許 娜 馬競軒 郭淑芹 張云良 王 翯 白廣芹 常文龍 李 杰

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2型糖尿病患者分泌型卷曲相關(guān)蛋白5水平和胰島素抵抗與尿白蛋白的關(guān)系

許 娜1馬競軒1郭淑芹2，*張云良2王 翯2白廣芹2常文龍2李 杰2

目的：分析2型糖尿病(T2DM)患者分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)水平和胰島素抵抗(IR)與尿白蛋白的關(guān)系。方法：137例T2DM住院患者，根據(jù)尿白蛋白排泄率(UAER)分為三組：正常白蛋白尿組(DM1組，n=47)；微量白蛋白尿組(DM2組，n=45)；大量蛋白尿組(DM3組，n=45)。另選同期體檢健康者作為對照組(NC組，n=50)。采用ELISE檢測各組血清SFRP5、葡萄糖氧化酶法測定空腹血糖(FBG)、電化學(xué)發(fā)光免疫分析法測定空腹胰島素(FINS)，計算穩(wěn)態(tài)胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)。比較組間差異并分析其相關(guān)性。結(jié)果：與NC組比較，T2DM各組HOMA-IR、FINS、FBG和UAER均升高(P<0.05或P<0.01) ，以DM3組升高最明顯(P<0.05或P<0.01)；DM1組SFRP5水平顯著低于NC組(P<0.01)，但DM2組、DM3組則較DM1組升高，以DM3組升高最明顯(P<0.01)。相關(guān)性分析顯示，T2DM患者SFRP5與HOMA-IR呈正相關(guān)(r=0.507，P<0.01),且SFRP5和HOMA-IR與UAER亦成正相關(guān)(r=0.791、0.345，P<0.01)。結(jié)論：SFRP5可能與IR共同參與糖尿病腎病(DN)的發(fā)生發(fā)展，或可成為DN診療的新靶點。

分泌型卷曲相關(guān)蛋白5；胰島素抵抗；2型糖尿?。惶悄虿∧I病

糖尿病腎病(Diabetic Nephropathy,DN)是糖尿病(Diabetes Mellitus，DM)特異性微血管并發(fā)癥，也是DM患者常見的慢性并發(fā)癥之一[1]。DN發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，目前尚未完全闡明。有研究[2]認(rèn)為可能是慢性炎癥通過胰島素抵抗(Insulin Resistance,IR)加速了DM患者的微血管病變進(jìn)展。分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(Secreted Frizzled-related Protein 5，SFRP5)是新發(fā)現(xiàn)的抗炎脂肪因子，已有研究表明其與腫瘤、冠心病、肥胖及T2DM有關(guān)[3-5]，對于SFRP5在DM微血管病變中作用的研究較少見。本研究測定T2DM不同程度尿白蛋白排泄率(Urinary Albumin Excretion Rate，UAER)患者血清SFRP5水平，探討其與IR、UAER的相關(guān)性以及與DN的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 對象和分組

選取2015-12—2016-05于河北省保定市第一中心醫(yī)院內(nèi)分泌科住院的T2DM患者137例,根據(jù)2012年ADA推薦指南中UAER標(biāo)準(zhǔn)[6]將其分為三組：正常白蛋白尿組(DM1組，UAER<20μg/min，n=47)，男25例，女22例，年齡38-69歲，平均(55.04±8.52)歲；微量白蛋白尿組(DM2組，20μg/min≤UAER<200μg/min，n=45)，男21例，女24例，年齡31-72歲，平均(57.56±9.58)歲；大量白蛋白尿組(DM3組，UAER≥200μg/min，n=45)，男28例，女17例，年齡30-74歲，平均(56.27±9.94)歲。所有研究對象均符合2013年中國T2DM防治指南的T2DM診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。并排除(1)心臟、肝臟、其它腎臟疾病以及各種感染性疾病患者；(2)T1DM患者；3個月內(nèi)發(fā)生酮癥酸中毒或高滲性昏迷者；(3)近2周服用血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、血管緊張素受體阻斷劑、胰島素增敏劑及其它影響尿蛋白藥物者。選取同期于本院體檢健康者為對照組(NC組，n=50)，男25例，女25例，年齡30—72歲，平均(53.96±10.33)歲。四組性別、年齡、體重指數(shù)(BMI)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(均P>0.05)；病程、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。見表1。

