張　嘉,陳美珍,林　旋,溫福利,陳仁鋒,胡玲英,王壽昆(.福建農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,福建福州50002;2.福建省動(dòng)物藥物工程實(shí)驗(yàn)室,福建福州50002;.南京軍區(qū)福州總醫(yī)院比較醫(yī)學(xué)科,福建福州50025)

福建省某肉兔場(chǎng)球蟲感染情況調(diào)查

張嘉1,2,陳美珍1,2,林旋1,2,溫福利3,陳仁鋒1,胡玲英1,王壽昆1,2
(1.福建農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院,福建福州350002;2.福建省動(dòng)物藥物工程實(shí)驗(yàn)室,福建福州350002;3.南京軍區(qū)福州總醫(yī)院比較醫(yī)學(xué)科,福建福州350025)

為預(yù)防兔球蟲病提供依據(jù),采集福州郊區(qū)某肉兔場(chǎng)不同日齡肉兔糞便樣本587份,采用飽和食鹽水漂浮法和麥克馬斯特計(jì)數(shù)法對(duì)該場(chǎng)兔球蟲感染率、OPG值、球蟲卵囊在兔群中的分布、球蟲種類及優(yōu)勢(shì)種等進(jìn)行調(diào)查分析.調(diào)查結(jié)果顯示,該場(chǎng)兔球蟲平均感染率為85.86%,平均OPG值為11 865,個(gè)體OPG最高達(dá)466 000;OPG值在兔群中呈負(fù)二項(xiàng)分布.調(diào)查共檢測(cè)出13種艾美耳球蟲,均為混合感染,以納格浦爾艾美耳球蟲(E.nagpurensis)、穿孔艾美耳球蟲(E.perforans)、大型艾美耳球蟲(E.magna)和盲腸艾美耳球蟲(E.coecicola)為優(yōu)勢(shì)種.

兔球蟲病;感染率;OPG值;麥克馬斯特計(jì)數(shù)法

1　材料與方法

1.1采樣采集對(duì)象為福州市某肉兔場(chǎng),共采集糞便樣本587份,標(biāo)明編號(hào),品種、日齡、用藥情況.

1.2卵囊檢測(cè)稱量2 g糞樣,加入60 mL飽和食鹽水,搗勻,經(jīng)120目網(wǎng)篩過濾,用膠頭滴管吸取濾液充滿兩片計(jì)數(shù)小室(每片計(jì)數(shù)室中的容積1 cmX1 cmX0.15 cm=0.15 cm3),將計(jì)數(shù)板置于顯微鏡下觀察,兩片計(jì)數(shù)室內(nèi)的平均卵囊乘以200,即為每克糞樣總卵囊數(shù)[OPG=(n1+n2)/2X 200].

1.3卵囊收集挑取各日齡糞樣于裝有飽和食鹽水的燒杯中,搗勻,過濾.將過濾后的糞汁靜置10～15 min,取漂浮液上1/3,收集到的糞汁4 000 r/min離心5 min,去上清,反復(fù)2次,沉淀即為球蟲卵囊.

1.4卵囊培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)觀察標(biāo)記各日齡階段卵囊,加入2.5%重鉻酸鉀液,28℃、120 r/min的搖床中培養(yǎng)2～3 d,待孢子化率達(dá)95%以上時(shí),于油鏡下觀察拍照.

1.5數(shù)據(jù)處理及分析以χ2檢驗(yàn)不同日齡兔球蟲感染頻數(shù)差異顯著性,OPG值的比較采用對(duì)數(shù)化后進(jìn)行方差分析;以負(fù)二項(xiàng)分布和泊松分布擬合球蟲卵囊在肉兔群體中的分布,運(yùn)用曲線方程擬合肉兔日齡與感染率和OPG值的相關(guān)與回歸分析,得出最優(yōu)回歸方程.

2　結(jié)果與分析

2.1不同日齡肉兔球蟲感染率、OPG值比較該兔場(chǎng)肉兔球蟲總感染率為89.79%;其中,40日齡、50日齡和60日齡肉兔的球蟲感染率顯著高于20日齡、30日齡、75日齡和90日齡肉兔(P<0.05);日齡與感染率呈曲線相關(guān)(P<0.01),最優(yōu)回歸方程為3次曲線方程Y=-88.342+10.004X-0.167X2+0.001X3,R2= 0.978(Y:感染率,X:日齡)(表1、圖1).

