龔小花，吳文俊，陳雄，周琦，沈飛霞，陳如俊

（1.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 內(nèi)分泌科，浙江 溫州 325015；2.中國人民解放軍第118醫(yī)院 燒傷科，浙江 溫州 325001）

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糖尿病對燒傷創(chuàng)面氧化應(yīng)激狀態(tài)的影響

龔小花1，吳文俊1，陳雄1，周琦1，沈飛霞1，陳如俊2

（1.溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 內(nèi)分泌科，浙江 溫州 325015；2.中國人民解放軍第118醫(yī)院 燒傷科，浙江 溫州 325001）

目的：研究糖尿?。―M）對燒傷患者機(jī)體血清和燒傷創(chuàng)面氧化應(yīng)激狀態(tài)的影響，探討DM燒傷創(chuàng)面愈合延遲或者不愈合發(fā)生的可能機(jī)制。方法：選擇2型DM合并燒傷患者26例（DM-B組），單純燒傷患者22例（Burn組），并選擇同期匹配單純DM患者20例（DM組）及健康人群21例（對照組）。收集受檢者的空腹血清、創(chuàng)面組織標(biāo)本測定超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）水平。結(jié)果：①DM-B組、Burn組和DM組患者的血清標(biāo)本中SOD活性、MDA水平與對照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。與Burn組比較，DM-B組血清SOD活性進(jìn)一步下降，MDA水平進(jìn)一步升高（P＜0.05）。②DM-B組患者創(chuàng)面組織中MDA含量在各時(shí)相點(diǎn)與Burn組相比均明顯升高，SOD活性均明顯降低（P＜0.05），且這種差異至燙傷后21 d仍顯著。結(jié)論：DM燒傷創(chuàng)面氧化應(yīng)激明顯增強(qiáng)，可能是DM燒傷創(chuàng)面愈合延遲或者不愈合發(fā)生的機(jī)制之一。

燒傷創(chuàng)面；糖尿?。谎趸瘧?yīng)激；超氧化物歧化酶；丙二醛

隨著糖尿?。╠iabetes mellitus，DM）患者的不斷增多，燒傷合并DM患者人數(shù)也呈上升趨勢。此類患者發(fā)生感染的概率明顯升高，創(chuàng)面愈合延遲或者不愈合，甚至可增加燒傷患者的病死率。本研究探討氧化應(yīng)激是否是DM加重?zé)齻颊卟∏?，延遲創(chuàng)面愈合的機(jī)制之一。

1　資料和方法

1.1臨床資料 收集中國人民解放軍118醫(yī)院2013 年2月-2014年9月就診的符合1999年WHO診斷標(biāo)準(zhǔn)的2型DM合并燒傷患者26例（DM-B組）、單純燒傷患者22例（Burn組），并選擇同期匹配單純DM患者20例（DM組）及健康人群21例（對照組）。燒傷患者均為熱燒傷，燒傷面積10%～30%，創(chuàng)面為深I(lǐng) I度燒傷。燒傷后24 h內(nèi)入院，入院后第1天留取血標(biāo)本測空腹血糖、餐后2 h血糖、糖化血紅蛋白（HbA1c）等，并記錄燒傷深度、燒傷面積。DM-B組男15例，女11例，平均年齡（58.0±8.5）歲；Burns組男13例，女9例，平均年齡（60.6±10.3）歲；DM組男12例，女8例，平均年齡（61.2±11.2）歲；對照組男12例，女9例，平均年齡（59.6±9.8）歲。各組間性別構(gòu)成、年齡差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。DM-B組與Burn組患者空腹血糖分別為（9.1±1.7）mmol/L和（5.1±0.7）mmol/L，餐后血糖分別為（14.5±3.6）mmol/L和（7.3±1.0）mmol/L，HbA1c分別為（9.4± 2.3）%和（5.1±0.6）%，2組間上述指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。DM-B組與Burn組患者燒傷總體表面積分別為（16.2±5.3）%、（15.0±4.4）%，2組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。DM-B組患者入院后予降糖處理，余治療方案與Burn組患者相同。排除標(biāo)準(zhǔn)：DM急性并發(fā)癥（酮癥酸中毒、高血糖高滲狀態(tài)），嚴(yán)重的心肌梗死、腦梗死病史，肝腎功能不全。本研究經(jīng)中國人民解放軍118醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)，所有受試者均簽署知情同意書。

1.2標(biāo)本采集與處理

1.2.1組織標(biāo)本的獲?。篋M-B組和Burn組患者均在清創(chuàng)換藥過程中或手術(shù)中取創(chuàng)緣皮膚組織，組織大小均為0.5 cm×0.5 cm，厚度2～3 mm，進(jìn)行勻漿處理，-80 ℃冷凍保存，用于丙二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）含量的檢測。MDA試劑盒、SOD試劑盒均購自南京建成生物工程研究所。

