劉曉華

(河北省承德市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科 067000)

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·經(jīng)驗(yàn)交流· doi:10.3969/j.issn.1671-8348.2016.28.034

宮頸及輸卵管人乳頭瘤病毒感染與輸卵管妊娠的關(guān)系探討

劉曉華

(河北省承德市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科 067000)

[摘要] 目的 探討宮頸及輸卵管人乳頭瘤病毒感染與輸卵管妊娠的關(guān)系。方法 選取在該院婦科病區(qū)住院的輸卵管妊娠的患者50例作為觀察組，選取同期在該院住院治療的子宮肌瘤、子宮肌腺癥、卵巢良性囊腫蒂扭轉(zhuǎn)切除輸卵管的患者30例作為對照，比較兩組研究對象宮頸樣本和輸卵管樣本HPV感染率的差異；比較兩組研究對象宮頸樣本和輸卵管樣本HPV亞型分布情況的差異；以及輸卵管妊娠次數(shù)與HPV感染率的相關(guān)性分析。結(jié)果 觀察組宮頸樣本中HPV陽性率(16例，32.0%)高于對照組(3例，10.0%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；觀察組輸卵管樣本中HPV陽性率(14例，28.0%)高于對照組(2例，6.67%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。觀察組宮頸樣本中高危型HPV16、 HPV18、HPV33和低危型HPV6檢出率高于對照組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；兩組研究對象輸卵管樣本的HPV各亞型檢出率的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。輸卵管妊娠次數(shù)與HPV感染率呈正相關(guān)(r=0.278，P=0.036)。結(jié)論 輸卵管妊娠患者宮頸樣本和輸卵管樣本HPV感染率顯著增高，且輸卵管妊娠次數(shù)與HPV感染率呈正相關(guān)。

妊娠，輸卵管；子宮頸；人乳頭瘤病毒

異位妊娠為臨床上較為常見的婦科急腹癥，受精卵著床位置異常導(dǎo)致絨毛膜滋養(yǎng)細(xì)胞對于輸卵管及闊韌帶或者卵巢等部位進(jìn)行持續(xù)性的侵襲，嚴(yán)重的腹腔內(nèi)出血可導(dǎo)致患者出現(xiàn)失血性休克而死亡。對于異位妊娠的病因探討發(fā)現(xiàn)，育齡期女性生殖系統(tǒng)炎癥如支原體、解脲衣原體及淋病球菌等的感染可在一定程度上促進(jìn)異位妊娠的發(fā)生[1-2]，提示宮頸或者陰道內(nèi)病原體或者病毒等微生物的感染可以影響到輸卵管局部的生理功能。

