倪萍，趙志強(qiáng)

? 論著 ?

血漿Apelin在不同類型冠心病中的表達(dá)及與左心室重構(gòu)的關(guān)系

倪萍1，趙志強(qiáng)1

目的 比較不同類型冠心病患者血漿中的apelin濃度，并探討其與冠心病嚴(yán)重程度、左心室重構(gòu)的關(guān)系。方法 入選2014年7月～2014年12月昆山市第一人民醫(yī)院首次以冠心病診斷入院的患者99例，分為穩(wěn)定型心絞痛組（SAP）、不穩(wěn)定型心絞痛組（UAP）、急性心肌梗死組（AMI），選擇年齡相當(dāng)并且冠狀動(dòng)脈造影排除冠心病的29例患者為對(duì)照組；應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定血漿apelin濃度，記錄超聲心動(dòng)圖指標(biāo)左心室收縮末期內(nèi)徑（LVDs）和左心室舒張末期內(nèi)徑（LVDd）。比較四組患者血漿apelin水平，觀察AMI、UAP、SAP三組冠心病患者血漿apelin水平及與左心室功能指標(biāo)——LVDs、LVDd的關(guān)系。結(jié)果 AMI組、UAP組的血漿apelin水平顯著低于對(duì)照組（P＜0.05），而SAP組與對(duì)照組相比血漿apelin水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；AMI組、UAP組、SAP組三組間兩兩比較，apelin濃度均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）。血漿apelin濃度與左心室收縮末期內(nèi)徑（LVDs）、左心室舒張末期內(nèi)徑（LVDd）均呈顯著負(fù)相關(guān)，r值分別為-0.403和-0.305（P＜0.05）。結(jié)論 不同類型冠心病患者表達(dá)apelin水平不同，apelin水平可能與冠心病患者的左心室重構(gòu)存在相關(guān)性。

apelin；冠心?。蛔笮氖抑貥?gòu)；左心室收縮末期內(nèi)徑；左心室舒張末期內(nèi)徑

心室重構(gòu)在許多心血管疾病的病理生理過(guò)程中十分常見(jiàn)，可最終導(dǎo)致惡性心律失常（如室性心動(dòng)過(guò)速、心室顫動(dòng)等）和心力衰竭，是心血管疾病的死亡率居高不下的一個(gè)獨(dú)立危險(xiǎn)因素。許多因素參與了心室重構(gòu)的過(guò)程，如生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、血管緊張素Ⅱ、內(nèi)皮素、兒茶酚胺及機(jī)械牽拉等。Foldes等［2］發(fā)現(xiàn)apelin主要分布在冠狀動(dòng)脈的內(nèi)皮細(xì)胞中，而當(dāng)心肌機(jī)械運(yùn)動(dòng)功能出現(xiàn)障礙時(shí)，冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)apelin增加，使其高度集中在心臟組織中。Apelin及其受體表達(dá)的變化是適應(yīng)心臟功能改變的結(jié)果，但是目前我們尚不清楚apelin在心室重構(gòu)的形成機(jī)制中的作用。因apelin與血管緊張素Ⅱ在基因序列、酶、受體以及mRNA表達(dá)分布方面有很多相似之處，所以我們推測(cè)apelin可能與心室重構(gòu)相關(guān)，并可能干預(yù)了心室重構(gòu)的進(jìn)程。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

1.1.1 入選對(duì)象 入選2014年7月～2014年12月江蘇省昆山市第一人民醫(yī)院內(nèi)科門診和急診科收治的首次以冠心病為初步診斷入院并行冠狀動(dòng)脈造影確診冠心病的患者99例，其中急性心肌梗死，包括急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）和急性非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI），均是首次發(fā)作急性心肌梗死，其中患者38例（男性23例，女性15例），不穩(wěn)定型心絞痛（UAP）患者31例（男性21例，女性10例），穩(wěn)定型心絞痛（SAP）患者30例（男性23例，女性7例）。均行冠狀動(dòng)脈造影術(shù)確診（其中急性心肌梗死患者行急診冠狀動(dòng)脈造影術(shù)）。同時(shí)選擇年齡、性別及冠心病危險(xiǎn)因素相匹配的，并行冠狀動(dòng)脈造影排除冠心病的29例患者為對(duì)照組（男性12例，女性17例）。

