潘 文 ， 喬 磊 ， 邵 葳 ， 李 潔 ， 蘇小齊 ， 于 雷 ， 黃書林

(1.中牧實業(yè)股份有限公司 ， 北京豐臺100070 ； 2.農(nóng)業(yè)部獸用生物制品與化學(xué)藥品重點實驗室 ， 北京海淀100095)

河南南陽信陽地區(qū)部分規(guī)?；i場豬偽狂犬野毒感染的血清學(xué)調(diào)查

潘 文1，2， 喬 磊1， 邵 葳1，2， 李 潔1， 蘇小齊1， 于 雷1，2， 黃書林1，2

(1.中牧實業(yè)股份有限公司 ， 北京豐臺100070 ； 2.農(nóng)業(yè)部獸用生物制品與化學(xué)藥品重點實驗室 ， 北京海淀100095)

偽狂犬病(Pseudorabies，PR)是由偽狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus，PRV)引起的一種急性傳染病，國際動物衛(wèi)生組織(OIE)將其列為二類傳染病。豬是偽狂犬病病毒的最主要宿主，豬感染PRV后的臨床癥狀隨著年齡不同差異很大。新生仔豬及15日齡以內(nèi)的仔豬表現(xiàn)明顯的神經(jīng)癥狀，死亡率達100%。育肥豬常呈隱性感染，成年豬感染后多耐過，但長期排毒，妊娠母豬表現(xiàn)為流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎等。

目前，國內(nèi)外普遍采用豬偽狂犬病病毒gE基因缺失活疫苗對該病進行免疫預(yù)防，配套使用PRV gE抗體ELISA診斷試劑盒對PRV野毒抗體進行檢測，能有效檢測豬群中PRV野毒感染情況。自2011年豬偽狂犬病(PR)疫情率先在華北暴發(fā)以來，目前呈持續(xù)蔓延態(tài)勢[1-2]。為了解近期河南南陽、信陽地區(qū)部分規(guī)?；i場豬偽狂犬野毒感染情況，本文采用美國IDEXX公司豬偽狂犬病病毒gE抗體檢測試劑盒對使用了PRV Bartha-k61株gE基因缺失活疫苗的23個規(guī)?；i場進行調(diào)查，共采集733份血清進行了PRV-gE抗體檢測，該調(diào)查對河南南陽、信陽地區(qū)部分規(guī)?；i場的偽狂犬病的防控措施提供了有效理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 血清 2015年6月采自河南南陽、信陽地區(qū)共23家規(guī)模化豬場，共計733份血液樣品，采血后自然凝固，分離血清，置4 ℃冰箱保存。

1.2 診斷試劑盒 豬偽狂犬病病毒gE抗體檢測試劑盒，購自美國IDEXX公司。

1.3 檢測方法與結(jié)果判定 血清樣品的檢測按照試劑盒說明書進行操作，計算S/N比值，S=樣品孔OD650nm值，N=陰性對照孔平均OD650nm值。若S/N≤0.6，樣品判定為gE抗體陽性；0.60.7判為gE抗體陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 河南南陽、信陽地區(qū)PRV gE抗體檢測結(jié)果

南陽、信陽地區(qū)參加此次PRV gE抗體檢測的豬場共計23家，300頭以上豬場7家，100～300頭豬場16家，樣品共計733份。無偽狂犬野毒感染的豬群共計5家，分別是F豬場、H豬場、K豬場、N豬場、W豬場，占南陽、信陽兩地區(qū)的21.7%，偽狂犬野毒呈現(xiàn)陽性的豬場18家，占整個南陽、信陽兩地區(qū)78.3%，血清樣品抗體陽性率為44.2%。見表1。

2.1.1 南陽、信陽地區(qū)PRV gE陰性豬場的抗體分析 5家豬場偽狂犬野毒檢測S/N平均值大于 0.9，離散度均小于25%，結(jié)果判定陰性，說明豬場生物安全防控工作執(zhí)行到位。建議上述5家豬場繼續(xù)使用現(xiàn)有疫苗，同時，重點關(guān)注后備母豬引種注意事項，在引種前對每頭母豬進行偽狂犬野毒抗體檢測，引種后做好隔離、馴化、免疫等工作，以防偽狂犬野毒隨母豬帶入豬場。

