梁飛龍，王欽貴，鄧岳文，謝紹河，

（1廣東海洋大學珍珠研究所，廣東　湛江　524025；2廣東紹河珍珠有限公司，廣東　汕頭　515822）

術前處理和珠核規(guī)格對企鵝珍珠貝游離珍珠培育效果的影響

梁飛龍1，王欽貴2，鄧岳文1，謝紹河1，2

（1廣東海洋大學珍珠研究所，廣東湛江524025；2廣東紹河珍珠有限公司，廣東汕頭515822）

本研究比較了不同術前處理方式和不同規(guī)格珠核對企鵝珍珠貝（Pteria penguin）游離珍珠培育效果的影響。術前處理方式分別為抑制母貝性腺發(fā)育和促進性腺發(fā)育排精產卵，珠核規(guī)格分別為5.0 mm、6.0 mm、7.0 mm和8.0 mm，手術貝休養(yǎng)期為1個月，育珠期為18個月。結果顯示：術前處理和珠核規(guī)格對育珠貝成活率、留核率和成珠率存在顯著影響（P＜0.05），促進性腺發(fā)育排精產卵處理的育珠貝休養(yǎng)期、育珠期成活率、留核率和成珠率最高（62.0%、54.0%、21.0%和48.0%），未經術前處理的對照組最低（50.0%、38.0%、11.0%和32.0%），珠核直徑5.0 mm組休養(yǎng)期、育珠期手術貝成活率、留核率和成珠率最高（64.0%、54.0%、22.0%和45.0%），8.0mm最低（42.0%、33.0%、8.0%和22.0%）。本研究結果表明，通過手術前處理可以顯著提高企鵝珍珠貝育珠貝的成活率、留核率和成珠率，企鵝珍珠貝游離珍珠培育的合適的珠核規(guī)格為5.0～6.0 mm。

企鵝珍珠貝；游離有核珍珠；術前處理；珠核規(guī)格

企鵝珍珠貝［Pteria penguin（R?ding）］，屬軟體動物門（Mollusca），雙殼綱（Bivalvia），珍珠貝科（Pteriidae），珍珠貝屬（Pteria）。分布于熱帶、亞熱帶海區(qū)，如日本、泰國、印度尼西亞、菲律賓、澳大利亞、馬來西亞等國，以及我國廣東、廣西和海南沿海深水海域。貝體成斜方形，前耳短，后耳長，殼外表面黑色，殼內表面珍珠層銀白色，靠近腹緣部分為古銅色，具有彩虹光澤，足絲十分粗壯，附著力強，閉殼肌發(fā)達，具有生長速度快，對環(huán)境適應力強，分泌珍珠質機能旺盛等特點。成體殼高約18 cm，殼長約21 cm，厚4 cm，最大殼高可達25 cm，企鵝珍珠貝左右兩殼隆起顯著，是培育半圓附殼珍珠的理想母貝，在國外主要用于培育附殼珍珠［1-4］。企鵝珍珠貝形態(tài)結構特殊，培育游離珍珠十分困難，國外還沒有利用企鵝珍珠貝（Pteria penguin）成功培育出游離珍珠的有關報道。在國內，利用企鵝珍珠貝培育正圓游離珍珠已經取得初步成功，但還存在育珠貝吐核率高，病死率高，成珠率低的問題［5-10］。為了突破企鵝珍珠貝游離珍珠培育的技術瓶頸，筆者進行了術前處理和珠核規(guī)格對企鵝珍珠貝游離珍珠培育的影響試驗。

1　材料和方法

1.1材料

植核母貝來自廣東紹河珍珠有限公司徐聞承梧養(yǎng)殖基地。手術貝：貝齡2.0～3.0齡，殼高11.6～14.7 cm，殼表面光潔，角質層無分層脫落現(xiàn)象，鱗片銳利，足絲粗壯。小片貝：貝齡1.5～2.0齡，殼高10.8～12.5 cm，殼內珍珠層為銀白色或彩虹色。珠核：由淡水麗蚌貝殼研磨而成，正圓形，直徑5.0～8.0 mm；休養(yǎng)籠為錐形籠，底徑30 cm，高25 cm，網(wǎng)目3.0 cm×2.0 cm；育珠籠為片狀網(wǎng)籠，規(guī)格120 cm×50 cm，網(wǎng)目3.0 cm×2.0 cm。