1.1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) ①患者知情同意并簽字；②第一次以冠心病診斷入院的患者，既往無(wú)心肌梗死病史；③病史資料系患者本人提供，資料完整可靠。

1.1.3 排除標(biāo)準(zhǔn) ①嚴(yán)重肝、腎功能不全；②持續(xù)性心房顫動(dòng)；③風(fēng)濕性心臟病、心肌病、繼發(fā)性高血壓；④間質(zhì)性肺病、結(jié)締組織??；⑤急性或慢性嚴(yán)重感染；⑥甲狀腺功能亢進(jìn)；⑦近一月急性腦梗死；⑧NYHA心功能分級(jí)為Ⅲ級(jí)或Ⅳ級(jí)。

1.1.4 相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn) STEMI的診斷符合2009年ACC/AHA共同制定的的STEMI診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］；VAP/ NSTEMI的診斷符合2011年ACC/AHA共同制定的UA/NSTEMI診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］；SAP的診斷符合2007年ACC/AHA共同制定的SAP診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］；NYHA心功能分級(jí)參照2009年ACC/AHA共同制定的成人心力衰竭診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］。

1.2 方法

1.2.1 病史采集 對(duì)所有首次以冠心病診斷入院的患者采集臨床相關(guān)病史，包括年齡、體質(zhì)指數(shù)（BMI）、吸煙指數(shù)（平均每天吸煙支數(shù)×吸煙年數(shù)）、高血壓病史、2型糖尿病病史、既往用藥情況（主要為他汀類調(diào)脂藥、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑/血管緊張素II受體拮抗劑（ACEI/ ARB）、鈣通道阻滯劑、抗血小板藥物）等，根據(jù)化驗(yàn)結(jié)果記錄三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、尿酸（UA）、超聲心動(dòng)圖相關(guān)指標(biāo)，包括左室舒張期內(nèi)徑（LVDd）、左室收縮期內(nèi)徑（LVDs）值。

1.2.2 主要試劑 apelin：ELISA試劑盒由美國(guó)Phoenix Pharmaceuticals Inc.提供。與apelin-36 （human，Bovine），apelin-16（human，Bovine）及apelin-13（human，Bovine），apelin-12 （human，Bovine）交叉反應(yīng)性100%，與其他血管活性肽如內(nèi)皮素-1、尾加壓素、生長(zhǎng)抑素均無(wú)交叉反應(yīng)；Binding為38%。

杭州市運(yùn)河片區(qū)位于錢塘江流域和太湖流域的交界處，南以錢塘江為界，西北與東苕溪接壤，東面止于上塘河。該研究區(qū)屬亞熱帶季風(fēng)氣候，四季分明，溫和濕潤(rùn)，光照充足，雨量充沛。根據(jù)杭州氣象站資料，研究區(qū)2003—2008年多年平均氣溫17.83℃，多年平均年日照數(shù)1 650.03 h，多年平均年降雨量1 158.45 mm，多年平均年降雨天數(shù)133 d。研究區(qū)占地面積823 km2，涉及上城區(qū)、下城區(qū)、拱墅區(qū)、西湖區(qū)、江干區(qū)和余杭區(qū)等6個(gè)行政區(qū)，歷史悠久，名勝古跡眾多，水路交通方便，工農(nóng)業(yè)、旅游業(yè)發(fā)達(dá)，經(jīng)濟(jì)發(fā)展迅速。

1.2.3 外周靜脈血收集 除急診冠狀動(dòng)脈造影患者在發(fā)病12 h內(nèi)且低分子肝素治療前及冠狀動(dòng)脈支架置入術(shù)后6 h急抽血，余患者均于入院第2 d清晨抽取空腹靜脈血3 ml，用EDTA抗凝，每1 ml血樣加入蛋白酶抑制劑600～750 KIU，立即顛倒混勻5次，30 min內(nèi)4℃，1500 r/min離心10 min，提取上清，用EP管分裝后存于-80℃冰箱中待檢。

