虎淑妍， 邢　潔， 李　娟， 張成憲

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甘肅省慶陽市人民醫(yī)院細菌耐藥性監(jiān)測

虎淑妍， 邢潔， 李娟， 張成憲

摘要：目的 調(diào)查分析2014年甘肅省慶陽市人民醫(yī)院臨床分離菌的分布和耐藥特征，為醫(yī)院臨床合理選用抗菌藥物提供可靠依據(jù)。方法 采用紙片擴散法（K-B法）和E試驗法對分離菌株進行藥敏試驗，根據(jù)CLSI 2014年標準判定藥敏結果，用 WHONET5.6軟件進行數(shù)據(jù)分析。結果 2014年1—12月該院共分離出非重復菌2 121株，其中革蘭陰性菌1 565株，占73.8%；革蘭陽性菌556株，占26.2%。前5位分離菌依次為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黃色葡萄球菌（金葡菌）、鮑曼不動桿菌和銅綠假單胞菌。葡萄球菌中耐甲氧西林金葡菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）檢出率分別為44.6%和15.4%。大腸埃希菌和金葡菌分別居革蘭陰性桿菌和革蘭陽性球菌菌株數(shù)的首位。萬古霉素和碳青霉烯類藥物仍然是革蘭陽性球菌和腸桿菌科細菌最敏感的藥物。結論 2014年1—12月該院住院患者分離的細菌以大腸埃希菌居首位，產(chǎn)ESBL的大腸埃希菌分離率較高，病原菌對多種抗菌藥物的耐藥率呈上升趨勢。臨床微生物室及感染管理科應繼續(xù)加強細菌耐藥監(jiān)測，為臨床合理選擇用藥提供參考依據(jù)。

關鍵詞：細菌耐藥性監(jiān)測； 抗菌藥物； 藥敏試驗； 耐藥性

抗菌藥物的廣泛應用尤其是不合理應用，導致細菌耐藥率不斷上升，多重耐藥菌及泛耐藥菌亦不斷出現(xiàn)，是臨床抗感染治療面臨的巨大挑戰(zhàn)。不同地區(qū)及不同醫(yī)院分離菌的耐藥性存在顯著差異，密切監(jiān)測臨床常見病原菌的耐藥性及其變遷對指導臨床合理使用抗菌藥物具有重要意義。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1 細菌來源 收集慶陽市人民醫(yī)院2014年1—12月臨床送檢的全部標本分離得到的細菌，剔除同一患者相同部位重復菌株，采用法國生物梅里埃公司VITEK 2-Compact全自動微生物鑒定儀進行細菌鑒定。

1.1.2 質(zhì)控菌株 大腸埃希菌ATCC 25922，金黃色葡萄球菌（金葡菌）ATCC 29213、ATCC 25923，銅綠假單胞菌ATCC 27853，陰溝腸桿菌ATCC 700323，糞腸球菌ATCC 29212均購于衛(wèi)生部臨床檢驗中心。

1.1.3 抗菌藥物紙片 藥敏紙片和MH瓊脂粉均為英國OXOID公司商品。

1.2方法

2.1細菌分布及種類

1.2.1 藥敏試驗與方法 肺炎鏈球菌青霉素和葡萄球菌萬古霉素藥敏結果用E試驗法測得；其余常規(guī)藥敏結果用紙片擴散法（Kirby-Bauer）測得。

1.2.2 耐甲氧西林葡萄球菌檢測方法 采用頭孢西丁檢測。

1.2.3 超廣譜β內(nèi)酰胺酶（ESBL）檢測方法 采用文獻推薦的協(xié)同法進行ESBL篩選［1］。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析 采用WHONET 5.6軟件進行數(shù)據(jù)處理和藥敏分析；所有藥敏結果均按照CLSI 2014［1］的標準判定結果。

2　結果

2014年1—12月從臨床標本中共分離出2 121株細菌，其中革蘭陰性菌1 565株，占73.8%；革蘭陽性菌556株，占26.2%。大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌中產(chǎn)ESBL菌株檢出率分別為53.3% 和45.2%。分離的前5種細菌分別為大腸埃希菌（30.7%）、肺炎克雷伯菌（14.7%）、金葡菌（11.7%）、鮑曼不動桿菌（6.4%）和銅綠假單胞菌（5.5%）。革蘭陰性菌中腸桿菌科細菌占77.3%，不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌占21.3%，其他革蘭陰性菌1.4%；革蘭陽性菌中葡萄球菌屬60.1%，腸球菌屬23.3%，肺炎鏈球菌10.1%，β溶血鏈球菌2.9%，其他革蘭陽性菌3.6%。上述臨床分離菌株的主要標本分布是：呼吸道標本38.9%、傷口分泌物15.4%、血方法液11.5%、尿液10.3%、膿液7.6%、胸腹水6.8%、腦脊液3.1%，其他標本6.4%。

