鐘志君，洪亮，顧以韌，陶璇，梁艷，楊雪梅，楊躍奎，曾凱，陳曉暉，呂學(xué)斌

（1.四川省畜牧科學(xué)研究院養(yǎng)豬所，四川成都610066；2.四川省巴中市恩陽(yáng)區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川巴中636063）

藏豬和大約克夏豬血清中脂代謝相關(guān)細(xì)胞因子的發(fā)育性變化研究

鐘志君1，洪亮2，顧以韌1，陶璇1，梁艷1，楊雪梅1，楊躍奎1，曾凱1，陳曉暉1，呂學(xué)斌1

（1.四川省畜牧科學(xué)研究院養(yǎng)豬所，四川成都610066；2.四川省巴中市恩陽(yáng)區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川巴中636063）

采用酶聯(lián)免疫吸附方法（ELISA）檢測(cè)了2、4、6月齡藏豬和大約克夏豬血清中甘油三酯、瘦素和脂聯(lián)素含量。結(jié)果表明，2、4、6月齡藏豬和大約克夏豬血清中甘油三酯含量分別為26.17 μmol/L和24.25 μmol/L、29.36 μmol/L和37.88 μmol/L、28.39 μmol/L和37.88 μmol/L；瘦素含量分別為2 403.82 ng/L和2 080.21 ng/L、2 513.31 ng/L和2 060.91 ng/L、2 564.75 ng/L和2 068.05 ng/L，脂聯(lián)素含量分別為78.28 μg/L和104.94 μg/L、94.84 μg/L和129.13 μg/L、95.23 μg/L和103.01 μg/L。試驗(yàn)探索了藏豬和大約克夏豬脂肪代謝相關(guān)細(xì)胞因子的發(fā)育性變化規(guī)律和差異，為深入研究豬脂肪沉積機(jī)理提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

豬；甘油三酯；瘦素；脂聯(lián)素

動(dòng)物體內(nèi)的脂類代謝在機(jī)體的能量平衡上有重要作用。而甘油三酯在脂肪代謝中尤為重要，因?yàn)橹窘M織是機(jī)體內(nèi)最大的能量?jī)?chǔ)存組織，能量的平衡很大程度上取決于甘油三酯的合成和分解代謝。瘦素是一種多靶器官蛋白激素，具有廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，可調(diào)節(jié)攝食、能量利用、生長(zhǎng)、繁殖和免疫等生物學(xué)過(guò)程[1-3]，其中最突出的功能是作用于下丘腦的體重調(diào)節(jié)中樞，引起食欲降低，能量消耗增加，從而降低脂肪沉積、抑制體增重[4-5]。脂聯(lián)素（Adiponctin）是一種脂肪細(xì)胞分泌的激素蛋白，是脂肪細(xì)胞所分泌的脂肪細(xì)胞因子中含量最高的脂肪細(xì)胞因子[6]，它以內(nèi)分泌方式循環(huán)于血液中，參與調(diào)節(jié)糖脂代謝和抵抗炎癥反應(yīng)[7]，增加脂肪酸氧化和減少肝臟葡萄糖合成等生命活動(dòng)。

本試驗(yàn)以脂肪型的藏豬和瘦肉型的大約克夏豬為研究對(duì)象，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法（ELISA）測(cè)定其2、4、6月齡血清中甘油三酯、瘦素和脂聯(lián)素的含量，探索了脂肪代謝相關(guān)細(xì)胞因子在兩豬種中的規(guī)律和差異，為深入研究豬脂肪沉積機(jī)理提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及采樣

試驗(yàn)于2014年3月至2015年6月在四川省畜牧科學(xué)研究院科研豬場(chǎng)進(jìn)行。分別挑選健康的去勢(shì)藏豬和大約克夏豬各9頭組建試驗(yàn)群體，35日齡斷奶后用相同的飼料飼喂，到2、4、6月齡時(shí)，每個(gè)品種隨機(jī)挑選3頭進(jìn)行屠宰，屠宰前停食24 h，自由飲水。前腔靜脈采血，室溫放置15 min，4℃3 000 r/min離心10 min后吸取血清。