人乳頭瘤狀病毒(human papillomairus，HPV)是導(dǎo)致宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌的重要因素，作為宮頸病毒感染的病因之一，迄今為止對于HPV與輸卵管生理功能改變導(dǎo)致的異常受精卵著床的關(guān)系尚不清楚，持續(xù)性的HPV感染或者不同高危分型的HPV感染與異位妊娠關(guān)系的研究將為具有異位妊娠相關(guān)危險(xiǎn)因素患者的隨訪提供參考，并為高危型HPV感染患者的臨床治療提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取在本院婦科病區(qū)住院的輸卵管妊娠的患者50例作為觀察組，年齡22～41歲，平均(30.25±5.38)歲，平均孕次(1.15±0.96)次，平均產(chǎn)次(0.26±0.38)次，納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)行開腹或腹腔鏡切除患側(cè)輸卵管，術(shù)后病理化驗(yàn)證實(shí)為輸卵管妊娠患者；(2)患者術(shù)前均行宮頸HPV檢測；(3)術(shù)中在輸卵管黏膜處取樣行HPV檢測；(4)與研究對象簽訂了知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)拒絕行宮頸和輸卵管HPV檢測的患者；(2)既往有闌尾炎、破宮產(chǎn)等盆腔手術(shù)史的患者；(3)服用免疫調(diào)節(jié)劑或有自身免疫性疾病的患者。選取同期在本院住院治療的子宮肌瘤、子宮肌腺癥、卵巢良性囊腫蒂扭轉(zhuǎn)的患者30例作為對照，年齡24～46歲，平均(31.72±6.09)歲，平均孕次(1.09±0.94)次，平均產(chǎn)次(0.29±0.35)次，納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)行開腹或腹腔鏡切除一側(cè)或雙側(cè)輸卵管患者；(2)患者術(shù)前均行宮頸HPV檢測；(3)術(shù)中在輸卵管黏膜處取樣行HPV檢測；(4)與研究對象簽訂了知情同意書；排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)排除有盆腔炎性疾病、宮頸癌、輸卵管癌的患者；(2)拒絕行宮頸和輸卵管HPV檢測的患者；(3)服用免疫調(diào)節(jié)劑或有自身免疫性疾病的患者。兩組患者的一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 樣本采集和HPV-DNA檢測方法 觀察組行開腹或腹腔鏡切除患側(cè)輸卵管、術(shù)后病理化驗(yàn)證實(shí)為輸卵管妊娠患者，術(shù)前取宮頸HPV檢測，術(shù)中于輸卵管黏膜處取HPV送檢，對照組行手術(shù)治療切除一側(cè)或雙側(cè)輸卵管患者，術(shù)前取宮頸HPV檢測，術(shù)中于輸卵管黏膜處取HPV送檢。采用羅氏的cobas 4800 HPV檢測試劑盒，毛刷對于宮頸黏液細(xì)胞及輸卵管上皮細(xì)胞進(jìn)行采集，順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)毛刷10～15圈，之后立即放入封存液中保存待測。PE9600實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀(美國MBI公司)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，采用HYDJF-trics核酸分子快速雜交儀及配套試劑盒進(jìn)行導(dǎo)流雜交(南京凱基生物科技有限公司)。

1.3 觀察指標(biāo) 比較兩組研究對象宮頸樣本和輸卵管樣本和輸卵管樣本HPV感染率的差異；比較兩組研究對象宮頸樣本HPV亞型分布情況的差異；以及輸卵管妊娠次數(shù)與HPV感染率的相關(guān)性分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS16.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，HPV感染率以百分率(%)表示，用χ2檢驗(yàn)或Fisher 確切概率法進(jìn)行兩組間差異比較；Spearman相關(guān)分析法用于分析輸卵管妊娠次數(shù)與HPV感染率的相關(guān)性； 以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組研究對象宮頸樣本和輸卵管樣本HPV感染率比較 觀察組宮頸樣本中HPV陽性率(16例，32.0%)高于對照組(3例，10.0%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；觀察組輸卵管樣本中HPV陽性率(14例，28.0%)高于對照組(2例，6.7%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組研究對象宮頸樣本和輸卵管樣本HPV感染率比較[n(%)]

2.2 兩組研究對象宮頸樣本HPV亞型分布情況比較 觀察組宮頸樣本中高危型HPV16檢出率(12例，24.0%)高于對照組(2例，6.67%)，高危型HPV18檢出率(15例，30.0%)高于對照組(1例，3.33%)，高危型HPV33檢出率(13例，26.0%)高于對照組(2例，6.67%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；觀察組宮頸樣本中低危型HPV6檢出率(10例，18.0%)高于對照組(1例，3.33%)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 兩組研究對象宮頸樣本HPV亞型分布情況比較[n(%)]

-：表示無數(shù)據(jù)。

表3 兩組研究對象輸卵管樣本HPV亞型分布情況比較[n(%)]

-：表示無數(shù)據(jù)。

2.3 兩組研究對象輸卵管樣本HPV亞型分布情況比較 觀察組研究對象輸卵管樣本HPV亞型分布情況：高危型HPV16 3例(6.0%)，HPV18 4例(8.0%)，HPV33 2例(4.0%)，HPV51 3例(2.0%)；低危型HPV6 2例(4.0%)，HPV30 1例(2.0%)，HPV43 1例(2.0%)，對照組研究對象輸卵管樣本HPV亞型分布情況：高危型HPV51 1例(2.0%)，低危型HPV6 1例(2.0%)；兩組研究對象輸卵管樣本的HPV各亞型檢出率的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表3。

