徐建平 (新疆生產(chǎn)建設兵團庫爾勒第二師畜牧獸醫(yī)工作站 841023)
金標法與ELASA檢測3種豬病的對比試驗
徐建平 (新疆生產(chǎn)建設兵團庫爾勒第二師畜牧獸醫(yī)工作站 841023)
檢測卡利用抗體快速金標檢測卡法 (簡稱金標法)檢測抗體效價。金標法是在酶聯(lián)免疫吸附法的基礎上發(fā)展起來的一種固相標記免疫測定新技術。其檢測原理是以微孔濾膜為載體,包被已知抗原,加入待檢標本后,經(jīng)濾膜的毛細管作用,標本中的抗體與膠體金結合的抗原相結合,再通過與膜上包被的抗原結合顯色而達到檢測目的。金標法的試劑為試紙條形式,即為金標試紙條。判定標準:豬瘟、口蹄疫抗體陽性≥1:32(5log2),藍耳抗體陽性≥1:40;豬瘟、口蹄疫抗體陰性<1:32(5log2),藍耳抗體陰性<1:40。
(1)試驗主要試劑:豬瘟檢測卡 (深圳康百得公司,批號:20140527);豬口蹄疫檢測卡 (深圳康百得公司,批號:20131225)、藍耳病檢測卡 (深圳康百得公司,批號:20140328)。豬瘟ELISA試劑盒 (洛陽萊普生信息科技有限公司,批號:20131208);口蹄疫試劑盒 (洛陽萊普生信息科技有限公司公司,批號:20131201);豬藍耳ELISA試劑盒 (北京世紀元亨生物技術有限公司,批號:20140107E)。
(2)在農(nóng)牧團場,隨機抽檢486頭豬,采用檢測卡 (金標法)檢測豬瘟、藍耳、O型口蹄疫的抗體效價,采用ELISA法檢測這批血作為對照,比較檢測卡與ELISA的區(qū)別。可以得出檢測卡和ELISA法檢測豬瘟、藍耳、O型口蹄疫符合率達90%以上。詳細結果見表1。
(3)對檢測卡檢測陽性的血清采用ELISA檢測可以得出,豬瘟、藍耳、口蹄疫的符合率達100%,說明檢測卡檢測合格的ELISA檢測合格。詳細結果見表2。
(4)對檢測卡檢測陰性的血清采用ELISA檢測可以得出,ELISA檢測的有陽性,也有陰性。具體結果見表3。對監(jiān)測卡檢測陰性接近陽性的血清中用ELISA法檢測有部分血清為陽性,具體結果見表4。對檢測卡檢測陰性遠離陽性的血清中ELISA法檢測血清全部為陰性,具體結果見表5。
表1 檢測卡與ELISA比較
表2 檢測卡檢測陽性血清與ELISA比較
表3 檢測卡檢測陰性血清與Elisa法比較
表4 檢測卡檢測陰性血清接近陽性與Elisa法比較
表5 檢測卡檢測陰性血清遠離陽性與Elisa法比較
(1)檢測卡檢測抗體效價合格的,ELISA檢測合格。
(2)檢測卡檢測抗體效價不合格的,ELISA有合格的,這在于人眼與機器的辨別有差異。
(3)可以肯定的說,用檢測卡在臨床中檢測抗體效價是合格的。檢測卡可以作為臨床免疫效價的檢測、檢疫、監(jiān)督的輔助工具。
新疆建設兵團第二師科技項目 (項目編號:2013NYGG1)。