1.2 ELISA測(cè)定甘油三酯、瘦素和脂聯(lián)素含量

血清中甘油三酯、瘦素和脂聯(lián)素含量的測(cè)定嚴(yán)格按照豬甘油三酯ELISA試劑盒、豬瘦素ELISA試劑盒和豬脂聯(lián)素ELISA試劑盒操作說(shuō)明進(jìn)行：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔和待測(cè)樣品孔，在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品孔中準(zhǔn)確加樣50 μL，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40 μL，然后再加待測(cè)樣品10 μL（樣品最終稀釋度為5倍），用封板膜封板后置37℃溫育30 min，小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 s后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。加入酶標(biāo)試劑50 μL（空白孔除外），37℃溫育30 min，再洗板5次后分別加入顯色劑A和B各50 μL，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 min后加終止液50 μL，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立刻轉(zhuǎn)為黃色）。在加終止液后15 min內(nèi)用450 nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值），每個(gè)樣品做3個(gè)重復(fù)。以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

運(yùn)用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，平均數(shù)間的比較用SigmaPlot 12.0的T-Test程序進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 血清中甘油三酯含量

由圖1可知，兩個(gè)豬種血清中甘油三酯的含量隨著月齡的增加有升高的趨勢(shì)。藏豬2、4、6月齡血清中甘油三酯含量分別為（26.17±0.42）μmol/L、（29.36±1.19）μmol/L和（28.39±1.12）μmol/L，經(jīng)顯著性檢驗(yàn)可知，藏豬2月齡與4月齡間的甘油三酯含量達(dá)顯著差異水平（P<0.05），與6月齡相比差異不顯著（P>0.05）；4月齡與6月齡之間差異不顯著（P>0.05）。大約克夏豬2、4、6月齡血清中甘油三酯含量分別為（24.25±0.78）μmol/L、（37.88±0.58）μmol/L和（37.88±0.46）μmol/L，且2月齡與4月齡、6月齡相比均達(dá)極顯著差異水平（P<0.01），而4月齡和6月齡之間差異不顯著（P>0.05）。對(duì)相同月齡不同品種的血清甘油三酯含量進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，在2月齡時(shí)藏豬和大約克夏豬血清中甘油三酯含量差異達(dá)顯著水平（P<0.05），4月齡和6月齡時(shí)差異達(dá)極顯著水平（P<0.01）。

圖1 藏豬和大約克夏豬血清中甘油三酯含量

2.2 血清中瘦素含量

由圖2可知，藏豬2、4、6月齡血清中瘦素含量分別為（2 403.82±35.99）ng/L、（2 513.31±53.79）ng/L和（2 564.75±60.75）ng/L，經(jīng)顯著性檢驗(yàn)可知，藏豬2月齡與4月齡間的瘦素含量差異不顯著（P>0.05），與6月齡間的差異達(dá)顯著水平（P<0.05），4月齡與6月齡之間差異不顯著（P>0.05）。大約克夏豬2、4、6月齡血清中瘦素含量分別為（2 080.21±60.41）ng/L、（2 060.91±47.76）ng/L和（2 068.05±45.55）ng/L，經(jīng)顯著性檢驗(yàn)可知，各月齡間的瘦素含量差異均不顯著（P>0.05）。對(duì)相同月齡不同品種的血清瘦素含量比較發(fā)現(xiàn)，在2、4、6月齡時(shí)藏豬血清中瘦素含量均極顯著高于大約克夏豬（P<0.01）。

