謝建華，周　莉，侯亞麗，藺　露，姚　璐，葉潔瑩，梁望旺，楊澤林，熊仲良（重慶市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，重慶渝北　401120）

重慶市畜禽產(chǎn)品中沙門(mén)氏菌污染狀況調(diào)查分析

謝建華，周莉，侯亞麗，藺露，姚璐，葉潔瑩，梁望旺，楊澤林，熊仲良
（重慶市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，重慶渝北401120）

為有效控制畜禽產(chǎn)品中沙門(mén)氏菌的污染，以便對(duì)污染源和污染途徑進(jìn)行針對(duì)性監(jiān)控，對(duì)重慶市屠宰場(chǎng)、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和超市供應(yīng)鏈的畜禽產(chǎn)品中沙門(mén)氏菌污染狀況進(jìn)行初步調(diào)查分析，同時(shí)對(duì)從供應(yīng)鏈中分離的沙門(mén)氏茵進(jìn)行18種抗生素的藥敏試驗(yàn)。結(jié)果表明：屠宰環(huán)節(jié)豬肉的沙門(mén)氏菌污染程度較低，為7.27%；經(jīng)過(guò)運(yùn)輸?shù)竭_(dá)銷(xiāo)售環(huán)節(jié)，其污染程度明顯上升，最高的是超市環(huán)節(jié)，高達(dá)64.52%。對(duì)其所處的環(huán)境進(jìn)行調(diào)查分析，發(fā)現(xiàn)屠宰場(chǎng)和超市的沙門(mén)氏菌污染較嚴(yán)重，尤其是屠宰場(chǎng)容器（88.89%）、臺(tái)面（55.56%）和超市刀具（50.00%）、地面（46.67%）；中型規(guī)模屠宰場(chǎng)的沙門(mén)氏菌污染風(fēng)險(xiǎn)最大。分離菌株對(duì)頭孢類藥物敏感，對(duì)磺胺類藥物耐藥嚴(yán)重，其次為四環(huán)素類和β-內(nèi)酰胺類，多重耐藥情況普遍。

沙門(mén)氏菌；畜禽產(chǎn)品；耐藥性

食源性致病菌是食物中毒和食源性疾病暴發(fā)的重要因素，畜禽肉中的沙門(mén)氏菌是人類食物中毒的重要原因之一［1］。我國(guó)每年約3億人因沙門(mén)氏菌感染而患病，約占病原菌食源性疾病總數(shù)的70%～80%［2-3］，而引起沙門(mén)氏菌中毒的食品90%以上是動(dòng)物源性食品［4］。在國(guó)內(nèi)，畜禽肉中沙門(mén)氏菌污染的來(lái)源極其復(fù)雜，畜禽的飼養(yǎng)、屠宰加工、儲(chǔ)存、銷(xiāo)售等眾多環(huán)節(jié)均可能受污染，其污染源和污染途徑多種多樣［5-6］。本研究通過(guò)對(duì)重慶市畜禽產(chǎn)品供應(yīng)鏈各個(gè)環(huán)節(jié)中沙門(mén)氏菌的污染狀況進(jìn)行調(diào)查，初步摸清了重慶市畜禽產(chǎn)品中沙門(mén)氏菌的污染水平，為引導(dǎo)消費(fèi)、規(guī)避風(fēng)險(xiǎn)和政府決策提供了科學(xué)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1 取樣環(huán)節(jié)與數(shù)量

全年取樣1 247份。其中，在9個(gè)屠宰場(chǎng)共取豬肉樣品110份和環(huán)境拭子樣品330份；在4個(gè)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)共取豬肉樣品27份、雞肉樣品23份和環(huán)境拭子樣品140份；在17個(gè)超市共取豬肉樣品31份、雞肉樣品71份和環(huán)境拭子樣品515份。

1.2 取樣方法

參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 肉與肉制品檢驗(yàn)》（GB/T 4789.17-2003）進(jìn)行［7］。

1.3 檢測(cè)方法

參照食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《食品微生物學(xué)檢驗(yàn)沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)》（GB 4789.4-2010）［8］和《食品中多種致病菌快速檢測(cè)方法》（SN/T 1869-2007）［9］進(jìn)行。

