張曙光　黃偉　魏光河

近幾年，規(guī)模豬場急性、頑固性腹瀉越來越成為引起仔豬死亡的主要因素，導(dǎo)致規(guī)模豬場養(yǎng)殖效益降低，嚴重影響?zhàn)B豬業(yè)的順利發(fā)展。以豬傳染性胃腸炎病毒（TransmissibleGastroenteritisofPigsvims，TGP）、流行性腹瀉病毒（PorcineEpidemicDiarrheavirus，PEDV）、輪狀病毒為主是引起仔豬腹瀉的主要病毒性病原因素；大腸桿菌、沙門氏桿菌及梭菌性腸炎是仔豬腹瀉主要細菌性病原因素。目前，加強飼養(yǎng)管理及強化免疫是防控規(guī)模豬場仔豬腹瀉的主要手段。

1.材料與方法

1.1病料來源及處理

重慶市巫山縣金牧生豬養(yǎng)殖場的自繁自養(yǎng)10頭病死哺乳期外三元仔豬。隨機選擇其中2頭死仔豬，無菌采集脾、腸系膜淋巴結(jié)及小腸、大腸內(nèi)容物，作實驗室疑似病原的抗原分子生物學(xué)檢測病料。

1.2主要試劑及檢測單位

抗原檢測試劑盒為豬流行性腹瀉病毒PCR快速檢測試劑盒，通用引物由上海生工合成；檢測單位為西南大學(xué)榮昌校區(qū)動物疫病快速診斷中心實驗室；雞抗豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉、偽狂犬三聯(lián)高免卵黃抗體口服液及實驗室病理解剖診斷，由西南大學(xué)榮昌校區(qū)動物醫(yī)學(xué)系基礎(chǔ)獸醫(yī)Ⅱ室提供和完成。

1.3病例描述

2015年12月19日，重慶市巫山縣金牧生豬養(yǎng)殖場仔豬出現(xiàn)頑固性腹瀉，常規(guī)方法不能控制病情，初生仔豬發(fā)病率接近100%，死亡率60%～100%不等。經(jīng)技術(shù)人員建議，送病死豬及瀕死仔豬樣本到西南大學(xué)榮昌校區(qū)動物醫(yī)學(xué)系實驗室病理解剖診斷及分子生物學(xué)診斷并提具體的防控方案。

1.4診斷方法及內(nèi)容

采取描述流行病學(xué)調(diào)查法對發(fā)病豬場發(fā)病經(jīng)過、養(yǎng)殖規(guī)模、養(yǎng)殖品種、免疫疫苗類型及時間、用藥情況、豬場硬件設(shè)備、豬場管理水平等進行臨床調(diào)查；利用實驗室病理解剖病死及瀕死仔豬主要器官的獲得病理變化結(jié)果；通過問詢法了解發(fā)病仔豬發(fā)病日齡、腹瀉糞便色澤、形狀等。通過臨床調(diào)查、實驗室病理解剖診斷及腹瀉表征得出初步診斷結(jié)果，采集瀕死仔豬或病死仔豬大腸、小腸內(nèi)容物及脾、腸系膜淋巴結(jié)等于實驗室作疑似病原的抗原分子生物學(xué)檢測，并據(jù)此作出準備診斷。

1.5緊急防控方案

1.5.1病豬群分類 根據(jù)體溫、體況、精神狀態(tài)、呼吸頻率、食欲包括飲水欲及對外界刺激的反應(yīng)程度將病豬群分為淘汰豬群、重癥豬群、中度及以下癥狀豬群。淘汰豬群是針對體溫低于正常體溫38℃以下、心率、呼吸頻率低而弱、無食欲、極度消瘦及對外界刺激無反應(yīng)的豬群；重癥豬群指體溫正?；虻蜔s40℃）、有飲水欲望、食欲廢絕、心率及呼吸頻率中等或略快、對外界刺激有微弱反應(yīng)、體況介于正常與極度消瘦之間的豬群；體溫正?；虻蜔s40℃）、有飲水欲及食欲、心率及呼吸頻率中等或偏快、對外界刺激即時反應(yīng)、體況略顯脫水、精神正?；蚵燥@沉郁為中度及以下癥狀豬群。根據(jù)病豬群分類方法，將31頭病仔豬歸為淘汰病豬群；46頭病仔豬歸類為重癥豬群；215頭病仔豬歸類為中度及以下癥狀豬群。

