張建清， 湯旭山， 楊 媚， 白 鴿， 馬曉麗， 張 莉

(新疆醫(yī)科大學(xué)1第一附屬醫(yī)院腫瘤中心， 烏魯木齊 830054; 2附屬腫瘤醫(yī)院消化內(nèi)科， 烏魯木齊 830011;

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微小RNA let-7a及其靶基因K-ras多態(tài)性與局部晚期食管鱗癌放化療療效的相關(guān)性研究

張建清1， 湯旭山2， 楊 媚1， 白 鴿1， 馬曉麗3， 張 莉3

(新疆醫(yī)科大學(xué)1第一附屬醫(yī)院腫瘤中心， 烏魯木齊 830054;2附屬腫瘤醫(yī)院消化內(nèi)科， 烏魯木齊 830011;

3第一附屬醫(yī)院VIP內(nèi)科， 烏魯木齊 830054)

目的 探討微小RNA let-7a及其靶基因K-ras多態(tài)性與食管鱗癌患者放化療療效的關(guān)系。方法 收集局部晚期食管鱗癌患者(病例組,92例)和正常體檢者(正常組,92例)血液標(biāo)本。進行微小RNA let-7a rs10877887位點、rs13293512位點及靶基因K-ras rs712位點單核苷酸多態(tài)性檢測。分析兩組間各位點多態(tài)性的分型與分布特點及與放化療療效、預(yù)后及中位PFS的相關(guān)性，并運用熒光素酶報告基因?qū)嶒濳-ras是否為微小RNA let-7a的直接靶基因。結(jié)果 放化療療效與食管鱗癌分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。兩組基因多態(tài)性分析顯示，rs10877887位點多態(tài)性無明顯差異(P>0.05)， rs13293512 攜帶 CC基因型的個體以及非TT基因型的個體食管鱗癌的發(fā)病風(fēng)險增加(P<0.05)，rs712位點攜帶TT基因型和非GG基因型的個體食管鱗癌的發(fā)病風(fēng)險明顯增加(P<0.05)。同時熒光索酶報告實驗證明K-ras是微小RNA let-7a的直接靶基因。預(yù)后分析發(fā)現(xiàn)，rs10877887位點對療效和預(yù)后無影響(P>0.05)；rs13293512 攜帶CC基因型的個體，rs712位點攜帶TT基因型和非GG基因型的個體，有效率明顯降低，中位PFS生存時間明顯減少(P<0.05)。COX回歸分析，顯示淋巴有效治療轉(zhuǎn)移、臨床分期Ⅳ期、rs13293512位點CC基因型、rs712位點TT基因型是食管鱗癌預(yù)后的獨立危險因素。結(jié)論 rs13293512位點CC基因型與rs712位點TT基因型增加局部晚期食管鱗癌術(shù)后放化療抵抗性和患病風(fēng)險，降低放化療有效療效和中位PFS生存時間。在放化療前對患者進行基因型檢測，在一定程度上可以預(yù)測患者對放化療的敏感性。

微小RNA let-7a；K-ras； 食管鱗癌； 基因多態(tài)性； 放化療； 預(yù)后； 靶基因； 相關(guān)性

食管癌(Esophagus cancer, EC)是消化道第三常見的癌癥，也是全球因癌致死的第七大死因，中國是EC發(fā)病率最高的區(qū)域之一。食管鱗狀細(xì)胞癌即食管鱗癌(esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)則是世界上最常見的EC組織學(xué)類型之一，雖然在美國表現(xiàn)出不斷下降的趨勢，但在發(fā)展中國家的發(fā)病率較高[1-2]。目前，國內(nèi)外食管癌缺乏早期診斷方法，確診時80%已為中晚期，5年生存率僅為15%～20%，中位生存期為18個月[3]。根據(jù)美國國家癌癥綜合網(wǎng)(NCCN)指南，中晚期食管癌主要以放化療為主的綜合治療，但總體有效率不高。由于食管癌的高度侵襲性、較差的臨床療效和預(yù)后、綜合治療模式眾多的特點，很難對其進行有效的預(yù)后判斷及預(yù)測治療療效來提高患者生存率。因此尋找合適的靶點判斷ESCC患者放化療療效對于ESCC的治療與預(yù)后具有重大意義。