1.2方法

1.2.1細胞小片制作用解剖刀將小片貝的閉殼肌從中間切斷，將貝體打開，用消毒海水沖洗干凈黏液及其他附著物，再用切片刀將唇瓣下方至肛門之間的外套膜切下，切除外套膜緣觸手，以色線為中心按外側占30%、內側占70%的比例切成寬度為2.0～2.5 mm的條狀，然后切成正方形的細胞小片，使用前滴上3%的紅汞水進行消毒和染色。

1.2.2植核手術將經過術前處理的待植核貝清洗干凈，經排貝、栓口后挑選合格者作為手術貝，固定于植核臺上，用剪刀剪去足絲，在足和內臟囊交界處切一口作為送核口，用通道針通道至預定核位，先送核后送片，植核位置為“左袋”位于腸道回曲處前方。

1.2.3休養(yǎng)與育珠植核手術結束后，按每籠2～3只施術貝的密度裝入休養(yǎng)籠中（每只施術貝外套一個網(wǎng)目3.0 mm×3.0 mm的休養(yǎng)網(wǎng)袋，以回收死貝脫落和吐核脫落的珠核），吊養(yǎng)于湛江徐聞承梧紹河珍珠公司養(yǎng)殖海區(qū)，每3～5 d檢查1次育珠貝的恢復與脫核情況。休養(yǎng)期為1個月，休養(yǎng)期結束后，按每籠裝貝9～12只的密度換用片籠進行育珠貝養(yǎng)殖，育珠期為18個月。根據(jù)附著生物的多寡，約每月清洗1次養(yǎng)殖籠外的附著物，同時更換破損的育珠籠。

1.3實驗設計

1.3.1術前處理對植核育珠效果的影響

1.3.1.1抑制性腺發(fā)育法在每年的1—2月，植核手術前30～40 d，挑選性腺發(fā)育尚未豐滿，外觀分辨不出雌雄性的母貝，按每籠12～15個的密度裝進錐形籠中，外套一個30目的網(wǎng)布，吊養(yǎng)在浮排下水深400 cm水層處。每5～6 d檢查1次，切除新生長的足絲，處理時間20～25 d，共切除足絲3～4次，待貝體不再生長出新的足絲和鱗片或只有1～2條足絲，軟體部松軟，外套膜呈白色透明狀，即達到處理目的可以進行植核手術。試驗使用母貝1 500只。

1.3.1.2促進性腺發(fā)育排精產卵法手術前30 d左右，選擇性腺比較豐滿的母貝（雄性乳黃色，雌性土黃色），按每籠2～3只的密度裝進錐形籠，吊養(yǎng)于浮排下150～200 cm水層，經10～15 d的培育，切除足絲，洗刷干凈，挑選性腺豐滿的母貝陰干（溫差刺激）1～2 h再吊回養(yǎng)殖浮排相同水層，刺激1～2次，性腺發(fā)育成熟的母貝會自動排精產卵，母貝排放后休整3～5 d進行植核手術。使用母貝1 500只。

1.3.2珠核規(guī)格對植核育珠影響選擇貝齡2.0～3.0年，殼高11.6～14.7 cm的企鵝珍珠貝，分別植入直徑5.0、6.0、7.0和8.0 mm的珠核。比較不同規(guī)格珠核的植核育珠效果，植核位置為“左袋”（位于腸道回曲處前方），植核方式為先送核后送片［11］，使用母貝1 500只。