1.2.2血標(biāo)本的獲?。嚎崭钩槿⊙褐糜诳鼓嚬苤校x心機(jī)離心，取上層血清置于1.5 mL EP管中，-80 ℃保存待用。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，所有數(shù)據(jù)均用表示，燒傷后MDA、SOD不同時(shí)相點(diǎn)的變化用方差分析，2組間的比較用t檢驗(yàn)。P＜ 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1各組患者血清和創(chuàng)面組織MDA水平的比較 由表1可見，與對照組相比，DM-B組、Burn組、DM組患者血清MDA水平均明顯升高（P＜0.05）；DM-B組患者血清MDA水平較Burn組、DM組患者進(jìn)一步升高（P＜0.05）。創(chuàng)面組織中DM-B組與Burn組在燒傷第1天差異即有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，在燒傷后第7天MDA水平達(dá)到高峰，此后MDA水平逐漸下降，但2組間的MDA水平差異性一直持續(xù)到燒傷后21 d仍存在（P＜0.05）。

2.2各組患者血清和創(chuàng)面組織SOD水平的比較 由表2可見，與對照組相比，DM-B組、Burn組、DM組患者血清SOD水平均明顯降低（P＜0.05）；DM-B組患者血清SOD水平較Burn組、DM組患者進(jìn)一步下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。創(chuàng)面組織中SOD水平檢測顯示，DM-B組與Burn組患者在燒傷第1天水平差異即有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），在燒傷后第7天SOD水平達(dá)到低谷，此后SOD水平回升，但2組間的SOD水平差異性一直持續(xù)到燒傷后21 d仍存在（P＜0.05）。

表1　各組MDA水平的比較（±s，nmol/mL）

表1　各組MDA水平的比較（±s，nmol/mL）

與對照組比：aP＜0.05；與DM-B組比：bP＜0.05

組別　例數(shù)　血清創(chuàng)面組織1 d　7 d　14 d　21 d對照組　21　1.8±1.0ab　-　-　-　-Burn組　22　3.4±1.3ab　3.0±1.3b　3.7±1.4b　3.5±1.1b　3.1±1.2bDM-B組　26　5.8±2.3ab　6.3±2.6b　7.1±2.9b　6.5±2.5b　6.0±2.2bDM組　20　3.7±1.2ab　-　-　-　-

表1　各組SOD水平的比較（±s，nmol/mL）

表1　各組SOD水平的比較（±s，nmol/mL）

與對照組比：aP＜0.05；與DM-B組比：bP＜0.05

組別　例數(shù)　血清創(chuàng)面組織1 d　7 d　14 d　21 d對照組　21　82.3±13.2ab　-　-　-　-Burn組　22　56.1± 9.7ab　54.4±10.3b　43.7±6.4b　51.5±9.1b　53.9±8.2bDM-B組　26　31.8± 7.3ab　36.3± 7.6b　24.1±5.9b　35.5±6.5b　34.7±7.2bDM組　20　45.7± 7.9ab　-　-　-　-

3　討論

DM是一種代謝性疾病，可導(dǎo)致多種并發(fā)癥的產(chǎn)生。臨床上常見DM患者燒傷創(chuàng)面出現(xiàn)愈合延遲或不愈合，給患者及其家屬帶來極大痛苦，也增加了醫(yī)療費(fèi)用［1］。盡管臨床以及實(shí)驗(yàn)研究肯定了高血糖是這種現(xiàn)象發(fā)生的主要危險(xiǎn)因素，但對DM是如何引起創(chuàng)面難愈仍缺乏一致意見。