1.4 檢測(cè)數(shù)據(jù)分析

采用t檢驗(yàn)方法對(duì)樣品檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行生物學(xué)統(tǒng)計(jì)分析。

1.5 藥敏試驗(yàn)

采用世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦的K-B紙片擴(kuò)散法測(cè)定。用接種環(huán)挑取經(jīng)純化、傳代的沙門(mén)氏菌，接種于3～5 mL TSB肉湯中，35 ℃培養(yǎng)24 h；用生理鹽水校正菌液濃度至0.5麥?zhǔn)媳葷針?biāo)準(zhǔn)，用無(wú)菌棉簽蘸取已準(zhǔn)備好的菌液，均勻涂布接種于MHA瓊脂平板表面，置室溫干燥3～5 min后，用紙片分配器將含藥紙片貼于含菌MHA瓊脂平板表面。平板經(jīng)室溫放置15 min。再倒放于35℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，測(cè)量抑菌環(huán)直徑并記錄結(jié)果。每次實(shí)驗(yàn)均用大腸桿菌ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 25923作質(zhì)控菌株，判定標(biāo)準(zhǔn)按美國(guó)NCCLS操作標(biāo)準(zhǔn)（2003版）。

2　結(jié)果

2.1 不同環(huán)節(jié)樣品中沙門(mén)氏菌驗(yàn)證結(jié)果

不同環(huán)節(jié)樣品中以超市中豬肉沙門(mén)氏菌的污染最為嚴(yán)重，與其他相比差異顯著（p≤0.05），其次是屠宰和超市環(huán)節(jié)的環(huán)境拭子（表1）。

表1　不同環(huán)節(jié)樣品中沙門(mén)氏菌驗(yàn)證結(jié)果

2.2 不同環(huán)節(jié)中環(huán)境拭子沙門(mén)氏菌驗(yàn)證結(jié)果

不同環(huán)節(jié)環(huán)境拭子中，以屠宰場(chǎng)容器的沙門(mén)氏菌污染最為嚴(yán)重，與其他環(huán)節(jié)相比差異均顯著（p≤0.05），其次是屠宰場(chǎng)臺(tái)面、超市刀具和超市地面（表2）。

表2　不同環(huán)節(jié)中環(huán)境拭子沙門(mén)氏菌驗(yàn)證結(jié)果

2.3 不同規(guī)模屠宰場(chǎng)沙門(mén)氏菌驗(yàn)證結(jié)果

對(duì)2個(gè)大型屠宰場(chǎng)、3個(gè)中型屠宰場(chǎng)和4個(gè)小型屠宰環(huán)境拭子進(jìn)行取樣調(diào)查結(jié)果顯示，中型屠宰場(chǎng)沙門(mén)氏菌污染最嚴(yán)重，檢出率為50.00%，與大型和小型屠宰場(chǎng)相比差異極顯著（p≤0.01）；從樣品類型來(lái)看，中型屠宰場(chǎng)環(huán)境拭子中沙門(mén)氏菌的污染最為嚴(yán)重，與其他環(huán)節(jié)相比差異均顯著（p≤0.05），其次是大型屠宰場(chǎng)的環(huán)境拭子與小型屠宰場(chǎng)的環(huán)境拭子和豬肉（表3）。

2.4 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

從分離出的371株沙門(mén)氏菌中，隨機(jī)抽取65株（其中超市28株、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)9株、屠宰場(chǎng)28株）進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)。試驗(yàn)共使用了18種抗生素，以金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸桿菌ATCC25922作質(zhì)控菌株，結(jié)果見(jiàn)表4。不同環(huán)節(jié)三類樣品的耐藥趨勢(shì)基本相似，對(duì)頭孢噻肟、頭孢曲松、頭孢哌酮、亞胺培南、環(huán)丙沙星全部敏感；對(duì)甲氧芐啶、磺胺異亞唑、四環(huán)素等有不同程度的耐藥。從不同環(huán)節(jié)來(lái)看。屠宰場(chǎng)和超市對(duì)頭孢噻吩和阿莫西林存在一定的耐藥性；不同樣品類型來(lái)看，豬肉對(duì)阿米卡星和慶大霉素也存在較高的耐藥性，雞肉對(duì)卡那霉素和呋喃妥因存在較高的耐藥性。