1.4數(shù)據(jù)的收集和統(tǒng)計分析

休養(yǎng)期為30 d、育珠期18個月，休養(yǎng)期和育珠期分別統(tǒng)計育珠貝成活率、留核率和成珠率。

休養(yǎng)期成活率=休養(yǎng)期結束成活貝數(shù)量/植核貝數(shù)量×%；育珠期成活率=育珠結束成活貝數(shù)量/休養(yǎng)期結束成活貝數(shù)量×%；留核率=收獲珍珠及珠核數(shù)量/成活貝數(shù)×%；成珠率=收獲商品珍珠數(shù)量/成活貝中收獲珍珠及珠核數(shù)量×%。

利用單因素方差（ANOVA）比較實驗組間的成活率、留核率和成珠率，若差異顯著再利用LSD方法比較各組間的差異；檢驗的顯著性水平設為P＜0.05。

2　結果與分析

2.1術前處理對企鵝珍珠貝植核育珠效果的影響

從表1可見，術前處理對植核母貝的成活率、留核率和成珠率存在顯著影響（P＜0.05）。促性腺發(fā)育排精產卵法處理的手術貝成活率、留核率和成珠率最高（62.0%、54.0%、21.0%、48.0%），未經術前處理的對照相最低（50.0%、38.0%、11.0%、32.0%）；不同術前處理方式之間在育珠貝成活率、留核率和成珠率方面差異不顯著。

2.2珠核規(guī)格對植核育珠效果影響

珠核規(guī)格對育珠貝成活率和成珠率存在顯著影響（P＜0.05），植入直徑5.0 mm珠核的育珠貝具有最高的休養(yǎng)期和育珠期成活率、留核率和成珠率（64.0%、54.0%、22.0%和45.0%），并且顯著大于8.0 mm組（42.0%、33.0%、8.0%和22.0%），但與植入直徑6.0 mm珠核的相比差異不顯著。珠核直徑達7.0 mm和8.0 mm時吐核率接近90%，表明2～3齡的企鵝珍珠貝植核手術使用的適宜珠核直徑為5.0～6.0 mm。

表1不同術前處理的企鵝珍珠貝植核育珠效果　%

表2手術貝植入不同珠核規(guī)格的育珠效果　%

3　討論

珍珠培育過程中，需要將合適規(guī)格的珠核和細胞小片植入到手術貝內臟囊，并且使細胞小片的光滑面和珠核表面緊密相貼，隨后手術貝經過一系列的生理生化變化形成珍珠囊分泌珍珠質沉積在珠核表面形成珍珠。手術貝的性腺發(fā)育水平和貝體活力，以及珠核規(guī)格對植核育珠效果產生重要影響。

