何優(yōu)選，盧 凱，陳燕娜，邱冰花，梁奇峰

（1.嘉應(yīng)學(xué)院設(shè)備與實驗室管理處，廣東 梅州 514015；2.嘉應(yīng)學(xué)院化學(xué)與環(huán)境學(xué)院，廣東 梅州 514015）

實驗室與分析

抗感冒藥中對乙酰氨基酚含量的紅外光譜法測定

何優(yōu)選1，盧 凱2，陳燕娜2，邱冰花2，梁奇峰2

（1.嘉應(yīng)學(xué)院設(shè)備與實驗室管理處，廣東 梅州 514015；2.嘉應(yīng)學(xué)院化學(xué)與環(huán)境學(xué)院，廣東 梅州 514015）

摘 要：建立了紅外光譜內(nèi)標(biāo)法測定抗感冒藥中對乙酰氨基酚的方法。選擇鐵氰化鉀作為內(nèi)標(biāo)物，定量添加到對乙酰氨基酚中，在對乙酰氨基酚百分含量為0.16%～1.67%范圍內(nèi)，測得混合物紅外光譜中對乙酰氨基酚測量峰（1564.1cm-1）和鐵氰化鉀內(nèi)標(biāo)峰（2117.6cm-1）的峰高比（y= hi/hs）與兩者質(zhì)量比（x= mi/ms）有良好的線性關(guān)系，其線性回歸方程為y=0.8448x+0.0842，相關(guān)系數(shù)r=0.9983。據(jù)此測得抗感冒藥樣品中對乙酰氨基酚的含量，測定結(jié)果與藥典法相近。

關(guān)鍵詞：抗感冒藥；對乙酰氨基酚；鐵氰化鉀；紅外光譜內(nèi)標(biāo)法

對乙酰氨基酚是抗感冒中西藥復(fù)方制劑的主要有效成分，具有解熱鎮(zhèn)痛作用［1］。目前測定中成藥中對乙酰氨基酚含量的方法主要有分光光度法［2］、高效液相色譜法［3］及其他方法［4-6］等。紅外光譜定量分析已經(jīng)實現(xiàn)了單一物質(zhì)、元或多元物質(zhì)的定量測定［7-10］。紅外光譜內(nèi)標(biāo)法是分別選取待測組分和內(nèi)標(biāo)物的一個特征峰作為測量峰和內(nèi)標(biāo)峰，在同一份樣品測定中，測量峰和內(nèi)標(biāo)峰的峰高比（hi/hs）與待測組分和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量比（mi/ms）成正比，據(jù)此可進(jìn)行紅外光譜的定量分析。該法可消除壓片過程中KBr壓片厚度（光程）的不確定性及測定過程中儀器波動帶來的影響，簡化了壓片過程，提高了壓片效率，有較好的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確度。

本文建立了紅外光譜內(nèi)標(biāo)法測定抗感冒中西藥復(fù)方制劑中對乙酰氨基酚含量的方法，測定時樣品無需進(jìn)行繁瑣的提取分離，消耗量少，操作簡單快捷，測定結(jié)果與藥典法相近，有一定的實用價值。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

Nicolet Avatar 360傅立葉變換紅外光譜儀。

鐵氰化鉀、溴化鉀（均為分析純）。對乙酰氨基酚標(biāo)準(zhǔn)品，抗感靈片，撲感片，新復(fù)方大青葉片。

通信聯(lián)系人：梁奇峰（1973-），男，廣東梅縣人，碩士，副教授，主要研究方向:儀器分析的教學(xué)和科研工作

1.2 實驗方法

1.2.1 紅外光譜測繪條件

測定范圍為4000～400cm-1，掃描次數(shù)32次，分辨率4cm-1。每次譜圖掃描前用一個空白的KBr片做背景，以即時除去水、CO2和KBr中所含雜質(zhì)的影響。數(shù)據(jù)采集和處理采用OMNIC 7.4軟件。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的繪制

固定對乙酰氨基酚、K3［Fe（CN）6］和KBr晶體的總質(zhì)量在0.3g左右，內(nèi)標(biāo)物K3［Fe（CN）6］的質(zhì)量為0.0015g，以KBr晶體為稀釋劑，準(zhǔn)確稱量并配制百分含量為0.16%～1.67%左右的對乙酰氨基酚標(biāo)準(zhǔn)樣品系列，分別混合研磨均勻，壓片，采集紅外光譜。測出測量峰（1564±1）cm-1和內(nèi)標(biāo)峰（2117±1）cm-1的校正峰高（吸光度）。繪制測量峰與內(nèi)標(biāo)峰峰高比（hi/hs）與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)樣品中對乙酰氨基酚與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量比（mi/ms）的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