圖2 藏豬和大約克夏豬血清中瘦素含量

2.3 血清中脂聯(lián)素含量

由圖3可知，藏豬2、4、6月齡血清中脂聯(lián)素含量分別為（78.28±5.94）μg/L、（94.84±4.24）μg/L和（95.23±2.93）μg/L，經(jīng)顯著性檢驗(yàn)可知，藏豬2月齡分別與4月齡、6月齡間的脂聯(lián)素含量達(dá)顯著差異水平（P＜0.05），4月齡與6月齡之間差異不顯著（P＞0.05）。大約克夏豬2、4、6月齡血清中脂聯(lián)素含量分別為（104.94±2.91）μg/L、（129.13±5.35）μg/L和（103.01± 6.95）μg/L，經(jīng)顯著性檢驗(yàn)可知，2月齡與4月齡間的脂聯(lián)素含量達(dá)極顯著差異水平（P＜0.01），與6月齡之間差異不顯著（P＞0.05）；4月齡和6月齡間的脂聯(lián)素含量達(dá)極顯著差異水平（P＜0.01）。對(duì)相同月齡不同品種的血清脂聯(lián)素含量進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn)，在2月齡和4月齡時(shí)藏豬血清中脂聯(lián)素含量均極顯著低于大約克夏豬（P＜0.01），6月齡時(shí)差異不顯著（P＞0.05）。

圖3 藏豬和大約克夏豬血清中脂聯(lián)素含量

3 小結(jié)

本研究初步闡明了藏豬和大約克夏豬不同月齡間血清中甘油三酯、瘦素和脂聯(lián)素的水平的差異，為深入研究豬脂肪沉積能力的形成機(jī)理提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。但影響豬脂肪沉積的因素是多方面的，要進(jìn)一步揭示不同豬種脂肪沉積能力差異的形成基礎(chǔ)，還有待于更加深入和系統(tǒng)的研究。

[1]李宏睿，孫文夏，潘杰.瘦素功能研究進(jìn)展[J].中國(guó)動(dòng)脈硬化雜志，2004，12（1）：108-112.

[2]Wauters M,Considine R V,Van Gaal L F.Human leptin：from adipocyte hormone to anendocrine mediator[J].European Journal of Endocrinology,2000,143(3)：293-311.

[3]Berthoud H R.Interactions between the"cognitive"and"metabolic" brain in the control of foodintake[J].J PhysiolBehav,2007,91(5)：486-498.

[4]楊雪芬，蔣宗勇.瘦素對(duì)豬脂肪沉積與代謝調(diào)控的研究進(jìn)展[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2009，36（8）：18-22.

[5]Münzberg H.Differential leptin access into the brain-a hierarchical organization of hypothalamic leptin target sites[J].J Physiol Behav,2008,94(5)：664-669.

[6]黃業(yè)傳，賀稚非，李洪軍，等.皮下脂肪和肌內(nèi)脂肪對(duì)豬肉風(fēng)味的作用[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，44（10）：2118-2130.

[7]Hoehne A,Nuernberg G,Kuehn C,et al.Relationships between intramuscular fat contents,selected carcass traits,and fatty acid profile in bulls using a F2-population[J].Meat Science,2012,90：629-635.

（編輯：富春妮）

合理吃肉有何竅門

【法新社巴黎10月26日電】國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)26日警告稱，香腸和火腿等加工過(guò)的肉類導(dǎo)致腸癌，紅肉“很可能”同樣如此。

這是否意味著我們應(yīng)該不再吃肉？

國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)稱，肉類具有“已為人所知的健康益處”。

該機(jī)構(gòu)稱，并不知道安全的肉類攝入量是多少，甚至是否存在此種限量。

其他專家指出，肉類是鋅、蛋白質(zhì)、維生素B12以及鐵等重要營(yíng)養(yǎng)成分的良好來(lái)源。肉類中的鐵比植物中的鐵更易為人類吸收。

英國(guó)癌癥研究會(huì)流行病學(xué)家蒂姆·基說(shuō)：“這一論斷并不意味著你需要停止攝入任何紅肉和加工過(guò)的肉類。但如果你肉吃得太多，也許就要想一想減少攝入量。你可以試著在晚餐時(shí)吃魚(yú)，而不是火腿，或者午餐時(shí)來(lái)一份豆子沙拉，而不是培根生菜番茄三明治?！?/p>

