張　遷，韓　磊，尤文斌

（1.宣化縣人民醫(yī)院普外科，河北宣化 075100；2.河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院普通外科）

結(jié)直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平的變化及意義

張遷1，韓磊2，尤文斌1

（1.宣化縣人民醫(yī)院普外科，河北宣化 075100；2.河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院普通外科）

目的：探討結(jié)直腸癌患者血清血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）和基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）水平的變化和意義。方法：采用雙抗體夾心法檢測72例結(jié)直腸癌患者（術(shù)前、術(shù)后3個月、術(shù)后1年）、30例結(jié)直腸腺瘤患者和30例健康體檢者血清VEGF和MMP-2的水平。結(jié)果：結(jié)直腸癌組患者術(shù)前血清VEGF和MMP-2水平明顯高于結(jié)直腸腺瘤組和正常對照組（P＜0.05）；術(shù)后3個月，72例結(jié)直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平明顯低于術(shù)前（P＜0.05），與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平與年齡、性別、組織類型、大體分型、腫瘤部位無關(guān)（P＞0.05）；與Dukes分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度、腫瘤大小有關(guān)（P＜0.05）。術(shù)后隨訪1年時，復(fù)發(fā)者血清VEGF和MMP-2水平明顯高于未復(fù)發(fā)者（P＜0.05）。結(jié)論：血清VEGF和MMP-2水平可能在結(jié)直腸癌的早期診斷、病情評估及預(yù)后評價中具有重要作用。

結(jié)直腸癌；血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）；基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）

結(jié)直腸癌是臨床常見的惡性腫瘤之一，據(jù)統(tǒng)計其發(fā)病率在男性居第四位、在女性居第三位，嚴(yán)重威脅著人們的生命健康［1］。因此，結(jié)直腸癌的早期診斷、正確治療決策及預(yù)后備受關(guān)注。血清腫瘤標(biāo)記物檢測是一種無創(chuàng)、有效的檢查方法，在輔助結(jié)直腸癌的診斷、預(yù)后評價中具有重要的臨床意義［2］。本文旨在探求血清血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）和基質(zhì)金屬蛋白酶-2（MMP-2）在結(jié)直腸癌早期診斷，病情程度及預(yù)后評價中的臨床意義。

1　對象與方法

1.1研究對象

1.1.1結(jié)直腸癌組：以2012年9月-2013 年8月于我科行根治手術(shù)的72例結(jié)直腸癌患者為研究對象，女性32例、男性40例，年齡28-86歲，平均58.6歲。Dukes分期：A期6例、B期24例、C期42例。全部病例均經(jīng)病史、查體、實(shí)驗(yàn)室有關(guān)腫瘤標(biāo)記物，上、下腹部CT，盆腔MRI，盆腹腔淋巴結(jié)彩超，電子結(jié)腸鏡及病理等檢查確診為結(jié)直腸癌且經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)，全部病例術(shù)前均未接受放、化療等治療。入選條件：結(jié)直腸癌患者不合并高血壓、糖尿病以及血栓性疾病等影響VEGF水平者；無嚴(yán)重心、腦、腎功能不全者；不合并其它部位惡性腫瘤；無免疫性疾病。

1.1.2結(jié)直腸腺瘤組：同期于我科住院治療的結(jié)直腸腺瘤患者30例，其中女性12例、男性18例，年齡26-80歲，平均53.5歲，全部病例均經(jīng)電子結(jié)腸鏡及病理確診。

1.1.3正常對照組：同期來我院經(jīng)健康體檢證實(shí)為健康者30例，其中女性16例、男性14例，年齡24-70歲，平均49.3歲。

以上三組性別構(gòu)成、年齡等一般情況比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2方法與試劑 全部受檢者均于晨起采集空腹靜脈血4ml（結(jié)腸癌組患者分別于術(shù)前、術(shù)后3個月、隨訪1年時采集靜脈血），3000r/min離心10min，分離血清，-20℃冰箱中凍存待測。血清VEGF和MMP-2水平的測定采用雙抗體夾心法，實(shí)驗(yàn)過程嚴(yán)格按照試劑盒（晶美生物工程公司）說明書進(jìn)行，測定值按標(biāo)準(zhǔn)曲線換算成VEGF和MMP-2的含量。