表3　不同規(guī)模屠宰場(chǎng)沙門(mén)氏菌驗(yàn)證結(jié)果

表4　不同環(huán)節(jié)樣品的藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果

絕大多數(shù)沙門(mén)氏菌同時(shí)對(duì)3種以上抗生素耐藥，占81.25%（表5）。

3　討論

對(duì)不同環(huán)節(jié)樣品中沙門(mén)氏菌的污染狀況調(diào)查可見(jiàn)，在屠宰環(huán)節(jié)，剛宰殺分割出來(lái)的豬肉的沙門(mén)氏菌污染率為7.27%；經(jīng)過(guò)運(yùn)輸?shù)竭_(dá)銷(xiāo)售環(huán)節(jié)，其污染率明顯上升，最高的是超市環(huán)節(jié)，高達(dá)64.52%；同時(shí)對(duì)其所處的環(huán)境調(diào)查分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)屠宰場(chǎng)和超市受沙門(mén)氏菌污染比較嚴(yán)重，尤其是屠宰場(chǎng)容器、臺(tái)面和超市的刀具、地面。探其原因主要在于畜禽肉產(chǎn)品到餐桌前，在流轉(zhuǎn)環(huán)節(jié)，對(duì)沙門(mén)氏菌的污染途徑不能有效控制，尤其在農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)和超市銷(xiāo)售過(guò)程中，畜禽肉產(chǎn)品往往堆放在一起銷(xiāo)售，極易引起二次污染，同時(shí)銷(xiāo)售過(guò)程中畜禽肉產(chǎn)品的保存溫度和銷(xiāo)售時(shí)間不能有效控制。這也提示在對(duì)致病菌監(jiān)測(cè)的同時(shí)，應(yīng)該提高畜禽產(chǎn)品中致病菌污染的防控技術(shù)，從而減少疾病的暴發(fā)。

表5　沙門(mén)氏菌多重耐藥性

對(duì)于不同規(guī)模的屠宰場(chǎng)來(lái)說(shuō)，中型屠宰場(chǎng)的沙門(mén)氏菌污染最為嚴(yán)重，其中以中型屠宰場(chǎng)環(huán)境拭子污染最為嚴(yán)重（59.09%）。結(jié)合問(wèn)卷調(diào)查分析發(fā)現(xiàn)，中型屠宰場(chǎng)環(huán)境、容器、用具等消毒不規(guī)范，有的甚至不消毒，導(dǎo)致細(xì)菌污染嚴(yán)重。而大型屠宰場(chǎng)管理較規(guī)范，小型屠宰場(chǎng)較容易充分清洗，故大型和小型屠宰場(chǎng)檢出率相對(duì)較低。

從對(duì)18種抗生素藥物敏感試驗(yàn)可見(jiàn)，所分離的沙門(mén)氏菌對(duì)頭孢類藥物敏感，這跟大多數(shù)的研究結(jié)果相似［10-12］。對(duì)其余8類抗生素中常用藥物的耐藥性分析來(lái)看，沙門(mén)氏菌對(duì)磺胺類藥物的耐藥性最高，其次是對(duì)四環(huán)素類和β-內(nèi)酰胺類。這與王娟等［13］2009年報(bào)道相似。雖然從不同環(huán)節(jié)和樣品類型來(lái)看，它們的耐藥趨勢(shì)相似，但豬肉中的沙門(mén)氏菌對(duì)阿米卡星和氯霉素還存在較高的耐藥性，雞肉中的對(duì)卡那霉素和呋喃妥因存在較高的耐藥性。而阿米卡星、慶大霉素、卡那霉素和呋喃妥因是臨床上用于治療細(xì)菌性腹瀉的常用藥物。這些菌株絕大多數(shù)存在多重耐藥性，對(duì)三種以上抗生素耐藥的占81.25%。為了降低病原菌的耐性率，應(yīng)規(guī)范養(yǎng)殖環(huán)節(jié)抗生素的使用，嚴(yán)禁使用人用抗生素，同時(shí)加強(qiáng)對(duì)細(xì)菌耐藥機(jī)理的研究，并提出相應(yīng)的防控措施，為畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全的監(jiān)管提供科學(xué)依據(jù)。

［1］ 張秀麗，廖興廣，郝宗宇，等.2006-2007年河南省生肉食品中沙門(mén)菌的主動(dòng)監(jiān)測(cè)及其DNA指紋圖譜庫(kù)的建立［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)，2009（7）：1545-1548.

