■ 左亞男 鄭 偉，2 夏長(zhǎng)革,3 劉凡寧，3 陳秀梅 王桂芹*

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，吉林長(zhǎng)春130118；2.延邊州水產(chǎn)技術(shù)推廣站，吉林延邊133002；3.吉林省新立城水庫(kù)管理局，吉林長(zhǎng)春130119）

賴氨酸也稱為L(zhǎng)-賴氨酸鹽酸鹽，是一種必需氨基酸，它是蛋白質(zhì)必不可少的組成部分。飼料中必需氨基酸的組成及含量直接影響蛋白質(zhì)的利用率，飼料中氨基酸比例越平衡，蛋白質(zhì)的利用率越高。目前，有關(guān)賴氨酸在陸生動(dòng)物[1-4]和水產(chǎn)方面[5]均有研究。尼羅羅非魚（Tilapia nilotica linnaeus）[5]、鳡幼魚（Elopich?thys bambusa）[6]、異育銀鯽（Carassiusauratusgibelio）[7]的研究表明，賴氨酸可提高干物質(zhì)和蛋白表觀消化率；黃顙魚幼魚（Pelteobagrus fulvidraco）[8]、草魚（Cteno?pharyngodon idellus）[9]的研究表明，賴氨酸可提高魚肌肉粗蛋白含量；團(tuán)頭魴（Parabramis pekinensis）[10-11]、許氏平鲉（Sebastods schlegelii）[12]、卵形鯧鲹（Trachino?tus ovatus）[13]的研究表明，賴氨酸可顯著提高魚的增重率和特定生長(zhǎng)率。目前關(guān)于賴氨酸對(duì)雅羅魚生長(zhǎng)、飼料利用和肌肉營(yíng)養(yǎng)成分的影響沒有相關(guān)報(bào)道，所以本試驗(yàn)選取生長(zhǎng)快、肉質(zhì)細(xì)嫩、肉味鮮美和氨基酸含量高等優(yōu)點(diǎn)而備受青睞的雅羅魚為研究對(duì)象，在飼料中添加不同水平的賴氨酸飼喂雅羅魚，旨在探討賴氨酸對(duì)雅羅魚生長(zhǎng)、飼料利用和肌肉營(yíng)養(yǎng)成分的影響，以確定雅羅魚飼料中賴氨酸的適宜添加量。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

以魚粉為蛋白源，配制添加包膜賴氨酸（80%L-賴氨酸，北京市星火科技有限公司）的等氮（37%）、等能（17 MJ/kg）的六種飼料，通過添加丙氨酸來調(diào)整飼料等蛋白質(zhì)水平，賴氨酸水平為1.82%、2.27%、2.72%、3.17%、3.62%、4.07%。飼料原料經(jīng)粉碎過40目篩，按配方稱重、采用逐級(jí)擴(kuò)大的方法均勻混合，加工成直徑為1.2 mm的顆粒，晾干后置于-20℃冰柜中保存、備用。飼料配方及營(yíng)養(yǎng)水平見表1，飼料中氨基酸組成見表2。

1.2 試驗(yàn)魚和飼養(yǎng)管理

雅羅魚試驗(yàn)前暫養(yǎng)在室內(nèi)水族箱中，馴化15 d。暫養(yǎng)期間投喂基礎(chǔ)日糧作為馴化飼料，飽食投喂，試驗(yàn)開始之前，停止投喂1 d。

挑選健康活潑、規(guī)格一致的試驗(yàn)雅羅魚，體質(zhì)量為（13.44±1.20）g，隨機(jī)分配到18個(gè)水族箱中，隨機(jī)分成6組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50尾。每天飽食投喂兩次（09：00，16：00），每次投料前觀察魚的活動(dòng)，投喂1 h后觀察殘餌情況，用虹吸法吸出殘餌并及時(shí)調(diào)整投喂量，每天記錄水溫和投喂量。試驗(yàn)期間水溫23～30 ℃，pH值7.1±0.1，溶解氧大于5.0 mg/l，氨氮小于0.5 mg/l。養(yǎng)殖持續(xù)8周。

1.3 樣品收集及指標(biāo)計(jì)算

飼養(yǎng)8周后取樣，分別稱體重，測(cè)體長(zhǎng)，計(jì)算平均增重率、特定生長(zhǎng)率、蛋白質(zhì)效率、蛋白沉積率、氮沉積率、肥滿度；取側(cè)線以上、背鰭以下的白肌，測(cè)定其營(yíng)養(yǎng)成分，采用GB/T 6435—2006、GB/T6432—1994、GB/T6438—2007、GB/T6433—2006 和 GB/T18246—2000分別測(cè)定飼料中的水分、粗蛋白質(zhì)、粗灰分、粗脂肪和氨基酸的含量，然后取內(nèi)臟稱重，計(jì)算臟體比。