微小RNAs(MicroRNAs, miRNAs)屬于非蛋白編碼RNAs，是由長的內(nèi)源性表達(dá)的RNA前體(primary RNA, pri-miRNA)產(chǎn)生，一個miRNA能調(diào)控幾個基因的表達(dá)，一個基因能被一系列不同的miRNAs所調(diào)控，而let-7a的異常表達(dá)與許多人類疾病有所關(guān)聯(lián)[4]，包括心血管疾病[5]、肺病[6]和癌癥[7]。MiRNAs的let-7a家族首先是在秀麗線蟲中被發(fā)現(xiàn)，該家族在人體中包含13個成員，分布于9條不同的染色體上，而RAS是其靶基因[8]。K-ras基因位于人類染色體12q12.1，定位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)[9]，在許多人類癌癥中該基因的突變十分常見[10]。有多項研究指出K-ras基因突變在多種人類癌癥的發(fā)展進程中扮演著重要角色，尤其是在密碼子12、13和61上[11-12]。關(guān)于miRNA let-7a及其靶基因K-ras多態(tài)性與ESCC患者放化療療效關(guān)系的研究相對較少。本研究擬通過檢測微小RNA let-7a rs10877887位點、rs13293512位點及靶基因K-ras rs712位點的單核苷酸多態(tài)性，進一步確定miRNA let-7a及其靶基因K-ras多態(tài)性是否能影響ESCC患者放化療療效。

1 材料與方法

1.1 臨床資料 根據(jù)美國癌癥聯(lián)合委員會(AJCC)和國際抗癌聯(lián)盟(UICC)聯(lián)合制定的食管癌TNM分期標(biāo)準(zhǔn)[13]，選擇2013年1月-2015年1月經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院及附屬腫瘤醫(yī)院病理證實的Ⅲ、Ⅳ期局部晚期食管鱗癌患者92例為病例組。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)經(jīng)病理學(xué)診斷的原發(fā)性食管鱗癌首診患者；(2)有可測量的病灶，年齡30～65歲，性別不限，身體狀況評分PS(WHO Performance Status)≤0～2，能耐受放療或化療，預(yù)計生存期≥6個月;(3)患者無主要器官的功能障礙，血常規(guī)、肝、腎功能及心臟功能基本正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)繼發(fā)性食管鱗癌患者；(2)曾經(jīng)接受過手術(shù)治療、放療及化療；(3)合并其它惡性腫瘤的患者。隨機選取92例健康體檢者為對照組。本項研究得到新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院及附屬腫瘤醫(yī)院倫理委員會的批準(zhǔn)，受試者均簽署知情同意書并享有知情權(quán)。

病例組92例，男性55例，女性37例，平均年齡(50.00±5.46)歲。對照組92例，男性53例，女性39例，平均年齡(49.08±4.92)歲。兩組患者年齡、性別構(gòu)成、吸煙史和飲酒史差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(表1)。

表1 病例組和對照組的一般資料比較

1.2 血清樣本的采集及DNA的提取 收集病例組放化療前和對照組患者的靜脈血，取血后，37℃下血液凝固1～2 h(不加抗凝劑)；4℃冰箱過夜；當(dāng)血清自然析出后，以4℃、3 000 r/min離心10 min，分離血清，棄去不溶物；將血清移至干凈試管，并分裝成小份，儲藏在-80℃超低溫冰箱備用。血清樣本收集和保存的整個操作過程中應(yīng)盡可能縮短標(biāo)本暴露時間，以防止標(biāo)本中RNA降解，影響實驗結(jié)果。采集所有入選研究對象外周靜脈血2～3 mL，EDTA抗凝，酚/氯仿法提取基因組DNA。

