谷海燕，謝孔平

(1. 四川省自然資源科學(xué)研究院，四川 成都 610015；2. 峨嵋山生物資源實(shí)驗(yàn)站，四川 峨眉 614201)

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華重樓(ParispolyphyllaSmith var.chinensis)無(wú)性繁殖試驗(yàn)研究

谷海燕1，2，謝孔平1,2

(1. 四川省自然資源科學(xué)研究院，四川 成都 610015；2. 峨嵋山生物資源實(shí)驗(yàn)站，四川 峨眉 614201)

華重樓為我國(guó)一味珍貴的民族藥，本文以華重樓根莖為材料開(kāi)展其無(wú)性繁殖試驗(yàn)，研究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA不同濃度對(duì)其潛伏芽萌發(fā)、生長(zhǎng)的影響。試驗(yàn)結(jié)果顯示5mg/L的6-BA可促進(jìn)華重樓切段的繁殖系數(shù)，提高其雙芽率、多芽率及有根率。

華重樓；根莖；無(wú)性繁殖

華重樓為延齡草科重樓屬的多年生草本植物，是我國(guó)一味珍貴的民族藥，具有非常悠久的藥用歷史[1]，常用于毒蛇咬傷、乳腺炎、跌打傷痛等病癥的治療[2-5]，是奪命丹、云南白藥、四川抗病毒沖劑、宮血寧及其他中成藥的重要原料。2005年版和2010年版的《中國(guó)藥典》中均規(guī)定華重樓ParispolyphyllaSmith var.chinensisHara與滇重樓ParispolyphyllaSmith var.yunanensis的干燥根莖為重樓的正品藥源[6-7]。近年來(lái)的醫(yī)學(xué)研究表明，華重樓對(duì)多種癌癥具有良好的療效，臨床上用于醫(yī)治肝癌、胃癌和白血病等[8-9]。另外，在我國(guó)的一些地方，華重樓是治療蛇傷應(yīng)用最為廣泛的草藥之一，一般的蛇藥配方中也少不了它。

目前我國(guó)華重樓藥用原料主要來(lái)自于野生，造成野生儲(chǔ)存量急劇減少，而華重樓為多年生草本植物，生長(zhǎng)緩慢，即使現(xiàn)在加強(qiáng)資源保護(hù)，其種群在近些年也難以恢復(fù)。解決重樓產(chǎn)業(yè)供求矛盾并保護(hù)野生資源最為有效的方式，就是大力發(fā)展重樓的規(guī)?；斯しN植。

多年來(lái)，我國(guó)科研工作者通過(guò)各種手段開(kāi)展重樓繁殖工作[10-20]。目前我國(guó)重樓產(chǎn)業(yè)中種苗繁育的一種方式為種子繁殖，由于重樓種子具有“二年休眠”、出苗率低的特性，影響了種子繁殖的效率，并且幼苗到成藥周期長(zhǎng)，對(duì)重樓種子進(jìn)行處理提高其當(dāng)年萌發(fā)率是目前科研工作者的研究?jī)?nèi)容；塊莖繁殖是重樓繁育的另一個(gè)重要方式，這種方式操作方便，但存在塊莖易染菌潰爛，萌發(fā)率低等問(wèn)題。 本文通過(guò)切割華重樓塊莖，采用外源生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA的不同濃度處理，探尋其萌發(fā)率高、簡(jiǎn)便高效經(jīng)濟(jì)的方式，期望為我國(guó)重樓的產(chǎn)業(yè)化栽培提供有效建議。

1 研究?jī)?nèi)容和方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)的繁殖材料為華重樓的根狀莖，這些材料經(jīng)人工馴化，已生長(zhǎng)有4～5 a的時(shí)間，直徑為3～5 cm。11月底，在華重樓倒苗后，挖取其根莖，按垂直于其主軸的方向切割，每個(gè)切塊至少保留一個(gè)莖節(jié)，長(zhǎng)度在3～4 cm之間。