1.2.3 ELISA檢測(cè) 按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，所有計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（百分比）表示。組間均數(shù)比較采用單因素方差分析（ANOVA），組內(nèi)兩兩比較采用q檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料應(yīng)用χ2檢驗(yàn)；采用直線回歸分析各組血漿apelin與左心室收縮末期內(nèi)徑、左心室舒張末期內(nèi)徑的相關(guān)關(guān)系。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 四組人群基本資料比較 年齡、BMI、吸煙指數(shù)、UA、LDL-C、HDL-C、TC、TG、高血壓病、糖尿病、服用藥物（包括CCB、ACEI/ARB、抗血小板藥、調(diào)脂藥）的患者在AMI組、UAP組、SAP組及對(duì)照組四組間均未見(jiàn)明顯差異（P ＞0.05）（表1）。

2.2 四組人群血漿apelin水平的比較及三組冠心病患者血漿apelin水平與左心室功能指標(biāo)的關(guān)系 四組人群血漿Apelin濃度比較：AMI組、UAP組與對(duì)照組比較有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P ＜0.05），而SAP組與對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；AMI組、UAP組、SAP組三組患者間兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）（表2）。

AMI組、UAP組、SAP組三組患者LVDs、LVDd水平兩兩比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P均＜0.05）。Apelin與LVDs的相關(guān)性分析，相關(guān)系數(shù)r=-0.403，P＜0.0001，兩者呈顯著負(fù)相關(guān)；apelin與LVDd的相關(guān)性分析，相關(guān)系數(shù)r=-0.305，P＜0.001，呈顯著負(fù)相關(guān)（圖1）。

3 討論

表1 四組人群基線資料比較

表2 四組人群血漿Apelin濃度及LVDs、LVDd水平

以上研究顯示，AMI、VAP、SAP患者之間血漿apelin濃度是有差異的，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；以上三組血漿apelin濃度與正常對(duì)照組相比，AMI、SAP有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，VAP無(wú)顯著差異。Apelin對(duì)抗動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制目前尚不完全清楚，可能通過(guò)保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞的完整性、對(duì)抗炎癥反應(yīng)、抑制巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞、抑制平滑肌細(xì)胞的增生等。

本研究中顯示，左室收縮末期內(nèi)徑、左室舒張末期內(nèi)徑與冠心病患者血漿中的apelin濃度呈顯著負(fù)相關(guān)，而兩者是評(píng)估心功能的指標(biāo)，可以反映心室重構(gòu)的進(jìn)程。心室重構(gòu)是心臟適應(yīng)功能改變的代償性反應(yīng)，病理生理學(xué)特點(diǎn)包括心肌細(xì)胞表型改變、心肌細(xì)胞死亡、纖維化、血管缺乏、心肌細(xì)胞肥大、線粒體缺乏、Ca2+轉(zhuǎn)運(yùn)障礙、肌球蛋白運(yùn)動(dòng)遲緩等。這些改變使心肌梗死的面積增加、心肌的順應(yīng)性下降，引起心力衰竭。引起心室重構(gòu)的重要刺激因素主要有兩個(gè)方面，力學(xué)超載和神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的激活，而力學(xué)超載又可激發(fā)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的進(jìn)一步激活，主要包括RAS系統(tǒng)、醛固酮等的作用。所以及早抑制神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)的激活有助于干預(yù)心室重構(gòu)的進(jìn)程。

圖1 AMI組、UAP組、SAP組三組間血漿Apelin濃度與LVDs、LVDd比較

有研究表明，在異丙腎上腺素誘導(dǎo)的大鼠急性心肌損傷模型中，apelin及其受體APJ表達(dá)下降，外源性補(bǔ)充apelin能夠減輕心肌損傷改善心臟功能［7］。Apelin可使衰竭心肌發(fā)揮正性肌力作用，通過(guò)增加心肌細(xì)胞一過(guò)性Ca2+內(nèi)流，而不是非肌原纖維對(duì)Ca2+的敏感性增加；還有人認(rèn)為apelin直接作用于心肌細(xì)胞，使其動(dòng)作電位擴(kuò)布及心肌細(xì)胞收縮，體現(xiàn)在apelin可增強(qiáng)心肌細(xì)胞Na+- H+泵的活性，使H+外流造成心肌細(xì)胞內(nèi)堿化，肌原纖維對(duì)Ca2+的敏感性增加［8］。