該兔場(chǎng)球蟲平均OPG值為11 865,最大者達(dá)466 000;以40日齡肉兔的平均OPG值最高,其與50日齡肉兔之間、30日齡與60日齡之間球蟲OPG值差異均不顯著(P>0.05),但均高于20日齡、75日齡和90日齡肉兔(P<0.01);日齡與OPG值呈曲線相關(guān)(P<0.05),最優(yōu)回歸方程Y=66983.994+ 5456.703X-102.738X2+0.563X3,R2=0.960(Y:OPG值,X:日齡)(表1、圖1).

2.2兔球蟲種類與感染情況油鏡下觀察孢子化卵囊,檢測(cè)出13種艾美耳球蟲(見中插彩版圖2);各日齡100個(gè)孢子化卵囊為1組,分別統(tǒng)計(jì)12組,得出穿孔、納格浦爾、大型、盲腸艾美耳球蟲為優(yōu)勢(shì)種.致病性較強(qiáng)的斯氏、松林、無殘、腸型艾美耳球蟲均有感染(見中插彩版圖2).

表1　不同日齡兔球蟲病感染情況

圖1　福州郊區(qū)某兔場(chǎng)不同日齡肉兔球蟲感染情況

20日齡以穿孔、納格浦爾、大型、盲腸艾美耳球蟲為優(yōu)勢(shì)種,其中以穿孔艾美耳球蟲卵囊比例最高,達(dá)到24.15%;其余艾美耳球蟲比例顯著低于優(yōu)勢(shì)種.30、40、50日齡均以穿孔、納格浦爾、大型艾美耳球蟲為優(yōu)勢(shì)種,比例分別為23.42%、15.54%、11.26%以上;大型艾美耳球蟲隨著日齡增大比例逐漸下降;盲腸艾美耳球蟲30日齡與20日齡比較出現(xiàn)顯著下降趨勢(shì),于40日齡比例下降最低值,50日齡盲腸艾美耳球蟲呈上升趨勢(shì);無殘艾美耳球蟲比例隨著日齡增大而逐漸增大,于40日齡增大至最大值,50日齡呈現(xiàn)下降趨勢(shì);其余艾美耳球蟲與20日齡比較未出現(xiàn)較大比例改變.60、75、90日齡均以穿孔、納格浦爾、盲腸艾美耳球蟲為優(yōu)勢(shì)種,卵囊比例分別為21.99%、13.43%、17.36%以上;大型艾美耳球蟲卵囊比例在60～90日齡內(nèi)隨著日齡增大繼續(xù)逐漸減小,并于90日齡下降至最低;盲腸艾美耳球蟲60～90日齡比例顯著高于30～50日齡,其于20日齡比例開始下降并于40日齡比例下降至最低值,后隨著日齡增大比例逐漸增大,于90日齡比例最大;中型艾美耳球蟲90日齡比例最高,顯著高于20～ 75日齡;其余艾美耳球蟲感染率均較穩(wěn)定,比例較低(表2).

2.3球蟲卵囊在閩侯某兔場(chǎng)肉兔群體中的分布類型兔群中球蟲OPG值在5 000以下的比例為58.26%(342/587),OPG值大于70 000以上的比例為2.56%(15/587).以負(fù)二項(xiàng)分布和泊松分布分別擬合球蟲卵囊在該兔群體中的分布,負(fù)二項(xiàng)分布的理論頻數(shù)與實(shí)際頻數(shù)接近,χ2值小于臨界值,故服從負(fù)二項(xiàng)分布.說明兔群中球蟲感染后的卵囊排泄量(OPG值),不是隨機(jī)分布,也不是均勻分布,卵囊排泄量極大的個(gè)體較少,多數(shù)卵囊OPG值在5 000以下.