1.2 試驗(yàn)方法

2013年12月中旬，將華重樓的根狀莖放入4g/L的多菌靈溶液中浸泡15 min，之后將其橫切為2或3段，分為帶頂芽的頂段及不帶頂芽的中段、底段三個(gè)部位，每段至少有1個(gè)小節(jié)，保證每個(gè)切段的長(zhǎng)度不小于2 cm。切段陰干后置于生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA溶液(分別為2 mg/L、5 mg/L、8 mg/L)中浸泡2 h，另做CK做對(duì)比；隨后切割傷口用草木灰處理，埋入峨眉山基地的試驗(yàn)田中，蓋入一層5 cm左右厚的腐殖土，然后覆膜保溫；2014年3月，峨眉山氣溫回升時(shí)，去除覆膜。

1.3 各指標(biāo)的計(jì)算公式

出芽率=(萌發(fā)芽切斷數(shù)/處理切段總數(shù))×100%

切段損失率=(腐爛切段數(shù)/各處理切段總數(shù))×100%

總有根率=(長(zhǎng)出須根切段數(shù)/各處理切段總數(shù))×100%

單芽率=(萌發(fā)1芽切段數(shù)/各處理切段總數(shù))×100%

雙芽率=(萌發(fā)2芽切段數(shù)/各處理切段總數(shù))×100%

多芽率=(萌發(fā)多于2芽切段數(shù)/各處理切段總數(shù))×100%

繁殖系數(shù)=萌發(fā)芽數(shù)/各處理切段總數(shù)

2 研究結(jié)果和分析

2015年5月底，統(tǒng)計(jì)生長(zhǎng)了一年半的華重樓根莖切段生長(zhǎng)情況，對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行多重比較。

2.1 不同部位切段損失率、發(fā)芽情況分析

經(jīng)統(tǒng)計(jì)，本試驗(yàn)中試驗(yàn)材料總的切段損失率比較低，為7.2%，其中頂部切段損失率為零，損失的為中、下部的切段。在育苗時(shí)，中、下部切段的濕度、防染菌控制均是關(guān)鍵。

試驗(yàn)結(jié)果表明，頂部切段和中、下部切段，芽的萌發(fā)情況差異明顯(見(jiàn)表1)，頂部切段出芽率達(dá)到100%，出苗率亦達(dá)到100%，而中、下部的出芽率為70%左右。試驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)，頂部切段是根莖中生命力最頑強(qiáng)的部分，在切割后3個(gè)月即可出苗，形成正常植株，并可當(dāng)年開(kāi)花結(jié)實(shí)，高度達(dá)到60～70 cm左右。試驗(yàn)中這些切段形成的地上莖雖然偶有雙軸出現(xiàn)，但絕大多數(shù)為單軸。經(jīng)2015年6月的統(tǒng)計(jì)表明，中、下部切段的出芽率為70.2%；中下部切段在2014年沒(méi)有出苗現(xiàn)象，于2015年3月開(kāi)始逐漸出苗，苗高多在5 cm左右，出苗率為50%左右。

試驗(yàn)中華重樓頂部切段、中下部切段的繁殖系數(shù)均不甚理想，中下部切段的繁殖系數(shù)高于頂部。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，頂部切段出芽率雖為100%，但幾乎均為單芽，偶爾亦有雙芽萌發(fā)，但出現(xiàn)幾率極低，不到4%，其繁殖系數(shù)為1.04；而中下部切段雖然出芽率僅為70.2%，遠(yuǎn)低于頂部切段，但不僅有單芽、雙芽，也會(huì)萌發(fā)出三芽、四芽，因此其繁殖系數(shù)為1.74，高于頂部切段。

表1 不同切割部位發(fā)芽情況

2.2 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA對(duì)切段萌芽、生長(zhǎng)情況的影響

采用不同濃度的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA對(duì)切段進(jìn)行處理，試驗(yàn)切段在經(jīng)過(guò)一年半生長(zhǎng)之后的情況見(jiàn)表2。試驗(yàn)結(jié)果表明，處理后切斷的平均繁殖系數(shù)為1.55，其中5 mg/L的6-BA處理后切段繁殖系數(shù)最高，為2.3，與其他2個(gè)處理及對(duì)照均存在顯著差異；經(jīng)過(guò)2 mg/L的6-BA處理后，僅為0.93，甚至低于空白對(duì)照1.09；8 mg/L 6-BA處理下切段的繁殖系數(shù)為1.42。統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，華重樓的切割根狀莖采用5 mg/L的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA處理后，能提高華重樓的繁殖系數(shù)。