1.3統(tǒng)計分析 使用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件包進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。采用t檢驗(yàn)和方差分析比較組間差異。

2　結(jié)果

2.1血清VEGF和MMP-2水平 結(jié)直腸癌組患者術(shù)前血清VEGF和MMP-2水平明顯高于結(jié)直腸腺瘤組和正常對照組（P＜0.05）；術(shù)后3個月，72例結(jié) 直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平明顯低于術(shù)前（P＜0.05），與正常對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1：

表1　三組血清VEGF和MMP-2水平檢測結(jié)果（）

表1　三組血清VEGF和MMP-2水平檢測結(jié)果（）

與正常對照組、結(jié)直腸腺瘤組、結(jié)腸癌術(shù)后3個月比較：*P＜0.05

2.2血清VEGF和MMP-2水平與結(jié)直腸臨床病理特征的關(guān)系 結(jié)直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平與年齡、性別、組織類型、大體分型、腫瘤部位無關(guān)（P＞0.05）；與Dukes分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度、腫瘤大小有關(guān)（P＜0.05）：Dukes C期患者明顯高于A期和B期患者，低、未分化患者明顯高于高、中分化患者，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者明顯高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，腫瘤浸潤漿膜層或全層者明顯高于未及漿膜者，腫瘤直徑≥5cm者明顯高于＜5cm者。見表2：

表2　血清VEGF和MMP-2水平與結(jié)直腸癌臨床病理特征的關(guān)系（n=72）

2.3結(jié)直腸癌患者隨訪1年時血清VEGF和MMP-2水平 復(fù)發(fā)組患者血清VEGF和MMP-2水平明顯高于未復(fù)發(fā)者（P＜0.05）。見表3：

表3　隨訪1年時結(jié)直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平（）

表3　隨訪1年時結(jié)直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平（）

組別　例數(shù)　VEGF（ng/L）　MMP-2（mg/L）復(fù)發(fā)組　8　380.6±88.5　262.8±35.3未復(fù)發(fā)組　64　132.3±41.0　178.6±27.8 P＜0.05　＜0.05

3　討論

VEGF是Ferrara等1989年從牛正常垂體濾泡星型細(xì)胞中分離純化的一種特異性蛋白質(zhì)，主要作用是參與血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖、血管形成以及腫瘤的浸潤、轉(zhuǎn)移［3-4］。VEGF是目前所知的促腫瘤血管生成活性最強(qiáng)、最特異的血管生長因子，可以直接作用于內(nèi)皮使微血管的通透性增高。研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞VEGF表達(dá)水平升高，并且腫瘤細(xì)胞表達(dá)VEGF是腫瘤具有侵襲性的基礎(chǔ)［5］。結(jié)直腸癌患者血清VEGF水平升高已被大量研究所證實(shí)，目前認(rèn)為主要是癌細(xì)胞分泌、血小板激活或破壞釋放以及侵入腫瘤組織的巨噬細(xì)胞釋放癌細(xì)胞分泌的VEGF隨穿過血管壁的血液細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)，或是VEGF使血管壁通透性增加，從而彌散到循環(huán)血液中。

細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜降解是惡性腫瘤局部浸潤、轉(zhuǎn)移的必要條件，MMPs是降解細(xì)胞外基質(zhì)蛋白最主要的水解酶。MMPs可促進(jìn)生長因子分泌，進(jìn)而加速結(jié)腸癌的生長、侵襲以及轉(zhuǎn)移；同時，MMPs還可誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡耐受，使癌細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視；MMPs還能促進(jìn)結(jié)腸癌血管生成，豐富的血管可為腫瘤的迅速增殖提供營養(yǎng)和氧分。MMP-2是MMPs家族的重要成員，在腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移的過程中起重要作用，主要降解Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原、明膠彈性蛋白和層黏蛋白等。