式中：I——攝入飼料的重量（g）；

t——試驗(yàn)時(shí)間（d）；

W0、Wt——試驗(yàn)初始和結(jié)束時(shí)雅羅魚的總重量(g);

C——飼料蛋白質(zhì)的含量（%）；

L——每尾魚的體重（g）和體長(zhǎng)（cm）；

表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平（%干物質(zhì)基礎(chǔ)）

表2 試驗(yàn)飼料氨基酸組成（%干物質(zhì)基礎(chǔ)）

Wv——內(nèi)臟質(zhì)量（g）；

Pt——魚末蛋白含量（g）；

P0——魚初蛋白含量（g）；

Nf——魚末氮含量（g）；

N——飼料氮含量（%）；N0——魚初氮含量（g）。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS（20.0）軟件進(jìn)行單因素方差分析，用Duncan's法多重比較進(jìn)行組間差異顯著性比較。數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚生長(zhǎng)的影響（見表3）

由表3可知，飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚的增重率、特定生長(zhǎng)率具有不同程度的影響，增重率和特定生長(zhǎng)率均隨著飼料賴氨酸水平的提高呈先升高后下降的趨勢(shì)，在飼料賴氨酸為水平1.82%～3.17%范圍時(shí)，雅羅魚平均增重率和特定生長(zhǎng)率分別隨著賴氨酸添加量的增加而顯著提高，3.17%組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），但是賴氨酸水平為在3.17%～4.07%范圍時(shí)，平均增重率和特定生長(zhǎng)率不再提高且有下降趨勢(shì)，3.17%組顯著高于4.07%組（P＜0.05）。雅羅魚臟體比和肥滿度各組之間差異不顯著（P＞0.05）。

表3 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚生長(zhǎng)的影響

將飼料的不同賴氨酸水平（x）和試驗(yàn)雅羅魚的平均增重率（y）做拋物線回歸分析，見圖1。所得方程為：

拋物線回歸分析結(jié)果與方差分析結(jié)合起來得出雅羅魚增重率的最適賴氨酸范圍為3.17%～3.3%。

圖1 雅羅魚增重率與飼料賴氨酸水平的關(guān)系

2.2 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚飼料利用的影響（見表4）

由表4可知，飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚飼料利用具有不同程度的影響。存活率沒有受到飼料賴氨酸水平的影響（P＞0.05）。在賴氨酸的水平為1.82%～2.72%范圍時(shí)，雅羅魚飼料效率和蛋白沉積率隨著賴氨酸添加量的增加而提高，且各組之間差異顯著（P＜0.05）。當(dāng)飼料賴氨酸水平超過3.17%時(shí)，飼料效率和蛋白沉積率不再提高，且各組差異不顯著（P＞0.05）。蛋白質(zhì)效率隨著賴氨酸的添加量增加而不斷提高，3.17%組顯著高于對(duì)照組和2.27%組（P＜0.05）。在賴氨酸水平為3.17%～4.07%范圍內(nèi)，蛋白質(zhì)效率沒有明顯提高且差異不顯著（P＞0.05）。氮沉積率隨著賴氨酸水平的提高而先增加后下降，賴氨酸水平為3.17%組的氮沉積率顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

表4 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚飼料利用的影響(%)

將飼料賴氨酸水平（x）和養(yǎng)殖雅羅魚的蛋白質(zhì)效率（y）做拋物線回歸分析，見圖2。所得方程為：

拋物線回歸分析結(jié)果與方差分析結(jié)合起來得出雅羅魚最大蛋白質(zhì)效率的最適賴氨酸水平范圍為3.17%～3.21%。

2.3 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉營(yíng)養(yǎng)成分的影響

飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉營(yíng)養(yǎng)成分有顯著影響（P＜0.05）（見表5），但是主要影響的是粗蛋白含量。粗蛋白含量隨著飼料賴氨酸水平的增加而增加，在3.62%組顯著高于對(duì)照組和其他各組（P＜0.05）。飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉的粗脂肪、水分和灰分沒有顯著影響，各組之間差異不顯著（P＞0.05）。

圖2 雅羅魚蛋白質(zhì)效率與飼料賴氨酸水平的關(guān)系

2.4 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉氨基酸含量的影響

飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉氨基酸含量具有不同程度的影響（見表6）。賴氨酸水平對(duì)肌肉賴氨酸含量的影響呈先上升后下降的趨勢(shì)，當(dāng)飼料賴氨酸水平為3.17%時(shí)顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），在1.82%～3.17%之間，呈上升趨勢(shì)，在3.17%～4.07%之間，魚體賴氨酸含量呈下降趨勢(shì)，但各組之間差異不顯著（P＞0.05）。