表2數(shù)據(jù)顯示，3個(gè)濃度的6-BA處理試驗(yàn)切段后，單芽率相比對(duì)照有所降低。2 mg/L 6-BA的處理，可能是試驗(yàn)操作失誤的原因，造成其切段損失率高達(dá)15.1%，全為單芽萌發(fā)，無(wú)雙芽和多芽萌發(fā)。另2個(gè)處理的雙芽率均與對(duì)照存在差異，可見(jiàn)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA對(duì)華重樓切段萌芽具有一定的促進(jìn)作用，尤其是在濃度為5 mg/L的6-BA處理下，多芽的萌發(fā)率高達(dá)15.6%。

本試驗(yàn)中頂端切段無(wú)損失，均在來(lái)年3月出苗，進(jìn)行光合作用，因此頂端增重明顯，其中以5 mg/L 6-BA處理的莖段增重最為明顯，達(dá)到6.48 g。中低段雖然萌發(fā)芽數(shù)多，但增重狀況則不理想，依然是5 mg/L 6-BA處理的莖段增重最多，為1.7 g。

表2 不同濃度生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA對(duì)華重樓切段萌發(fā)的影響

注：大寫(xiě)字母表示1%水平的差異，小寫(xiě)字母表示5%水平的差異；相同字母表示差異不顯著，不同字母表示差異顯著。

3 結(jié) 論

在研究和實(shí)際生產(chǎn)中，往往存在著重樓切段大量腐爛的現(xiàn)象。通過(guò)試驗(yàn)表明，只要在栽植前采用多菌靈滅菌，并采用草木灰覆裹切段，保持土壤不過(guò)于濕潤(rùn)，就可以在一定程度上杜絕腐爛現(xiàn)象。另外，根據(jù)以往學(xué)者的研究，不帶頂芽的切段年平均增重沒(méi)有帶頂芽的高，但形成頂芽的數(shù)量多可以不斷切割擴(kuò)繁，本試驗(yàn)結(jié)果與學(xué)者的研究結(jié)果相同。本試驗(yàn)中不帶頂芽的切段年平均增重沒(méi)有帶頂芽的高，這應(yīng)該是因?yàn)閹ы斞康那卸尉哂许敹藘?yōu)勢(shì)，分生新芽的能力沒(méi)有不帶頂芽的切段強(qiáng)，當(dāng)年即可形成正常植株，進(jìn)行光合作用，增重顯然要高。

5 mg/L的生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑6-BA可在一定程度上促進(jìn)華重樓切段的繁殖系數(shù)，提高其雙多芽率、有根率等，超過(guò)或低于這個(gè)濃度則會(huì)起到抑制作用。

采用華重樓根莖切段繁殖，占用了大量的原材料，雖然種植周期比種子繁殖種植周期短3～4年，但栽植生長(zhǎng)過(guò)程中會(huì)造成一定程度切段的損失，且繁殖系數(shù)不到2，不甚理想，另外出苗不整齊，管理不方便，造成種植的成本增加。

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Studies on Asexual Propagation ofParispolyphyllaSmith var.chinensis

Gu Haiyan1,2,Xie Kongping1,2

(1. Sichuan Nature Resource Institute, Chengdu 610015,China;2. Emei Mountain Biotic Resource Experimental Station, Emei 614201,China)

ParispolyphyllaSmith var.chinensisHara is a rare ethnodrug. An experiment of asexual propagation ,based on rhizome ofParispolyphyllaSmith var.chinensisHara were arranged in order to study the effects of concentrations of plant growth regulator 6-BA on bud germination rate and growth. The results showed that 5 mg/L 6-BA can promote the propagation coefficient ofParispolyphyllaSmith var.chinensis, it also can increase the double buds rate, multiple buds rate and root rate.

ParispolyphyllaSmith var.chinensis；rhizome；asexual propagation

10.3969/j.issn.1006-9690.2016.05.022

2016-02-26

四川省財(cái)政廳基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)項(xiàng)目—重樓屬植物(華重樓)的快速繁育技術(shù)研究和四川省科技條件平臺(tái)項(xiàng)目—四川省植物資源共享平臺(tái)建設(shè)項(xiàng)目共同資助。

谷海燕(1976—)，女，碩士，主要從事植物繁育、植物生態(tài)學(xué)方面的研究。E-mail:guhy76@163.com

Q945.5

A

1006-9690(2016)05-0086-03