2.1.2 南陽、信陽地區(qū)PRV gE陽性豬場抗體分析

3家豬場偽狂犬野毒檢測S/N平均值小于0.6，結(jié)果判定陽性。陽性率均在20%以下，建議上述3家豬場重點關(guān)注豬群的偽狂犬抗體變化及健康情況，以進一步評判當(dāng)前使用的偽狂犬疫苗對偽狂犬野毒是否具備良好的交叉免疫保護作用。

15家豬場偽狂犬野毒檢測S/N平均值小于 0.6，結(jié)果判定陽性，但離散度在60%以上，且陽性率均在20%以上，說明上述豬場當(dāng)前所使用偽狂犬疫苗對偽狂犬野毒交叉免疫保護性較差，建議及時科學(xué)的更換疫苗廠家、調(diào)整免疫程序，同時有計劃的做好豬群偽狂犬野毒抗體檢測。

表1 河南南陽、信陽地區(qū)23個規(guī)模化豬場PRV gE抗體情況

注：A～G豬場為300頭以上豬場；H～W豬場為100～300頭豬場

2.2 河南南陽、信陽地區(qū)部分典型豬場PRV gE抗體檢測結(jié)果分析

2.2.1 A豬場(300頭以上)PRV gE抗體檢測情況

A豬場當(dāng)前使用國內(nèi)α公司偽狂犬K61毒株疫苗，豬群偽狂犬抗體檢測結(jié)果大部分呈陰性，但在育肥后期陽性率突然猛增達到75%(見中插彩版圖1)，這有可能是由于現(xiàn)有免疫程序存在漏洞，偽狂犬野毒入侵，導(dǎo)致所使用的疫苗不能提供免疫交叉保護，建議該場增加對育肥豬偽狂犬的免疫次數(shù)，并進一步做好偽狂犬野毒的抗體檢測工作，同時做好生物安全等綜合防控措施。

2.2.2 F豬場(300頭以上)PRV gE抗體檢測情況

F豬場當(dāng)前所使用的國內(nèi)β公司偽狂犬K61毒株，各階段豬群偽狂犬野毒均呈現(xiàn)陰性。說明F豬場免疫程序科學(xué)合理，現(xiàn)有疫苗能夠?qū)慰袢岸酒鸬浇徊婷庖弑Ｗo性的作用，另外，通過抗體檢測結(jié)果可以看出，仔豬能通過母源抗體保護的方式免受偽狂犬野毒的侵襲(見中插彩版圖2)。追溯該廠的免疫程序，該場嚴(yán)格執(zhí)行公母豬每年4次免疫，小豬30日齡免疫1次，60～70日齡再免疫1次的免疫程序。建議繼續(xù)保留疫苗廠家、使用現(xiàn)有免疫程序，同時，加強豬群偽狂犬野毒的抗體檢測并做好生物安全等綜合防控措施。

2.2.3 R豬場(100～300頭)PRV gE抗體檢測情況及分析 R豬場當(dāng)前所使用的國內(nèi)γ公司偽狂犬K61毒株疫苗，母豬群免疫該公司疫苗后其偽狂犬野毒抗體陽性仍在50%以上，達不到通過母源抗體保護仔豬免受偽狂犬野毒侵襲的目的。另外，在育肥后期其偽狂犬陽性率快速上升，說明該場育肥豬在育肥后期偽狂犬野毒擴散現(xiàn)象嚴(yán)重(見中插彩版圖2)。建議及時調(diào)整現(xiàn)有免疫程序或更換疫苗廠家、制定科學(xué)有效的免疫程序同時，做好生物安全等綜合防控措施。

2.2.4 U豬場(100～300頭)PRVg-I抗體檢測情況 U豬場屬于偽狂犬野毒陽性不穩(wěn)定場，現(xiàn)使用的進口δ公司偽狂犬K61毒株，可能由于母豬群每年偽狂犬的免疫次數(shù)偏少，導(dǎo)致保育豬不能得到良好的母源抗體抵御偽狂犬野毒的入侵；但從該場育肥豬育肥后期陽性率的變化可以看出，進口偽狂犬K61毒株確實在對偽狂犬野毒發(fā)揮著良好的交叉免疫保護作用。因此，建議該場繼續(xù)使用該疫苗，母豬群每年免疫3次，在產(chǎn)前4周跟胎免疫，保育育肥豬免疫程序不再做調(diào)整。