1.2.3 對乙酰氨基酚含量的測定

取同一批次的抗感靈片（或撲感片、大青葉片）20片，去掉外層包衣，將里面的藥粒研成粉末，混勻。準(zhǔn)確稱取0.0271g抗感靈片藥粉（或0.0169g撲感片、0.0126g大青葉片藥粉）、0.0015g K3［Fe（CN）6］和適量的KBr晶體（總質(zhì)量控制在0.3g左右），混合研磨均勻，壓片，采集紅外光譜。測出紅外譜圖中測量峰和內(nèi)標(biāo)峰的校正峰高（吸光度），計算樣品中對乙酰氨基酚的百分含量。平行測定10次，計算測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

1.2.4 回收率的測定

準(zhǔn)確稱取0.0142g混合均勻的抗感靈片藥粉（或0.0085g撲感片、0.0063g大青葉片藥粉），0.0015g K3［Fe（CN）6］和適量的KBr晶體，總質(zhì)量控制在0.3g左右，磨細(xì)磨勻，得藥粉稀釋物。準(zhǔn)確稱取該稀釋物0.0186g，分別加入適當(dāng)質(zhì)量的對乙酰氨基酚標(biāo)準(zhǔn)品，再加入0.0014g K3［Fe（CN）6］和適量的KBr晶體，總質(zhì)量控制在0.3g左右，混合研磨均勻，壓片，采集紅外光譜。測出測量峰和內(nèi)標(biāo)峰的校正峰高（吸光度），計算樣品加標(biāo)回收率。每份樣品測定6次，計算測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。

2 結(jié)果與討論

2.1 內(nèi)標(biāo)物的選擇

經(jīng)實驗，K3［Fe（CN）6］在2117.6cm-1處出現(xiàn)一個強(qiáng)而且孤立的特征峰，其他區(qū)域吸收較小或不吸收。且K3［Fe（CN）6］不與對乙酰氨基酚以及抗感靈片、撲感片的組分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，故選取K3［Fe（CN）6］作為本方法的測定內(nèi)標(biāo)物。

2.2 內(nèi)標(biāo)峰與測量峰的選擇

由圖1可以看出，對乙酰氨基酚在1564.1cm-1處有特征的紅外吸收峰，該峰在抗感靈片、撲感片譜圖中出峰明顯（1564.1cm-1），其他物質(zhì)的干擾較小。內(nèi)標(biāo)物K3Fe（CN）6在2117.6cm-1處有強(qiáng)而且孤立的特征峰，且在該處對乙酰氨基酚、抗感靈片、撲感片和大青葉片樣品無吸收，故選擇1564.1cm-1和2117.6 cm-1吸收峰分別作為測量峰和內(nèi)標(biāo)峰。

圖1 樣品的紅外光譜Fig.1 FT-IR of samples

2.3 樣品穩(wěn)定性的測定

將適量對乙酰氨基酚或抗感冒藥樣品粉末、K3Fe（CN）6和KBr晶體混合研磨均勻，在紅外烘燈下，露置于空氣中放置0～30min。 結(jié)果表明，所得紅外光譜的測量峰和內(nèi)標(biāo)峰的峰高比在30min內(nèi)基本不變，說明樣品混合后性質(zhì)比較穩(wěn)定。

2.4 對乙酰氨基酚濃度的選擇

經(jīng)實驗，對乙酰氨基酚與KBr晶體質(zhì)量比為1∶100時，對乙酰氨基酚的吸收峰強(qiáng)度較合適且峰形較好，故選擇兩者的混合比例為質(zhì)量比1∶100左右。

2.5 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

按照實驗方法，測定對乙酰氨基酚百分含量為0.16%～1.67%標(biāo)準(zhǔn)樣品的紅外光譜，以（1706.5cm-1，1589.8 cm-1）兩點所定基線測定各譜圖中測量峰（1564.1cm-1）的校正峰高（hi），以（2146.2cm-1，2096.5cm-1）兩點所定基線測定各譜圖中內(nèi)標(biāo)峰（2117.6cm-1）的校正峰高（hs）。以hi/hs為縱坐標(biāo)，以對乙酰氨基酚和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)量比mi/ms為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線見圖2。

由圖2可知，在對乙酰氨基酚百分含量為0.16%～1.67%范圍內(nèi)，測量峰和內(nèi)標(biāo)峰的峰高比（y= hi/hs）與兩者質(zhì)量比（x=mi/ms）有良好的線性關(guān)系，其線性回歸方程為y=0.8448x+0.0842，線性相關(guān)系數(shù)r=0.9983。