表2　肉兔球蟲種類比例情況/%

表3　閩侯某兔場(chǎng)肉兔球蟲卵囊OPG值的負(fù)二項(xiàng)分布和泊松分布擬合

3　討論

本次調(diào)查結(jié)果顯示,兔球蟲病平均感染率為85.86%,平均OPG值為11 865,個(gè)體最高OPG達(dá)466 000,感染率與感染強(qiáng)度均很高,與全國其他地區(qū)報(bào)道相似,可見兔球蟲疾病仍是養(yǎng)兔行業(yè)不容忽視的嚴(yán)重寄生蟲疾病.通過對(duì)比最高感染率與最大OPG值發(fā)現(xiàn),40日齡OPG值達(dá)到頂峰,10 d后感染率隨之達(dá)到高峰,說明兔球蟲卵囊排泄量直接影響兔球蟲陽性率.OPG值從20～40日齡逐漸增大情況,可能是由于20日齡幼兔還未斷奶,靠母源抗體,對(duì)兔球蟲病具有一定的抵抗力,所以其感染強(qiáng)度處于最低,30日齡幼兔感染強(qiáng)度逐漸出現(xiàn)峰值,說明母源抗體在體內(nèi)逐漸降低,感染強(qiáng)度繼續(xù)逐漸增大,于40日齡OPG值達(dá)到高峰,由于斷奶15 d,體內(nèi)母源抗體消失,兔球蟲發(fā)育完成一個(gè)周期所致,符合索勛等(1991)將其裂殖生殖劃分為4代,13 d發(fā)現(xiàn)成熟配子體,15 d卵囊開始排出發(fā)育規(guī)律[10].

隨著兔子日齡逐漸增大,所感染兔球蟲優(yōu)勢(shì)種以及比例都發(fā)生相應(yīng)的改變,穿孔艾美耳球蟲與納格浦爾艾美耳球蟲為該肉兔場(chǎng)所共患優(yōu)勢(shì)種.致病力較強(qiáng)的大型艾美耳球蟲為20～50日齡肉兔的球蟲優(yōu)勢(shì)種,并由30日齡開始直到90日齡,感染比例隨著日齡的增大呈現(xiàn)下降趨勢(shì),可能隨著肉兔日齡增大,對(duì)致病力較強(qiáng)的大型艾美耳球蟲免疫力逐漸增強(qiáng)有關(guān),未斷奶20日齡肉兔的大型艾美耳球蟲的感染強(qiáng)度低于30日齡,可見母源抗體對(duì)致病力較強(qiáng)的大型艾美耳球蟲起到一定抑制作用.盲腸艾美耳球蟲為60～90日齡肉兔的球蟲優(yōu)勢(shì)種,顯著高于30～50日齡,可見盲腸艾美耳球蟲對(duì)大日齡肉兔危害較大.致病力較強(qiáng)的無殘艾美耳球蟲在40～60日齡感染率出現(xiàn)高峰,可見無殘艾美耳球蟲對(duì)40～60日齡肉兔危害最大.其他致病力較強(qiáng)的斯氏艾美耳球蟲、松林艾美耳球蟲、腸型艾美耳球蟲雖均有感染,但感染率較低,所以對(duì)兔球蟲病的預(yù)防應(yīng)將重點(diǎn)放在致病力較強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)種上.

從卵囊OPG值在兔群中的分布情況看,約有兔群中60%的OPG值低于5 000,OPG值大于70 000的只占2.5%,說明多數(shù)兔子感染強(qiáng)度不高,感染強(qiáng)度高的只是少數(shù),有利于寄生蟲與宿主取得平衡,也有利于各自的種族延續(xù).

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TheInvestigation and Analysisof Rabbit Coccidial Infection in a Meat Rabbit Farmof Fujian Province

ZHANG Jia1,2,CHEN Mei-zhen1,2,LIN Xuan1,2,WEN Fu-li3,CHEN Ren-feng1,HU Ling-ying1,WANG Shou-kun1,2
(1.College of Animal Science,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002,China; 2.Fujian Animal Pharmaceuticals Engineering Laboratory,Fuzhou 350002,China; 3.Fuzhou General Hospital of Nanjing Command,PLA,Fuzhou 350025,China)

In order to investigate the infection rate,OPG value and the oocysts distribution in rabbits,coccidial species per?centage and the dominant species in a rabbit farm,the flotation method of saturated saline solution and McMaster method were used and a total of 587 samples of fecal were collected from rabbits of different ages.The results showed that the total infection rate of coccidian was 85.86%and the average OPG value was 11 865,with the individual OPG up to 466 000,and the distribution pattern of OPG values was negative binonal distribution.We detected a total of 13 species of Eimeria,which were all form mixed infec?tions,and the dominant species were E.nagpurensis,E.perforans,E.magna and E.cociola.This study found out the coccidian spe?cies in rabbits in this farm and provided some information for the prevention and control of rabbit coccidiosis.

Rabbit coccidiosis;infection rate;OPG(oocysts per gramme of faeces);McMaster counting

WANG Kun-shou

S858.285.9

A

0529-6005(2016)06-0019-03

2015-01-28

福建省科技計(jì)劃引導(dǎo)性項(xiàng)目(2015Y0075)

張嘉(1990-),男,碩士,從事獸醫(yī)寄生蟲方向研究,E-mai:zhangjia1310@163.com

王壽昆,E-mail:wsk138@163.com