徐蘇標(biāo)［梅里亞國(guó)際貿(mào)易（上海）有限公司］

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豬偽狂犬病的防控策略及凈化方案

徐蘇標(biāo)［梅里亞國(guó)際貿(mào)易（上海）有限公司］

徐蘇標(biāo)，中國(guó)獸醫(yī)協(xié)會(huì)第一屆理事，職業(yè)獸醫(yī)師。1992年畢業(yè)于浙江農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006年獲南京農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)碩士，同濟(jì)大學(xué)EMBA在讀。曾在浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所工作，現(xiàn)供職于梅里亞中國(guó)家畜事業(yè)部高級(jí)市場(chǎng)經(jīng)理。

豬偽狂犬?。≒seudrabies，PR）是偽狂犬病病毒（Pseudrabies Virus，PRV）所引起的豬的一種病毒性傳染病。豬PRV被確認(rèn)為豬甲型皰疹病毒，為雙鏈DNA病毒。1902年匈牙利奧杰斯基首次報(bào)道，因此又稱奧杰斯基病病毒。迄今，從世界各地分離的毒株均呈現(xiàn)一致的血清學(xué)反應(yīng)，即只有一個(gè)血清型，但毒力有強(qiáng)弱之分，毒株的致病性有差異。

1　PRV的感染過(guò)程

PRV經(jīng)口鼻感染后，首先成熟的病毒會(huì)吸附到宿主細(xì)胞，接著病毒的囊膜和宿主細(xì)胞膜融合。

PRV在三叉神經(jīng)的定植與再感染之間有一定的聯(lián)系，主要體現(xiàn)在4周齡的仔豬。潛伏PRV的神經(jīng)元不可能再感染PRV的其他毒株，這為滴鼻免疫提供理論依據(jù)。研究表明，弱毒的活疫苗可以建立潛伏期，抑制野毒的感染。

2　感染方式

PRV進(jìn)入組織液后，首先遇到的是抗體，體液免疫只對(duì)游離的病毒有效。一旦病毒感染細(xì)胞后會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞病變，然后會(huì)啟動(dòng)細(xì)胞的免疫程序，連同該細(xì)胞一起被摧毀，細(xì)胞免疫成功。但如果PRV沒有被阻止，就會(huì)破壞細(xì)胞，在細(xì)胞中增殖，釋放更多的病毒。釋放出的病毒會(huì)感染相鄰細(xì)胞，或排到體外感染其他豬，導(dǎo)致整個(gè)豬場(chǎng)發(fā)病。

另外一種情況是長(zhǎng)期的潛伏感染，遇到任何應(yīng)激會(huì)重新散布。這就是為什么感染PRV后會(huì)終身呈陽(yáng)性的原因。

豬感染PRV后的臨床癥狀與年齡有關(guān)，0～4周齡仔豬主要表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀；4～12周齡的豬主要表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀、內(nèi)臟壞死、呼吸道癥狀；12周齡以上的豬主要表現(xiàn)為呼吸道癥狀，死亡率不高，而仔豬的死亡率很高。母豬感染會(huì)導(dǎo)致繁殖障礙的發(fā)生（表1）。

3　PR的致病機(jī)理

PRV通過(guò)口鼻感染，在扁桃體增殖。由于仔豬的血腦屏障尚未發(fā)育完善，PRV增殖以后通過(guò)神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)運(yùn)到達(dá)大腦，導(dǎo)致神經(jīng)癥狀發(fā)生。隨著年齡的增長(zhǎng)，到12周齡后，血腦屏障發(fā)育完善，病毒無(wú)法到達(dá)大腦，而會(huì)通過(guò)肺泡細(xì)胞導(dǎo)致呼吸癥狀的發(fā)生。

PRV是一種皰疹病毒，本身產(chǎn)生干擾素的能力很強(qiáng)，因此豬發(fā)生呼吸道問(wèn)題后通常一周自己就好了。但是一周的咳嗽會(huì)導(dǎo)致兩個(gè)嚴(yán)重問(wèn)題：體重下降5 kg～10 kg，這是造成的直接損失；咳嗽是一個(gè)散毒的過(guò)程，會(huì)導(dǎo)致整個(gè)豬場(chǎng)的感染壓力不斷上升。通常死亡率不高，所以很多人不重視。