［2］ World Health Organization.Overcoming antimicrobial re-sistance，World Health Organization Report on Infectious Diseases：WHO/CDS/2000.2［R］.Geneva：WHO，2000.

［3］ 趙貴，張華.畜產(chǎn)品中沙門(mén)氏菌的危害及檢測(cè)方法概述［J］.貴州畜牧獸醫(yī)，2004，28（3）：21-22.

［4］ 曾艷兵，張莉，孫吉昌，等.利用熒光定量PCR檢測(cè)方法對(duì)畜禽肉中沙門(mén)氏菌的污染調(diào)查［J］.農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量與安全，2012（1）：21-24.

［5］ 莊榮玉.禽肉中沙門(mén)氏菌的污染及其控制方法［J］.中國(guó)家禽，2005，27（2）：41-43.

［6］ 王華洪，吳日明.冰鮮肉雞制品中食源性致病菌污染的調(diào)查［J］.實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2010，17（7）：1314-1315.

［7］ 衛(wèi)生部.國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)肉與肉制品檢驗(yàn)：GB/T 4789.17-2003［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003.

［8］ 衛(wèi)生部.食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)：GB 4789.4-2010［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2010.

［9］ 國(guó)家質(zhì)檢總局.食品中多種致病菌快速檢測(cè)方法：SN/T 1869-2007［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2007.

［10］ 關(guān)文英，申志新，張淑紅，等.河北省食品中沙門(mén)氏菌的耐藥性研究［J］.現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2006，33（10）：1761-1763.

［11］ 王曉泉，焦新安，劉曉文，等.江蘇部分地區(qū)食源性和人源沙門(mén)氏菌的多重耐藥性研究［J］.微生物學(xué)報(bào)，2007，47（2）：221-227.

［12］ 張莉，曾艷兵，尹德風(fēng)，等.一株分離自凍雞肉沙門(mén)氏菌的耐藥性分析［J］.農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，2013（1）：36-40.

［13］ 王娟，王玉東，鄭增忍，等.禽源大腸桿菌和沙門(mén)氏菌耐藥性研究［J］.家禽科學(xué)，2009（6）：8-10.

（責(zé)任編輯：杜憲）

Analysis on Salmonella Contamination Status of Livestock and Poultry Products in Chongqing City

Xie Jianhua，Zhou Li，Hou Yali，Lin Lu，Yao Lu，Ye Jieying，Liang Wangwang，Yang Zelin，Xiong Zhongliang
（Chongqing Animal Disease Prevention and Control Center，Yubei，Chongqing 401120）

This paper investigated Salmonella contamination situation in animal products at different sectors such as slaughterhouses and market. In the study， the antimicrobial susceptibility of Salmonella strains isolated from the supply chain to 18 kinds of antibiotics was tested. The results showed that the Salmonella contamination level of pork at slaughterhouse was relatively low， being 7.27%，and this figure significantly increased following the supply chain from the transportation to the marketing stage，with the peak witnessed at the stage of supermarket of 64.52%. Investigation and analysis of environment revealed that slaughterhouses and supermarkets were most heavily contaminated with Salmonella，especially the slaughterhouse container （88.89%），table（55.56%） and the supermarket cutter （50.00%） and ground （46.67%），and the highest risk for Salmonella contamination was observed at medium-sized slaughterhouse. In addition，the isolated strains were sensitive to cephalosporins，but demonstrated highly resistance to Sulphonamides，then to Tetracyclines，and β- lactam，which indicated the existence of serious multi-drug resistance.

Salmonella；animalproducts；drug resistance

S851.3

B

1005-944X（2016）08-0027-04

10.3969/j.issn.1005-944X.2016.08.007

2015年農(nóng)業(yè)部畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估項(xiàng)目（GJFP2016008）