本研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平明顯高于結(jié)腸腺瘤和健康體檢者，并且結(jié)直腸癌患者血清VEGF和MMP-2水平與Dukes分期、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤深度和腫瘤大小有關(guān)。本研究提示，血清VEGF和MMP-2水平在結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展過程中隨惡性程度的增加呈上升趨勢，且與結(jié)直腸癌病情有關(guān)，說明VEGF和MMP-2能較敏感地反應(yīng)結(jié)直腸的惡變過程，在結(jié)直腸癌早期診斷、病情判斷上有重要意義；并且，VEGF和MMP-2水平升高是結(jié)直腸癌獲得高侵襲和轉(zhuǎn)移能力的重要因素，在某種程度上可以預(yù)測病情的惡化程度。本研究亦發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌患者術(shù)后3個月血清VEGF和MMP-2水平接近正常，隨訪1年時復(fù)發(fā)組患者血清VEGF和MMP-2水平明顯高于未復(fù)發(fā)組，說明二者能較敏感地反映結(jié)直腸癌患者病情和預(yù)后的變化，對評估病情具有重要的臨床意義。

綜上所述，VEGF和MMP-2在結(jié)直腸癌的生長、浸潤、轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用，檢測血清中VEGF和MMP-2水平對結(jié)直腸癌的早期診斷、病情評估和預(yù)后評價具有重要的臨床價值。

［1］Parkin DM， Bray F， Ferlay J， et al. Global cancer statistics，2002［J］. CA Cancer J Clin， 2005， 55（2）: 74-108.

［2］蔡三軍.結(jié)直腸肛管癌［M］.北京：北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2006.177-178.

［3］吳胤瑛，李恩孝.VEGF在惡性腫瘤中的研究進(jìn)展［J］.現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2005，13（5）：附18-21.

［4］龔麗明，林世杰，王忠明，等.巢式RT-PCR擴(kuò)增CK20、MMP-7診斷大腸癌淋巴結(jié)微轉(zhuǎn)移的初步研究［J］.腫瘤防治研究，2005，32（6）：346-349，345.

［5］Zafirellis K，Agrogiannis G，Zachaki A，et al.Prognostic significance of VEGF expression evaluated by quantitative immunohistochemical analysis in colorectal cancer［J］.J Surg Res， 2008，147（1）:99-107.

CHANGES AND SIGNIFICANE OF SERUM VEGF AND MMP-2 LEVEL OF COLORECTAL CANCER PATIENTS

ZHANG Qian， HAN Lei， YOU Wen-bin
(Department of General Surgery, Xuanhua People’s Hospital, Hebei Xuanhua 075100, China)

Objective: To investigate the changes and signifi cance of the vascular endothelial growth factor （VEGF）and matrix metalloproteinase-2 （MMP-2） level in serum of colorectal cancer patients. Methods: Double antibody sandwich method was used to detect the serum VEGF and MMP-2 level of 72 colorectal cancer patients （before operation， 3 months and 1 year after operation）， 30 colorectal adenomas patients and healthy controls. Results: The serum VEGF and MMP-2 level of colorectal cancer patients before operation were obviously higher than that of colorectal adenomas patients and healthy controls（P＜0.05）； 3 months after operation， the serum VEGF and MMP-2 level of colorectal cancer patients were signifi cantly lower than that before operation （P＜0.05）， and had no statistical signifi cance compared with healthy controls （P＞0.05）. The serum VEGF and MMP-2 level of colorectal cancer patients were not related to age， sex， histological type， gross classifi cation and tumour location （P＞0.05）； but related to Dukes stage， differentiated degree， lymph node metastasis， depth of infi ltration and tumour size （P＜0.05）. 1 year after operation， the serum VEGF and MMP-2 level of relapsed patients were obviously higher than that of no relapsed patients （P＜0.05）. Conclusions: The serum VEGF and MMP-2 level may play important role in early diagnosis， severity assessment and prognostic evaluation of colorectal cancer.

Colorectal cancer；Vascular endothelial growth factor（VEGF）；Matrix metalloproteinase-2（MMP-2）

R735.3

A

1004-6879（2016）01-003-03

2015-08-12）