飼料賴氨酸添加量對(duì)魚體其他氨基酸含量有不同程度的影響。除絲氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、苯丙氨酸、蘇氨酸、蛋氨酸、半胱氨酸、丙氨酸、甘氨酸和酪氨酸各組影響不顯著外（P＞0.05），其他必需氨基酸均隨著飼料賴氨酸添加量的增加而呈先增加后降低。

表5 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉營(yíng)養(yǎng)成分的影響(%)

表6 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉氨基酸含量的影響(%)

3 討論

3.1 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚生長(zhǎng)的影響

飼料中缺乏某種必需氨基酸時(shí)，往往都會(huì)導(dǎo)致水產(chǎn)動(dòng)物的生長(zhǎng)減緩，在水產(chǎn)動(dòng)物蛋白質(zhì)的合成和生長(zhǎng)上，賴氨酸起著重要的作用。賴氨酸作為必需氨基酸之一，其含量不足或者含量過高都會(huì)引起氨基酸的不平衡，影響魚類的生長(zhǎng)。楊威等[6]在鳡幼魚飼料中添加晶體賴氨酸，賴氨酸水平為1.96%～2.95%之間時(shí)，增重率和特定生長(zhǎng)率均隨著賴氨酸水平的升高而升高，當(dāng)超過4.45%時(shí)，生長(zhǎng)性能開始下降。在草魚[14]和異育銀鯽幼魚[7]飼料中加入晶體賴氨酸的研究也有相同的結(jié)果。在黃尾鰤、大西洋鮭等魚類的飼料中加入賴氨酸可以提高試驗(yàn)魚的增重率和生長(zhǎng)速度，但是當(dāng)賴氨酸水平超過一定劑量后便對(duì)實(shí)驗(yàn)魚的增重和生長(zhǎng)沒有了影響[15-17]。通過對(duì)尼羅羅非魚和花鱸等魚類的研究發(fā)現(xiàn)，過量的賴氨酸也會(huì)抑制魚類的生長(zhǎng)[18-19]。這些結(jié)果都說明了在飼料中加入過量或者不足的賴氨酸都會(huì)使魚類生長(zhǎng)受到抑制，可能由于氨基酸不平衡，加重了多余的氨基酸的脫氮作用，所以影響了飼料利用。還可能由于過量的賴氨酸可能產(chǎn)生毒性作用，也可能由于對(duì)精氨酸有頡頏作用[20]。在本試驗(yàn)條件下，在低水平的賴氨酸條件下，雅羅魚生長(zhǎng)性能很低，隨著賴氨酸水平的增加，在2.27%～3.17%之間，其雅羅魚的增重率和特定生長(zhǎng)率逐漸增加，當(dāng)賴氨酸水平超過了3.17%之后便開始出現(xiàn)下降的趨勢(shì)，說明飼料中添加適宜的賴氨酸可提高雅羅魚的生長(zhǎng)性能，促進(jìn)雅羅魚的生長(zhǎng)。

3.2 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚飼料利用的影響

魚類對(duì)蛋白質(zhì)的需求就是對(duì)氨基酸的需求，飼料中氨基酸的組成是決定飼料轉(zhuǎn)化效率的最重要因素，而在理想蛋白質(zhì)模式中，氨基酸的組成比例是以賴氨酸為基礎(chǔ)確定，合理利用氨基酸的需要量會(huì)達(dá)到很好的養(yǎng)殖效果，養(yǎng)殖效果主要包括魚體的生長(zhǎng)速率和魚體對(duì)飼料的利用率（如飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率等）。大量研究數(shù)據(jù)表明，賴氨酸可顯著提高魚體對(duì)飼料的利用。Forster等[21]研究表明，飼料中添加合成賴氨酸水平從2.2%提高到4.9%時(shí)，牙鲆日采食量提高了72%；同樣真鯛[21]飼料中賴氨酸添加水平從2.5%提高到5.9%，日采食量提高67%。鄢華等[22]同樣報(bào)道，通過添加一定量的賴氨酸可以增加日本比目魚和鯉的采食量。趙春蓉[23]研究結(jié)果表明，當(dāng)飼料添加賴氨酸水平從0%提高到1.2%，鯉攝食量和蛋白質(zhì)沉積率極顯著提高。張永正等[24]認(rèn)為飼料賴氨酸水平從2.08%上升到3.25%，黑鯛幼魚蛋白質(zhì)沉積率顯著提高。張滿隆等[25]報(bào)道鯉飼料中添加0.25%賴氨酸，可以降低飼料系數(shù)，減少鯉養(yǎng)殖成本。而不添加合成賴氨酸時(shí)，鯉蛋白質(zhì)沉積率降低了10%。黃尾鰤賴氨酸缺乏時(shí)，蛋白質(zhì)效率和氮沉積分別降低了25%和31%。本試驗(yàn)條件下，飼料賴氨酸水平為3.17%時(shí)，可顯著提高雅羅魚的氮沉積，添加量再增加則無顯著效果。這說明適當(dāng)提高飼糧賴氨酸水平有利于氮利用效率的提高，即賴氨酸能促使魚對(duì)各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收均衡有效，能促進(jìn)魚體內(nèi)各種生化反應(yīng)，以調(diào)節(jié)新陳代謝，增強(qiáng)魚體內(nèi)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化率。