2.4 輸卵管妊娠次數(shù)與HPV感染率的相關(guān)性分析 對觀察組研究對象輸卵管妊娠次數(shù)與HPV感染率做Spearman相關(guān)性分析結(jié)果顯示：輸卵管妊娠次數(shù)與HPV感染率呈正相關(guān)(r=0.278，P=0.036)，輸卵管妊娠次數(shù)越多，HPV感染率越高，見表4。

表4 輸卵管妊娠次數(shù)與HPV感染率的相關(guān)性分析[n(%)]

3 討 論

陰道內(nèi)環(huán)境或者下生殖道的相關(guān)病原體的數(shù)量及相互之間比例的協(xié)調(diào)，對于維持復(fù)雜而穩(wěn)定的陰道內(nèi)菌群環(huán)境具有重要的意義。支原體、衣原體及解脲尿原體等微生物在陰道內(nèi)廣泛存在，但多數(shù)患者無致病表現(xiàn)，而一旦特定的細(xì)菌或者病毒過度增殖，可在破壞原有菌群環(huán)境的基礎(chǔ)上損失宮頸上皮細(xì)胞及陰道內(nèi)黏膜上皮層。下生殖道系統(tǒng)的感染性疾病不僅可以導(dǎo)致宮頸或者陰道上皮病變，同時(shí)對于盆腔內(nèi)輸卵管或者子宮同樣具有顯著的影響[3-4]，有研究分析了137例真菌性陰道炎及持續(xù)性宮頸HPV感染的患者的手術(shù)資料，發(fā)現(xiàn)25%的真菌性陰道炎可合并輸卵管慢性炎癥損失，同時(shí)5.7%的宮頸高危型HPV感染的患者可出現(xiàn)一側(cè)或者雙側(cè)附件的粘連[5-6]。髂內(nèi)動(dòng)脈的分支陰部內(nèi)動(dòng)脈伴行靜脈的回流，髂內(nèi)淋巴結(jié)及腹股溝淺淋巴結(jié)對于相關(guān)淋巴引流區(qū)域的組織液的收納，均可以促進(jìn)下生殖系統(tǒng)炎癥或者病毒感染性疾病的上行性感染，并加劇其對于輸卵管上皮細(xì)胞或者纖毛擺動(dòng)的影響[7]。1項(xiàng)匯集了156例HPV感染與不孕或者異位妊娠患者的相關(guān)關(guān)系的研究認(rèn)為，高危型HPV感染可顯著影響輸卵管上皮的纖毛擺動(dòng)，并促進(jìn)不孕和異位妊娠的發(fā)生，其中異位妊娠的發(fā)生率可增加3%～4%[8]，但其并未進(jìn)行HPV高危分型分析，研究只限于現(xiàn)象一級的探討和分析，具有一定的局限性。

本次研究采用羅氏檢測公司生產(chǎn)的高危型HPV分型檢測試劑盒進(jìn)行分型檢測，發(fā)現(xiàn)異位妊娠患者的術(shù)前宮頸黏液細(xì)胞刮片及術(shù)中的輸卵管組織的標(biāo)本采集中均出現(xiàn)了較高的HPV感染率，其中宮頸上皮中的HPV感染率可達(dá)78%，而輸卵管組織中的HPV感染率可達(dá)28%，一方面提示了宮頸HPV感染的患者，其輸卵管組織中可出現(xiàn)HPV感染的證據(jù)，輸卵管HPV感染可能進(jìn)一步導(dǎo)致異位妊娠的出現(xiàn)，另一方面，輸卵管上皮中的HPV感染陽性率低于宮頸HPV感染陽性率，考慮可能與宮頸病變的逆行性致病過程有關(guān)。高危型HPV感染是導(dǎo)致宮頸高度上皮病變的重要原因，特別是HPV16、HPV18及HPV33等的感染，患者宮頸上皮內(nèi)的病變可達(dá)CINⅡ～Ⅲ[9-10]。本次研究進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn)，異位妊娠患者中，高危型HPV16、HPV18及HPV33感染的陽性率明顯高于對照組，提示HPV16、HPV18及HPV33等高危HPV亞型與異位妊娠的發(fā)生關(guān)系更為密切，持續(xù)性的HPV16、HPV18及HPV33感染可以通過整合E6、E7 mRNA進(jìn)入輸卵管柱狀上皮細(xì)胞內(nèi)，通過影響纖毛橫紋肌的等長收縮進(jìn)而影響纖毛的擺動(dòng)頻率和方向，影響卵子正常通過輸卵管。