1.3 微小RNA let-7a及其靶基因K-ras多態(tài)性分析 采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性長度片段多態(tài)性進行微小RNA let-7a啟動子區(qū)rs13293512(let-7a-1/let-7f-1/let-7d基因簇啟動子區(qū))和 rs10877887(let-7i啟動子區(qū))2 個多態(tài)性位點及靶基因K-ras rs712分型。根據(jù)文獻引物合成序列設(shè)計引物，rs13293512上游引物:5′-GCAGGGAAGACAGTGAATGTTAAA-3′，下游引物: 5′-CCAAGAAAGCAGTATTATCAATGAAGTT-3[14]， rs10877887上游引物5′-TGGTGTCTGACTGCGCTTT-3′，下游引物：5′-CCGAGAGCTACGGGGATGA-3′[15]；K-ras rs712的引物為：5′-ATGACAGTGGAAGT-

TTTTTTTTCCTC-3′，下游：5′-GAATCATCAT-

CAGGAAGCCCAT-3′[16]。由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。PCR反應(yīng)體系為25 μL，含 10×PCR buffer 2.5 μL，dNTPs 2.5 μL，上、下游引物各1.0 μL，模板DNA 2.0 μL，氯化鎂1.87 μL，Taq polymerase 0.23 μL，ddH2O 15 μL，PCR反應(yīng)條件為：95.0℃ 2 min，95.0℃ 30 s，55℃ 30 s，72.0℃ 30 s，共40個循環(huán)；最終72.0℃ 5 min。PCR產(chǎn)物運用DNA全自動測序技術(shù)(上海鉑尚生物有限公司測序)，結(jié)果驗證無誤(圖1)。

1.4 熒光素酶報告基因?qū)嶒?本實驗細(xì)胞為食管鱗癌細(xì)胞ECA109(中科院上海細(xì)胞庫)，對其進行傳代培養(yǎng)后用于熒光素酶報告基因?qū)嶒?。合成含let-7a結(jié)合位點的K-ras 3′UTR啟動子區(qū)序列，在pGL3 control vector(Promega, USA)的5′端Bg1Ⅱ位點插入，構(gòu)建K-ras 3′UTR野生型(Wild)質(zhì)粒(命名為K-ras 3′UTR-Wild )。并在該質(zhì)?；A(chǔ)上，突變let-7a結(jié)合位點(CUACUUUA)，構(gòu)建K-ras 3′UTR突變型(Mutant)質(zhì)粒(命名為K-ras3′UTR-Mutant)。再將重組質(zhì)粒與微小RNA let-7a模擬物(let-7a-mimics)或陰性對照序列(let-7a-NC)共同轉(zhuǎn)染食管鱗癌細(xì)胞。具體為1.5×104個/孔接種于每孔100 μL培養(yǎng)基的96孔板中，于37℃、5% CO2及飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。次日更換每孔培養(yǎng)基至50 μL培養(yǎng)基，取10 μL減血清培養(yǎng)基OPTI-MEM (Thermo Fisher Scientific, 美國) 稀釋let-7a-mimics至100 nmol/L，15 μL OPTI-MEM稀釋重組質(zhì)粒K-ras-Wild或K-ras-Mutant 100 ng，25 μL OPTI-MEM稀釋Lipofectamine 2000 0.25 μL，5 min 后三者混合，輕輕搖勻，室溫靜置20 min。將上述混合液50 μL加入孔中，最終每孔總體積100 μL，每組設(shè)3個復(fù)孔，轉(zhuǎn)染6 h后再加入100 μL新鮮培養(yǎng)基。轉(zhuǎn)染48 h后使用熒光素酶報告基因檢測試劑盒 (碧云天，中國) 進行雙熒光素酶報告基因檢測，并比較各組相對熒光素酶活性 (hRluc/hLuc)。

a：rs10877887位點測序結(jié)果；b：rs13293512位點測序結(jié)果；c：rs712位點測序結(jié)果

圖1 微小RNA let-7a及其靶基因K-ras測序結(jié)果

1.5 放化療治療方法和療效評價 采用同期放化療聯(lián)合治療(根據(jù)NCCN及我國食管癌治療指南)：化療方案：紫杉醇/多西他賽+卡鉑/順鉑(劑量：紫杉醇(135～175)mg/m2·d,d1, 多西他賽75 mg/m2·d,d1;卡鉑：AUC：4～5，d1,順鉑：75 mg/m2· d,d1～2),21 d1次；放療方案：調(diào)強照射(IMRT)，DT50～66 Gy/25～33 f。共2個周期，與放療同期后序貫2～4個周期化療。根據(jù)實體瘤評價標(biāo)準(zhǔn)(Response Evaluation Criteria in Solid Tumors RECIST 標(biāo)準(zhǔn)1.0)[17]：確定近期療效為完全緩解(CR)、部分緩解(PR)、穩(wěn)定(SD)或是進展(PD)。以CR+PR歸為治療有效組，以SD + PD歸為治療抵抗組。