3 討論

通過此次對河南南陽、信陽兩地區(qū)偽狂犬野毒抗體的檢測與分析，了解了河南南陽、信陽兩地區(qū)偽狂犬野毒的流行情況。當(dāng)前河南南陽、信陽兩地區(qū)78.3%豬場均存在偽狂犬野毒情況，這與2014年中國農(nóng)業(yè)大學(xué)楊漢春教授對全國23個地區(qū)266個豬場15 029份血清偽狂犬gE抗體監(jiān)測，數(shù)據(jù)顯示gE抗體陽性豬場為80.08%的數(shù)據(jù)[3]相當(dāng)，說明河南南陽、信陽兩地區(qū)2015年偽狂犬野毒防控形勢仍十分嚴(yán)峻。

目前所使用的偽狂犬K61毒株，對偽狂犬野毒確實能夠在一定程度上起到交叉免疫保護作用，但偽狂犬K61毒株所發(fā)揮交叉免疫保護作用的好壞主要取決于各批次疫苗間抗原含量的穩(wěn)定性、母豬群的免疫次數(shù)、育肥豬的免疫程序等幾個要素，其中注重育肥豬免疫的豬場野毒交叉感染率較低。梅里亞公司豬事業(yè)部技術(shù)經(jīng)理袁沖在《豬偽狂犬病流行勢態(tài)、發(fā)病原因分析及預(yù)防措施》一文中也提到的“在大多數(shù)豬場中，肥育豬是免疫的薄弱環(huán)節(jié)。仔豬免疫的程序的不合理，免疫劑量不足，均可造成感染，使肥育期豬群不足以抵御強毒攻擊而感染，臨床出現(xiàn)咳嗽并大量排毒，同時血清gE抗體轉(zhuǎn)陽，大量強毒的擴散，使母豬群處于病毒高壓下，當(dāng)病毒高壓突破母豬抗力，則出現(xiàn)流產(chǎn)，繼而仔豬發(fā)病死亡[4]。”

另外母豬群較高的PRV野毒陽性率也是整個豬場持續(xù)陽性的根本原因，由于母豬飼養(yǎng)時間較長，一旦感染PRV野毒，可長期帶毒排毒，引起持續(xù)性感染[5]。制定合理的免疫程序，能夠有效的降低感染的發(fā)生，母豬群每年普免3次，然后于產(chǎn)前4周進行跟胎免疫(上產(chǎn)床后2～3 d采血進行抗體檢測)，保育育肥豬的免疫程序需要根據(jù)母豬群的抗體情況、母源抗體的消長情況進行制定。同時，還應(yīng)加強對后備母豬引種工作的監(jiān)管，加強豬群偽狂犬野毒的抗體檢測、豬群通風(fēng)、日常消毒、清除場內(nèi)犬貓等寵物。

[1] 胡睿銘，湯細彪，劉峰.2011-2013年豬偽狂犬病在我國部分地區(qū)的流行病學(xué)調(diào)查與分析[C].第十四屆全國規(guī)?；i場主要疫病監(jiān)控與凈化專題研討會論文集，武漢：2014：83-88.

[2] 彭金美，安同慶，趙鴻遠.豬偽狂犬病病毒新流行株的分離鑒定及抗原差異性分析[J].中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報，2013，35(1)：1-4.

[3] 楊漢春.2014年豬病流行情況與2015年流行趨勢及防控對策[J].豬業(yè)科學(xué)，2015(2)：38-40.

[4] 袁沖.豬偽狂犬病流行勢態(tài)發(fā)病原因分析及預(yù)防措施[J].國外畜牧學(xué)(豬與禽)，2015(5)：33-37.

[5] 常洪濤，劉慧敏，郭占達.河南省及周邊省份豬群中大面積感染豬偽狂犬病毒的病因分析[J].病毒學(xué)報，2014(4)：441-449.

2015-09-28

潘文(1985-)，女，碩士，主要從事動物疫苗研發(fā)工作，E-mail：Pstone1985@163.com

黃書林，E-mail：Hslcau@163.com

S852.65+1

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0529-6005(2016)11-0055-02