倫敦大學(xué)國(guó)王學(xué)院營(yíng)養(yǎng)學(xué)教授湯姆·桑德斯說(shuō)，通常的膳食建議是，限制紅肉攝入，每周一兩次，相當(dāng)于大約兩份牛排或三個(gè)漢堡。

他說(shuō)：“問(wèn)題在于，食物不像煙草—我們總得吃點(diǎn)什么吧。”

【美國(guó)石英財(cái)經(jīng)網(wǎng)站10月27日?qǐng)?bào)道】題：如果你不愿為了防止患癌而不吃肉，那么你應(yīng)該如何合理攝入肉類？

“合理的”肉類攝入量是多少？要回答這個(gè)問(wèn)題可不簡(jiǎn)單。我們所了解的只是，攝入紅肉和加工過(guò)的肉類越少，患癌風(fēng)險(xiǎn)越小。

但如果培根愛(ài)好者戒不掉這一口，也許聽(tīng)一聽(tīng)英國(guó)政府的建議是值得的。試著將你每天的紅肉和加工過(guò)的肉類總攝入量減至70克以下。還應(yīng)該指出的是，沒(méi)有明顯的證據(jù)表明，新鮮白肉—火雞肉、雞肉或魚(yú)肉—與任何種類的癌癥有聯(lián)系。

因此，盡管各種新聞滿天飛，要保持健康，建議始終如一：攝入足夠多纖維、水果和蔬菜；減少攝入紅肉、加工過(guò)的肉類和鹽；限制酒精攝入量。要過(guò)上健康生活，適度仍是一種美德。

（轉(zhuǎn)自參考消息[N]，2015-10-28）

The Research on Developmental Changes of Lipid Metabolism Related Cytokines in Serum of Tibetan and Yorkshire Pigs

ZHONG Zhijun1,HONG Liang2,GU Yiren1,TAO Xuan1,LIANG Yan1,YANG Xuemei1, YANG Yuekui1,ZENG Kai1,CHEN Xiaohui1,LV Xuebin1
(1.Sichuan Animal Science Academy,Chengdu 610066,China; 2.Bazhong Enyang Animal Disease Control Center,Bazhong 636063,China)

The triglycerides,leptin and adiponectin content in serum of the 2,4,6 months old of Tibetan and Yorkshire pigs were detected by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).The results showed that the triglycerides content in the serum of 2,4,6 months old of Tibetan and Yorkshires pigs respectively were 26.17 μmol/L and 24.25 μmol/L,29.36 μmol/L and 37.88 μmol/L,28.39 μmol/L and 37.88 μmol/L.The leptin content respectively were 2 403.82 ng/L and 2 080.21 ng/L,2 513.31 ng/L and 2 060.91 ng/L,2 564.75 ng/L and 2 068.05 ng/L.The adiponectin content respectively were 78.28 μg/L and 104.94 μg/L,94.84 μg/L and 129.13 μg/L,95.23 μg/L and 103.01 μg/L.Our study explored the developmental changes of lipid metabolism related cytokines of two pig breeds,and provided basic data for the further study of the lipormetabolism mechanism.

pig;triglycerides;leptin;adiponectin

S828.8

A

1002-1957(2016)01-0065-03

2016-01-04

四川省基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金（SASA2013B02）

鐘志君（1985-），男，四川德陽(yáng)人，研究實(shí)習(xí)員，碩士，主要從事豬的遺傳育種研究工作.E-mail：378885733＠qq.com

呂學(xué)斌（1965-），男，四川成都人，研究員，博士，主要從事豬的遺傳育種研究工作.E-mail：lvxuebin＠21cn.com