現(xiàn)在的問(wèn)題是PRV也會(huì)通過(guò)血液到達(dá)子宮，導(dǎo)致母豬流產(chǎn)。

仔豬發(fā)生顫抖的癥狀較多，毛聳起來(lái)，毛茸茸、發(fā)黃，像鴨子一樣，走路不穩(wěn)定，這種豬基本沒有成活的可能（圖1）。大豬會(huì)發(fā)生流清鼻涕的癥狀（圖2）。我有很好的臨床意見給大家，如果你看到豬流的是清鼻涕，通常與病毒有關(guān)，流的是膿鼻涕，通常與細(xì)菌有關(guān)。病毒所產(chǎn)生的炎性反應(yīng)比較稀，PR導(dǎo)致的咳嗽是一種濕性咳嗽，流的是清鼻涕。該病還會(huì)導(dǎo)致扁桃體出現(xiàn)膿性分泌物（圖3）、扁桃體糜爛（圖4）、肺部病變（圖5）等。

PR在育肥階段很容易引起豬咳嗽，并繼發(fā)胸膜肺炎。相反，如果豬場(chǎng)的胸膜肺炎總是不斷，應(yīng)該考慮是不是由PRV導(dǎo)致的。它們之間的相關(guān)性非常高。

4　PR的原因分析

PR的發(fā)生如此嚴(yán)重，原因我歸納為兩點(diǎn)：外因和內(nèi)因。外因?qū)χ袊?guó)來(lái)說(shuō)是毒力增強(qiáng)，以前是可能，現(xiàn)在是肯定，我國(guó)已經(jīng)出現(xiàn)高致病性的強(qiáng)毒株。這與飼養(yǎng)管理欠缺有關(guān)，包括引進(jìn)種豬的同時(shí)引入了病原；消毒、隔離措施不嚴(yán)；僅采取一般的防控措施，未實(shí)施撲滅方案。豬感染PR一般是因?yàn)槊庖卟缓侠?、免疫空白，主要為免疫程序與疫苗特性不對(duì)稱；商品豬不免疫或免疫時(shí)機(jī)把握不正確；免疫量不足（疫苗效價(jià)低無(wú)法突破母抗）。

不同的偽狂犬疫苗的抗原含量相差很遠(yuǎn)，所有的豬疫苗可以從3個(gè)角度去評(píng)估：毒株（毒株安全性、免疫性和穩(wěn)定性）；抗原含量（幫助豬產(chǎn)生特異性免疫力）；佐劑（輔助疫苗取得成功的重要手段）。從抗原含量角度看，偽狂犬疫苗用的是半數(shù)細(xì)胞感染量（TCID50/頭份或CCID50/頭份）。目前我國(guó)所有疫苗的抗原含量分為 0.5萬(wàn) （103.7）、1萬(wàn) （104）、16萬(wàn) （105.2）、32萬(wàn) （105.5）、200萬(wàn)（106.3）。1萬(wàn)以下是低效價(jià)，16萬(wàn)～32萬(wàn)是中等效價(jià)，200萬(wàn)是高效價(jià)。佐劑分為水性佐劑、水包油佐劑和油性佐劑。水包油佐劑屬于油佐劑范圍，它維護(hù)了油佐劑的特性，又減少了油佐劑的缺陷。

圖1　仔豬顫抖、沉郁

疫苗可以分為四種。第一種是低效價(jià)水佐劑，水佐劑上升快下降也快。4個(gè)月以后，通常抗體的水平比較低，這種疫苗國(guó)內(nèi)較少。第二種是中等效價(jià)水佐劑，產(chǎn)生的抗體水平比較高，由于是水佐劑，4個(gè)月后下降。使用這種疫苗對(duì)母豬普免時(shí)，3針就會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題，說(shuō)明書上也會(huì)說(shuō)明此事。仔豬的首免日齡也很難選擇。第三種是油佐劑疫苗，波動(dòng)比較小，也不太適合用于免疫。第四種是油性高效價(jià)佐劑，一年打3針，抗體水平維持比較高，仔豬首免日齡比較好選，仔豬首免日齡可以到10～12周齡，不同的疫苗需要不同的免疫程序。