1.5.2整體防控 根據(jù)臨床調(diào)查及實驗室病理解剖診斷，對發(fā)病仔豬群采取自家組織滅活疫苗按3mL/頭，5～7d后按2mL/頭加強免疫1次進行緊急接種；發(fā)病仔豬群恩諾沙星飲水，上下午各1次，連用3～4d，后將恩諾沙星更換為慶大霉素，飲水或拌料3～4d，停藥5d，再按3kg/t料的益生菌飲水；同時，葡萄糖及電解多維30～37℃的水，自由飲用，連用3-4d，根據(jù)豬群癥狀1次/d，至豬群恢復(fù)正常停用。除配種1個月內(nèi)的懷孕母豬外，其他母豬及種公豬均緊急接種自家組織滅活疫苗，第1次9mL/頭，5～7d后按4～5mL/頭加強免疫1次。同時，加強飼養(yǎng)管理，做好即時清潔和強化科學(xué)消毒，保持豬舍溫度前提下做好豬舍通風(fēng)。按上述方案，選擇30d內(nèi)生產(chǎn)的10窩仔豬作腹瀉發(fā)生情況的跟蹤調(diào)查對象，收集并統(tǒng)計結(jié)果，備用。

1.5.3分群治療 重癥豬只按強心、補液、抗繼發(fā)感染及治本的原則處方。肌肉注射樟腦磺酸鈉、按30～50mL/頭口服補液鹽及5～10mL/頭慶大霉素注射或口服液、按10mL/頭口服雞抗豬傳染性胃腸炎一流行性腹瀉一偽狂犬三聯(lián)高免卵黃抗體口服液，均上下午各1次，連用3～4d，根據(jù)病況減半劑量及減少給藥次數(shù)至1次/天至每兩天1次。中度及以下癥狀豬群按6mL/頭口服雞抗豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉、偽狂犬三聯(lián)高免卵黃抗體口服液，每天上下午各1次，連用2d，第3～5天根據(jù)病情1次/d；同時每天上下午各1次益生菌劑及口服補液鹽，連用2d，第3～5天根據(jù)病情1次/d。于實施處方后第15天時收集分群治療結(jié)果。

2.結(jié)果

2.1臨床調(diào)查結(jié)果

該豬場為典型的自繁自養(yǎng)豬場，設(shè)計母豬最大存欄量為500頭母豬，目前存欄492頭母豬，臨產(chǎn)母豬94頭。聘請有畜牧獸醫(yī)專業(yè)畢業(yè)的技術(shù)場長；有正規(guī)的免疫程序表；豬舍基本符合現(xiàn)代規(guī)模豬場的布局和豬舍設(shè)計條件，養(yǎng)殖設(shè)備均為規(guī)模豬場專用設(shè)備。發(fā)病仔豬于出生第1天開始腹瀉，排淡黃或黃紅色稀糞，部分病仔豬排黃綠色稀糞，曾使用氟苯尼考、雙黃連或黃芪多糖口服液，未見好轉(zhuǎn)。

2.2臨床診斷結(jié)果

對送檢的10頭病仔豬中的其中2頭瀕死仔豬進行解剖，2頭被解剖病仔豬均脫水嚴重，消瘦，被毛黃色；鼻孔、耳末梢及腹壁皮膚未見淤斑；頭部、頸部皮下、眼瞼未見水腫；腹股溝淋巴結(jié)、下頜淋巴結(jié)均不同程度出血，腫大不明顯；胃內(nèi)均留存有不同程度凝乳塊或乳白色液體狀物，部分胃底腺區(qū)出血潰瘍；部分仔豬空腸腸壁血管增生充血明顯，腸壁變厚，腸內(nèi)積有少量白色或黃白色內(nèi)容物，剖開腸腔腸黏膜易脫落；回盲乳頭出血，大部分病死仔豬盲結(jié)腸充滿黃白色內(nèi)容物；左右腎形狀均呈近三棱形，表面有不同程度凹陷，除去纖維膜，部分病死豬腎表現(xiàn)有散在的針尖狀出血點；被解剖病死豬肝呈不同程度出血或黃白色塊狀壞死區(qū)；膽囊腫脹，積滿近似藍黑色膽汁；膀胱黏膜無明顯病變；腸系膜淋巴程度不等的充血出血，部分病死豬腸系膜淋巴結(jié)呈繩索狀腫大；脾不同程度出血，腫大不明顯，部分病死豬脾邊緣有呈黑色連續(xù)性梗死灶；被解剖病死豬左右肺均不同程度出血，但未見肉變；肺門淋巴結(jié)程度不等的充血出血，腫大不明顯；頸部皮下無水腫；喉黏膜未見充血和出血；腦膜未見水腫、出血充血。

