何天文　　黃濱梅　　王逾男　　鐘志成　　陳柯藝　　尹愛華★

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廣東地區(qū)育齡婦女人細小病毒B19感染篩查結(jié)果分析

何天文1，2黃濱梅1，2王逾男1，2鐘志成1，2陳柯藝1，2尹愛華1，2★

［摘要］目的通過對廣東地區(qū)育齡婦女人細小病毒B19（human parvovirus B19,B19）感染篩查結(jié)果進行分析，了解廣東地區(qū)育齡婦女人細小病毒B19感染情況。方法采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測廣東地區(qū)育齡婦女血清中人細小病毒B19特異性IgM 和IgG抗體，并對檢測結(jié)果進行分析。結(jié)果廣東地區(qū)育齡婦女血清中人細小病毒B19特異性IgM 和IgG抗體陽性率分別為1.40%（700/50 086）、16.72%（341/2 039）。結(jié)論開展育齡婦女人細小病毒B19感染篩查工作，對優(yōu)生優(yōu)育、提高人口素質(zhì)具有非常重要意義。

［關(guān)鍵詞］育齡婦女；人細小病毒B19；酶聯(lián)免疫吸附試驗

人細小病毒B19（human parvovirus B19，B19）是細小病毒科細小病毒屬的成員，是唯一對人類有致病性的細小病毒［1-2］。B19感染呈全球分布，全年均可發(fā)生，以冬春季常見，而人群對B19普遍易感，尤以兒童和孕婦感染多見［3］。B19感染呈非特異性病毒感染癥狀或無癥狀，可引起多種臨床表現(xiàn)，不同患者可有不同臨床表現(xiàn)，主要可引起傳染性紅斑、急性再生障礙性貧血危象、急性關(guān)節(jié)炎或關(guān)節(jié)痛、血小板減少性紫癜等多種疾?。?-5］。而妊娠期婦女感染B19除可發(fā)生上述癥狀外，還可發(fā)生自然流產(chǎn)和垂直傳播給胎兒。胎兒感染B19可無癥狀，也可發(fā)生貧血、低白蛋白血癥、肝炎、心肌炎，甚至導(dǎo)致宮內(nèi)死胎和非免疫性胎兒水腫［6-9］。本文對2012年1月至2015年3月就診于廣東省婦幼保健院婦科、產(chǎn)科、生殖健康科和醫(yī)學(xué)遺傳中心進行孕前檢查、產(chǎn)前檢查和不孕不育治療的廣東地區(qū)育齡婦女進行B19感染篩查，了解廣東地區(qū)育齡婦女B19感染狀況。

1　資料與方法

1.1研究對象

2012年1月至2015年3月就診于廣東省婦幼保健院婦科、產(chǎn)科、生殖健康科和醫(yī)學(xué)遺傳中心進行孕前檢查、產(chǎn)前檢查和不孕不育治療的廣東地區(qū)育齡女性50 086例，其中孕前檢查女性4 298例，產(chǎn)前檢查女性39 929例，不孕不育女性5 859例，年齡在14歲至50歲之間，平均年齡為26.7歲。

1.2儀器與試劑

主要儀器有美國Thermo公司Multiskan MK3全自動酶標(biāo)儀和德國eppendorf公司5810型臺式離心機；人細小病毒B19特異性IgM和IgG抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附試驗法，enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）及其質(zhì)控品由德國維潤賽潤研發(fā)有限公司提供。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集

采集非抗凝血2 mL，4 h內(nèi)送檢，可置4~8℃保存2周，長時間保存則需分離血清后置?20℃保存，避免反復(fù)凍融。

1.3.2B19特異性IgM和IgG抗體檢測

非抗凝血用德國eppendorf公司5810型臺式離心機在3 000 rpm下離心5 min，分離血清；然后采用德國維潤賽潤研發(fā)有限公司的B19特異性IgM和IgG抗體檢測試劑盒對已分離血清標(biāo)本進行檢測，使用美國Thermo公司Multiskan MK3全自動酶標(biāo)儀讀取吸光度值（OD值），所有操作嚴格按照說明書要求完成。

1.3.3診斷標(biāo)準(zhǔn)

當(dāng)標(biāo)本檢測OD值大于試劑盒設(shè)定的cut off值判為陽性，標(biāo)本檢測OD值小等于試劑盒設(shè)定的cut off值判為陰性。

1.3.4統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，率的比較采用卡方檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1育齡婦女B19特異性IgM和IgG抗體檢測結(jié)果

受調(diào)查的廣東地區(qū)育齡婦女中B19特異性IgM 和IgG抗體陽性率分別為1.40%（700/50 086）、16.72%（341/2 039），具體見表1。按照診療常規(guī)，孕前進行B19的IgG檢測評估女性對B19免疫力情況，而孕期進行B19的IgM檢測對孕婦篩查B19感染，研究對象中以孕期女性為主，導(dǎo)致B19特異性IgM和IgG抗體檢測的基數(shù)不一致。

2.2孕前和孕期女性B19感染情況

根據(jù)是否懷孕分為孕前組及孕期組，比較兩組B19的IgM陽性率。孕前組和孕期組B19的IgM陽性率分別為2.02%（87/4 298）、1.23%（492/ 39 929）。孕前組B19的IgM陽性率比孕期組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），具體結(jié)果見表2。

表1　廣東地區(qū)育齡婦女B19特異性IgM和IgG抗體檢測結(jié)果Table 1　Detection results of B19 specific IgM and IgG antibodies in women of childbearing age in Guangdong