圖2　豬流清鼻涕

圖3　扁桃體出現(xiàn)膿性分泌物

圖4　扁桃體糜爛

圖5　肺部病變

5　關(guān)于變異強(qiáng)毒株

目前根據(jù)攻毒情況，PRV有4種強(qiáng)毒株。

2011年我國(guó)出現(xiàn)豬PRV的變異毒株。分離到的毒株，基因雖然有變化，但是沒有出現(xiàn)新的血清型。為了驗(yàn)證現(xiàn)有的疫苗對(duì)變異株是否有效，江蘇省農(nóng)科院做了以下試驗(yàn)。兩種不同的Bartha株疫苗，一種效價(jià)高，一種效價(jià)低，對(duì)SPF豬進(jìn)行免疫，然后攻毒，測(cè)試結(jié)果。觀察臨床表現(xiàn)，分?jǐn)?shù)越高臨床表現(xiàn)越嚴(yán)重（表2）。

相比對(duì)照組，低效價(jià)疫苗組的臨床表現(xiàn)有一定改善，高效價(jià)疫苗組的臨床表現(xiàn)更好。高效價(jià)疫苗組在5 d后全部恢復(fù)健康。低效價(jià)疫苗組具有典型癥狀，但比空白對(duì)照組好很多，10頭豬只死亡2頭。

關(guān)于日增重，發(fā)現(xiàn)無(wú)論是高效價(jià)疫苗組還是低效價(jià)疫苗組都比對(duì)照組好，但高效價(jià)疫苗組要比低效價(jià)疫苗組更好。所以Bartha株疫苗對(duì)豬PRV的變異毒株有效，但不同的疫苗效果有差異。

關(guān)于死亡率，高效價(jià)疫苗組的11頭豬全部存活，低效價(jià)疫苗組的10頭豬死亡2頭，對(duì)照組的8頭豬死亡4頭，在死亡率方面，Bartha株疫苗有效果。

關(guān)于扁桃體，高效價(jià)疫苗組的扁桃體正常，低效價(jià)疫苗組的扁桃體病變比較嚴(yán)重。

關(guān)于攻毒后的排毒量，高效價(jià)疫苗組的高峰排毒量顯著低于低效價(jià)疫苗組和對(duì)照組（P<0.05）。攻毒后14 d的總排毒量，高效價(jià)疫苗組顯著低于低效價(jià)疫苗組。

試驗(yàn)評(píng)估項(xiàng)目結(jié)果，無(wú)論是從臨床觀察（臨床癥狀評(píng)分、生長(zhǎng)性能、發(fā)病率、死亡率），還是剖檢病變觀察（扁桃體、攻毒后的排毒量），高效價(jià)疫苗對(duì)PRV變異毒株有明顯保護(hù)作用，低效價(jià)疫苗也有部分保護(hù)作用。兩種疫苗同為Bartha-K61株，但免疫效力差異很大。高效價(jià)疫苗組對(duì)致死率提供了11/11的保護(hù)。結(jié)論是，Bartha株疫苗對(duì)PRV變異強(qiáng)毒株完全有效，但不同品牌的Bartha株疫苗的效果不同。由于PRV變異毒株的毒力很強(qiáng)，因此對(duì)疫苗的要求更高。

感染PR后終生陽(yáng)性，怎么能夠清除呢？基本原理是可以呈陽(yáng)性，但不要排毒，確保后備母豬或初生仔豬呈陰性。陰性豬和陽(yáng)性豬在一起時(shí)不被陽(yáng)性豬感染，陽(yáng)性豬隨著年齡增長(zhǎng)，慢慢淘汰，只留下陰性豬。歐洲對(duì)PR疫苗有一個(gè)黃金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)仔豬進(jìn)行免疫，免疫后利用強(qiáng)毒株攻擊測(cè)試，發(fā)現(xiàn)仔豬不死亡，排毒量與排毒時(shí)間大幅降低，與參考疫苗效果相同。梅里亞公司的豬克偽疫苗獲得全球自然基因缺失的PR黃金標(biāo)準(zhǔn)疫苗，專業(yè)清除PRV。

