18column(250 mm×4.6 mm, 5 μm)by HPLC. The mobile phase was acetonitrile-0.04% triethylamine and 0.1% acetic acid(V ∶V=12 ∶88). The flow rate was 1.0 ml/min and the detection wavelength was at 230 nm. RESULTS: TLC spots of ophiopogonis radix and citri reticulatae pericarpium were quite clear and easy to be identified; and the contents of paeoniflorin show a good linear range in 0.403-2.015 μg. The average recovery was 99.17% and RSD was 1.14%. CONCLUSIONS: The method is simple, rapid with a good reproducibility, which can be used for the quality control of Xiao’erjianwei syrup.

KEYWORDSXiao’erjianwei syrup; Quality standard; Paconiflorin

中圖分類號(hào)R927.11

文獻(xiàn)標(biāo)志碼A

文章編號(hào)1672-2124(2016)05-0630-03

DOI10.14009/j.issn.1672-2124.2016.05.022

(收稿日期：2015-11-27)