2.3比較孕期女性與不孕不育女性B19感染情況

分析不孕不育女性B19的的IgM陽性率，比較孕期女性與不孕不育女性B19的IgM陽性率。不孕不育組B19的的 IgM陽性率為 2.07%（121/5 859），比孕期組B19的IgM陽性率1.23%（492/39 929）高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），具體結(jié)果見表3。

表2　孕前和孕期女性B19的IgM陽性率情況Table 2　The IgM positive rate of B19 in pre?pregnancy and pregnancy women

表3　孕期女性和不孕不育女性B19 IgM陽性率情況Table 3　The IgM positive rate of B19 in pregnancy and infertile women

3　討論

B19感染呈全球分布，全年均可發(fā)生，而人群對B19普遍易感，尤以兒童和孕婦感染多見。B19感染呈非特異性病毒感染癥狀，而大部分感染者無明顯的臨床癥狀，在妊娠婦女B19感染可發(fā)生垂直傳播會導(dǎo)致胎兒發(fā)生不良結(jié)局。胎兒感染后可發(fā)生貧血、非免疫性水腫、竇性心肌炎、胸腔積液、抗磷脂綜合癥等，是胎兒發(fā)生流產(chǎn)和水腫的重要原因［10］。B19病毒抗體檢測是進行B19病毒感染臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查的主要方法，通常使用商用ELISA試劑盒、Western blot或免疫熒光法針對B19病毒特異IgM、IgG抗體進行檢測［11］。而ELISA方法操作簡便、經(jīng)濟和不需要特殊設(shè)備等優(yōu)點，是臨床B19感染篩查主要方法。本實驗室采用進口ELISA試劑篩查B19感染，分析了2012 年1月至2015年3月就診于廣東省婦幼保健院婦科、產(chǎn)科、生殖健康科和醫(yī)學(xué)遺傳中心進行孕前檢查、產(chǎn)前檢查和不孕不育治療的進行B19感染篩查的廣東地區(qū)育齡女性50 086例，B19的IgM和IgG抗體陽性率分別為 1.40%（700/50 086）、16.72%（341/2 039）。本研究的B19的IgM陽性率較文獻報道6.72%低［12］，可能原因為不同地域陽性率不同還有檢測方法的差別造成。而分組統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，孕前組B19的IgM陽性率比孕期組高，不孕不育組B19的IgM陽性率比孕期組高。B19感染可能與不孕不育具有相關(guān)性，需要進一步研究探討。相關(guān)文獻也曾報道過，B19可能是除TORCH感染之外造成孕婦復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的重要病原體之一［13］，可能是由于免疫缺陷的孕婦不能產(chǎn)生特異性抗體來清除B19病毒，病毒的持續(xù)感染導(dǎo)致習(xí)慣性流產(chǎn)。相關(guān)文獻還指出，體內(nèi)B19 IgG為陽性的人群對細小病毒B19有一定的免疫能力，在感染B19后可迅速被機體清除，血清中B19 IgG抗體為陰性的人群易受細小病毒B19的感染［14］。但有約50%的孕婦在感染細小病毒B19后，不產(chǎn)生特異性的中和抗體，而且有10%~50%的B19 IgG抗體陽性者對細小病毒B19的再次感染無保護能力。由此可推測，這可能與細小病毒B19表面外露區(qū)域氨基酸殘基的高度變異使病毒逃避機體免疫系統(tǒng)的監(jiān)控有關(guān)。歐美有研究報道，在細小病毒B19感染的流行期，其中3%~8%的孕婦存在急性感染，胎盤垂直傳播率為33%~51%，有5%~16%的感染孕婦出現(xiàn)了嚴重胎兒發(fā)病和死亡，傳染源主要為2~7歲急性感染兒童，呼吸道傳播為主，還有血制品、母嬰垂直傳播［15］。

因此育齡婦女B19感染越來越多地引起臨床醫(yī)生的關(guān)注，對育齡婦女進行B19感染篩查以便及早發(fā)現(xiàn)高危人群，針對高危人群進行及時處理和干預(yù)，預(yù)防出生缺陷，對優(yōu)生優(yōu)育、提高人口素質(zhì)具有非常重要意義。

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2.廣東省衛(wèi)生廳婦幼代謝與遺傳病醫(yī)學(xué)重點實驗室，廣東，廣州511442★通訊作者：尹愛華，E?mail：yinaiwa@126.com

何天文和黃濱梅為共同第一作者

基金項目：國家自然科學(xué)基金（81000255）

作者單位：1.廣東省婦幼保健院醫(yī)學(xué)遺傳中心，廣東，廣州511442

Screening results on human parvovirus B19 infection in women of childbear?ing age in Guangdong area

HE Tianwen1，2，HUANG Binmei1，2，WANG Yunan1，2，ZHONG Zhicheng1，2，CHEN Keyi1，2，YIN Aihua1，2★
（1.Medical Genetics Center of Guangdong Women and Children Hospital，Guangzhou，Guangdong，China，511442；2.Maternal and Children Metabolic?Genetic Key Laboratory of Guangdong，Guangzhou，Guang?dong，China，511442）

［ABSTRACT］ObjectiveTo analyze the screening results and investigate the pathology of human parvovirus B19 infection in women of childbearing age in the Guangdong region.MethodsAn enzyme linked immunosorbent assay was used to detect the specific IgM and IgG antibodies of human parvovirus B19 in women of childbearing age in Guangdong.ResultsThe positive rates of specific IgM and IgG antibodies of human parvovirus B19 among the subjects were 1.40%(700/50 086)and 16.72%(341/2 039)respectively.

ConclusionIt is very important to carry out the screening of human parvovirus B19 infection in women of childbearing age and newborn for healthy child rearing and to improve the quality of life for the population.

［KEY WORDS］Women of childbearing age;Human parvovirus B19;Enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)