Buckley 等[11]在一側(cè)輸卵管妊娠患者的輸卵管上皮細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)HPV16及HPV18的感染陽性率可增加3～5倍，同時(shí)高危HPV的感染可進(jìn)一步促進(jìn)盆腔炎癥性疾病對于輸卵管影響，導(dǎo)致輸卵管水腫、扭曲、變長，促進(jìn)異位妊娠的發(fā)生。輸卵管妊娠次數(shù)越多，HPV感染率越高，提示輸卵管HPV感染可能具有累積效應(yīng)，早期的HPV感染可增加再次感染其他高危分型HPV的概率。但在輸卵管上皮組織中并未發(fā)現(xiàn)HPV分型的差異性表現(xiàn)，考慮異位妊娠的發(fā)生主要與宮頸原位HPV感染有關(guān)，另外，觀察組中低危型HPV6 感染的陽性率較低，提示低危型HPV6的感染可能是異位妊娠的一項(xiàng)保護(hù)性因素，但仍然需要后續(xù)研究加大樣本量、變更檢測試劑盒進(jìn)行進(jìn)一步的分析。

[1]韋敏,林曉琰,黃寧,等.南寧市婦女人乳頭狀病毒感染狀態(tài)及危險(xiǎn)因素調(diào)查[J].重慶醫(yī)學(xué),2015,44(25):3558-3561.

[2]周平樂，孫彬彬.宮頸病變患者高危型HPV感染情況及其與血清炎性因子的關(guān)系[J].山東醫(yī)藥,2015,43(30):47-48.

[3]吳崧，趙文龍，鄭媛.高危型人乳頭狀瘤病毒陽性不孕患者宮頸感染與組織病變的相關(guān)性研究[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2014,34(12):2877-2879.

[4]Ronco G,Dillner J,Elfstr?m KM,et al.Efficacy of HPV-based screening for prevention of invasive cervical cancer:follow-up of four European randomised controlled trials[J].Lancet,2014,383(9916):524-532.

[5]朱怡，吳旭，楊蓉，等.上海市育齡婦女HPV感染情況調(diào)查及感染因素分析[J].現(xiàn)代儀器與醫(yī)療,2015,23(3):119-120.

[6]李美琴，李春宏，裴圣林，等.宮頸脫落細(xì)胞HPVL1蛋白及HPV DNA載量對宮頸病變的預(yù)測價(jià)值[J].重慶醫(yī)學(xué),2015,30(13):1804-1806.

[7]Hernandez-Marquez CI,Salinas-Urbina AA,Cruz-Valdez A,et al.Knowledge of human papilloma virus(HPV)and acceptance of vaginal self-sampling among Mexican woman[J].Rev Salud Publica(Bogota),2014,16(5):697-708.

[8]方三高,石群立,周曉軍,等.解讀 2014 年 WHO 女性生殖器官腫瘤分類(宮頸)[J].重慶醫(yī)學(xué),2015,44(28):3889-3899.

[19]Lemieux-Mellouki P,Drolet M,Brisson J,et al.Assortative mixing as a source of bias in epidemiological studies of sexually transmitted infections:the case of smoking and human papillomavirus[J].Epidemiol Infect,2015,33(7):1-10.

[10]Pichon-Riviere A,Alcaraz A,Caporale J,et al.Cost-effectiveness of quadrivalent vaccine against human papilloma virus in Argentina based on a dynamic transmission model[J].Salud Publica Mex,2015,57(6):504-513.

[11]Buckley L,Gupta R,Ashford B,et al.Oropharyngeal cancer and human papilloma virus:evolving diagnostic and management paradigms[J].ANZ J Surg,2015,34(6):123-126.

河北省承德市科學(xué)技術(shù)局科技支撐基金資助項(xiàng)目(20142012)。 作者簡介：劉曉華(1972-)，副主任醫(yī)師,本科,主要從事異味妊娠研究。

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1671-8348(2016)28-3987-04

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2016-07-15)