表1 各組一般資料比較

注：與NC組比較，1)P<0.05;與DM1組比較，2)P<0.05;與DM2組比較，3)P<0.05

1.2 檢測指標(biāo)和方法

記錄各研究對象的年齡、性別、病程，測量其身高、體重、血壓。所有研究對象均隔夜禁食10h，次日清晨采集空腹肘靜脈血10ml，離心(3 000r/min)10min 分離血清均分為兩份，一份采用已糖激酶法(日本日立公司全自動7600型生化分析儀)檢測空腹血糖(Fasting Blood Glucose,FBG，試劑由上海名典公司提供，批號：141202)；采用電化學(xué)發(fā)光法(德國羅氏公司電化學(xué)發(fā)光儀Cobas6000-E601及原廠配套試劑，批號18095303)測定空腹胰島素(Fasting Insulin,FINS)，并用穩(wěn)態(tài)模式評估法(HOMA model)計算胰島素抵抗指數(shù)[Homeostasis Model Assessment for Insulin Resistance, HOMA-IR =(FBG ×FINS)/22.5]。另一份置于—80℃冰箱保存，測定前2h取出平衡至室溫，用ELISA測定血清SFRP5水平(試劑盒由上海酶聯(lián)生物科技有限公司提供，批號 20160426；批內(nèi)差異<6%,批間差異<10%)。

所有對象采血后留取24h尿測定UAER(免疫比濁法，重慶博士泰生物技術(shù)有限公司提供的全自動特定蛋白分析儀及原廠配套試劑，批號 1442016003AT)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 各組各指標(biāo)水平比較

各組SFRP5、HOMA-IR、UAER、FINS、FBG水平差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。與NC組比較，DM1組HOMA-IR、UAER、FINS、FBG水平均升高(t/H=-4.577、-4.104、-2.457、-28.023，P<0.05或P<0.01)，SFRP5水平降低(t=19.350，P<0.01)。與 DM1組比較，DM2組SFRP5、HOMA-IR、UAER、FBG水平均升高(t/H=-5.529、-2.328、-8.260、-13.734，P<0.05或P<0.01)，F(xiàn)INS水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=-1.021，P>0.05)。與DM2組比較，DM3組SFRP5、UAER、FBG水平均升高(t/H=-7.240、-8.171、-12.955，P<0.01)，其余指標(biāo)(HOMA-IR、FINS)組間水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t/H=-0.382、-1.642，P>0.05)。見表2。

2.2 相關(guān)性分析

T2DM患者SFRP5與HOMA-IR呈正相關(guān)(r=0.507，P<0.05),且SFRP5和HOMA-IR與UAER均成正相關(guān)(r=0.791、0.345，P<0.01)。

表2 各組SFRP5、HOMA-IR、UAER、FINS、FBG水平比較

注：與NC組比較，1)P<0.05,2)P<0.01; 與DM1組比較，3)P<0.05,4)P<0.01; 與DM2組比較，5)P<0.01

3 討 論

DM患者有20%-40%發(fā)生DN，早期DN的特征是尿中白蛋白排泄輕度增加(微量白蛋白尿)，逐步進(jìn)展至大量白蛋白尿和血清肌酐(Scr)水平上升，最終發(fā)生腎功能衰竭，需要透析或腎移植[1]。目前研究認(rèn)為DN的發(fā)生發(fā)展是多因素綜合作用的結(jié)果，在遺傳因素與長期高血糖等環(huán)境因素的相互作用下，腎小球基底膜增厚和細(xì)胞外基質(zhì)增多，所導(dǎo)致的腎小球硬化[6]以及炎癥可能作為多種機(jī)制的下游關(guān)鍵環(huán)節(jié)對腎臟起損害作用[7，8]。

SFRP5是一種繼脂聯(lián)素之后發(fā)現(xiàn)的抗炎脂肪因子，其在不同糖耐量人群中表達(dá)水平的變化趨勢與脂聯(lián)素相似[9]，可能具有與脂聯(lián)素相同的抗炎、改善IR等作用。該作用可能通過SFRP5與脂肪細(xì)胞分泌的Wnt5a結(jié)合，阻止非經(jīng)典的Wnt信號通路下游的c-Jun氨基端激酶磷酸化，減少炎性因子釋放，最后減弱炎癥對胰島素信號通路的抑制作用，拮抗胰島素受體底物-1絲氨酸磷酸化，從而增加胰島素敏感性[5]。 本研究顯示，DM1組患者血清SFRP5水平較NC組降低，與Hu等[10]及尹經(jīng)霞等[9]的研究結(jié)果一致。劉云濤等[11]的研究結(jié)果表明SFRP5從單純DM組到早期DN組表達(dá)水平逐漸降低，可能與DM患者INS或腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平升高抑制了SFRP5的分泌有關(guān)。 而本研究中SFRP5從DM1到DM3組表達(dá)水平逐漸升高(但未超過NC組)，有可能由不斷加重的腎臟病變加強(qiáng)刺激機(jī)體分泌更多SFRP5以對抗炎癥反應(yīng)及不斷加重的腎臟病變導(dǎo)致腎臟濾過功能逐漸降低，使經(jīng)尿排泄SFRP5減少，導(dǎo)致血液SFRP5水平升高所致。如何解釋這兩種結(jié)果的有機(jī)聯(lián)系和具體機(jī)制有待進(jìn)一步探究。