2014年1—12月共檢出的2 121株細菌中包括92個種屬。檢出菌排名前10位的是：大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、金葡菌、鮑曼不動桿菌、銅綠假單胞菌、陰溝腸桿菌、肺炎鏈球菌、屎腸球菌、糞腸球菌和奇異變形桿菌。各個菌種（或屬）檢出菌占所有分離菌的比率見表1。

表1　各種檢出菌占總菌數(shù)的百分比Table 1 Distribution of bacterial species in 2014

2.2細菌對常用抗菌藥物的敏感率和耐藥率

2.2.1 腸桿菌科 幾種腸桿菌科細菌對第一代頭孢菌素的耐藥率達60%以上；對頭孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦等敏感率在70%以上；對阿米卡星和左氧氟沙星的敏感率在60%以上；對碳青霉烯類的耐藥率不到1%，見表2。

2.2.2 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌 不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對氨芐西林、頭孢唑林、頭孢西丁、頭孢噻肟、頭孢哌酮的耐藥率達到60%以上；鮑曼不動桿菌對頭孢哌酮-舒巴坦、阿米卡星、左氧氟沙星的敏感率在60%以上；銅綠假單孢菌對哌拉西林-他唑巴坦、美羅培南、氨基糖苷類、喹諾酮類藥物的敏感率在60%以上，見表3。

表2　部分腸桿菌科細菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 2 Susceptibility of Enterobacteriaceae species to antibacterial agents

2.2.3 葡萄球菌屬 凝固酶陰性葡萄球菌耐甲氧西林菌株的檢出率逐年升高。金葡菌和凝固酶陰性葡萄球菌對常用抗菌藥物的耐藥率和敏感率見表4。

2.2.4 腸球菌屬 腸球菌檢出率呈現(xiàn)逐年升高，屎腸球菌的檢出率高于糞腸球菌，耐藥率也高于糞腸球菌。兩種細菌對常用抗菌藥物的耐藥率和敏感率見表5。

2.2.5 肺炎鏈球菌 2014年共分離出肺炎鏈球菌56株，均為青霉素敏感株（PSSP），對紅霉素、克林霉素、甲氧芐啶-磺胺甲唑、四環(huán)素的耐藥率均在70%以上，見表6。

表3　銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 3 Susceptibility of P. aeruginosa and A. baumannii to antimicrobial agents

表3?。ɡm(xù)）Table 3 （continued）

3　討論

本次數(shù)據(jù)中，以革蘭陰性桿菌為多，與本院2010年監(jiān)測資料的數(shù)據(jù)相近［3］，革蘭陰性桿菌和革蘭陽性球菌中居首位的分別為大腸埃希菌和金葡菌，這與國內(nèi)監(jiān)測網(wǎng)結果基本一致［4］，鮑曼不動桿菌的排名上升為第4位，銅綠假單胞菌下降為第5位。金葡菌中MRSA明顯低于2010年數(shù)據(jù)［3］，這可能與醫(yī)院2011年開始執(zhí)行《抗菌藥物臨床應用指南》及注意手衛(wèi)生和病房消毒有關。

腸桿菌科細菌感染在臨床治療中首選的為碳青霉烯類藥物［5］。檢出2株耐厄他培南的肺炎克雷伯菌。其他腸桿菌科細菌未檢出碳青霉烯類耐藥菌。厄他培南耐藥的主要機制是產(chǎn)生β內(nèi)酰胺酶同時伴有外膜孔蛋白的缺失。

表4　葡萄球菌屬主要菌種對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 4 Susceptibility of Staphylococcus strains to antimicrobial agents

本分析顯示不發(fā)酵糖革蘭陰性桿菌對碳青霉烯類的耐藥率明顯高于2010年。其中鮑曼不動桿菌對碳青霉烯類耐藥率達到70%以上，鮑曼不動桿菌感染主要集中于重癥監(jiān)護病房（40.5%）和神經(jīng)外科（23.2%）?？赡芘c侵襲性操作、患者免疫力低下、廣譜抗菌藥物廣泛應用及住院時間長等諸多因素有關。銅綠假單胞菌在臨床上出現(xiàn)多重耐藥的特點主要與近年來臨床抗菌藥物不合理使用導致其基因突變相關，其耐藥機制復雜，而且具有較強的環(huán)境適應能力，是醫(yī)院感染常見的條件致病菌。

