崔耀明，樊克鋒，林　莉

（1.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院，河南 鄭州 450046；2.河南普爾泰動(dòng)物藥業(yè)有限公司，河南 鄭州 450000）

氟苯尼考與甲氧芐啶復(fù)方注射液的抑菌性試驗(yàn)

崔耀明1，樊克鋒1，林莉2

（1.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院，河南 鄭州 450046；2.河南普爾泰動(dòng)物藥業(yè)有限公司，河南 鄭州 450000）

對氟苯尼考與甲氧芐啶配伍來制備復(fù)方注射劑的有效性，進(jìn)行了配伍增效的抑菌效果研究。采用體外抑菌效果試驗(yàn)，利用臨床分離的5株豬大腸桿菌為試驗(yàn)菌株，進(jìn)行了氟苯尼考與甲氧芐啶聯(lián)用的體外抑菌效果試驗(yàn)，以及比較復(fù)方氟苯尼考與氟苯尼考的MIC值。測得氟苯尼考、甲氧芐啶的最小抑菌濃度（MIC）分別為8 μg/mL和16 μg/mL，兩藥聯(lián)合應(yīng)用的部分抑菌濃度指數(shù)（FIC）值介于0.375～0.75之間，呈現(xiàn)協(xié)同或相加作用，其中氟苯尼考與甲氧芐啶按照5∶1的比例聯(lián)合應(yīng)用時(shí)的MIC值最小，抗菌效果最好。復(fù)方氟苯尼考的抑菌效果明顯高于氟苯尼考，比氟苯尼考的抑菌效果增加了4～8倍。說明氟苯尼考與甲氧芐啶配伍制備復(fù)方注射液具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，并提供了復(fù)方配比的參考比例。

復(fù)方；氟苯尼考；甲氧芐啶；注射液；抑菌性

氟苯尼考注射液在獸醫(yī)臨床普遍應(yīng)用，多為單方制劑，因耐藥性的出現(xiàn)，臨床上為達(dá)到良好的治療效果需要大劑量使用，往往采用高濃度（20%）氟苯尼考注射液，造成應(yīng)用成本過高，影響了該制劑的實(shí)際使用。有資料表明，氟苯尼考與甲氧芐啶配伍，可明顯增強(qiáng)氟苯尼考的體外抑菌效果[1]。依據(jù)藥理學(xué)原理，通過藥物聯(lián)合應(yīng)用可發(fā)揮藥物的協(xié)同增效作用[2]，提高氟苯尼考的抗菌活性，減少氟苯尼考的使用量。其他研究也表明，氟苯尼考與一些抗病原體藥物聯(lián)合應(yīng)用，能增加體外抑菌效果[3-4]，臨床上甲氧芐啶與其他抗病原體藥物聯(lián)合應(yīng)用效果明顯[5]，且甲氧芐啶又是常用和廉價(jià)的抗菌增效劑，將氟苯尼考與甲氧芐啶制成復(fù)方注射液有一定的實(shí)際意義，但首先需了解該制劑處方組成以及聯(lián)合應(yīng)用對抑菌效果的影響，為此進(jìn)行了該復(fù)方制劑的體外抑菌效果試驗(yàn)，可為該復(fù)方氟苯尼考注射液提供組方依據(jù)。

1　材料與方法

1.1藥物氟苯尼考（含量99.0%，批號：FB20120501，張家港恒盛藥業(yè)有限公司）；甲氧芐啶（含量99.5%，批號：120503，山東新華藥業(yè)有限公司）；氟苯尼考注射液（10.0%，批號：20120601，河南普爾泰動(dòng)物藥業(yè)有限公司）。

1.2受試菌株質(zhì)控菌株（大腸桿菌O2，44365，購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所）；5株臨床分離的豬大腸桿菌（河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院微生物實(shí)驗(yàn)室）。

1.3方法用常規(guī)方法分別測定預(yù)組方藥物甲氧芐啶和氟苯尼考的最小抑菌濃度（MIC）和二者配伍后的抑菌濃度指數(shù)（FIC），用來確定甲氧芐啶和氟苯尼考復(fù)方注射液的處方組成，選擇具有最佳抑菌效果和最經(jīng)濟(jì)的配伍比例。采用微量液體兩倍稀釋法測定甲氧芐啶和氟苯尼考對5株豬大腸桿菌菌株的MIC。再用微量液體棋盤[6]稀釋法，以兩藥MIC的4倍、2倍、1倍及MIC的1/2、1/4、1/8的濃度分別進(jìn)行聯(lián)合。以部分抑菌濃度指數(shù)（FIC）作為聯(lián)合藥敏試驗(yàn)判斷依據(jù)。計(jì)算公式如下：相同試驗(yàn)重復(fù)3次，求其平均值。

試驗(yàn)結(jié)果判定：當(dāng)FIC≤0.5時(shí)，呈現(xiàn)協(xié)同作用，當(dāng)0.5＜FIC≤1，呈現(xiàn)相加作用，