3.3 飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉營(yíng)養(yǎng)組成的影響

魚類肌肉的主要營(yíng)養(yǎng)成分受遺傳因子的影響，在一定生長(zhǎng)發(fā)育階段是相對(duì)恒定的。但隨著飼料營(yíng)養(yǎng)水平、生長(zhǎng)環(huán)境、養(yǎng)殖技術(shù)管理、加工技術(shù)等外界環(huán)境的變化，其成分亦會(huì)有所改變[26]。肌肉營(yíng)養(yǎng)成分是衡量養(yǎng)殖動(dòng)物產(chǎn)品肌肉品質(zhì)的重要指標(biāo)[27]。飼料中賴氨酸的添加量對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分的影響的報(bào)道不盡相同。有報(bào)道指出在飼料中添加不同水平的賴氨酸含量對(duì)肌肉蛋白質(zhì)含量不會(huì)產(chǎn)生影響，比如大菱鲆[28]。也有報(bào)道指出,添加賴氨酸對(duì)魚類蛋白含量有所提高，比如鱸魚[19]、大黃魚[29]和黑鯛[24]。杜強(qiáng)等[13]指出了不同賴氨酸水平?jīng)]有影響卵形鯧鲹魚體肌肉的粗蛋白、粗脂肪、粗灰分的含量，僅有2.28%水平的水分含量有所提高。張微微等[30]在克氏原螯蝦飼料中添加賴氨酸顯著降低蝦體水分含量，提高蝦體的粗蛋白和粗脂肪含量。于海瑞等[31]指出，補(bǔ)充氨基酸的魚體粗蛋白含量有所升高，但脂肪有所降低。本試驗(yàn)研究表明，飼料賴氨酸水平對(duì)雅羅魚肌肉的粗蛋白有不同程度的影響，肌肉中的粗蛋白含量隨著賴氨酸水平的增加而增加，但是當(dāng)達(dá)到最大量時(shí)，粗蛋白含量反而減少。類似的研究結(jié)果在鯰魚[32]、虹鱒[33]、刺參[34]均有報(bào)道。黑鯛[24]、黃顙魚[8]和軍曹魚幼魚[35]研究都表明，飼料不同賴氨酸水平對(duì)魚體氨基酸含量都有顯著影響。于海瑞等[31]研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)充賴氨酸對(duì)于羅非魚魚體氨基酸含量不產(chǎn)生影響。本試驗(yàn)條件下，隨著賴氨酸水平的增加，賴氨酸含量也增加，但超過一定需要量后賴氨酸含量不再增加。隨著賴氨酸添加量的增加，其他氨基酸，比如組氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、谷氨酸和天冬氨酸也都出現(xiàn)先升高后不再增加的趨勢(shì)。造成本試驗(yàn)結(jié)果的原因可能是，在低水平賴氨酸添加量下，雅羅魚體內(nèi)缺少賴氨酸來滿足蛋白質(zhì)的合成，從而不能滿足機(jī)體正常的新陳代謝，隨著賴氨酸添加量的增加，賴氨酸含量也就隨著增加，一旦飼料中賴氨酸水平達(dá)到最適時(shí)，賴氨酸含量也達(dá)到最大，但超過需要量時(shí)，機(jī)體不再需要賴氨酸滿足蛋白質(zhì)合成，賴氨酸含量也就不再增加。也可能由于不同種類，不同種屬的魚類對(duì)于賴氨酸的需求量的不同以及試驗(yàn)的條件和飼養(yǎng)的環(huán)境的差異導(dǎo)致不同的結(jié)果。

4 結(jié)論

綜上所述，飼料中添加賴氨酸在一定程度上有利于雅羅魚的生長(zhǎng)，促進(jìn)雅羅魚的蛋白質(zhì)代謝，提高肌肉等組織的營(yíng)養(yǎng)組成水平，綜合增重率和蛋白質(zhì)效率指標(biāo)，13 g左右雅羅魚對(duì)飼料中賴氨酸需求量3.17%～3.21%。