表5　腸球菌屬主要菌種對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 5 Susceptibility of Enterococcus species to antimicrobial agents

表6　肺炎鏈球菌（非腦膜炎株）對抗菌藥物的耐藥率和敏感率Table 6 Susceptibility of non-meningitis S. pneumoniae strains to antimicrobial agents

肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌分離率較以前明顯增加。肺炎鏈球菌對紅霉素、克林霉素和甲氧芐啶-磺胺甲唑的耐藥率在70%以上；流感嗜血桿菌β內(nèi)酰胺酶陽性率較高，對氨芐西林、頭孢哌酮-舒巴坦耐藥率在60%以上。

細菌耐藥性已是我國衛(wèi)生領域目前面臨的嚴峻問題，如何控制這些細菌在醫(yī)院感染的暴發(fā)流行是我們面臨的重大課題［6］。了解當?shù)丶毦餍屑澳退幀F(xiàn)狀，各地各級醫(yī)院必須進一步加強細菌耐藥監(jiān)測。我院個別抗菌藥物耐藥數(shù)據(jù)與國內(nèi)監(jiān)測網(wǎng)結果相差較大，與當?shù)乜咕幬锉O(jiān)管不嚴及抗菌藥物不合理應用密切相關；醫(yī)院微生物室及相關科室應加強抗菌藥物敏感性的檢測，為臨床合理應用抗菌藥物提供參考數(shù)據(jù)，以指導臨床合理應用抗菌藥物，減少耐藥菌的產(chǎn)生。手衛(wèi)生和加強醫(yī)院環(huán)境消毒將是阻斷碳青霉烯類藥物耐藥菌株在醫(yī)院環(huán)境內(nèi)廣泛播散的關鍵措施，應加強抗菌藥物的監(jiān)督管理，合理使用抗菌藥物，同時加強醫(yī)院感染的控制，防止醫(yī)院內(nèi)多重耐藥菌株和泛耐藥菌株的傳播。

參考文獻：

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中圖分類號：R378

文獻標識碼：A

文章編號：1009-7708（2016）03-0368-05

DOI：10.16718/j.1009-7708.2016.03.021

收稿日期：2015-09-22 修回日期：2015-11-30

作者單位：甘肅省慶陽市人民醫(yī)院檢驗科，甘肅慶陽 745000。

作者簡介：虎淑妍（1972—），女，本科，副主任檢驗師，主要從事醫(yī)院細菌耐藥數(shù)據(jù)基礎研究分析。

通信作者：虎淑妍，E-mail：562190996@qq.com。

Antibiotic resistance profle of clinical isolates in People's Hospital of Qingyang，Gansu Province

HU Shuyan， XING Jie， LI Juan， ZHANG Chengxian. （Department of Laboratory Medicine， Qingyang People's Hospital， Qingyang Gansu 745000， China）

Abstract:Objective To investigate the distribution and antibiotic resistance of clinical isolates in People's Hospital of Qingyang during 2014 to provide evidence for rational antimicrobial therapy. Methods Bacterial strains were isolated and identified by routine methods and tested by disk diffusion method and E-test for antimicrobial susceptibility. The data were analyzed according to CLSI breakpoints using WHONET 5.6 software. Results Of the 2 121 nonduplicate strains isolated from January through December 2014， 1 565 （73.8%） were gram-negative and 556 （26.2%） were gram-positive strains. The top fve pathogens were E. coli， K. pneumoniae， A. baumannii， S. aureus and P. aeruginosa. The prevalence of methicillin-resistant Staphylococcus aureus （MRSA） and methicillin-resistant coagulase negative Staphylococcus （MRCNS） was 44.6% and 15.4%， respectively. E. coli was the most common gram-negative bacterial species， while S. aureus was the most common gram-positive bacteria species. Gram-positive bacteria were still highly susceptible to vancomycin， and gram-negative bacteria （such as Enterobacteriaceae） were still highly susceptible to carbapenems. Conclusions E. coli is the most prevalent pathogen isolated from inpatients in this hospital during 2014. The prevalence of ESBLs-producing strains is the highest in E. coli isolates. The pathogenic bacteria in this hospital showed increasing resistance to a variety of antibacterial agents. Surveillance of antibiotic resistance and effective control measures are necessary to control the growing antimicrobial resistance.

Key words:bacterial resistance surveillance； antimicrobial agent； antimicrobial susceptibility testing； antibiotic resistance profle