1.6 隨訪 采用電話、門診及查閱病歷進行隨訪，隨訪截止時間為2016年6月，隨訪3～36個月，6例刪失，隨訪率為93.0%。無進展生存時間(Progression Free Survival，PFS)定義為自治療開始至癌癥復(fù)發(fā)或患者的死亡時間。

2 結(jié)果

2.1 治療有效組和抵抗組臨床資料對比分析 根據(jù)患者的治療情況，比較治療有效組和抵抗組患者的臨床資料，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析，放化療療效與食管鱗癌臨床分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，與其他(年齡、性別、分化程度、食管癌部位)無關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P均<0.05)(表2) 。

2.2 基因型分析及基因頻率比較 rs10877887位點多態(tài)性分析，對照組和病例組基因型頻率分布差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。rs13293512位點多態(tài)性分析，病例組CC基因型和非TT基因型分布顯著高于對照組，攜帶CC基因型的個體以及非TT基因型的個體患病風(fēng)險增加(OR=4.26，95%CI=1.80～10.06，P=0.001；OR=2.27，95%CI=1.20

～4.32，P=0.017)。RS712位點多態(tài)性分析，病例組TT基因型和非GG基因型分布明顯高于對照組，rs712攜帶TT基因型和非GG基因型的個體食管鱗癌的發(fā)病風(fēng)險增加(OR=4.88，95%CI=1.80～13.25，P=0.002；OR=1.93，95%CI=1.08～3.47，P=0.039)(表3)。

表3 兩組基因頻率分布比較/例(%)

2.3 K-ras是微小RNA let-7a的直接靶基因 利用生物醫(yī)學(xué)數(shù)據(jù)庫，根據(jù)基因互補結(jié)合原理分析基因結(jié)構(gòu)，結(jié)合預(yù)試驗初步確定K-ras為食管鱗癌細(xì)胞中微小RNA let-7a的靶基因之一(圖2a)，let-7a可能通過識別并結(jié)合K-ras mRNA發(fā)揮生物學(xué)作用。let-7a mimics與構(gòu)建K-ras基因的3′UTR及突變的熒光索酶報告質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染食管鱗癌細(xì)胞后，與NC組相比，let-7a 與野生型質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染使海腎熒光索酶活性下降，海腎熒光索酶與螢火蟲熒光素酶活性之比下降(P<0.05)，而let-7a對突變質(zhì)粒的作用無明顯差異(P=0.404)(圖2b)。

a: miRNA靶位預(yù)測軟件預(yù)測K-ras存在let-7a的結(jié)合靶點； b: 熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測食管鱗癌細(xì)胞各處理組熒光活性。 與NC相比，*P<0.05。

圖2 let-7a與K-ras的靶向驗證

2.4 基因多態(tài)性與食管鱗癌放化療療效的關(guān)系 rs10877887位點各基因型患者放化療有效治療率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。rs13293512位點攜帶CC基因型的個體與攜帶TT基因型的個體相比，食管鱗癌的放化療抵抗能力增加，有效治療率顯著降低(P<0.05)；rs712位點，與GG基因型相比，攜帶TT基因型和非GG基因型的個體顯著增加食管鱗癌的放化療抵抗性能，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(表4)。

2.5 基因多態(tài)性與食管鱗癌預(yù)后的關(guān)系 rs10877887位點TT、TC、CC基因型中位PFS分別為21.9、20.7、20.8個月，各基因型組間差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)(圖3a)。rs13293512位點TT、TC、CC基因型中位PFS分別為23.1、23.1、18.7個月，rs13293512攜帶CC基因型的個體中位生存時間明顯降低(P<0.001)(圖3b)。靶基因K-ras rs712位點GG、GT、TT基因型中位PFS分別為22.6、22.1、18.6個月，RS712攜帶非GG基因型的個體中位生存時間明顯降低(P<0.001)(圖3c)。

