張 慧
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HPLC法測定安樂片中阿魏酸的含量
張 慧
目的 建立安樂片中阿魏酸的含量測定方法。方法 采用高效液相色譜法,色譜條件:乙腈-1%醋酸(14:86)為流動相;流速:1.0 ml/min,檢測波長:320nm。結(jié)果 阿魏酸進(jìn)樣量在0.03648~0.32832μg范圍內(nèi),線性關(guān)系良好,r=0.9998;回收率在95.51~99.04%之間,RSD為1.61%。結(jié)論 該方法穩(wěn)定,結(jié)果準(zhǔn)確。
高效液相色譜法;安樂片;阿魏酸
安樂片為中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第二冊收載品種(書頁號:Z2-104;標(biāo)準(zhǔn)編號:WS3-B-0274-90)[1]。安樂片是由柴胡、當(dāng)歸、川芎、茯苓、鉤藤、何首烏藤、白術(shù)(麩炒)、甘草等八味中藥材加工制成,具有疏肝解郁、定驚安神的作用。用于精神抑郁、驚恐失眠、胸悶不適、納少神疲。當(dāng)歸、川芎為方中主藥,具有較強(qiáng)的協(xié)同作用。阿魏酸是當(dāng)歸和川芎共有的有效成分之一,它是一種有機(jī)酸,可用高效液相色譜法測定其總量。經(jīng)方法學(xué)考察,本方法的線性、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、回收率試驗均符合規(guī)定,故確立本制劑的定量方法為高效液相色譜法測定阿魏酸的含量。
1.1 儀器 SHIMADZU-10Avp 液相色譜儀,N2000 工作站。
1.2 試劑 阿魏酸對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號0773-9910);安樂片由四川琦云藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn);乙腈為色譜純;其它試劑為分析純。
2.1 測定波長的確立 經(jīng)繪制阿魏酸紫外吸收圖譜,阿魏酸在320nm處有最大吸收[2],故確立320nm為本品中阿魏酸含量測定的波長。
2.2 流動相篩選 對比了乙腈-0.085% 磷酸溶液(17:83)[3]和乙腈-1%醋酸溶液(15:85)[4]對本品中阿魏酸分離的影響,乙腈-1%醋酸溶液(14:86)對阿魏酸分離的效果好于乙腈-0.085% 磷酸溶液(17:83),因此確定乙腈-1%醋酸(14:86)為本實驗中阿魏酸含量測定的流動相。
2.3 色譜條件 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動相:乙腈-1%醋酸(14:86);流速:1.0 ml/min;檢測波長:320 nm。
2.4 對照品溶液的制備 精密稱取阿魏酸對照品18.24 mg,置10 ml棕色量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,精密吸取1 ml,置棕色100 ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻,制成每1 ml含18.24 μg的溶液。
2.5 供試品溶液的制備 取本品20片,除去包衣,研細(xì),取約2 g,精密稱定,精密加入1%甲酸甲醇溶液25 ml,密塞,稱定重量,超聲處理30分鐘,再稱定重量,用1%甲酸甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液,即得[5]。
2.6 線性范圍考查 分別精密吸取對照品2μl、6μl、10μl、14μl、18 μl溶液,注入液相色譜儀中,測定色譜峰面積,以阿魏酸對照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),色譜峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為:y=2229986.29x+1899.10,r=0.9998。阿魏酸對照品進(jìn)樣量在0.03648~0.32832μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。測定結(jié)果見表1。
表1 阿魏酸對照品線性范圍考察結(jié)果
2.7 精密度試驗考查 精密吸取對照品溶液10μl,連續(xù)進(jìn)樣6次,測定色譜峰面積,阿魏酸對照品溶液精密度試驗符合規(guī)定。測定結(jié)果見表2。
2.8 穩(wěn)定性試驗考查 精密吸取供試品液10 μl,每間隔1小時進(jìn)樣1次,測定色譜峰面積,阿魏酸色譜峰峰面積積分值基本一致,RSD為1.13%。說明供試品在4小時內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。測定結(jié)果見表3。
表2 精密度試驗結(jié)果
表3 穩(wěn)定性試驗結(jié)果
2.9 重復(fù)性試驗考查 取本品2 g,精密稱定,共取6份,分別按供試品溶液制備項下方法操作,測定色譜峰面積,計算含量,阿魏酸含量重復(fù)性試驗符合規(guī)定。測定結(jié)果見表4。
表4 重復(fù)性試驗結(jié)果
2.10 回收率試驗考察 取本品1 g,精密稱定,共取6份,精密加入阿魏酸對照品溶液(0.274 mg/ml)1 ml,按供試品溶液制備項下方法操作,測定色譜峰面積,計算,阿魏酸回收率在95.51~99.04%之間,RSD為1.61%,符合規(guī)定。測定結(jié)果見表5。
表5 回收率試驗結(jié)果
本品采用高效液相色譜法測定阿魏酸的含量,方法穩(wěn)定,結(jié)果準(zhǔn)確,可作為該制劑的質(zhì)量控制方法。
[1] 中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會. 中藥成方制劑[S].中華人民共和國衛(wèi)生部,1990:104.
[2] 張玉愛,吳澤榕,鄭起平,等.HPLC測定養(yǎng)血當(dāng)歸軟膠囊中阿魏酸的含量[J].中成藥,2006,28(4):599-600.
[3] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部) [M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:124.
[4] 謝先吉,王臨潤,吳文娟.通經(jīng)口服液中阿魏酸含量測定方法的研究[J].藥物分析雜志,2005,25(8):992-993.
[5] 容蓉,袁久榮,王學(xué)志.HPLC測定四物湯及其配伍組方中阿魏酸的煎出量[J]. 中國藥學(xué)雜志,2000,11,35(11):767-768.
Content Determination of Ferulic Acid in Anle Tablet by HPLC
ZHANG Hui
(Department of Pharmacy, Shenyang Second Hospital of Traditional Chinese Medicine, Liaoning, Shenyang 110101, China)
Objective To develop a method for content determination of ferulic acid in Anle tablet. Method Using HPLC method, the mobile phase was a mixture of acetonitrile-1% acetic acid (14:86). The flow rate was 1.0ml/min with the detection wavelength at 320nm. Result The injection volume of ferulic acid was in the range of 0.03648 ~ 0.32832 μg. The linear relationship was good, r=0.9998. The recovery was between 95.51~99.04%. RSD was 1.61%. Conclusion The method was stable, and the result was accurate.
High performance liquid chromatography; Anle tablet; Ferulic acid
遼寧省沈陽市第二中醫(yī)醫(yī)院藥劑科(沈陽 110101)
10.3969/j.issn.1003-8914.2016.06.020
1003-8914(2016)-06-0796-02
?秀琴
2015-08-03)