氧化應(yīng)激是指機(jī)體在遭受各種有害刺激時(shí)，自由基的產(chǎn)生和抗氧化防御之間嚴(yán)重失衡的一種狀態(tài)。Pintaudi等［2］、Jutkiewicz等［3］研究證實(shí)，無論是輕中度還是重度燒傷患者燒傷部位均會產(chǎn)生大量活性氧（reactive oxygen species，ROS），患者體內(nèi)MDA水平明顯升高，SOD水平顯著降低［4］，參與了燒傷創(chuàng)面損傷、水腫的形成，也參與了燒傷后免疫功能紊亂、器官功能的異?；蛩ソ?。本研究也證實(shí)燒傷患者血漿MDA、SOD水平均與對照組存在明顯差異（P＜0.05）。有研究表明予燒傷患者早期進(jìn)行抗氧化治療，能夠有效控制ROS的產(chǎn)生，從而降低組織損傷，減少并發(fā)癥發(fā)生，提高創(chuàng)面愈合率。2009年Barbosa等［5］在燒傷患兒中進(jìn)行了隨機(jī)雙盲安慰劑對照臨床研究，發(fā)現(xiàn)予維生素C、E和鋅等抗氧化治療可明顯降低患兒體內(nèi)氧化應(yīng)激水平，縮短創(chuàng)面愈合時(shí)間。N乙酰半胱氨酸（N-Acetylcysteine，NAC）是一種受到廣泛研究的自由基清除劑。Chen等［6］用NAC處理大鼠燒傷模型，發(fā)現(xiàn)NAC能顯著提高谷胱甘肽過氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）活性，降低MDA活性。Csontos等［7］給予NAC治療后重度燒傷患者體內(nèi)氧化應(yīng)激程度明顯降低。目前DM患者燒傷創(chuàng)面出現(xiàn)愈合延遲或不愈合的具體機(jī)制仍不明確。2004年美國糖尿病學(xué)會（American Dia-betes Association，ADA）年會提出，DM及其慢性并發(fā)癥存在同一發(fā)病機(jī)制—氧化應(yīng)激［8-9］。本研究也進(jìn)一步證實(shí)DM患者體內(nèi)存在氧化應(yīng)激反應(yīng)增強(qiáng)現(xiàn)象。Costa等［10］發(fā)現(xiàn)DM燒傷大鼠的創(chuàng)面、肝臟、腎臟都存在過強(qiáng)的氧化應(yīng)激現(xiàn)象，提示氧化應(yīng)激參與了DM燒傷創(chuàng)面病理發(fā)生發(fā)展進(jìn)程。葛奎等［11］給予DM燒傷大鼠模型進(jìn)行氨基胍干預(yù)治療后發(fā)現(xiàn)，在氧化應(yīng)激水平得到改善的情況下，其創(chuàng)面愈合率也得到了顯著改善。本研究顯示，DM燒傷患者與單純燒傷患者相比，無論是血清標(biāo)本還是創(chuàng)面標(biāo)本，SOD、MDA都存在明顯差異（P＜0.05），這種差異甚至在創(chuàng)面21 d時(shí)仍持續(xù)存在，進(jìn)一步證明在DM燒傷患者體內(nèi)氧化應(yīng)激增強(qiáng)是創(chuàng)面難愈的機(jī)制之一，與周萍萍等［12］動物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果相符。

總之，本研究初步推斷在DM狀態(tài)下，機(jī)體燒傷創(chuàng)面氧化應(yīng)激增強(qiáng)，可能是DM創(chuàng)面愈合延遲或不愈合的原因之一。實(shí)施抗氧化治療可能是提高DM燒傷創(chuàng)面愈合率，縮短愈合時(shí)間的有效途徑之一。

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（本文編輯：丁敏嬌）

Effects of diabetes on oxidative stress in burn wounds

GONG Xiaohua1，WU Wenjun1，CHEN Xiong1，ZHOU Qi1，SHEN Feixia1，CHEN Rujun2. 1.Department of Endocrinology，the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University，Wenzhou，325015； 2.Department of Burns，the 118th Hospital of People's Liberation Army，Wenzhou，325001

Objective： To observe the metabolite level of oxidative stress in burned patients with or without type 2 diabetes mellitus，and to explore the relationship between oxidative stress and diabetic burned wounds. Methods： The patients were divided into 3 groups，including burned patients without DM （Burn group），burned patients with DM （DM-B group） and DM without burns. And another 21 healthy subjects were enrolled as control group. The levels of superoxide dismutase （SOD） and malondialdehyde （MDA） in plasma and wounds were detected. Results： The plasma levels of SOD in the DM-B group，Burn group and DM group were lower than that of the control group （P＜0.05）. The plasma concentrations of MDA were statistically signifcantly higher in the groups of DM-B，Burn and DM in comparison with the control group. The levels of SOD in the burn wounds were lower in DM-B group compared to Burn group on the 1st day following injury （P＜0.05），which maintained until the 21stday. In DM-B group a statistically signifcant increase of the MDA was observed from the 1st day until the 21stday. Conclusion： These data show evidence of a marked，long-lasting oxidative stress in burned patients with DM compared to the burned patients without DM. For this reason，burned patients with DM are recommended to receive exogenous antioxidants.

burn wounds； diabetes mellitus； oxidative stress； superoxide dismutase； malondialdehyde

R587.1

B DOI： 10.3969/j.issn.2095-9400.2016.08.012

2016-04-01

溫州市科技計(jì)劃項(xiàng)目（Y20120116）。

龔小花（1980-），女，浙江溫州人，主治醫(yī)師，碩士。通信作者：陳如俊，副主任醫(yī)師，Email：519973491@qq.com。