在大鼠心肌缺血及再灌注損傷模型中，外源性補(bǔ)充apelin可促進(jìn)Akt及p44/42的磷酸化，同時(shí)作用于心肌細(xì)胞線粒體通透性轉(zhuǎn)運(yùn)孔，使其開(kāi)放延遲，減少缺血再灌注損傷，降低心肌梗死面積，提高心臟收縮功能［9］。

Apelin通過(guò)其受體APJ調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞的有絲分裂、趨化、增殖、遷移，致使毛細(xì)血管內(nèi)形成管道樣結(jié)構(gòu)，并可使血管直徑進(jìn)一步擴(kuò)大。Apelin是內(nèi)皮細(xì)胞的一個(gè)有絲分裂原，可以激活ERKs、Akt、P70S6激酶，使其磷酸化，促使細(xì)胞遷移和增殖［10］，同時(shí)促進(jìn)在體鼠新生毛細(xì)血管的形成。Apelin/APJ信號(hào)位于血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A的下游，通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞上的APJ受體，可調(diào)控apelin的表達(dá)，調(diào)節(jié)血管直徑進(jìn)一步擴(kuò)大，同時(shí)在血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的參與下，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增值和細(xì)胞間的相互聚集［11］。

綜上所述，apelin能夠增強(qiáng)心肌收縮力，降低心臟負(fù)荷，增加心臟儲(chǔ)備而不引起心肌肥厚，在改善衰竭心臟功能的同時(shí)避免了心肌耗氧量的增加，這使其可能在慢性心力衰竭中得到廣泛應(yīng)用，apelin可促血管新生，提示其可用于治療缺血性心臟病和動(dòng)脈粥樣硬化閉塞的疾病等。如同交感-腎上腺系統(tǒng)及RAS系統(tǒng)一樣，apelin/APJ信號(hào)系統(tǒng)在心血管系統(tǒng)具有重要的調(diào)節(jié)作用，在心血管領(lǐng)域有著廣闊的前景。

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本文編輯：劉暢，田國(guó)祥

Expression of apelin in different types of coronary heart disease and the relationship between apelin and left ventricular remodeling

NI Ping*， ZHAO Zhi-qiang.*Cardiovascular medicine of Kunshan first people's hospital， Kunshan， Jiangsu， 215300， China.

ZHAO Zhi-qiang， Email: zhaozhiqiang202@126.com

Objective To investigate expression of apelin in patients with different types of coronary heart disease （CHD）， and the relationship between apelin and left ventricular remodeling. Methods Ninety-nine patients initially admitted for CHD were divided into three groups： stable angina pectoris（SAP） group， unstable angina pectoris（UAP） group and acute myocardial infarction （AMI） group. Twenty-nine age matched patients with CHD excluded after coronary angiography（CAG） were involved as the control group. Plasma apelin levels were determined by enzyme-linked immunoabsorbent assay （ELISA）. The left ventricular end systolic dimension （LVDs） and left ventricular end diastolic dimension （LVDd） were measured and recorded by the ultrasonic cardiography （UCG）. Plasma apelin levels among four groups were compared. And relationship between plasma apelin levels of AMI，UAP， SAP groups with LVDs and LVDd were analyzed. Results Compared to the control group， plasma apelin in AMI group and UAP group was significantly lower （P＜0.05）. And there was no significant difference of plasma apelin between control group and SAP group （P＞0.05）. Among the AMI， UAP and SAP groups， plasma apelin level was significantly different （P＜0.05）. Plasma apelin was negatively correlated with LVDs and LVDd （r=-0.403 and -0.305 respectively， P＜0.05）. Conclusion Plasma apelin levels were different in different types of CAG， and plasma apelin level may be associated with the left ventricular remodeling.

Apelin； Coronary heart disease； Left ventricular remodeling； Left ventricular end systolic dimension； Left ventricular end diastolic dimension

R541.4

A

1674-4055（2016）07-0868-04

1215300 昆山，江蘇省昆山市第一人民醫(yī)院心血管內(nèi)科

趙志強(qiáng)，E-mail：zhaozhiqiang202@126.com

10.3969/j.issn.1674-4055.2016.07.29