仔豬所有疫苗的首免日齡主要由母源抗體決定。1周齡仔豬沒有母源抗體，很容易感染且會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的神經(jīng)癥狀而死亡。如果母源抗體可以保護(hù)到4周齡，對(duì)仔豬不進(jìn)行免疫，7周齡后發(fā)生感染會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)癥狀和呼吸癥狀，這種疫苗應(yīng)該在3～4周齡注射。高水平的母源抗體能保護(hù)到12周齡，如果不進(jìn)行免疫，15周齡后會(huì)出現(xiàn)呼吸道癥狀。為了阻斷呼吸道癥狀，可在10～12周注射疫苗。

6　育肥期是多數(shù)豬場(chǎng)免疫的薄弱環(huán)節(jié)

盡管多數(shù)豬場(chǎng)基于母豬流產(chǎn)、仔豬神經(jīng)癥狀而確定發(fā)生PR，但血清學(xué)資料顯示往往是育肥豬gE轉(zhuǎn)陽(yáng)在先。仔豬免疫的不完整或程序的偏差，或免疫量的不足，會(huì)使育肥期豬群不足以抵御強(qiáng)毒攻擊而被感染，臨床出現(xiàn)咳嗽并大量排毒，同時(shí)血清gE抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)。大量強(qiáng)毒的擴(kuò)散使母豬群處于病毒高壓下，抵御能力經(jīng)受考驗(yàn)。當(dāng)病毒高壓突破母豬抗體時(shí)，則出現(xiàn)流產(chǎn)，繼而仔豬發(fā)病死亡。因此，育肥期的免疫漏洞不可忽視。我認(rèn)為gB相當(dāng)于堤壩，gE相當(dāng)于洪水。只有堤壩很高，洪水很低，豬場(chǎng)才安全。

PR的早期臨床確診很難，如何診斷？生長(zhǎng)育肥豬或成年豬的PR診斷可以根據(jù)gE抗體的檢測(cè)。因?yàn)?6周齡以后一般沒有母源抗體，如果測(cè)出抗體陽(yáng)性，這頭豬肯定被感染。

7　PR的免疫

母豬免疫的益處：保護(hù)母豬、胎兒；通過(guò)母源抗體保護(hù)仔豬達(dá)10周齡；減少排毒。

育肥豬免疫的益處：主動(dòng)免疫替代早期的被動(dòng)免疫；預(yù)防豬的臨床癥狀；如果處在野毒株環(huán)境，可降低排毒量和縮短排毒時(shí)間。

關(guān)于PR的免疫程序，后備母豬在第一次配種前間隔3～4周注射兩次，經(jīng)產(chǎn)母豬一年注射3～4次，仔豬在10～12周齡注射第一針，14～16日齡注射第二針。在不太安全或感染壓力很高的情況下，給仔豬進(jìn)行滴鼻免疫，10～12周齡進(jìn)行第一次，14～16周齡進(jìn)行第二次，這是最完整的免疫程序。

清除方法包括：清群與重建（雖然速度快，但成本高）；檢測(cè)與淘汰；免疫、檢測(cè)、淘汰；免疫。凈化原則是，用偽狂犬基因缺失苗免疫豬群（母豬和生長(zhǎng)豬）來(lái)阻斷排毒，定期檢測(cè)豬群gE抗體；用偽狂犬陰性豬更新種群，2～3年后偽狂犬野毒陽(yáng)性豬數(shù)量減少，直到最后成為偽狂犬陰性豬場(chǎng)。

8　血清學(xué)研究結(jié)論

肉豬群PR野毒抗體陰性，則可能PR陰性，因?yàn)槿庳i群沒有病毒循環(huán)；母豬群PR野毒抗體陽(yáng)性，肉豬群PR野毒抗體可以是陰性的；肉豬群PR野毒抗體陽(yáng)性，母豬群肯定陽(yáng)性。

免疫程序不完整的豬場(chǎng)會(huì)處在感染的風(fēng)險(xiǎn)之中。合理的免疫程序包括：母豬的免疫，正確時(shí)間實(shí)施肉豬免疫。定期的血清學(xué)監(jiān)測(cè)是必需的，采用科學(xué)的免疫程序可以清除PR。

疫苗不僅要選好，還要保存好。疫苗不可以冷凍，先進(jìn)先用。免疫使用合理的針頭，70～80日齡的仔豬使用2.5 cm～3 cm針頭，100日齡的豬使用3 cm針頭，母豬/公豬使用3.8 cm針頭。正確注射，針頭不可斜著注射。