IR是代謝性疾病發(fā)生的共同環(huán)節(jié)。研究[12]表明IR的嚴(yán)重程度與T2DM腎功能正?；颊叩哪虻鞍自黾用芮邢嚓P(guān)。在DN發(fā)生的初始階段，IR可導(dǎo)致腎小球高壓和高濾過[13]。還有研究認(rèn)為IR是慢性亞臨床炎癥過程，在這一過程中IR和炎癥反應(yīng)相互促進(jìn)，引起機(jī)體內(nèi)環(huán)境的一系列改變[14]；血清SFRP5水平變化也可能與IR有關(guān)[15,16]。Lv等[15]分別給予成熟脂肪細(xì)胞高濃度INS、TNF-α及地塞米松干預(yù)后，SFRP5的基因表達(dá)和蛋白分泌水平均受到不同程度抑制，而給予INS增敏劑羅格列酮及二甲雙胍后，SFRP5的表達(dá)水平明顯升高。本研究中各組DM患者HOMA-IR明顯高于NC組，與既往研究結(jié)果[9,16]一致。同時發(fā)現(xiàn)DM1組SFRP5較NC組降低時，HOMA-IR較NC組升高，但DM2、DM3組患者SFRP5較DM1組升高時，HOMA-IR也較DM1組增加，而且UAER也顯著升高。相關(guān)分析顯示HOMA-IR與SFRP5呈正相關(guān)，HOMA-IR、SFRP5均與UAER水平呈正相關(guān)，提示SFRP5和IR可能共同參與DN的發(fā)生發(fā)展。因此，監(jiān)測血清SFRP5水平對判斷DM患者腎臟病變的發(fā)展具有一定的臨床意義。

綜上所述，SFRP5與HOMA-IR呈正相關(guān)，且與UAER程度亦呈正相關(guān)，提示SFRP5可能與IR共同參與了DM腎臟病變,可能為DN病因分析和臨床治療提供新思路。但SFRP5與IR在DN發(fā)病中的具體作用機(jī)制還需更深入的研究證實。

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本文第一作者簡介：

許 娜(1990-)，女，漢族，碩士研究生，研究方向：內(nèi)分泌及代謝性疾病

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The Correlation of Secreted Frizzled-related Protein 5 Level and Insulin Resistance with Albuminuria in Type 2 Diabetes

XU Na1,MA Jing-xuan1,GUO Shu-qin2,*,ZHANG Yun-liang2,WANG He2,BAI Guang-qin2,CHANG Wenlong2,Li Jie2

1Chengde Medical College,Chengde 067000,China;2Department of Endocrinology，Baoding NO. 1 Central Hospital，Baoding 071000，China;*Corresponding author

Objective: To investigate the correlation of secreted frizzled-related protein 5(SFRP5) level and insulin resistance with albuminuria in type 2 diabetes(T2DM).Method: A total of 137 patients with T2DM were enrolled．According to urinary albumin excretion rate,the patients with T2DM were divided into three groups：normoalbuminurial group(DM1 group,n=47),microalbuminuria group(DM2 group，n=45)，macroalbuminuria group(DM3 group，n=45).The control group included 50 healthy individuals(NC group)．Serum SFRP5 level was detected with ELISA method. Fasting blood glucose(FBG) was measured by gautose oxidase method.Fasting insulin(FINS) was measured by electrochemical iuminescence.Insulin resistance (HOMA-IR) was applied by homeostasis model assessment.To compare the differences of index among groups. Results: Compared with NC group,HOMA-IR,FINS,FBG and UAER in DM1 group,DM2 group,DM3 group were increased,especially DM3 group was increased most obviously (P<0.05 orP<0.01).SFRP5 in DM1 group was significantly lower than NC group (P<0.01), but it in the DM2 group and DM3 group were higher than DM1 group,especially DM3 group was increased most obviously (P<0.01).Correlation analysis showed that SFRP5 level was positive correlated with HOMA-IR(r=0.507,P<0.01).SFRP5 and HOMA-IR,respectively, correlate with UAER(r=0.791,0.345,P<0.01).Conclusion: SFRP5 and IR maybe involved in the occurrence and development of diabetic nephropathy(DN)，and may become the new target for diagnosis and treatment of DN.

Secreted frizzled-related protein 5;Insulin resistance;Type 2 diabetes mellitus;Diabetic nephropathy

1河北省承德醫(yī)學(xué)院，承德 067000；2河北省保定市第一中心醫(yī)院，保定 071000；*

本文2016-08-09收到，2016-08-24修回

R587.2

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1005-1740(2016)04-0042-45