2.3實驗室分子生物學(xué)檢測結(jié)果

利用RT-PCR方法對送檢樣品中的2份病料進行流行性腹瀉病毒和傳染性胃腸炎病毒檢測，圖中1和2泳道分別為送檢樣本A和B豬流行性腹瀉病毒的檢測結(jié)果，3和4泳道分別是送檢樣本A和B傳染病胃腸炎病毒的檢測結(jié)果。其中豬傳染性胃腸炎病毒陽性目的條帶大小為1060bp、豬流行性腹瀉病毒大小為462bp。經(jīng)檢測，送檢的兩頭樣本豬傳染性胃腸炎病毒檢測均陽性，流行性腹瀉病毒檢測均陽性。

2.4防控及分群治療結(jié)果

對執(zhí)行全群防控后30d內(nèi)新出生的23窩仔豬作跟蹤調(diào)查，23窩共249頭仔豬有3窩出現(xiàn)不同程度腹瀉，窩腹瀉率為13%；腹瀉仔豬37頭，占整個統(tǒng)計窩仔豬數(shù)的14.9%，即腹瀉率為14.9%；腹瀉仔豬的腹瀉時間延遲到出生后第5～6天開始發(fā)生；30d的統(tǒng)計期內(nèi)共因腹瀉死亡仔豬18頭，占整個249頭仔豬的7.2%。46頭重癥病仔豬治療后第15天死亡24頭，精神、體溫、食欲基本恢復(fù)正常豬只19頭，其他3頭，治愈率41.3%。215頭中度及以下癥狀豬群于實施方案后的第15天時死亡7頭，治愈率96.8%。

3.討論與分析

1）病毒性病原是引起規(guī)模豬場仔豬頑固和惡性腹瀉并導(dǎo)致快速死亡的主要因素，大部分技術(shù)人員多根據(jù)臨床表征和病理特征定位于豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉或輪狀病毒性腹瀉的診斷結(jié)果，沒有從實驗室精確的診斷進行確診。本文通過臨床調(diào)查了解其免疫史、豬場管理水平、病仔豬臨床表征為排除各項腹瀉因素奠定了基礎(chǔ)，實驗室多頭病仔豬的病理解剖及抗原分子生物學(xué)檢測為驗證是否屬于相同病原引起而進行準確診斷提供了保障，為本文探討針對流行性腹瀉病例的防控方案效果提供了科學(xué)依據(jù)。

2）規(guī)模豬場免疫失敗導(dǎo)致各種疫病散發(fā)或繼發(fā)流行，使針對仔豬腹瀉的防控更多以提高飼養(yǎng)管理和人工被動免疫、防繼發(fā)感染的方案進行；本文利用實驗室研發(fā)的雞抗豬傳染性胃腸炎一流行性腹瀉一偽狂犬三聯(lián)高免卵黃抗體口服液對重癥豬群實施口服，有利于直接中和、抵抗腸道流行性腹瀉病毒，同時，通過注射對腹瀉性細菌病原敏感的恩諾沙星，達到治本的作用。脫水及心衰是導(dǎo)致腹瀉病仔豬死亡的直接原因，通過注射樟腦磺酸鈉及口服補液鹽，維持病仔豬機體的水鹽代謝平衡，有助于病仔豬的存活，重癥豬群41.3%及中度以下癥狀豬群96.8%的治愈率說明本方案的有效性。

3）自家疫苗是指利用發(fā)病豬場分離的病原菌或病毒、或發(fā)病仔豬某些組織器官經(jīng)過實驗室系列工藝制備而成的疫苗，是針對規(guī)模養(yǎng)殖場發(fā)生大規(guī)模疫情時的有效防控措施之一。本病例通過采集來自不同圈舍、不同母豬的病死仔豬脾等制備組織滅活疫苗，既有助于針對性的產(chǎn)生本地流行性腹瀉病毒株的特異抗體，也通過大劑量的免疫刺激被接種豬群的非特異性保護屏障，增加被接種豬群機體的抵抗力，減少腹瀉的發(fā)生；從防控前60%～100%降至防控后14.9%的腹瀉發(fā)生率證明通過自家組織滅活疫苗緊急防控規(guī)模豬場暴發(fā)腹瀉的方法切實可行、有效。自家組織滅活疫苗本身的滅活是否徹底、是否感染有其他病原等決定該種方式僅限于商品豬場及大規(guī)模疫情發(fā)生時的緊急防控。（編輯：趙曉松）