3.1術前處理對植核育珠的影響

研究表明，性腺豐滿的手術貝妨礙植核操作，并且成珠率低，污珠及有機質珍珠比例高，為了提高育珠貝的成活率、留核率和優(yōu)質珠率，需要對手術貝進行合適的術前處理以調整手術貝達到適合植核手術的狀態(tài)［1，11-15］。例如，梁飛龍等［12］報道了經過術前處理能夠顯著提高馬氏珠母貝（Pinctada martensii）手術貝的成活率、留核率和珍珠質量。符韶等［13］認為術前處理可以明顯提高珠母貝（Pinctada margaritifera）植核貝的成活率、留核率和收珠率。謝玉坎等［14］在大珠母貝（Pinctada maxima）植核育珠實驗中觀察到經過預（術）前處理的手術貝，休養(yǎng)期平均成活率達85%，有的甚至達100%。珍珠貝類的手術前處理方法主要有抑制性腺發(fā)育與促進性腺成熟提前排放精卵2種方法［15］。抑制性腺發(fā)育法主要通過增加養(yǎng)殖密度，將養(yǎng)殖母貝吊養(yǎng)在較深的養(yǎng)殖水層，通過控制水流和餌料供給，以抑制母貝的活力和性腺發(fā)育，達到調節(jié)母貝的生理狀態(tài)。本研究將企鵝珍珠貝從常規(guī)養(yǎng)殖密度3～4個/籠，增加到12～15個/籠，水深200 cm增加到400 cm，吊養(yǎng)20～25 d，切除足絲3～4次，以抑制母貝的性腺發(fā)育和活力。對于性腺發(fā)育較豐滿的采用疏養(yǎng)淺吊，養(yǎng)殖密度從3～4個/籠調整為2～3個/籠，養(yǎng)殖水深從200～300 cm調整為150～200 cm，通過陰干（利用空氣溫度和水溫差異）刺激母貝排精產卵，兩種方式均取得良好的育珠效果。其中，促性腺發(fā)育排精產卵法效果略好于抑制性腺發(fā)育的，筆者認為造成這一結果的主要原因是促性腺發(fā)育法是促進貝體的生長發(fā)育，然后誘導其排精產卵休整3～5 d即進行手術，貝體在整個處理過程中生長沒有受到抑制，處理時間短，生殖腺排空后核位空間較大，因此手術后恢復快，手術貝成活率高、留核率高；抑制性腺發(fā)育方式的處理時間長，處理過程中貝體受到抑制，手術后要經過一段時間才能從抑制狀態(tài)恢復到正常狀態(tài)，其次抑制造成貝體內臟團瘦小導致核位縮小，故植核貝的成活率和留核率低。由于貝體的性腺發(fā)育水平和養(yǎng)殖水域環(huán)境存在差異，在實際應用中要根據(jù)貝體的生理狀態(tài)采取合適的術前處理方法，對于性腺沒有充分發(fā)育的母貝，采取抑制性腺發(fā)育的方法。對于性腺發(fā)育接近成熟的母貝，采取疏養(yǎng)促進性腺發(fā)育人工刺激誘導其排精產卵。

3.2不同規(guī)格珠核對企鵝珍珠貝植核育珠效果的影響

珍珠培育使用的珠核大小關系到所培育的珍珠規(guī)格和質量，珠核直徑小，所產珍珠顆粒小，價格低，不能充分發(fā)揮育珠貝的產能，珠核規(guī)格過大，育珠貝病死率高、脫核率高，影響珍珠的收獲量。黃惟灝等［16］認為體長120～122 mm的三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）內臟團植入直徑8.00～8.25 mm珠核培育有核珍珠效果比較理想。符韶等［13］認為珠母貝（Pinctada margaritifera）首次植核的適宜珠核直徑為6.0mm，珠核規(guī)格越大，手術貝病死率越高。Kripa V等［17］認為，手術貝的留核率和病死率因養(yǎng)殖場的位置和珠核規(guī)格而異，使用大規(guī)格珠核可使日本珠母貝（馬氏珠母貝）珍珠收獲量減少40%～70%。

該研究表明，企鵝珍珠貝手術貝的成活率、留核率、成珠率和珠核規(guī)格成反比，珠核直徑越大、育珠貝的成活率、留核率、成珠率越低。筆者經過解剖觀察到企鵝珍珠貝內臟團結構特殊，足絲和閉殼肌發(fā)達，擠壓其他部位的組織器官，可容納珠核的空間小，其次表皮厚實，開口、通道、送核十分困難，結締組織單薄不能為植核后珍珠囊的形成提供充足的營養(yǎng)，因此大顆粒珠核在手術過程中容易損傷通道周圍的組織器官，導致育珠貝病死率高、留核率低、成珠率低。但是，如果使用珠核直徑過小，雖然不影響植核操作，但培育的珍珠顆粒小，價格低，育珠貝的產能得不到充分發(fā)揮，造成母貝資源浪費。珍珠的價格主要由珍珠的大小、光澤、顏色和形狀決定，在光澤、顏色和形狀相同或相似的情況下，珍珠直徑越大價格越高。珠核直徑5.0 mm組和6.0 mm組在育珠貝成活率和成珠率方面差異不顯著，建議2.0～3.0齡（殼高11.6～14.7 cm）企鵝珍珠貝植核使用直徑6.0 mm珠核，只有個別尺寸比較小的使用5.0 mm珠核，以提高珍珠培育的經濟效益。