表4 基因多態(tài)性與食管鱗癌術(shù)后放化療療效的關(guān)系/例(%)

a： rs10877887位點基因型中位無進展生存時間曲線 b： rs13293512位點基因型中位無進展生存時間曲線 c： rs712位點基因型中位無進展生存時間曲線

圖3 微小RNA let-7a及其靶基因K-ras基因多態(tài)性中位無進展生存時間曲線

2.6 食管鱗癌預(yù)后COX回歸分析 將患者臨床分期、淋巴轉(zhuǎn)移情況、分化程度、rs13293512位點、rs712位點進行危險因素分析，結(jié)果顯示有淋巴轉(zhuǎn)移、臨床分期Ⅳ期、rs13293512位點CC基因型、rs712位點TT基因型是影響食管鱗癌預(yù)后的獨立危險因素(P<0.05)(表5)。

表5 食管鱗癌預(yù)后獨立危險因素分析

3 討論

ESCC是世界上最常見和致命的惡性腫瘤之一，與西方國家相比，東亞的發(fā)病率更高，基因組成可能促成食管上皮細(xì)胞的惡化[18]。近來，許多研究者把目光投向了miRNAs領(lǐng)域，有關(guān)let-7a、K-ras與直腸癌[19]、胰腺癌[20]等癌癥的報道并不少見，但將上述基因與ESCC聯(lián)系起來的研究相對較少。因此，本研究旨在探討微小RNA let-7a及其靶基因K-ras多態(tài)性與ESCC患者放化療療效的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)RNA let-7a的rs13293512位點CC基因型與K-ras的rs712位點TT基因型能增加局部晚期ESCC術(shù)后放化療抵抗性和患病風(fēng)險，降低放化療有效療效和中位PFS生存時間，提示在放化療前對患者進行基因型檢測，在一定程度上可以預(yù)測患者對放化療的敏感性。

本研究發(fā)現(xiàn)病例組let-7a rs13293512位點CC基因型和非TT基因型分布高于對照組，表明攜帶CC基因型的個體以及非TT基因型的個體患病風(fēng)險增加，且ESCC的有效治療率顯著降低。let-7a在許多癌癥中存在表達(dá)下調(diào)[21]，其miRNA表達(dá)水平與正常相比降低，且該miRNA的靶基因Ras又是原癌基因，意味著Ras受到let-7a的抑制作用減小，癌基因編碼的蛋白增加，從而導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生[22]。let-7a基因上的SNPs可能改變miRNA-mRNA的相互作用，從而改變其基因調(diào)節(jié)功能，影響多種惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。有研究顯示let-7a rs13293512位點多態(tài)能夠影響到中國人群患癌易感性[23]。Smits等[24]的研究也顯示let-7a基因多態(tài)性可能成為癌癥預(yù)后指標(biāo)。此外，Shen等[25]的研究表明，let-7a結(jié)合位點的SNPs與癌病變和生存率密切相關(guān)，患者攜帶CC+CT基因型比起攜帶TT基因型更有可能患得癌癥，C等位基因是風(fēng)險因素，本研究與其報道基本一致。