當(dāng)1＜FIC≤2時(shí)，呈現(xiàn)無關(guān)作用，當(dāng)FIC＞2時(shí)，呈現(xiàn)拮抗作用。

同樣方法進(jìn)行復(fù)方氟苯尼考與氟苯尼考MIC值的對比試驗(yàn)，進(jìn)一步驗(yàn)證復(fù)方氟苯尼考注射液的抗菌活性。

另外將氟苯尼考與甲氧芐啶分別按照10∶1、10∶2、10∶3、10∶4、10∶5、10∶6比例配制藥液，分別配成濃度為1 280 μg/mL的貯存液，通過對比MIC值，以單藥氟苯尼考作為對照藥物，觀察不同的配比的藥液對豬大腸桿菌的體外抑菌效果。

2　結(jié)果與分析

2.1復(fù)方注射液藥物組份的MIC兩種藥物單獨(dú)應(yīng)用時(shí)，測得對豬大腸桿菌受試菌株的MIC分別為氟苯尼考：8 μg/mL和甲氧芐啶：16 μg/mL；兩藥聯(lián)用后FIC值分別為0.375、0.5、0.5、0.75、0.5，呈現(xiàn)協(xié)同或相加作用，其中協(xié)同作用占80%，相加作用占20%。聯(lián)用時(shí)氟苯尼考的MIC值介于1～2 μg/mL之間，甲氧芐啶的MIC值介于4～8 μg/mL之間。與單藥的MIC值相比，兩藥的MIC值均明顯降低，聯(lián)用后的抗菌活性提高4～8倍。

對比試驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方氟苯尼與氟苯尼考對5株豬大腸桿菌的MIC值分別為2 μg/mL、1 μg/ mL、1 μg/mL、2 μg/mL、2 μg/mL和8 μg/mL、4 μg/ mL、8 μg/mL、8 μg/mL、4 μg/mL，后者對豬大腸桿菌的MIC值是前者的2～8倍，說明復(fù)方氟苯尼考的抑菌效果明顯高于單藥氟苯尼考。

2.2氟苯尼考與甲氧芐啶的最佳配比的確定結(jié)果表明，氟苯尼考和甲氧芐啶兩藥以10∶1、10∶2、10∶3、10∶4、10∶5、10∶6六個(gè)不同的比例聯(lián)合用藥時(shí)，對豬大腸桿菌產(chǎn)生的抑菌效果也不同，與對照單藥氟苯尼考進(jìn)行比較，在10∶1、10∶5、10∶6時(shí)，其MIC值均為8 μg/mL，抑菌效果無明顯的差異（P>0.05）；在10∶3、10∶4時(shí)，其MIC值分別為2 μg/mL和4 μg/mL，抑菌效果呈現(xiàn)顯著差異（P< 0.05）；在10∶2時(shí)，其MIC值為1 μg/mL，抑菌效果呈現(xiàn)顯極顯著（P<0.01）的增強(qiáng)作用，表現(xiàn)為最佳聯(lián)合比例。結(jié)合臨床用藥及經(jīng)濟(jì)成本等綜合考慮，本復(fù)方注射液的規(guī)格最終可確定為：每10 mL中含氟苯尼考1.0 g，甲氧芐啶0.2 g。

3　小結(jié)

復(fù)方氟苯尼考的抑菌作用明顯提高，兩藥聯(lián)合應(yīng)用呈現(xiàn)協(xié)同或相加作用。氟苯尼考與甲氧芐啶按照10∶2的比例組合，其MIC值最小，協(xié)同抗菌效果最好。按照此配比研制的復(fù)方氟苯尼考注射液，對豬大腸桿菌的抗菌作用比單方氟苯尼考注射液可提高4～8倍。實(shí)際應(yīng)用中可收到減少氟苯尼考藥物的用量，降低臨床藥物成本費(fèi)用，減少藥物殘留的效果，且對治療大腸桿菌病和研發(fā)復(fù)方氟苯尼考新制劑具有實(shí)用意義。

[1]黃慶洲，李鑫，申弦，等.甲氧芐啶對氟甲砜霉素體外抑菌效果的影響[J].中國獸醫(yī)雜志，2005，41（2）：46-47.

[2]朱摸忠.獸藥手冊[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2002：19-20.

[3]康宇，律海峽，胡功政，等.氟苯尼考與粘菌素聯(lián)用對豬大腸桿菌與鏈球菌的體外抗菌作用[J].中國獸醫(yī)雜志，2008，44 （9）：116-118.

[4]江麗，雷淑珍.氟苯尼考與多種抗菌藥物聯(lián)合應(yīng)用對大腸桿菌的體外抑菌試驗(yàn)[J].廣東畜牧獸醫(yī)科技雜志，2008（3）：42-44.

[5]胡功政，崔耀明.獸藥合理配伍使用[M].鄭州：河南科學(xué)技術(shù)出版社，2009：96-97.

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S859.5

B

0529-6005（2016）07-0116-02

2015-11-12

崔耀明（1962-），男，副教授，本科，從事獸醫(yī)藥理和獸藥制劑工藝教學(xué)與研究，E-mail：mzh-yaolilan@163.com