3.3不同貝齡對企鵝珍珠貝植核育珠效果的影響

貝體的大小與貝齡和環(huán)境條件密切相關，珍珠貝類隨著年齡和個體的增加生長速度減慢，珍珠質分泌速度下降［1，11，18-21］。例如，Yukihira H等［18］在大堡礁（Great Barrier Reef）的兩個不同地點養(yǎng)殖大珠母貝（Pinctada maxima）和珠母貝（P.margaritifera），結果顯示大珠母貝生長速度比珠母貝快，大珠母貝在兩個實驗點達到首次植核的殼高12 cm所需時間為1.9年和2.1年，而達到相同規(guī)格珠母貝所需時間為2.5年和3.9年。尹立鵬等［19］利用2齡和1.5齡的馬氏珠母貝（Pinctada martensii）進行植核育珠，結果顯示低齡貝（1.5齡）植核育珠明顯提高育珠貝的留核率、成活率和珍珠層厚度。符韶等［13］進行珠母貝（Pinctada margaritifera）育珠實驗，結果顯示年幼的母貝對手術適應性強、傷口愈合快，具有較高成活率、成珠率。Xu等［20］認為3～4齡三角帆蚌（Hyriopsis cumingii）分泌珍珠質能力最強，2～3齡次之，5齡后珍珠分泌能力明顯下降。因此，在選擇手術母貝時既要考慮母貝的年齡，還要考慮母貝的大小，選擇年齡小個體大的母貝做手術母貝，因為低齡貝的珍珠質分泌能力強，而較大的個體可承受較大直徑的珠核，達到在比較短的養(yǎng)殖時間內培育較大顆粒的珍珠，提高育珠效益。

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Pre-operative condition and nucleus size on round nucleated pearl production of Pteria penguin

Liang Feilong1，Wang Qingui2，Deng Yuewen1，Xie Shaohe1，2
（1.Pearl Research Institute，Guangdong Ocean University，Zhanjiang Guangdong 524025，China；2.Guangdong Shaohe Pearl Co.Ltd，Shantou Guangdong，515822 China）

Experiments were conducted to evaluate the effects of pre-operative condition and nucleus size on round nucleated pearl production performances of pearl oyster Pteria penguin.The pearl oyster was farmed in deeper water column to reduce metabolic rate，or induced to spawn by temperature stimulating prior to nucleusinserting operation for pre-operative condition.The diameters of nuclei were 5.0 mm，6.0 mm，7.0 mm and 8.0 mm，respectively.The recovery period and pearl farming period after nucleus implantation were one month and 18 months，respectively.The results showed that there were significant differences in the survival and pearl formation rates among groups（P＜0.05）.The survival rates，nucleus retention and pearl formation rates of host oysters during recovery and farming period were highest，with the values of 62.0%，54.0%，21.0%and 48.0%for implanted oysters by temperature stimulating for inducing to spawn.The lowest values were 50.0%，38.0%，11.0%and 32.0%for control groups，respectively.The survival rates during recovery and farming period，nucleus retention and pearl formation rates of operated oysters were the highest，with the values of 64.0%，54.0%，22.0%and 45.0%for 5.0 mm nucleus implanted oysters.The lowest values were 42.0%，33.0%，8.0% and 22.0%for 8.0mm nucleus implanted oysters，respectively.The results suggested that pre-operation condition can evidently improve survival rate，nucleus retention and pearl formation rates of host oysters and the nucleus diameter was 5.0～6.0 mm should be optimum for round nucleated pearl production of Pteria penguin.

Pteria penguin；round nucleated pearl；pre-operative condition；nucleus size

S968.35

A

1004-2091（2016）01-0030-05

10.3969/j.issn.1004-2091.2016.01.006

廣東省教育部產學研結合項目（2009B090300161）

梁飛龍（1963-），男，教授級高工，研究方向：珍珠養(yǎng)殖技術研究與開發(fā).E-mail:lflzjou@126.com

謝紹河（1955-），男，教授.E-mail:xsh5760288@126.com

2015-06-23）