圖2 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線Fig.2 Standard working curve

2.6 樣品的測定

按樣品測定方法，測定各抗感冒藥（抗感靈片、撲感片和新復(fù)方大青葉片）中對乙酰氨基酚的含量，結(jié)果見表1。

2.7 藥典法測定

表1 抗感冒藥中對乙酰氨基酚含量的測定Tab.1 Determination results of acetaminophen in samples and recoveries of the method

3 結(jié)論

本文建立了紅外光譜內(nèi)標(biāo)法測定抗感冒中成藥（抗感靈片、撲感片、復(fù)方大青葉片）中對乙酰氨基酚含量的方法，測定時樣品無需進(jìn)行繁瑣的提取分離，消耗量少，操作簡單快捷，測定結(jié)果均與藥典法相近，有一定的實用價值。參考文獻(xiàn)：

［1]國家基本藥物領(lǐng)導(dǎo)小組.國家基本藥物（西藥）［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1999:254-255.

［2]劉東風(fēng)，雷鍵.紫外分光光度法測定氨咖黃敏膠囊中對乙酰氨基酚含量［J］.中國藥師，2009，12（7）:986-987.

［3]韓正洲，吳曙光，李瓊婭，等.HPLC測定感冒靈顆粒中對乙酰氨基酚、咖啡因和馬來酸氯苯那敏的含量［J］.中國藥學(xué)雜志，2010，45（3）:228-230.

［4]謝笑英，黃文峰.中成藥中對乙酰氨基酚含量測定的4種方法及比較［J］.河北醫(yī)學(xué)，2005，11（6）:563-565.

［5]程存歸，趙彥勤，梁剛鋒.復(fù)方氨酚烷胺片中對乙酰氨基酚的漫反射傅里葉變換紅外光譜法測定［J］.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2003，34（2）:87-89.

［6]屈愛桃，孫利民，溫愛萍.薄層掃描法測定三九感冒靈沖劑中對乙酰氨基酚及咖啡因的含量［J］.中國藥房，2003，14（6）:365-366.

［7]程存歸，朱魯夫.漫反射FT-IR法測定阿奇霉素片劑中阿奇霉素的含量［J］.分析試驗室，2002，21（3）:37-39.

［8]張秀萍，何書美.紅外光譜在定量分析中的應(yīng)用［J］.分析科學(xué)學(xué)報，2007，23（4）:484-488.

［9]周永國，侯文龍，楊越冬，等.傅里葉變換紅外光譜法同時測定奶粉中蛋白質(zhì)和脂肪含量［J］.理化檢驗-化學(xué)分冊，2009，45（1）:66-69.

［10]朱哲燕，劉飛，張初，等.基于中紅外光譜技術(shù)的香菇蛋白質(zhì)含量測定［J］.光譜學(xué)與光譜分析，2014，34（7）:1844-1848.

中圖分類號：O 657.33

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1671-9905（2016）02-0030-04

作者簡介：何優(yōu)選（1974-），男，廣東大埔人，高級實驗師，碩士，主要研究方向:實驗室管理和儀器分析。TeL:0753-2186680；E-mail: jyuhyx@126.com

收稿日期：2015-12-23

Determination of Acetaminophen in Anti-cold Drugs by Internal Standard Method of FT-IR

HE You-xuan1， LU Kai2， CHEN Yan-na2， QIU Bing-hua2， LIANG Qi-feng2
（1.Facility and Laboratory Management Department， Jiaying University， Meizhou 514015， China； 2.School of Chemistry and Environment， Jiaying University，Meizhou 514015， China）

Abstract:A novel method for the determination of acetaminophen in anti-cold drugs by internal standard method of Fourier transform infrared spectrophotometry （FT-IR） was establlished. Potassium ferricyanide was added into acetaminophen as internal reference and the mixtures were detected by FT-IR. The peak of acetaminophen at （1564±1）cm-1was chosen as quantitative peak and the one of potassium ferricyanide at （2117±1） cm-1was chosen as inside mark quantitative peak. The ratio of two peak's absorbance （y=hi/hs） had good linear relationship with their mass ratio （x=mi/ms） when the mass fraction of acetaminophen was 0.16%～1.67%. The linear regression equation was y=0.8448x+0.0842， and the linear correlation coefficient was 0.9983. The contents of acetaminophen in the anti-cold drugs sample was detected and the determination results were similar to those of pharmacopoeia method.

Key words:anti cold drugs； acetaminophen； potassium ferricyanide； internal standard method of FT-IR