本研究發(fā)現(xiàn)病例組K-ras rs712位點的TT基因型和非GG基因型分布明顯高于對照組，表明攜帶TT基因型和非GG基因型的個體ESCC的發(fā)病風(fēng)險增加。Ras基因人類腫瘤中相對常見的癌基因，其家族包含H-ras、K-ras和N-ras3個重要成員[26]，而K-ras基因是癌癥中最常見的突變基因之一[27]。Ras基因突變導(dǎo)致細(xì)胞增殖的持續(xù)激活，在許多人類腫瘤中，K-ras基因突變都發(fā)生頻繁，且ras蛋白質(zhì)的過度表達(dá)能抑制細(xì)胞凋亡，推動腫瘤的發(fā)生、發(fā)展[28]。有研究表明，與GG基因型相比，TT和GT/TT基因型顯著增加了腫瘤的發(fā)病風(fēng)險，T等位基因攜帶者腫瘤分期更高，提示K-ras rs712等位基因多態(tài)性很可能是腫瘤的易感因素[29]。此外，本研究經(jīng)ESCC預(yù)后COX回歸分析發(fā)現(xiàn)淋巴轉(zhuǎn)移、臨床分期Ⅳ期、rs13293512位點CC基因型、rs712位點TT基因型均是影響食管鱗癌預(yù)后的獨立危險因素，進一步證實了上述結(jié)論。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)了let-7a rs13293512位點CC基因型與rs712位點TT基因型能增加局部晚期食管鱗癌術(shù)后放化療抵抗性和患病風(fēng)險，從而降低放化療有效療效，提示在放化療前對患者進行基因型檢測，在一定程度上可以預(yù)測患者對放化療的敏感性。然而，目前關(guān)于let-7a rs13293512位點CC基因型與rs712位點TT基因型之間有無相關(guān)性、兩者同時存在是否患者預(yù)后更差的相關(guān)研究尚少，還需要進一步的研究來證實以及闡明內(nèi)在機制。

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本文編輯 楊晨晨)

Effects of miRNA let-7a and K-ras polymorphisms on chemoradio therapy efficiency in patients with locally advanced esophageal squamous cell carcinoma

ZHANG Jianqing1, TANG Xushan2, YANG Mei1, BAI Ge1, MA Xiaoli3, ZHANG Li3

(1CancerCenter,theFirstAffiliatedHospitalofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi830054,China;2DepartmentofInternalMedicineofDigestiveTumor,theAffiliatedTumorHospitalofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi830011,China;3VIPDepartmentofInternalMedicine,theFirstAffiliatedHospitalofXinjiangMedicalUniversity,Urumqi830054,China)

Objective To investigate relationship between miRNA let-7a, K-ras polymorphisms and efficacy of chemoradiotherapy for esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) patients. Methods Blood specimens of 92 patients and 92 healthy controls were respectively collected. Single nucleotide polymorphisms (SNPs) of let-7a (rs10877887 and rs13293512) and K-ras rs712 were detected. The genotyping and distribution of SNPs and their relevance with chemoradiotherapy efficacy and median Progression Free Survival (PFS) time were analyzed. Luciferase reporter gene assay was used to determine whether K-ras is the target gene of let-7a. Results The efficacy of chemoradiotherapy was correlated with ESCC tumor-node-metastasis staging and lymph node metastasis (LNM) (P<0.05). As gene polymorphism analysis demonstrating, no significant difference was found in rs10877887, while individuals with rs13293512 CC and non-TT genotypes had increased ESCC risks (P<0.05), so did those with rs712 TT and non-GG (P<0.05). Luciferase reporter gene assay showed that K-ras is direct targeting gene of let-7a. As prognostic analysis showed, individuals with rs10877887 had no effect on efficacy and prognosis, while individuals with rs13293512 CC genotype or rs712 TT and non-GG genotypes had a lower effective treatment rate and shorter median PFS time (P<0.05). Cox logistic analysis revealed that LNM , Ⅳstage, rs13293512 CC and rs712 TT genotypes are ESCC risk factors. Conclusion Rs13293512 CC and rs712 TT genotypes increase the risk and the resistance of chemoradiotherapy for locally advanced ESCC, and lower the efficacy of chemoradiotherapy and median PFS time, which implicated sensitivity of patients to chemoradiotherapy can be potentially predicted by genotyping before the chemoradiotherapy.

MiRNA let-7a; K-ras; esophageal squamous cell carcinoma; polymorphism; chemoradiotherapy; prognosis; target gene

新疆維吾爾自治區(qū)自然科學(xué)基金(2013211B61)

張建清(1982-)，女，在讀博士，主治醫(yī)師，研究方向：食管癌的個體化治療。

張 莉，女，教授，博士生導(dǎo)師，主任醫(yī)師，研究方向：食管癌的個體化治療，E-mail: zhangli9514@126.com。

R735.1

A

1009-5551(2016)12-1547-07

10.3969/j.issn.1009-5551.2016.12.016

2016-07-06]